人教版高中生物选修一专题四酶的研究与应用知识点归纳

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人教新课标高中生物选修一《酶的研究与应用》专题复习

人教新课标高中生物选修一《酶的研究与应用》专题复习

酶的研究与应用课标解读〔一〕、能力要求1、学会根据实际情况,设计探究解决问题的实验。

2、学会正确的分析和评价实验结果。

(二〕、内容要求1、查阅酶与酶工程在生产生活中的应用。

2、通过实验体验探索果胶酶的使用,学会对照实验的设计;尝试自己制作一份果汁。

3、写出具体实验方案探讨加酶洗衣粉的洗涤效果,学会有效控制变量。

4、学会用包埋法制作固定化细胞,尝试在自己的生活中使用。

知识网络体系重难热点归纳重点:是研究酶在生产生活中的实际应用,包括制作果汁、洗涤衣物、通过细胞的固定化技术应用酶。

难点:1、如何正确确定实验变量,到达实验目的。

2、如何根据问题写出实验方案。

3、如何正确分析、评价实验结果。

4、固定化技术优势、制作固定化细胞的要领。

复习策略1、查阅酶与酶工程的应用,丰富知识内容2、阅读教材的相关实验和自己的实验设计、实验记录,体会实验设计方法,学写实验方案。

3、分析实验过程,学写分析评价报告。

4、习题训练。

经典例题剖析1. 水果罐头盖上印有“如发现盖子鼓起,请勿选购〞的字样,引起盖子鼓起的最可能原因是〔〕A、好氧型细菌呼吸,产生CO2和H2OB、酵母菌呼吸,产生CO2和C2H5OHC、乳酸菌呼吸,产生CO2和C3H6O3D、酵母菌呼吸,产生CO2和H2O[解析]罐头是密封、杀菌的,但不排除有微生物的孢子等存活下来,只有进展无氧呼吸的微生物可以生存;罐头鼓胀是过期后微生物生活产气的结果,乳酸菌无氧呼吸产生乳酸,无气体产生;酵母菌既可以在有氧条件下生活,也可以在无氧条件下发酵产生酒精和二氧化碳。

[答案] B2. 有人测定了A、B、C、D四种植物体内多种酶的活性与温度的关系,结果如以下图所示。

根据图中的信息,你认为在25摄氏度条件下,竞争能力最强的生物和对温度适应范围最广的生物分别是〔〕A B和DB B和C C B和AD A和C催 C D化100 A B效率50〔%〕0 5 10 15 20 25 30 35 40[解析] 酶活性具有一定的温度范围和适宜温度,温度过高酶会失活,低温对酶活性抑制;在一定温度下,最适宜该温度的酶活性最强,该生物生活的也最好,竞争力就强;酶有活性的范围最大,生物的生存温度范围就越广。

2023年高中生物选修一专题四酶的研究和应用知识点

2023年高中生物选修一专题四酶的研究和应用知识点

高中生物选修一4.1果胶酶在果汁生产中旳作用1.果胶是植物细胞壁以及胞间层旳重要构成成分之一, 果胶酶能将果胶分解成可溶性旳半乳醛酸, 瓦解植物旳细胞壁及胞间层, 使果汁变得澄清。

2.果胶酶是一类酶总称, 包括果胶分解酶、多聚半乳糖醛酸酶、果胶酯酶等。

3.酶旳活性是指酶催化一定化学反应旳能力。

酶活性旳高下可以用在一定条件下, 酶所催化旳某一化学反应旳反应速度来表达。

在科学研究与工业生产中, 酶反应速度用单位时间内、单位体积中反应物旳减小量或产物旳增长量来表达。

4. 影响酶活性旳原因包括温度、PH、酶旳克制剂等。

5.在〔探究温度对酶活性旳影响〕旳试验设计中, 自变量是温度;根据单一变量原则, 应保证各试验组相似旳变量(无关变量)有: 底物旳量及浓度、酶旳用量和浓度、混合物旳pH、水浴时间、试验器材等等。

