阿莫西林胶囊含量测定
HPLC法测定阿莫西林胶囊含量方法的改进
HPLC法测定阿莫西林胶囊含量方法的改进摘要：阿莫西林胶囊原有检测方法采用流动相（0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（用2mol/L氢氧化钾调pH至5.0）―乙腈（97.5：2.5））溶解样品，此方法溶解速度较慢。
本实验采用0.1摩尔每升盐酸溶液溶解样品，解决了原有方法溶解速度慢的问题。
本法简便、重现性好、回收率高，可用于阿莫西林胶囊中阿莫西林的含量测定。
关键词：阿莫西林胶囊；阿莫西林；测定阿莫西林别名为阿莫灵、阿莫仙、阿莫新、安福喜、奥纳欣、弗莱莫星、奈他美、羟氨苄青霉素、强力阿莫仙、特力士、再林、维克阿莫西等。
阿莫西林化学名为（2S，5R，6R）-3，3-二甲基-6-[（R）-（-）-2-氨基-2-（4-羟基苯基）乙酰氨基]-7-氧代-4-硫杂-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-2-甲酸三水合物[1-3]。
阿莫西林是一种最常用的青霉素类广谱β-内酰胺类抗生素[4-7]。
阿莫西林胶囊原有检测方法采用流动相（0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（用2mol/L氢氧化钾调pH至5.0）一乙腈（97.5：2.5））溶解样品，此方法溶解速度较慢。
本实验采用0.1摩尔每升盐酸溶液溶解样品，并对测定方法进行考察。
1 仪器与试药SL-GDH高精度恒温水槽（南京顺流仪器有限公司）；UPLC 超高效液相色谱系统（沃特世科技（上海）有限公司）；08890-xx超声波清洗器（北京中科科尔仪器有限公司）；TGL-16台式高速冷冻离心机（湘仪离心机仪器有限公司）；TU-1901 双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；XYJ-H帕恩特实验室中央超纯水系统（北京湘顺源科技有限公司）；瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中国公司）。
甲醇（北京红星化工有限责任公司）、磷酸（江西省华南化工有限公司）、醋酸（山东高密高源化工有限公司）、磷酸二氢铵（江西省华南化工有限公司）、冰乙酸（北京红星化工有限责任公司）、乙腈（盖州市鹏圣化工有限公司）、盐酸（北京红星化工有限责任公司）。
1阿莫西林胶囊的分析与检验
阿莫西林的分析与检验1阿莫西林化学式化学名为（2S,5R,6R）-3,3-二甲基-6[(R)-（-）-2-氨基-2-(4-羟基苯基)乙酰胺基]-7-氧代-4硫杂-1-氮杂双环[3,2,0]庚烷-2-甲酸散水合物。
又名羟苄西林，是氨苄西林的衍生物。
2药理特性：本品为半合成广谱青霉素，对革兰氏阴性菌如淋球菌，流感杆菌，百日咳杆菌，大肠杆菌，布氏杆菌等作用强，对革兰氏阳性菌的作用与青霉素相同或稍低，其耐酸可口服但不耐酶，可产生抗药性。
3性状：本品为白色或类白色粉末，味微苦，本品在水中微溶，在乙醇中几乎不溶，4采用胶囊剂型的优势4.1阿莫西林味微苦，将阿莫西林密封于胶囊内，可掩盖该药物的苦味，使其外形美观易于携带。
4.2阿莫西林在一定条件的水溶液下不稳定4.2.1可发生降解，引起聚合反应4.2.2水中有磷酸盐，山梨醇，硫酸锌，二乙醇氨等存在时，则会发生分子内成环反应，生成2，5吡嗪二酮。
4.2.3将阿莫西林包入胶囊中，可提高其对水分的稳定性，4.3本品阿莫西林结构中有酚羟基，易发生自动氧化，在光热及重金属催化下，氧化反应加速，将阿莫西林包入胶囊剂，可提高其对光线和空气的稳定性。
5阿莫西林胶囊项下胶囊的检验，5.1外观：胶囊剂应整洁不应有粘连，变形和破损现象，并应无异臭。
5.2装量差异：除另有规定外，应取供试品20粒，分别精密称重后，倾出内容物，（不得损害胶囊壳），用小刷或其它适宜用具拭净，再分别精密称定囊壳重量，求出每粒内容物的装量，每粒的装量与平均的装量相比较，超出装量差异，限度的胶囊，不得多于2粒，并不得有一粒超出限度值的一倍。
平均装量为0.3克以下的，装量差异限度为±10%，平均装量为，0.3g或0.3g以上的，装量差异限度为±7.5%。
5.3崩解时限的检查崩解时限的检查，采用生降式崩解仪，其主要结构为一能升降的金属支架与下端镶有筛网的吊篮，并附有挡板。
测定时使用胶囊剂在液体介质中，若胶囊剂漂浮在页面，可加挡板，阿莫西林胶囊剂应在30min内崩解，如有一粒不能完全崩解，则另取6粒重复试验，均应符合规定。
阿莫西林胶囊
4、系统适用性试验在正式测定样品前要做系统适用性试验，即用规定的对照品对仪器进行试验和调整，以检查该系统的理论塔板数、分离度、重复性、拖尾因子是否符合药典规定。
实验阿莫西林胶囊的含量测定
一、药品检验原始记录
检验日期温度相对湿度
检品名称剂型规格
生产厂家批号效期
检验依据检验目的
