艾滋病检测技术与应用ppt课件
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HIV
HIV-1
Types
HIV-2
M N O Groups
ຫໍສະໝຸດ Baidu
A, B, C, D, E, F, G, H, I, J CRF01-16
Clades
ANT 70, MVP5180,
VAU
ROD
NIH2
Guidelines for Classification
Types: Subtypes/Groups: Clades:
第二代
重组抗原或 合成多肽 HIV-1/2
艾滋病检测技术与应用
北京出入境检验检疫局 艾滋病确认中心实验室
HIV检测的病毒学基础
人免疫缺陷病毒
Human Immunodeficiency Virus HIV
HIV感染的 细胞过程的
动画演示
T he R eplication of H IV
Ad so rb tio n to C D 4 and co-receptor
HIV-1 and HIV-2 50% homology
HIV-1 group M, N and O 60-70% homology
HIV-1 Clades A-J >70% homology
名称
参考毒株
重组的亚型
CRF01_AE CRF02_AG CRF03_AB CRF04_cpx CRF05_DF CRF06_cpx CRF07_BC CRF08_BC CRF09_cpx CRF10_CD CRF11_cpx CRF12_BF CRF13_cpx CRF14_BG CRF15_01B CRF16_A2D
CM240 IbNG Kall53 94CY032 VI1310 BFP90 CN54 GX-6F 96GH2911 TZBF061 GR17 ARMA159 96CM－1849 X397 99TH.MU2079 KISII5009
A、E A、G A、B A、G、H、K、U D、F A、G、J、K B'、C B'、C 尚未发表 C、D A、G、J、CRF01_AE B、F
估计HIV-1平均每一代的时间大约为2.5天。这意 味着病毒复制的速率是每年140代或更多，从 HIV感染到诊断AIDS，病毒已经更新了上千代。
HIV 毒粒 血浆 活跃感染的细胞 潜伏感染的T细胞 潜伏感染的巨噬细胞
T1/2(半衰期) 6 小时 1.1 天 8.5 天 14 天
HIV 的型和亚型
计
A
0 0.00 0 0.00
1 20.00 3 60.00 0 0.00 1 20.00 5
B
0 0.00 0 0.00
0
0.00 7 77.78 0 0.00 2 22.22 9
B'
192 62.54 1 0.33
0
0.00 23 7.49 3 0.98 88 28.66 307
C
2 20.00 0 0.00
0
0.00 4 40.00 1 10.00 3 30.00 10
CRF-BC 4 0.96 245 58.89 108 25.96 28 6.73 1
CRF01-
AE
2 1.52 57 43.18 15 11.36 25 18.94 2
CRF02-
AG
0 0.00 0 0.00
0
0.00 1 100.00 0
◆ 检测的标本:血清/血浆，唾液、尿液 ◆ 检测的模式：ELISA、WB、IFA、快速法、
核酸扩增等 ◆ 检测的用途：病原学诊断、监测病程和疗效、
监测病毒变异
检测HIV抗体
◆是常规使用的诊断方法 ◆方法学: ELISA试剂, 快速试剂(金标记, 锡
标记), 家庭用试剂. ◆检测的标本:血清和血浆, 唾液, 尿液
A, CRF01_AE, G, J, U B、G
CRF01_AE, B A2、D
循环重组毒株（Circulate Recombinant Forms, CRF）
全国第二次HIV分子流调不同传播途径HIV-1亚型的分布
采供血
吸毒
吸毒和性途径
性途径
母婴传播
不详
合
亚型 例数 % 例数 %
例数
% 例数 % 例数 % 例数 %
结构基因 包膜(env) 多聚酶(pol) 核心(gag)
HIV-1 (HIV-2)
Gp160/gp120,gp41 (gp140/gp105,gp36)
P66, p55 (P68,P56)
P24, p17 (P26,p16)
HIV-1具有高度变异性
◆逆转录酶的忠实性较差，缺乏3’—5’外切核酸的校读 功能，RNA转录为DNA时经常出现错误
检测HIV抗体(ELISA法)
◆原理:间接法 (第1代,第2代试剂), 双抗原 夹心法(第3代试剂).
◆判断结果有客观依据(临界值).可自动化操 作.