只有这样才能保证只有温度一种变量对果胶酶旳活性产生影响。

在试验中将果泥和果胶酶分装在不一样旳试管中恒温处理, 保证了底物和酶在混合时旳温度是相似旳。

6.在〔探究PH对酶活性旳影响〕旳试验中, 只须将上述试验旳温度梯度改成pH梯度, 并选定一种合适旳温度进行水浴加热。

反应液中旳pH可以通过体积分数为0.1%旳氢氧化钠或盐酸溶液进行调整。

此试验中不一样旳pH梯度之间进行互相对照。

7.在〔探究果胶酶旳用量〕旳试验中, 果胶酶旳用量是建立在最适温度和最适pH基础之上旳。

此时研究旳变量是果胶酶旳用量, 其他原因都应保持不变。

试验时可以配制不一样浓度旳果胶酶溶液, 也可以只配制一种浓度旳果胶酶溶液, 然后使用不一样旳体积即可。

8.果胶酶将果胶分解为可以通过滤纸旳小分子物质, 因此苹果汁旳体积大小反应了果胶酶旳催化分解果胶旳能力。

在不一样旳温度和pH下, 果胶酶旳活性越大, 苹果汁旳体积就越大。

4.2 探讨加酶洗衣粉旳洗涤效果1.加酶洗衣粉是指含酶制剂旳洗衣粉, 目前常用旳酶制剂有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶四类。

高中生物四《酶的研究与用》知识点总结

高中生物四《酶的研究与用》知识点总结

角顿市安康阳光实验学校生物选修一《专题4 酶的研究与应用》知识点总结一、果胶与果胶酶1.果胶(1)作用:是植物细胞壁及胞间层的主要组成成分之一。

(2)成分:由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物,不溶于水。

2.果胶酶(1)作用:能把果胶分解成可溶性半乳糖醛酸。

(2)组成:是分解果胶的一类酶的总称。

包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。

(3)来源:植物、霉菌、酵母菌和细菌均能产生果胶酶。

由霉菌发酵生产的果胶酶,被广泛地应用于果汁加工业。

二、酶的活性与影响酶活性的因素1.酶的活性是指酶催化一定化学反应的能力,其高低可用一定条件下酶所催化的某一化学反应的反应速度来表示。

2.酶的反应速度是指单位时间内,单位体积中反应物的减少量或产物的增加量。

3.影响酶活性的条件有温度、pH和酶的抑制剂等。

三、果胶酶的用量生产果汁时,为了使果胶酶得到充分的利用,需要控制好酶的用量,用量多少常要通过实验手段探究。

四、实验设计1.探究温度和pH对果胶酶活性的影响(1)实验流程包括制备苹果泥、设置一系列具有梯度的温度和pH、加入果胶酶反应一段时间、过滤果汁。

(2)该实验的自变量是温度或pH,因变量是苹果汁的变化,检测因变量是通过测定果汁的体积或澄清度来实现的。

2.探究果胶酶的用量(1)该实验的自变量是果胶酶的用量,除此之外,影响果汁产量的因素还有温度、pH、酶催化反应的时间、苹果泥的用量等无关变量。

(2)判断的思路是:如果随着酶的用量增加,过滤到的果汁的体积也增加,说明酶的用量不足;如果当酶的用量增加到某个值后,再增加酶的用量,过滤到的果汁的体积不再改变,说明酶的用量足够。

专题4-2《酶的研究与应用---酵母细胞的固定化》一、固定化酶的应用实例1.能将葡萄糖转化为果糖的酶是葡萄糖异构酶,该酶稳定性好。

2.反应柱上的孔应满足酶颗粒无法通过,反应溶液可以自由通过。

二、固定化细胞技术1.概念:利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。

人教版高中生物选修一专题4《酶的研究与应用》word导学案-生物知识点总结

人教版高中生物选修一专题4《酶的研究与应用》word导学案-生物知识点总结

人教版高中生物选修一专题4《酶的研究与应用》word导学案-生物知识点总结专题4酶的研究与应用第12课时果胶酶在果汁生产中的作用目标导航 1.简述果胶酶的作用。

2.检测果胶酶的活性。

3.探究温度、pH和酶的抑制剂对果胶酶活性的影响及果胶酶的最适用量。

一、基础知识1.果胶酶的作用1)果胶的成分及作用:果胶是植物________以及________的主要组成成分之一,它是由________________聚合而成的一种高分子化合物,不溶于水。

2)果胶酶的作用:果胶酶能够把果胶分解成可溶性的________________。

3)果胶酶的组成:果胶酶并不特指某一种酶,而是____________的一类酶的总称,包括________________、________________和____________等。