检验人：校对人：
二、药品检验报告检品名称生产单位 Nhomakorabea剂型
规格
批号
有效期
包装
检验数量
检验目的
检验项目
检验日期
报告日期
检验依据
检验结论：
检验报告人：；审核人：
药品分析检验报告设计表（第三组）
课题
6、取阿莫西林系统适用性对照品约25mg，置50ml量瓶中用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过.精密量取20ul注入液相色谱仪，记录色谱图。
7、另取阿莫西林对照品适量，同法测定，按外标法以峰面积计算即得。
标示量%=ＣＲ
（三）、实验后清洗分析结束，先关检测器，再用经过滤和脱气的适当溶剂清洗色谱系统，正向柱一般用正己烷，反向柱一般用甲醇，如使用过含酸、碱或盐的流动相，则将水相换为同比例纯水，再适当提高甲醇比例，最后用甲醇依次冲洗，各种溶剂一般冲洗20~30倍柱体积，特殊情况延长。冲洗结果，逐渐降低流速至零，关泵。进样器用甲醇冲洗。
（二）、操作方法
1、泵的操作及色谱柱的平衡
（1）用流动相冲洗过滤器，再把过滤器浸入流动相中，打开泵的排液阀，设置高流速后启动泵，进行冲泵排气，直到管线内无气泡为止，关泵或将流速阀调至分析数值，关闭排液阀。
阿莫西林制剂的含量测定技术
阿莫西林制剂的含量测定技术【摘要】药物阿莫西林的原有剂型有片剂、胶囊剂等，目前又出现了一些新的剂型、制剂，为了适应新剂型、制剂的要求和进一步完善阿莫西林原有的质控标准，文章对测定阿莫西林制剂含量的方法进行了研究，并在本文中作了阐述。
【关键词】阿莫西林；测定技术作为光谱抗生素药物的一种，临床上阿莫西林被广泛应用，其又名为羟氨苄青霉素，属β-内酰胺青霉素类抗生素。
作为阿莫西林研究的一个重要方面，阿莫西林制剂的含量的测定方法一直备受关注。
文章对测定阿莫西林制剂含量的方法进行了研究。
测定阿莫西林制剂含量的测定方法主要有微生物效价测定法、碘量法、电位滴定法、旋光法、分光光度法以及流动注射化学发光法等，下面对以上这几种方法一一说明。
1.微生物效价测定法作为抗生素测定经典方法之一，微生物效价测定法同样适用于阿莫西林制剂含量的测定，通过该种方法测定出的数据能够直接反应阿莫西林对病菌微生物的抑杀能力，但该种方法的不足之处是实验操作繁琐、工作量较大。
具体方法是以藤黄八叠球菌（28001）为试验菌种，试验培养基为药典Ⅰ号培养基进行实验，最低检测浓度为0.05mg/L，日内和日间变异系数小于15%，线性范围为0.05～400mg/L（r=0.9977，P<0.01），符合生物样品分析要求。
2.碘量法碘量法是利用阿莫西林分子不消耗碘，而其降解产物消耗碘的特性来测定阿莫西林含量的方法，也是一种测定青霉素类抗生素较为通用的方法。
具体方法是先将阿莫西林制剂水解成阿莫西林噻唑酸，然后用足够的、定量的碘与其发生反应，之后再用准硫代硫酸钠滴定剩余的碘，从而测出消耗碘的阿莫西林的量，最终测出制剂中阿莫西林的含量。
3.电位滴定法电位滴定法是利用阿莫西林的降解产物能够与汞盐（Hg2+）发生反应，形成巯基化物汞盐这一特性而得以测定制剂中阿莫西林含量的，青霉素类化合物的降价降解产物普遍存在这一特性。
该种方法先将阿莫西林制剂水解，然后以铂电极为指示电极、Hg-Hg2SO4为参比电极，然后用硝酸汞滴定液（0.02mol/L）滴定，最终测得制剂中阿莫西林的含量。
阿莫西林胶囊溶出度测定方法的探讨
阿莫西林胶囊溶出度测定方法的探讨溶出度是指药物从片剂或胶囊剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度[1]，它是评价药物口服固体制剂质量的重要指标之一。
药物的溶出度是药物在人体内代谢的一种体外模拟实验，它的溶出速度和程度，都可以间接地反应出药物的动力学性质。
在实验过程中，发现阿莫西林胶囊的溶出度测定值比其含量要高出许多。
故笔者将其采用对照品法，自身对照法及消除空白吸收法三种方法对阿莫西林胶囊的测定进行了对比实验[2]，结果发现以对照品法进行测定，得出的结果与样品含量接近。
其溶出度比较合理，更接近真实值。
1 仪器与试药ZRS型溶出度测定仪；UV-2501型紫外分光光度计（岛津）；TG328B型电光分析天平。
阿莫西林对照品（中国药品生物制品检定所，批号：0409-9907，含量为84.5%），阿莫西林胶囊样品（市场抽验），溶剂：纯化水。
2 实验方法2.1 溶出度测定：将溶出度测定仪调试好，取阿莫西林胶囊6粒，照溶出度测定法（中国药典附录XC第一法）测定，转速：100 r/min，溶剂温度（37±0.5）℃，依法操作45 min，立即抽取溶液10 ml，经0.45 μm的滤膜滤过。
滤液待用。
2.2 溶液的配制2.2.1 对照品溶液配制：精密称取对照品阿莫西林适量，制成每1 ml含阿莫西林130 μg的溶液，作为对照品溶液。
