支气管肺泡灌洗液收集及保存

支气管肺泡灌洗液收集及保存

实验对象：遵义市第一人民医院呼吸科各种肺部疾病患者（随机收集30例）

实验器材：

试剂： RPMI1640培养液（l0%胎牛血清、10%二甲亚砜）

仪器及器材：硅化灭菌离心管、100μm细胞过滤器、离心机、冷冻盒、-80℃冰箱、微量加样器、4℃冰箱、-150℃冰箱

实验步骤路线图：

1、BAL液收集2ml在硅化灭菌离心管内，保存在4°C条件下

2、通过100微米细胞过滤器过滤BAL液，储存在新硅化灭菌离心管内

3、BAL液在450克4ºC条件下离心7分钟

4、微量加样器吸取上清液并保留在冷冻盒，-80°C冰箱冻存

5、悬液中加入1mlRPMI1640培养液（10％胎牛血清、10％二甲基亚砜），然后置于冷冻盒中冷冻至-80°C

6、-150°C冻存

7、解冻，快速在37°C条件下解冻细胞进行下一步实验。