提醒由于原核生物的细胞壁的主要成分是肽聚糖,真菌细胞壁的主要成分是几丁质,因此这两类生物的细胞壁均不能用纤维素酶和果胶酶除去。

2.酶的活性与影响酶活性的因素1)酶的活性:是指酶________________的能力。

酶活性的高低可以用在一定条件下,酶所催化的某一化学反应的____________来表示。

2)酶的反应速度:用____________内、____________中反应物的________或产品的________来表示。

影响酶活性的因素首要有________、________和____________等。

3.酶的用量酶用量过多,会导致酶的________;酶用量过少,会________酶促反应的速度。

因此要得到适宜的酶用量,需通过设计实验进行探究。

二、实验设计1.探讨温度对酶活性的影响1)实验原理①果胶酶活性受温度影响。

在一定范围内,随着温度的升高,酶的活性逐渐________;超过一定温度之后,随着温度的升高,酶的活性逐渐降低;当达到一定温度后,酶的活性____________。

酶的活性随温度的升高而变化的趋势可用下图表示:②通过测定____________内滤出的________________大小来判别果胶酶的活性的原理是:果胶酶将果胶分化为可溶性的半乳糖醛酸,半乳糖醛酸可通过滤纸,因此________________和________________反映了果胶酶催化分解果胶的能力。

高中生物选修一专题四 酶的研究和应用 知识点

高中生物选修一专题四 酶的研究和应用 知识点

高中生物选修一 4.1果胶酶在果汁生产中的作用 1.2.3.用在一定条件下,酶所催化的某在科学研究与工业生产中,酶反量来表示。

4.影响酶活性的因素包5.在〔探究温度对酶活性的影响〕验组相同的变量(无关变量)有:度、混合物的验器材等等。

只有这样才能保证的温度是相同的。

6.在〔探究PH 对酶活性的影响〕应液中的pH 可以通过体积分数为0.1%间进行相互对照。

7.在〔探究果胶酶的用量〕的实即可。

8.果胶酶将果胶分解为可以通过分解果胶的能力。

在不同的温度和pH4.2 探讨加酶洗衣粉的洗涤效果 1.四类。

2.物和藻类大量繁殖造成水体污少对环境的污染。

3.应用最广泛、效果最明显的是蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污迹容易从衣物衣粉来洗涤。

脂肪酶可以将脂肪的。

4.5.探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果有何不同6.固定化酶和固定化细胞是利用多采用包埋法固定化,这是因为7.包埋法固定化细胞即将微生物和聚丙烯酰胺等。

7.酵母细胞的固定化实验操作包8.0.05mol/L 的Cacl2母细胞混合、固定化酵母细胞五个步骤。

10.在缺水状态下,微生物处于10.凝胶珠是否制备成功可用用流出,就表明凝胶珠的制作成的制备的是成功的。

11.如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸钠的浓试。

12.利用固定的酵母细胞发酵产。

2020-2021学年人教版高中生物选修一期末综合复习:酶的研究与应用知识点

2020-2021学年人教版高中生物选修一期末综合复习:酶的研究与应用知识点

1、果胶和果胶酶。

(1)果胶对果汁制作的影响:影响果汁的出汁率,还会使果汁浑浊。

(2)果胶酶的种类:果胶酶并不特指某一种酶,而是分解果胶的一类酶的总称,包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。

(3)果胶酶的作用:①能够分解果胶,瓦解植物的细胞壁及胞间层,能提高果汁的出汁率;②而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸,使得浑浊的果汁变得澄清。

(4)植物、霉菌、酵母菌和细菌均能产生果胶酶。

由霉菌发酵生产的果胶酶是食品加工业中使用量最大的酶制剂之一。

2、探究温度和pH对酶活性的影响❖实验设计思路:通过设置梯度来确定最适值。

(1)自变量的处理方法:设置一系列的温度梯度或PH梯度的对照实验。

(2)因变量的检测方法:苹果汁的体积或果汁的澄清度。

(3)为什么在混合苹果泥和果胶酶之前,要将果泥和果胶酶分装在不同的试管中恒温处理?用什么方法进行恒温处理?答:保证果泥与果胶酶混合时温度相同,避免混合时影响混合物的温度,从而影响果胶酶活性。