2.2.2 自身对照液的制备：精密称取阿莫西林胶囊平均装量项下的内容物适量（约相当于1粒的平均装量），按标示量加水溶解并稀释成每1 ml中约含阿莫西林130 μg的溶液，作为自身对照溶液。
2.2.3 空白溶液的制备：取同批号阿莫西林胶囊的空胶囊壳1粒，加水900 ml，与样品同法操作。
加水稀释成与样品同样倍数的溶液，作为空白溶液。
2.3 溶液吸收值测定：取上述各溶液，照紫外分光光度法在272 nm处测定吸收值。
并计算溶出度值，结果见表1。
3 结果从表1中数据可以看出，空白溶液对溶出度的测定也有一定的影响，与药典规定的自身对照法相比，平均相差5%左右，与对照品法测定结果相差很多，平均相差16.5%左右，与相对应批号的含量相比，对照品法测定结果平均相差2%左右，而其他的方法都相差10%左右。
HPLC法测定阿莫西林胶囊中阿莫西林的含量共4页
HPLC法测定阿莫西林胶囊中阿莫西林的含量阿莫西林又名安莫西林或安默西林，分子式为C16H19N3O5S，是一种最常用的青霉素类广谱β-内酰胺类抗生素。
阿莫西林杀菌作用强，穿透细胞壁的能力也强，是目前应用较为广泛的口服青霉素之一。
阿莫西林适用于溶血链球菌、肺炎链球菌、葡萄球菌或流感嗜血杆菌所致中耳炎、鼻窦炎、咽炎、扁桃体炎等上呼吸道感染、溶血链球菌、葡萄球菌或大肠埃希菌所致的皮肤软组织感染、急性单纯性淋病、溶血链球菌或葡萄球菌或流感嗜血杆菌所致急性支气管炎、治疗伤寒、伤寒带菌者及钩端螺旋体病等。
本文用高效液相法对阿莫西林胶囊中的阿莫西林的进行了含量测定。
1.仪器与试药KHW-D-1LC精密拉伸水浴锅（上海科恒实业发展有限公司）；UPLC 超高效液相色谱系统（沃特世科技（上海）有限公司）；R-1001-VN旋转蒸发仪（郑州长城科工贸有限公司）TU-1901 双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；QT3120K脱气可调型超声波清洗器（天津市瑞普电子仪器公司）；TGL-18C高速台式离心机（上海楚柏实验室设备有限公司）；XYG-H帕恩特痕量分析级超纯水机（北京湘顺源科技有限公司）；DOA-P504-BN无油隔膜真空泵（上海洽姆仪器科技有限公司）；瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中国公司）。
甲醇（深圳市中原化工科技有限公司）、冰乙酸（衡阳市迅源化学试剂有限公司）、乙腈（盖州市鹏圣化工有限公司）、磷酸（南京盛庆和化工有限公司）、醋酸（山东高密高源化工有限公司）、磷酸二氢铵（深圳市中原化工科技有限公司）、盐酸（深圳市中原化工科技有限公司）。
2.含量测定2.1色谱条件依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-11]。
色谱柱为依利特hypersil BDSC18色谱柱（4.6*250*5u ）；乙腈-甲醇-0.1mol/L的磷酸二氢钾溶液-冰醋酸（10∶10：80：0.1）为流动相；检测波长为254nm；流速1.0mL?min-1；柱温：30℃。
高效液相色谱法测定阿莫西林胶囊含量
高效液相色谱法测定阿莫西林胶囊含量
一、目的
1．熟悉HPLC法测定的原理及操作；
2．掌握外标法测定阿莫西林胶囊含量。
二、操作
1．鉴别
取本品内容物适量，在含量测定项下记录的色谱图中，供试品主峰的保留时间应与对照品主峰的保留时间一致。
2．含量测定
（1）谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液（pH5.0）（取磷酸二氢钾13.6g，加水溶解后稀释到2000ml，用8mol/L氢氧化钾溶液调节pH值至5.0±0.1）-乙腈（96∶4）为流动相；流速为每分钟约1.0ml；检测波长254nm。
理论板数按阿莫西林峰计算应不低于1700。
（2）对照溶液配制：取阿莫西林对照品约30mg，精密称定，置50ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液（pH5.0）溶解并稀释至刻度，摇匀即得。
（3）样品测定：取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量，加磷酸盐缓冲液（pH5.0）溶解并稀释成每mL中约含0.6mg的溶液，滤过，取续滤液20μL注入液相色谱仪，记录色谱图；另取阿莫西林对照溶液同法测定。
按外标法以峰面积
计算出样品中阿莫西林（C
19H
19
N
3
O
5
S）的含量。
本品含阿莫西林（C
19H
19
N
3
O
5
S）应为标示量的90.0%～110.0%。
三、说明
1. 阿莫西林结构如下：
药典收载的相关制剂主要有片剂、胶囊剂及注射用阿莫西林钠。
实验十二阿莫西林胶囊的分析
实验十二阿莫西林胶囊的分析AmoxilinA moxiciHinCjiHijNjOjS * SHrO 419*46一、实验目的1熟悉高效液相色谱仪的结构及正确使用。
