组织学绪论_2

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这些年的努力就为了得到相应的回报 。2020 年11月1 5日星 期日3时 51分19 秒15:5 1:1915 November 2020
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科学，你是国力的灵魂；同时又是社 会发展 的标志 。下午3 时51分 19秒下 午3时5 1分15:51:1920 .11.15
影术
③ 构建组织或器官，即把细胞置于细
图像分析 胞外基质中进行三维培养、并形成所
细胞培养 需要的形状 组织工程 ④ 将构建物移植机体的方法
图16
本章重点
• 组织学、组织、嗜酸性、嗜碱性的概念 • 组织学学习方法要点 • 石蜡切片术和超薄切片术的基本原理 • HE染色法
上皮组织 结缔组织
肌组织 图1A 心脏（左:器官 右:组织光镜像）
• 形态和结构相统一 结构是功能的基础，功能是结构的必然表现
• 培养观察能力：重视实习课和图像观察 培养空间思维能力：将二维图形还原为三维 构像
研究内容 发展简史 学习方法 技术简介
• 石蜡切片术（paraffin sectioning）：取材、
光镜技术 固定、脱水、包埋、切片（5 ～ 10 µ m
骨骼肌、血管、角膜等；其中以组织
工程皮肤较为成功，已成为商品用于 图像分析 治疗烧伤、皮肤静脉性溃疡等疾病
细胞培养
组织工程
Байду номын сангаас
研究内容 发展简史 学习方法 技术简介
• 研究包括四个方面： 光镜技术 ① 种子细胞，即增殖旺盛的细胞，多 电镜技术 为干细胞
组织化学 ② 细胞外基质，可用生物材料（如牛
放射自显 胶原）和人工合成高分子材料
图像分析 • 扫描电镜术（SEM）
图6
细胞培养 用于观察组织细胞表面结构，具有真
组织工程 实的立体感，无需制备切片
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• 组织化学术（histochemistry）为应用化 光镜技术 学、物理、生物化学、免疫学或分子 电镜技术 生物学的原理和技术，与组织学技术
组织化学 结合而产生的技术，在组织切片显示
第1章
组织学绪论
Introduction of Histology
研究内容 发展简史 学习方法 技术简介
组织学 组织 意义
组织学（histology）
• 研究机体微细结构及其相关功能的科 学
• 研究水平：组织、细胞、亚细胞和分 子
（例：心脏）
图1
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组织学 组织 意义
原位杂交术（in situ hybridization） 光镜技术 • 即核酸分子杂交组织化学术，检测基 电镜技术 因（DNA片段）的有无、基因的表达
组织化学 活性（mRNA）
放射自显 • 原理：用带标记物的已知碱基顺序的
影术
核酸探针与细胞内待测核酸按碱基配
图像分析
细胞培养 组织工程
对原则进行特异性原位结合（杂交），
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每天都是美好的一天，新的一天开启 。20.11. 1520.1 1.1515:5115:51 :1915:5 1:19No v-20
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相信命运，让自己成长，慢慢的长大 。2020 年11月1 5日星 期日3时 51分19 秒Sund ay , November 15, 2020
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爱情，亲情，友情，让人无法割舍。2 0.11.15 2020年 11月15 日星期 日3时5 1分19 秒20.11. 15
图12 放射自显影像（3H-TdR掺入） ↓增殖的肝细胞 △非增殖的肝细胞
图13 计算机三维重建 示肝小叶血管
图14 体外培养的成纤维细胞在倒置显微镜下的图像
图15 体外培养的平滑肌细胞 （免疫组织化学染色显示肌动蛋白）
图16 实验中的组织工程耳
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生活中的辛苦阻挠不了我对生活的热 爱。20. 11.1520 .11.15Sunday , November 15, 2020
放射自显 多糖和糖蛋白，呈紫红色
图7
影术 • 脂类：锇酸固定染色，呈黑色
图像分析 • 核酸：福尔根反应显示DNA，甲基绿－ 细胞培养 派若宁反应同时显示DNA与RNA 组织工程 • 酶类：酶与特异性底物的反应产物、再
与捕捉剂反应，形成有色的沉淀物
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免疫组织化学（immunohistochemistry）
光学显
微镜 • 新仪器、新技术的发明和应用
细胞学说 • 免疫组织化学技术、原位杂交技术将
电子显 微镜
当代组 织学
组织学引入分子水平 • 组织工程学技术拓展了组织学的临床
应用前景
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• 审视角度 组织水平：层次顺序、特征性结构和细胞 细胞水平：主要细胞的分布、结构特点（含 重要细胞的超微结构）及功能
组织（tissue） • 构成：细胞群和细胞外基质
细胞：机体结构和功能的基本单位， 成人约有1015 个、200 余种 细胞外基质：由细胞分泌形成 • 类型：上皮组织、结缔组织、肌组织 和神经组织；组织以不同的种类、数 量和方式组合形成器官；若干功能相 关的器官构成系统
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当代组 织学
→1801 年比沙提出“组织”概念
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光学显
微镜 • 提出：施万、施莱登（1838、1839）
细胞学说
• 内容：细胞是一切动、植物体的基本
电子显 微镜
结构和功能单位；细胞内进行着复杂
当代组 织学
的化学反应；新细胞由原有细胞产生
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组织化学 图像进行分析，从而获得立体的组织
放射自显 细胞内有形成分的数量、体积、表面
影术
积等参数，从量的角度显示结构与功
图像分析 能的关系 细胞培养 • 体视学（stereology）：根据连续的组 组织工程 织切片应用计算机进行三维重建，以