水浴加热。

(4)在探究温度或pH对酶活性的影响时,是否需要设置对照?如果需要,又应该如何设置?为什么?答:需要。

不同的温度或pH之间,就可以作为对照——这种对照称为相互对照。

(5)为使果胶酶能够够充分催化反应,应用玻璃棒不时地搅拌反应混合物。

3、探究果胶酶的用量(1)实验变量:为酶的用量。

你打算如何设置酶用量的梯度呢?(同体积不同浓度的酶或不同体积相同浓度的酶。

)(2)因变量:苹果汁的体积或果汁的澄清度。

(3)实验结果和结论:随着酶的用量增加,过滤到的果汁的体积也增加,说明酶的用量不足;当酶的用量增加到某个值后,再增加酶的用量,过滤到的果汁的体积不再改变,说明这个值就是酶的最适用量。

(一)加酶洗衣粉1、定义:加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。

2、常用的酶制剂有四类:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶。

其中,应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

3、衣服有油渍、血渍的衣服很难洗干净,你是如何解决这个问题的?为什么?答:使用加酶洗衣粉。

高中生物选修一知识点小总结(2篇)

高中生物选修一知识点小总结(2篇)

高中生物选修一知识点小总结高中生物选修一知识点总结:酶的研究与应用1、果胶酶作用:分解果胶,瓦解植物的细胞壁及胞间层,提高水果的出汁率,并使果汁变得澄清。

2、果胶酶并不特指某一种酶,包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。

3、酶的活性可用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。

4、目前常用的酶制剂有四类:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶,其中应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

5、加酶洗衣粉的作用原理:碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污迹容易从衣物上脱落。

同样道理,脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质。

6、固定化技术包括:包埋法、化学结合法和物理吸附法。

一般来说,酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化,而细胞多采用包埋法固定化。

因为细胞个大,而酶分子很小;个大的细胞难以被吸附或结合,而个小的酶容易从包埋材料中漏出。

7、固定化酵母细胞时,酵母细胞的活化用蒸馏水;配制海藻酸钠溶液时,加热要用小火,或者间断加热;要将海藻酸钠溶液冷却至室温,再加入活化的酵母细胞。

CaCl2溶液有利于凝胶珠形成稳定的结构。

高中生物选修一知识点总结:DNA和蛋白质技术2、DNA溶解性:①DNA在不同浓度的NaCL溶液中溶解度不同。

在0.14moL/L的NaCL溶液中,溶解度最小。

②DNA不溶于酒精。

3、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性:因为酶有专一性,蛋白酶能水解蛋白质,但对DNA没有影响。

DNA比较能耐高温。

洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA无影响。

4、在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

5、提取DNA的材料一般用鸡血而不用猪血,因为哺乳动物(猪)成熟的红细胞无细胞核,无DNA。

6、破碎鸡血细胞时,可以加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。

7、为了纯化提取的DNA,需要将滤液进一步处理。

高中生物 知识点考点解析含答案 酶的研究与应用知识讲解

高中生物 知识点考点解析含答案 酶的研究与应用知识讲解

酶的研究和应用【学习目标】1、了解果胶酶的组成和作用。

2、理解检测酶活性的原理。

(重点)3、简述探究温度和PH对果胶酶活性的影响及其最适值的实验。

(重、难点)4、说出加酶洗衣粉的洗涤原理。

5、说明固定化细胞和固定化酶的作用和原理。

(重点)6、掌握制备固定化酵母细胞和利用其进行酒精发酵的方法。

(重、难点)【要点梳理】要点一、果胶酶在果汁生产中的应用【高清课堂:酶的研究和应用417460课题1:基础知识】1、实验原理(1)果胶是植物细胞壁以及胞间层中的主要成分,也是植物汁液中的主要成分。

果胶可结合大量的水分,将植物细胞粘合在一起,降低植物组织的分散性。

若去掉果胶,细胞壁被瓦解,就会使果泥中的植物组织块变得松散,产生更多的果汁,增加出汁率(2)果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸,使浑浊的果汁澄清(3)果胶酶催化果胶分解需要适宜的温度和pH(4)果胶不溶于酒精,因而可用于初步鉴定果胶被分解多少要点诠释:果胶酶和纤维素酶的比较:果胶酶的组成是多聚半乳糖醛酸酶,果胶分解酶和果胶酯酶,其化学本质是蛋白质,作用是催化果胶成为可溶性半乳糖醛酸;纤维素酶的组成是C1酶,C X酶和葡萄糖苷酶,其化学本质也是蛋白质,作用是催化纤维素成为纤维二糖,然后再成为葡萄糖。