2 •掌握阿莫西林胶囊分析的原理及方法。
二、实验原理阿莫西林为B-内酰胺类抗生素，其母核部分与侧链部分均有共轭体系，有紫外吸收, 因此阿莫西林胶囊的鉴别、有关物质的检查、含量测定均采用反相高效液相色谱法。
有关 物质的检查方法为外标法和不加校正因子的主成分自身对照法，含量测定采用外标法定量。
三、实验方法本品含 C 16H 19 N 3O 5S 应为标示量的 90.0% ~110.0%。
【鉴别】 在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时问应与对照品溶 液主峰的保留时间一致。
【检查】 水分 取本品的内容物，照水分测定法 （附录M 第一法A ）测定，含水分不得 过 16.0%。
有关物质取本品的内容物适量， 精密称定，用流动相A 溶解并制成每1ml 中含2mg 的溶液，滤过，取续滤液照阿莫西林有关物质项下的方法测定。
单个杂质的峰面积不得大 于对照溶液主峰面积的2倍（2.0 % ），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的 5倍 （5.0% ）。
供试品溶液中汪何小于对照溶液主峰面积 0.05倍的峰可忽略不计） 溶出度 取本品，照溶出度测定法（附录X C 第一法），以水900ml 为溶出介质，转速 为每分钟100转，依法操作，经 45分钟时，取溶液适量，滤过，精密量取续滤液适量，用 溶出介质稀释成缈"ml 中约含130⑷的溶液，照紫外一可见分光光度法（附录W A ），在272nm 的波长处测定吸光度；另取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于平 均装量），按标示量加溶出介质溶解并稀释成每1ml 中约含130⑷的溶液，滤过，取续滤液 作为对照溶液，同法测定，计算每粒的溶出量。
限度为80%，应符合规定。
其他 应符合胶囊片剂项下有关的各项规定（附录I A ）。
10实验十阿莫西林胶囊的质量检验
三、有关物质检查
色谱条件
m.p D ：0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(pH5.0)
m.p B ：乙腈
Time(min) 0 15 45 55
m.p D 97.5 97.5 80 80
m.p B 2.5 2.5 20 20
56
70
97.5
97.5
2.5
2.5
有关物质检查
样品溶液的配制（2mg/ml）
实验原理
三． RP-HPLC色谱法（略）
实验内容
一． 鉴别
二． 含量测定
三． 有关物质检查
一、鉴别
在含量测定条件下记录的色谱图中，供试品溶液 主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间 一致。
二、含量测定
对照品溶液制备：精密称取阿莫西林对照品约 25mg，置50ml量瓶中，用流动相溶解定容成浓度 为0.468mg/ml溶液。 供试品溶液制备：取本品10片，取胶囊内容物， 精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿莫 西林25mg），置50ml量瓶中，用流动相稀释定容 成每1ml约含0.5mg的溶液，用 0.45μm 滤膜滤过， 取续滤液，精密吸取20μl注入液相色谱仪，记录 色谱图； 按外标一点法以峰面积计算出供试品中 C16H19N3O5S的含量。
实验十
阿莫西林胶囊的质量检验
实验目的
掌握内酰胺类化合物的结构；
熟悉高效液相色谱法的定性、定量方法；
掌握β-内酰胺类抗生素的性质及有关物质检查； 掌握HLPC测定含量的方法。
实验原理
一． 阿莫西林结构 本品主要成分为β-内酰胺类抗生素阿莫西林，本品 含阿莫西林（C16H19N3O5S）应为标示量的 90.0%~110.0%。
色谱条件
高效液相法对比紫外分光光度法测定阿莫西林胶囊含量
高效液相法对比紫外分光光度法测定阿莫西林胶囊含量目的HPLC及UV测定阿莫西林胶囊的含量对比。
方法高效液相色谱法选择色谱柱为Agilent C18（4.6×250 mm，5 μm），流动相为0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液（pH=5）-乙腈（97.5：2.5），流速为1.0 ml/min，检测波长为254 nm，紫外法选择254 nm波长测定含量。
结果HPLC法中阿莫西林在 2.56 ～56.15ug/ml范围内线性关系良好，回归方程：Y=65257X-3244531（r=0.9996），加样回收率平均值为100.68%，RSD 1.7%。
结论HPLC法对比紫外分光光度法测定阿莫西林含量更为准确，重复性高，专属性强标签：阿莫西林；高效液相色谱法；紫外分光光度法阿莫西林因其耐酸、口服吸收快、生物利用度高等特点，使其在临床上深受医生和患者的厚爱[1]。