获得微细结构的立体模型
图13
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谢谢大家！
简称电镜（electron microscope, EM）
光学显
微镜 • 发明：1932 年 卢斯卡、科诺尔，使分
细胞学说 辨率提高到 0.2nm
电子显 微镜
当代组 织学
• 超薄切片术（50~80nm） • 超微结构（ultrastructure）：即细胞膜、
细胞器、染色体等亚细胞结构
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图1B 心脏 （心肌细胞光镜像）
肌动蛋白
图1C 心脏 上:肌丝结构电镜像 下:肌丝蛋白质构成
模式图
原肌球蛋白
肌钙蛋白
细肌丝 粗肌丝
肌球蛋白杆 肌球蛋白头
图2 HE染色，垂体远侧部
图3 镀银染色，大脑皮质神经元
图4 甲苯胺蓝与醛复红染色，肥大细胞和弹性纤维
图5 透射电镜像，浆细胞
图6 扫描电镜像，血细胞
放射自显 某种物质的存在和分布状态
影术
• 分类：
图像分析 一般组织化学术
细胞培养 组织工程
免疫组织化学术
原位杂交术
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一般组织化学术：组织中的某种结构成分 光镜技术 与所加试剂发生化学反应并呈现某种颜 电镜技术 色，在显微镜下可观察到
组织化学 • 糖类： PAS（过碘酸希夫）反应，显示
电镜技术 厚）、染色
组织化学 • 苏木精- 伊红染色法（hematoxylin-eosin
staining， HE染色法）：苏木精为碱性染
放射自显 料，使染色质和核糖体着紫蓝色；伊红
影术
为酸性染料，使胞质和细胞外基质着红
图像分析 色
图2
细胞培养 嗜酸性（acidophilia);嗜碱性(basophilia) 组织工程 中 性（neutrophilia）
细胞培养术（cell culture） 光镜技术 • 把从机体取得的细胞在体外模拟体内的 电镜技术 条件下进行培养；培养组织块或器官则
组织化学 称组织培养术或器官培养术
放射自显 • 用于研究细胞、组织的代谢、增殖、分
影术
化、形态和功能变化，各种理化因子对
图像分析 活细胞的影响
• 培养条件：营养、生长因子、pH值、渗
• 特殊染色
图3~4
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• 透射电镜术（TEM）
图5
光镜技术 用于观察组织细胞的超微结构，需制
电镜技术 备超薄切片（50 ~80nm 厚）并经电子
组织化学 染色，根据电子束在不同结构上被散
放射自显 射程度的差异表现为电子密度高（黑
影术
或深灰色）和电子密度低（浅灰色）
放射自显 借以反映细胞的功能状态
影术
• 应用举例
图像分析 ①用3H标记的胸腺嘧啶核苷研究DNA
细胞培养 合成和细胞增殖状态
图
组织工程 ②用125I 观察甲状腺滤泡内碘化部1位2
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• 图像分析术（image analysis）又称形 光镜技术 态计量术（morphometry）：应用数学 电镜技术 和统计学原理对组织切片提供的平面
组织学 组织 意义
• 促进了生理学的进步 • 是病理学的基础 • 促进人类对自身的深入了解
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简称光镜（light microscope，LM）
光学显
微镜
16 世纪末荷兰人发明→1665 年胡克
细胞学说
电子显 微镜
命名“细胞” →马尔比基观察了脾、 肺、肾、表皮；列文虎克发现红细胞、 精子、肌纤维；格拉夫发现卵泡
并通过对标记物的显示而获知待测核
酸的有无及相对量
图11
• 常用标记物有放射性核素和地高辛
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放射自显影术（autoradiography） 光镜技术 • 概念：通过活细胞对某种放射性物质 电镜技术 的特异性摄入，以显示该物质在组织 组织化学 和细胞内的分布、含量和代谢过程，
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人生得意须尽欢，莫使金樽空对月。1 5:51:19 15:51:1 915:51 11/15/2 020 3:51:19 PM
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做一枚螺丝钉，那里需要那里上。20. 11.1515 :51:191 5:51No v-2015 -Nov-2 0
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日复一日的努力只为成就美好的明天 。15:51:1915:5 1:1915:51Sund ay , November 15, 2020
细胞培养 组织工程
透压、O2和CO2浓度、温度，控制污染
• 用相差显微镜观察
图14~15
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组织工程（tissue engineering）
光镜技术
• 用细胞培养术在体外模拟构建机体组
电镜技术
织或器官的技术
组织化学
• 正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、
放射自显 影术
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安全放在第一位，防微杜渐。20.11.15 20.11.1 515:51:1915:5 1:19No vember 15, 2020
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图7 PAS反应，小肠上皮杯状细胞的粘原颗粒
图8 免疫组织化学（荧光素标记） 毛细血管内皮细胞呈vWF阳性
图9 免疫组织化学（辣根过氧化物酶标记） 胰岛B细胞呈胰岛素阳性
图10 免疫组织化学电镜像 示上皮细胞膜MAM－6蛋白 （A 胶体金标记 B 辣根过氧化物酶标记）
图11 原位杂交 脐静脉内皮细胞呈心房钠尿肽阳性
光镜技术
电镜技术 • 根据抗原、抗体特异性结合原理，检
组织化学 测组织切片中的肽和蛋白质
放射自显 • 用标记的抗体与组织中的抗原结合，
影术
标记物可于显微镜下观察。标记物有
图像分析 荧光素（荧光显微镜观察）、辣根过
细胞培养 组织工程
氧化物酶（光镜或电镜观察）、胶体
金（多用于电镜观察）
图8~10
研究内容 发展简史 学习方法 技术简介