常用显色剂

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一、通用显色剂

(1)硫酸①浓硫酸与甲醇等体积小心混合,冷却;②15%浓硫酸的正丁醇溶液;

③5%浓硫酸的乙酸酐溶液;④5%浓硫酸的乙醇溶液;⑤浓硫酸与乙酸等体积混合。用以上任一试液喷薄层板后,于110℃烘烤15min,不同类的成分显不同颜色。(2)碘①%碘的氯仿溶液;②碘蒸气在一密闭的玻璃缸内预先放入少许碘结晶,使缸为碘蒸气饱和。将薄层板放入缸内数分钟即可显色,碘对很多化合物显黄棕色。(3)高锰酸钾-硫酸高锰酸钾溶于15ml 40%硫酸中。检测易还原性物质。

(4)铬酸-硫酸重铬酸钾5g溶于100ml 40%硫酸中。易还原性物质显色。

(5)荧光显色液①%的罗丹明B乙醇溶液;②%的荧光素乙醇溶液;③%的桑色素乙醇溶液。用以上任一试液喷薄层板后,在荧光背景下可能显黑色或其他荧光斑点。

二、专属性显色剂

(一)生物碱及含氮类化合物

(1)改良碘化铋钾(Dragendorff)试剂①碱式硝酸铋溶于10ml冰醋酸与40ml水中;②碘化钾溶于20ml水中。试液①与试液②等量混合置棕色瓶内保存作贮备液。用前将1ml贮备液、2ml冰醋酸与10ml水混合。用于生物碱与某些含氮化合物,显橙红色。

(2)碘-碘化钾(Wagner)碘1g与碘化钾10g溶于50ml水(微温),加2ml乙酸,

加水至100ml。用于生物碱,显棕褐色。

(3)碘铂酸 5ml 15%氯化铂溶液加45ml 10%碘化钾溶液,用水稀释至100ml。用于生物碱,不同生物碱显不同颜色。

(4)碘铂酸钾 10%六氯铂酸溶液3ml与97ml水混合,加100ml 6%碘化钾溶液,混匀。新鲜配制。用于生物碱与其他有机含氮化合物,不同生物碱显不同颜色。(5)Ehrlich ①10%对二甲氨基苯甲醛盐酸溶液与丙酮按1:4混合。②对二甲氨基苯甲醛1g,溶于100ml 96%乙醇中。用于吲哚类,有时喷后要加热。

(6)硫酸高铈铵 1%本品的85%磷酸溶液。用于吲哚类,长春花生物碱显各种颜色。

(7)对二甲氨基苯甲醛-硫酸 65ml浓硫酸与35ml水混合,放冷后加对二甲氨基苯甲醛125mg,再加入5%三氯化铁溶液。本试液可保存一周。用于麦角生物碱。(8)肉桂醛-盐酸肉桂醛5ml、乙醇95ml和5ml 36%盐酸混合,新鲜配制。用于吲哚类衍生物。

(9)呫吨氢醇本品溶于90ml乙醇中,加10ml 36%的盐酸,用前新鲜配制。用于色氨酸及其他吲哚类生物碱。

(10)氯化铁-过氯酸 L三氯化铁溶液1ml与35%过氯酸溶液50ml混合。用于吲哚类生物碱。

(11)三氯化铁-碘三氯化铁5g、碘2g溶于50ml丙酮与50ml 20%酒石酸的混合

液中。用于黄嘌呤生物碱类,不同生物碱显不同颜色。

(12)硫酸铈-硫酸(改良Sonnenschein试剂)硫酸铈混悬于4ml水中,加1g三氯乙酸,加热煮沸,放冷,逐滴加入浓硫酸直至浑浊消失。用于生物碱、含碘有机化合物的显色,喷后110℃烤几分钟,不同生物碱显不同颜色。