2015版药典中推荐使用高效液相色谱法来分析本品[2]，但相对来说紫外分光光度法仪器设备要求简单，检测时间快捷，该法是否可以作为本品基层药物监测的备选方法值得考察。
本文由此出发，对比分析高效液相及紫外分光光度法测定阿莫西林含量。
1临床资料岛津LC-2010CHT 型高效液相色谱仪；岛津UV-2450型紫外分光光度计；乙腈由霍尼韦尔贸易（上海）有限公司提供，为色谱醇；氢氧化钾、磷酸二氢钾、N-溴代丁二酰亚胺均为色谱纯；阿莫西林对照品（中国药品生物制品检定所，批号：130409-201011，纯度85.80%）；阿莫西林胶囊（武汉健民集团随州药业有限公司）。
2实验方法2.1高效液相色谱法2.1.1色谱条件[2] 色谱柱选择Agilent C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相：0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液（用 2 mol/LKOH调节pH值5.0）-乙腈（97.5：2.5），检测波长：254 nm，进样量10 μl，1.0 ml/min流速，柱温为室温（25℃）。
高效液相色谱法测量药物中阿莫西林含量的分析
高效液相色谱法测量药物中阿莫西林含量的分析摘要：目的：利用高效液相色谱法，对阿莫西林的含量进行测定。
方法：对阿莫西林应用高效液相色谱法测定，并运用各种分析方法以确定高效液相色谱法对阿莫西林药物检测的可利用性和有效性。
结果：最终测量结果表明，利用高效液相色谱技术测定，阿莫西林的回收率约为88.4％-99.7％左右，在测量的实验样本中检测出阿莫西林的浓度于0.48-1.43mg-1之间时，浓度和峰面积之间表现出良性线性关系。
结论：阿莫西林应用高效液相谱法测量的可实施性较高，具有良好应用的价值，可在临床多实践。
关键词：高效液相色谱法；药物；测量；阿莫西林；含量阿莫西林属于西药，主要针对大部分革兰阴性菌、阳性菌有较强的杀菌、灭菌功能，其中也包含杆菌和球菌，是一种广谱青霉素，临床常用于消化道感染、泌尿道感染、呼吸道感染、软组织和皮肤感染等治疗中[1]。
和青霉素的功能相似，同时让细胞凋零死亡(通过对细菌细胞壁生物合成来实现)，本试验使用了高效液相色谱法来对阿莫西林药品中的浓度进行检测，以此来明确该方式的作用和功能，具体内容如下。
1研究方法与材料1.1实验仪器和试剂采用日本岛津公司LC-2030C 高效液相色谱仪（配备紫外检测器)；奥豪斯EX125DZH型十万分之一电子天平；上海康仪 PHS-3 酸度计；而实验试剂主要就是阿莫西林对照样本；色谱级纯或优级纯甲醇或乙腈。
1.2实验参数指标调整应用高效液相色谱法检测时，得合理调整实验参数指标。
其中包含流动相和固定相。
流动相选择：将6.8g磷酸二氢钾固体粉与1000ml纯水搅拌后溶解，从而形成磷酸二氢钾溶液。
然后，把25ml乙腈溶液与975ml已溶解过的溶剂相混合，随后进行10分钟超声处理。
此外，还需要把阿莫西林对照样品放在大量瓶内(50ml)，采用流动相稀释和溶解，将其溶液摇晃均匀后，制备为0.5mg mL-1的对照溶液。
固定相的指标调整为AgillentSB-C18色谱柱(4.7×150mm，3.5μm)，预柱为(22×3.8mm)，流动相：0.06moL·L-1磷酸盐缓冲液(将它和13.4g磷酸二氢钾共溶并稀释至2000mL，最后采用10个moL l-1氢氧化钾水溶液在调节pH值4.9±0.2)；乙腈(97.5：2.5，v/v)，将流速调整至1min/ml，柱温调整至30℃左右，检测波长度253nm，进样量20μL。
实验十二 阿莫西林胶囊的分析
实验十二阿莫西林胶囊的分析一、实验目的1．熟悉高效液相色谱仪的结构及正确使用。
2．掌握阿莫西林胶囊分析的原理及方法。
二、实验原理阿莫西林为β–内酰胺类抗生素，其母核部分与侧链部分均有共轭体系，有紫外吸收，因此阿莫西林胶囊的鉴别、有关物质的检查、含量测定均采用反相高效液相色谱法。
有关物质的检查方法为外标法和不加校正因子的主成分自身对照法，含量测定采用外标法定量。
三、实验方法本品含C16H19 N3O5S应为标示量的90.0％~110.0％。
【鉴别】在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时问应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
【检查】水分取本品的内容物，照水分测定法(附录M第一法A)测定，含水分不得过16.0％。
有关物质取本品的内容物适量，精密称定，用流动相A溶解并制成每1ml中含2mg 的溶液，滤过，取续滤液照阿莫西林有关物质项下的方法测定。
单个杂质的峰面积不得大于对照溶液主峰面积的2倍(2.0％)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的5倍(5.0％)。