果胶酶和纤维素酶都是复合酶,并不特指某一种酶,而是一类酶的总称。

2、酶的活性与影响酶活性的因素(1)酶的活性是指酶催化一定化学反应的能力。

酶活性的高低可以用在一定条件下,酶所催化的某一化学反应的反应速度来表示。

在科学研究与工业生产中,酶反应速度用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。

(2)影响酶活性的因素①温度:温度对酶活性的影响是通过影响酶(蛋白质)的稳定性和分子(离子等)运动速率的综合作用的结果。

低温使酶的活性降低,高温能使酶失活。

酶都有一个最适温度。

②pH:酶分子上有许多酸性、碱性氨基酸的侧链基团,这些基团随着pH的变化可处于不同的解离状态,从而影响底物与酶的结合和进一步反应,或影响酶的空间结构,进而影响酶的活性。

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人教版高中生物选修一专题四酶的研究与应用
知识点归纳
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专题四酶的研究与应用
探讨加酶洗衣粉的洗剂效果
一、实验原理
1.加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉,目前常用的酶制剂有四类:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶,其中,应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

2.碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污迹从衣物上脱落。

脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质,使洗衣粉具有更好的去污能力。

3.在本课题中,我们主要探究有关加酶洗衣粉的三个问题:
一是普通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果有什么不同;
二是在什么温度下使用加酶洗衣粉效果最好。

三是添加不同种类的酶的的洗衣粉,其洗剂效果有哪些区别。

二、实验步骤
1.探究用加酶洗衣粉与普通洗衣粉洗涤的效果的不同
①在2个编号的烧杯里,分别注入500mL清水。

②取2块大小相等的白棉布,用滴管在每块白布上分别滴上等量的墨水,
分别放入烧杯里,用玻璃棒搅拌。

③将2个烧杯分别放入同等温度的温水中,保温5分钟。

④称取5克加酶洗衣粉和5克普通洗衣粉2份,分别放入2个烧杯中,用
玻璃棒均匀搅拌。

保温10分钟。

⑤观察并记录2个烧杯中的洗涤效果
2.探究用加酶洗衣粉洗涤的最佳温度条件
①在3个编号的烧杯里,分别注入500mL清水。

②取3块大小相等的白棉布,用滴管在每块白布上分别滴上一滴食用油、鸡血、牛奶,分别放入烧杯里,用玻璃棒搅拌。

③将3个烧杯分别放入50摄氏度的热水、沸水和冰块中,保温5分钟。

④称取5克加酶洗衣粉3份,分别放入3个烧杯中,用玻璃棒均匀搅拌。

保温10分钟。

⑤观察并记录3个烧杯中的洗涤效果。

3.探究不同种类的加酶洗衣粉洗涤的效果
污染物蛋白酶洗衣粉脂肪酶洗衣粉复合酶洗衣粉普通洗衣粉
油渍
汗渍
血渍
观察并记录四种洗衣粉分别洗涤三种污染的洗涤效果。

三、注意事项
1.变量的分析和控制
影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素有水温、水量、水质、洗衣粉的用量,衣物的质料、大小及浸泡时间和洗涤的时间等。

在这些因素中,水温是我们要研究的对象,而其他因素应在实验中保持不变。

选择什么样的水温进行实验需要实验者根据当地一年中的实际气温变化来确定水温,通常情况下,冬季、春季、秋季和夏季可分别选取5 ℃、15 ℃、25 ℃和35 ℃的水温,因为这4个水温是比较符合实际情况的,对现实也有指导意义。

2.洗涤方式和材料的选择。

在洗涤方式中有机洗和手洗两种方式,应考虑其中哪一种比较科学哪一种更有利于控制变量再有,洗衣机又可以分为半自动和全自动两种,相比之下,采用全自动洗衣机比较好,并且应该尽量使用同一型号小容量的洗衣机,其机械搅拌作用相同。

关于洗涤材料的选择也有一些讲究。

用衣物作实验材料并不理想,这是因为作为实验材料的衣物,其大小、颜色、洁净程度等应该完全一致,而这并不容易做到;此外,人为地在衣物上增加污物,如血渍、油渍等,也令人难以接受。