(13)硫氰酸钴(Ⅱ)试液硫氰酸铵3g、氯化钴1g溶于20ml水中。用于生物碱,伯、仲、叔胺类。

(14)碘化汞钾(Meyer)试剂氯化汞和5g碘化钾各溶于20ml水中,混合后加水稀释至100ml即可。

(15)硅钨酸(Bertrand)试剂 5g硅钨酸溶于100ml水中,加盐酸少量调至pH=2左右。

(16)苦味酸试剂 1g苦味酸溶于100ml水中。

(17)鞣酸试剂鞣酸1g加乙醇1ml溶解后再加水至10ml。

(18)4-甲基伞形酮本品溶于35ml乙醇,加水至100ml。用于含氮杂环化合物。(19)硫酸铜-联苯胺①硫酸铜溶于100ml水-乙醇(5:4)的混合液中;②%联苯胺的50%乙醇溶液。用时先喷试液①,于60℃干燥后再喷试液②。用于吡啶单羧酸的显色。

(20)氯化铜%氯化铜溶液。用于肟类。

(21)硝普钠-铁氰化物 10%氢氧化钠溶液、10%硝普钠溶液、10%铁氰化钾溶液

和水按(1:1:1:3)混合,冰箱内保存(可保存数周),使用前取适量与等体积丙酮混合。用于氯基氰、胍、肌酸、肌酸酐、脲和硫脲及其衍生物的显色。

(22)硝普钠-过氧化氢 5%硝普钠溶液2ml、10%氢氧化钠1ml与5ml 3%过氧化氢溶液混合后,加15ml水。冰箱可保存数日。用于胍、尿素、硫脲及其衍生物、肌酸和肌酸酐的检测。

(23)三氯化锑试剂 25g三氯化锑溶于75g氯仿中成饱和溶液。用于秋水仙生物碱类。

(二)黄酮类

黄酮类化合物在紫外灯或日光下多显不同颜色,用氨薰、喷三氯化铝或氢氧化钠溶液等皆会使颜色加深或变色。

(1)三氯化铝-乙醇试液三氯化铝1g,加100ml乙醇溶解,即得。用于含氧杂环化合物。

(2)氢氧化钾(钠)试剂 10%氢氧化钾或氢氧化钠水溶液。

(3)氨气。

(4)三氯化锑试液 10%三氯化锑的氯仿溶液。喷后110℃烤5min,用于黄酮类。(5)碱式(或中性)醋酸铅试剂 1%碱式醋酸铅(或饱和中性醋酸铅)水溶液。用于黄酮类。

(6)硫酸铜-枸椽酸钠硫酸铜(CuSO4?5H2O)、柠檬酸钠与无水碳酸钠10g溶于水

并稀释至100ml。用于含邻二羟基的黄酮类与香豆精类。

(7)硼氢化钾试剂①1%~2%硼氢化钾异丙醇溶液,必须新鲜配制;②浓盐酸。先喷①溶液,5min后放入盐酸蒸气缸内。用于双氢黄酮类化合物,显红、橙红色。(8)盐酸镁粉试剂浓盐酸和镁粉。

(9)醋酸镁试剂 2%醋酸镁甲醇溶液。

(三)糖类

(1)茴香醛-硫酸试剂①茴香醛加入50ml乙酸,混匀后加1ml硫酸,用前新鲜配制。②改良试液。茴香醛、9ml乙醇、浓硫酸与乙酸混合后立即使用。用于糖类、甾族、萜类。喷后将薄层板置100~105℃烤,不同糖显不同颜色。

(2)α-萘酚-硫酸 15%的α-萘酚-乙醇溶液、浓硫酸、乙醇与水4ml的混合液。喷后100℃烤几分钟,多数糖显蓝色,鼠李糖显橙色。用于糖类的显色。

(3)苯胺-二苯胺-磷酸 4g二苯胺、4ml苯胺与20ml 85%磷酸共溶于200ml丙酮中。喷后85℃烤10min,用于还原糖,不同糖显不同颜色。

(4)对二甲氨基苯甲醛-乙酰丙酮

①%氢氧化钾溶液5ml与20ml乙醇混合;b.乙酰丙酮与正丁醇(1:100)的混合液。两种溶液均需新鲜配制,临用前混合。取a.混合液,加入10ml b.溶液。

②对二甲氨基苯甲醛1g溶于30ml乙醇中,加30ml 36%盐酸,需要时用180ml正丁醇稀释。

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