供试品溶液中汪何小于对照溶液主峰面积0.05倍的峰可忽略不计)溶出度取本品，照溶出度测定法(附录X C第一法)，以水900ml为溶出介质，转速为每分钟100转，依法操作，经45分钟时，取溶液适量，滤过，精密量取续滤液适量，用溶出介质稀释成缈"ml中约含130μg的溶液，照紫外一可见分光光度法(附录ⅣA)，在272nm 的波长处测定吸光度；另取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量(约相当于平均装量)，按标示量加溶出介质溶解并稀释成每1ml中约含130μg的溶液，滤过，取续滤液作为对照溶液，同法测定，计算每粒的溶出量。
限度为80％，应符合规定。
其他应符合胶囊片剂项下有关的各项规定(附录I A)。
【含量测定】1．色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（2mol/L氢氧化钠溶液调节PH值至5.0）–乙(97.5︰2.5)为流动相；流速为1ml/min,检测波长为254nm，理论板数按阿莫西林峰计算不低于2000。
不同溶剂量下阿莫西林的含量测定实验-药学论文-基础医学论文-医学论文
不同溶剂量下阿莫西林的含量测定实验-药学论文-基础医学论文-医学论文——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印——阿莫西林胶囊适用于敏感菌（不产内酰胺酶菌株）所致的下列感染，溶血链球菌、肺炎链球菌、葡萄球菌或流感嗜血杆菌所致中耳炎、鼻窦炎、咽炎、扁桃体炎等上呼吸道感染；大肠埃希菌、奇异变形杆菌或粪肠球菌所致的泌尿生殖道感染；溶血链球菌、葡萄球菌或大肠埃希菌所致皮肤软组织感染；溶血链球菌、肺炎链球菌、葡萄球菌或流感嗜血杆菌所致急性支气管炎、肺炎等下呼吸道感染；急性单纯性淋病。
本品尚可用于治疗伤寒、伤寒带菌者及钩端螺旋体病；阿莫西林亦可与克拉霉素、兰索拉唑三联用药根除胃、十二指肠幽门螺杆菌，降低消化道溃疡复发率。
阿莫西林胶囊收载在《中国药典》2010 年版二部第403页。
在其检验标准中要求对阿莫西林的含量进行测定，笔者在实验中发现溶解的溶剂量不同，对结果会造成较大的影响，甚至会出现误判。
笔者对几种溶解的溶剂量进行了实验，与大家探讨。
1 试药与仪器1.1 试药：阿莫西林胶囊（石家庄莫药厂批号：130629 标示量0.25g）；阿莫西林对照品（中检所批号：130409-201011含量：85.8%）。
1.2 仪器：sartorius cp224s 万分之一天平；sartorius ME235S 十万分之一天平；岛津20A 高效液相色谱仪。
2 方法2.1 色谱条件：以0.05mol/L 磷酸二氢钾溶液（pH 值5.0）∶乙腈（97.5∶2.5）为流动相，流速 1.0ml/min，柱温30.0∶，检查波长254nm，进样量20uL。
2.2 色谱柱：C18柱thermo 5 250mm4.6mm 1005404Q4。
2.3 对照品溶液的制备：取阿莫西林对照品，称量：0.01467g 置25ml量瓶中，用流动相溶解稀释至刻度，即得，浓度为0.5035mg/ml。
2.4 供试液：取样品20 粒，按装量差异检查法称出平均装量0.2980g，其内容物混匀，按照药典规定的取样量取样，共取十二组，每组两个样。
阿莫西林胶囊含量测定
欢迎共阅实验四HPLC法测定阿莫西林胶囊的含量
实验目的： 1. 熟练掌握安捷伦1100液相色谱仪的操作
2. 对液相色谱仪出现的一些故障和维护会进行简单维护
3. 通过外标一点法计算药物浓度
3.实验方法及结果
参照2010年中国药典二部收载阿莫西林胶囊剂的含量测定采用HPLC法（页码
401-404），阿莫西林峰与杂质峰的分离度需大于1.5。
3.1流动相的配制称取6.8 g磷酸二氢钾固体粉末，用1 L纯水溶解；量筒精密量取975 mL磷酸二氢钾水溶液于试剂瓶中，精密量取25 mL乙腈溶液，两相混合，超声10 min后用于流动相；
3.2 对照品溶液的制备精密称取阿莫西林对照品适量, 置50 mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成0.5 mg/mL的标准溶液, 备用。
3.3 样品溶液的制备取阿莫西林胶囊5粒，准确称量后取出内容物，研匀。
精密称
）
4.5 所有进样结束后，需对管路进行用色谱甲醇或乙腈进行冲洗，色谱柱也用色谱甲醇或色谱乙腈进行冲洗至少10 min后，保存色谱柱待下次使用。
5. 实验解答题
5.1 采用HPLC－UV法进行含量测定对化合物结构的要求？如何确定紫外最大吸收波长？
5.2 简答采用HPLC法对某一药物进行含量测定的基本思路。
费休氏法测定阿莫西林胶囊水分含量的不确定度评定
费休氏法测定阿莫西林胶囊水分含量的不确定度评定目的利用费休氏法测定阿莫西林胶囊中水分含量，对检验结果进行不确定度评定，提高检验结果的准确性和可靠性。