因此,选用布料作为实验材料比较可行。

在作对照实验时,可以控制布料的大小、颜色以及污物的量,使其相同;同时,也便于洗涤效果的比较。

3.水量、水质和洗衣粉用量的问题。

水的用量和布料的大小是成正比的。

做实验用的布料不易过大,水量不易过多,但应该让布料充分浸泡在水中。

水量和洗衣粉的用量可以参考下表。

实验时可根据表中的数据换算出实际用量。

如果在实验中使用手洗的方法,如课本中图4-4所示,使用1 000 mL的烧杯作为容器,可以用500 mL的水,洗衣粉的用量可以用1 g或 g。

洗涤方式机洗手洗
水量 L L
洗衣粉量 g 1 g或 g
其他相关问题简述如下。

实验中可以用滴管控制污物的量,待污物干燥后再进行实验;布料应放在洗衣粉溶液中浸泡相同的时间;采用玻璃棒或筷子搅拌的方式模拟洗衣过程;模拟搅拌的时间、次数和力量应基本相同。

酵母细胞的固定化
一、实验原理
1.使用固定化酶技术,将这种酶固定在一种颗粒状的载体
上,再将这些酶颗粒装到一个反应柱内,柱子底端装上分布着
许多小孔的筛板。

酶颗粒无法通过筛板的小孔,而反应溶液却
可以自由出入。

生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱的上端注
入,使葡萄糖溶液流过反应柱,与固定化葡萄糖异构酶接触,转化成果糖,从反应柱的下端流出。

反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本,提高了果糖的产量和质量。

2.固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术,包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。

一般来说,酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定,而细胞多采用包埋法固定化。

这是因为细胞个大,而酶分子很小;个大的难以被吸附或结合,而个小的酶容易从包埋材料中漏出。

固定化酶优点:使酶既能与反应物接触,又能与产物分离,还可以被反复利用。

固定化细胞优点:成本更低,操作更容易,可以催化一系列的化学反应。

二、实验步骤
1、细胞的活化
称取lg干酵母,放入50 mL的小烧杯中,加人蒸馏水10 mL,用玻璃棒搅拌,使酵母细胞混合均匀,成糊状,放置1h左右,使其活化。

【注】活化:让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态
2、配制物质的量浓度为L的CaCl
溶液
2
称取无水CaCl2。

放人200mL的烧杯中,加入150mL的蒸馏水,使其充分溶解,待用。

3、配制海藻酸钠溶液
称取海藻酸钠,放入50mL小烧杯中。

加人10mL水,用酒精灯加热,边加热边搅拌,将海藻酸钠调成糊状,直至完全溶化,用蒸馏水定容至10
mL。

注意,加热时要用小火,或者间断加热,反复几次,直到海藻酸钠溶化为止。

4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合
将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加人已活化的醉母细胞,进行充分搅拌,使其混合均匀,再转移至注射器中。

【注】冷却至室温的目的:防止杀死酵母菌
5、固定化酵母细胞
以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中,观察液滴在CaCl2溶液中形成凝胶珠的情形。

将这些凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30 min左右。

【注】CaCl2溶液的作用:使胶体聚沉
6 、使用固定化酵母细胞发酵
(a)将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2-3次。

(b) 将150mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200mL的锥形瓶中,再加入固定好的酵母细胞,置于25℃下发酵24h。

三、注意事项
1.配制海藻酸钠溶液:小火、间断加热、定容,如果加热太快,海藻酸钠会发生焦糊。

2.海藻酸钠溶液与酶母细胞混合:冷却后再混合,注意混合均匀,不要进入气泡
3.制备固定化酵母细胞:高度适宜,并匀速滴入
4.刚形成的凝胶珠应在CaCL2溶液中浸泡一段时间,以便Ca2+与Na+充分交换,形成的凝胶珠稳定。

检验凝胶珠是否形成,可用下列方法:用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果不容易破裂,没有液体流出就表明成功地制成了凝胶珠,还可以用手将凝胶珠在实验桌上用力摔打,如果凝胶珠很容易弹起,也表明制备的凝胶珠是成功的。

5.凝胶珠的颜色和形状
(a)如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少;
(b)如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明海藻酸钠的浓度偏高,制作失败,需要再作尝试。

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