方法采用费休氏法测定阿莫西林胶囊水分含量，分析检验过程中不确定度的来源，对不确定度进行评定。
结果标准不确定度为0.08417%，扩展不确定度为0.1683%。
结论采用费休氏法测定阿莫西林胶囊中水分含量，实验过程快速，结果准确，测量不确定度主要由费休氏液滴定强度和消耗费休氏液体积产生。
标签：费休氏法；阿莫西林胶囊；水分含量费休氏水分测定法是利用碘氧化二氧化硫时，需要有一定量的水参加反应的原理来测定样品中水分含量的方法[1]。
其具有操作简单、专属性强，准确性好等优点，已广泛用于医药、石油、化工、农药、染料、粮食等领域的大多数物质的水份测量[2]。
《中国药典2010年版二部》规定阿莫西林胶囊的水分测定使用费休氏法[3]。
笔者采用该法对阿莫西林胶囊中的水分含量进行了检验，并对检验不确定度进行了评定，现报告如下。
1资料与方法1.1一般资料V20卡尔费休氏水分测定仪，购自梅特勒-托利多；AUW220D 电子天平，购自日本岛津；QYYS-20A实验室超纯水机，购自重庆前沿水处理设备有限公司；1.2试剂试药卡尔·费休试剂购自天津科密欧化学试剂有限公司，批号：20130513；无水甲醇购自国药集团化学试剂有限公司；实验用水采用QYYS-20A 实验室超纯水机自制；阿莫西林胶囊为华北制药股份有限公司生产，批号：J1301017。
2方法2.1费休氏液滴定强度标定向滴定容器内加入一定量的无水甲醇，按仪器操作规定执行预滴定。
完成预滴定后，精密称取超纯水10.00mg，加入滴定容器内，启动仪器进行自动滴定，滴定完成后仪器自动计算费休氏液滴定强度（F）值，重复称取超纯水3份，分别置滴定容器内自动滴定，仪器自动计算3个费休氏液滴定强度值，取平均值作为本次滴定的费休氏液滴定强度。
阿莫西林胶囊质量标准
阿莫西林胶囊质量标准本品含阿莫西林（C16H19N3O5S）应为标示量的90.0%～110.0%。
【性状】本品内容物为白色至黄色粉末或颗粒。
【鉴别】（1）取本品内容物适量（约相当于阿莫西林0.125g），加4.6%碳酸氢钠溶液使溶解并稀释制成每1ml中约含阿莫西林10mg的溶液，滤过，作为供试品溶液，照阿莫西林项下的鉴别（1）项试验，显相同的结果。
（2）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰面积的保留时间一致。
【检查】有关物质取本品的内容物适量，精密称定，加流动相A溶解并定量稀释成每1ml中约含阿莫西林2.0mg的溶液，滤过，取续滤液，照阿莫西林项下的方法测定。
单个杂质峰面积不得大于对照品溶液主峰面积（1.0%），各杂质峰面积的和不得大于对照品溶液面积的5倍（5.0%）。
阿莫西林聚合物取本品内容物，混匀，精密称取适量（约相当于阿莫西林0.2g），置10ml量瓶中，加2%无水碳酸钠溶液5ml使溶解并用水稀释至刻度，摇匀，滤过，立即取续滤液作为供试品溶液，照阿莫西林项下的方法试验。
含阿莫西林聚合物以阿莫西林计，不得过0.2%。
水分取本品的内容物，照水分测定法（附录Ⅷ M第一法 A）测定，含水分不得过16.0%。
溶出物取本品，照溶出度测定法（附录Ⅹ C第一法），以水900ml为溶出介质，转速为每分钟100转，依法操作，经45分钟时，取溶液适量，滤过，精密量取续滤液适量，用水定量稀释制成每1ml中约含阿莫西林130μg的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录Ⅳ A），在272nm的波长处测定吸光度，另取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于平均装量），按标示量加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含阿莫西林130μg的溶液，滤过，取续滤液，同法测定，计算每粒的溶出量。
限度为80%，应符合规定。
其他应符合胶囊剂项下有关的各项规定（附录ⅠE）。
【含量测定】取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于阿莫西林0.125g），加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含阿莫西林0.5mg 的溶液，滤过，取续滤液，照阿莫西林项下的方法测定，即得。
阿莫西林胶囊10版403页
阿莫西林胶囊2010版二部403页
【性状】内容物应为白色至淡黄色粉末或颗粒
【鉴别】HPLC 含量测定供试品主峰的保留时间应与对照品一致
【检查】
有关物质
供试品：0.25g/规格*平均装量流A 10ml 2ml 流A 25ml (2mg/ml) 对照溶液：阿莫西林对照品10mg 流A 100ml 5ml 流A 25ml (20ug/ml) 阿莫西林聚合物
水分不得过7.0%
溶出度第一法 100转/min 45min取样紫外法255nm限度80% 溶出介质：0.1mol/L盐酸溶液900ml 54ml盐酸水 6000ml
供试：0.25g/900ml 5ml 介质 50ml (28ug/ml)
0.125g/900ml 5ml 介质 25ml (28ug/ml)
对照：平均装量介质 100ml 1ml 介质 100ml (28ug/ml) 装量差异取本品20粒，精密称定内容物。
【含量测定】
流动相: 水-甲醇-3.86%醋酸钠溶液-4%醋酸溶液（1564:400:30:6）
1.4475g醋酸钠水37.5ml 0.3ml醋酸水7.5ml （1955-500-37.5-7.5）
波长：254nm 流速：0.7~0.9ml/min 进样量：10 ul R>1.5
系统适用性试验：头孢拉定对照品溶液10份和头孢氨苄对照品贮备液1份头孢氨苄对照品：10mg 流 25ml(0.4mg/ml储备液) 5ml 流 50ml
供试：70mg/规格*平均装量流 100ml
对照：头孢拉定对照品17.5mg 流 25ml。
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实验四 HPLC法测定阿莫西林胶囊的含量
实验目的： 1. 熟练掌握安捷伦1100液相色谱仪的操作
2. 对液相色谱仪出现的一些故障和维护会进行简单维护
3. 通过外标一点法计算药物浓度
4. 采用高效液相色谱法对阿莫西林胶囊主成分阿莫西林进行含量测定实验原理：利用高效液相色谱仪的高选择性、高灵敏度等特点，通过记录已知浓度的阿莫西林对照品的色谱峰面积，并测定未知浓度的阿莫西林胶囊的色谱峰面积，根据外标一点法计算胶囊中阿莫西林的标示量的百分含量。
实验背景：阿莫西林 (Amoxicillin) 为β-酰胺类抗生素, 临床疗效好, 可口服且不易引起过敏。
2010年中国药典二部收载阿莫西林胶囊剂的含量测定采用HPLC法（页码401-404），方法操作简便、快速、准确、专属性好。
1.仪器与试药
Agilent 1100高效液相色谱仪: G1310 泵, G2280进样器, G1314A紫外波长检测器。
阿莫西林对照品由中国食品药品检定研究院提供（纯度为86.4％）, 乙腈为色谱纯, 磷酸二氢钾为分析纯，阿莫西林胶囊由国某药厂提供。
50 ml容量瓶，小镊子；棉花；无水乙醇
2.色谱条件
色谱柱: Zorbax SB-C
色谱柱(4.6 mm × 150 mm, 5 µm) ; 流动相: 50 mmol/L
18
磷酸二氢钾溶液:乙腈 (97.5 : 2.5, v/v), 流速1.0 ml/min ; 检测波长254 nm，进样量20 μl，柱温室温。
3.实验方法及结果
参照2010年中国药典二部收载阿莫西林胶囊剂的含量测定采用HPLC法（页码401-404），阿莫西林峰与杂质峰的分离度需大于1.5。
3.1流动相的配制称取6.8 g磷酸二氢钾固体粉末，用1 L纯水溶解；量筒精密量取975 mL磷酸二氢钾水溶液于试剂瓶中，精密量取25 mL乙腈溶液，两相混合，超声10 min后用于流动相；
3.2 对照品溶液的制备精密称取阿莫西林对照品适量, 置50 mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成0.5 mg/mL的标准溶液, 备用。
3.3 样品溶液的制备取阿莫西林胶囊5粒，准确称量后取出容物，研匀。
精密称粉末25 mg, 置50 mL量瓶中, 用流动相溶解并稀释至刻度, 备用。
用少许棉花将胶囊壳中残留药物拭尽，准确秤取空胶囊壳的重量，并算出5粒胶囊容物的重量，进一步算出平均装量。
3.4 样品测定吸取标准溶液20 μL注入液相色谱仪, 记录峰面积和保留时间；取样品20 μL注入液相色谱仪, 以外标法一点法进行含量测定。
3.5 计算
A 供/A
标
= C
供
/C
标
含量（%）= C
供
×50 ×M
平均装量
M
称样量
×500
×100%
4. 实验注意事项
4.1 高效液相色谱仪在进样之前需打开purge阀，加大泵流量（流速为2－3 ml/min）并开启泵，排除管路中的气泡。
4.2 进样前需用流动相平衡色谱柱15 min，按照色谱柱几何体积5－10倍流动相冲洗色谱柱，确保色谱柱平衡良好。
4.3 进样前所填写的sample information文件名和进样瓶位置是否填写正确，确保进样的正确性。
4.4 待基线稳定后进样，在采集色谱图过程中注意柱压变化，若柱压有显著增加或降低，说明管路有堵塞或漏液现象，应立即停止进样，关掉泵流速，仔细检查排除故障。
4.5 所有进样结束后，需对管路进行用色谱甲醇或乙腈进行冲洗，色谱柱也用色谱
甲醇或色谱乙腈进行冲洗至少10 min后，保存色谱柱待下次使用。
5. 实验解答题
5.1 采用HPLC－UV法进行含量测定对化合物结构的要求？如何确定紫外最大吸收波长？
5.2 简答采用HPLC法对某一药物进行含量测定的基本思路。