◆可检测多种标本(血清,血浆,唾液,尿液) ◆是使用最广泛的方法
HIV ELISA试剂的发展
固相
标记物
特异性检测
第一代 病毒裂解物
抗人IgG
HIV-1IgG抗体
Reverse T ran scrip tio n
In tegratio n
Fu sio n P en etratio n
T ran slatio n
T ran scrip tio n P rovirus
C ap sid Assem b ly
M aturatio n B u d d in g
HIV的主要结构基因和相应的抗原
0.24 30 7.21 416 1.52 31 23.48 132 0.00 0 0.00 1
合计 200 22.73 303 34.43 124 14.09 91 10.34 7 0.80 155 17.61 880
HIV检测方法的进展和应用
多种HIV检测方法
◆ 检测的目标: HIV抗体、HIV－1P24抗原,HIV RNA,HIV基因组
◆HIV变异的频率是真核细胞DNA基因组的100万倍。真核 细胞DNA多聚酶的错误率大约是10-10-10-9，而HIV-1逆转 录酶平均每一个位点的错误率是10-4-10-3
◆估计每一轮HIV-1的复制都会引入10个错误的碱基
HIV-1具有高度变异性
◆HIV的快速复制速率加上高突变率 ◆HIV从原发感染时的状态进化为一群遗传差异很大的病毒， 每一个成员都保存了生存所必需的基因，但是在不妨碍复制 的基因位点上有细小的差异 ◆高度分化的病毒群体。每一个复制周期都产生基因序列彼 此不同的HIV毒株的混合物，通常称为准种quasispecies）
HIV-1
Types
HIV-2
M N O Groups
ຫໍສະໝຸດ Baidu
A, B, C, D, E, F, G, H, I, J CRF01-16
Clades
ANT 70, MVP5180,
VAU
ROD
NIH2
Guidelines for Classification
Types: Subtypes/Groups: Clades:
第二代
重组抗原或 合成多肽 HIV-1/2
艾滋病检测技术与应用
北京出入境检验检疫局 艾滋病确认中心实验室
HIV检测的病毒学基础
人免疫缺陷病毒
Human Immunodeficiency Virus HIV
HIV感染的 细胞过程的
动画演示
T he R eplication of H IV
Ad so rb tio n to C D 4 and co-receptor
HIV-1 and HIV-2 50% homology
HIV-1 group M, N and O 60-70% homology
HIV-1 Clades A-J >70% homology
名称
参考毒株
重组的亚型
CRF01_AE CRF02_AG CRF03_AB CRF04_cpx CRF05_DF CRF06_cpx CRF07_BC CRF08_BC CRF09_cpx CRF10_CD CRF11_cpx CRF12_BF CRF13_cpx CRF14_BG CRF15_01B CRF16_A2D
CM240 IbNG Kall53 94CY032 VI1310 BFP90 CN54 GX-6F 96GH2911 TZBF061 GR17 ARMA159 96CM－1849 X397 99TH.MU2079 KISII5009
A、E A、G A、B A、G、H、K、U D、F A、G、J、K B'、C B'、C 尚未发表 C、D A、G、J、CRF01_AE B、F
估计HIV-1平均每一代的时间大约为2.5天。这意 味着病毒复制的速率是每年140代或更多，从 HIV感染到诊断AIDS，病毒已经更新了上千代。
HIV 毒粒 血浆 活跃感染的细胞 潜伏感染的T细胞 潜伏感染的巨噬细胞
T1/2(半衰期) 6 小时 1.1 天 8.5 天 14 天
HIV 的型和亚型
计
A
0 0.00 0 0.00
1 20.00 3 60.00 0 0.00 1 20.00 5
B
0 0.00 0 0.00
0
0.00 7 77.78 0 0.00 2 22.22 9
B'
192 62.54 1 0.33
0
0.00 23 7.49 3 0.98 88 28.66 307
C
2 20.00 0 0.00
0
0.00 4 40.00 1 10.00 3 30.00 10
CRF-BC 4 0.96 245 58.89 108 25.96 28 6.73 1
CRF01-
AE
2 1.52 57 43.18 15 11.36 25 18.94 2
CRF02-
AG
0 0.00 0 0.00
0
0.00 1 100.00 0
◆ 检测的标本:血清/血浆，唾液、尿液 ◆ 检测的模式：ELISA、WB、IFA、快速法、
核酸扩增等 ◆ 检测的用途：病原学诊断、监测病程和疗效、
监测病毒变异
检测HIV抗体
◆是常规使用的诊断方法 ◆方法学: ELISA试剂, 快速试剂(金标记, 锡
标记), 家庭用试剂. ◆检测的标本:血清和血浆, 唾液, 尿液
A, CRF01_AE, G, J, U B、G
CRF01_AE, B A2、D
循环重组毒株（Circulate Recombinant Forms, CRF）
全国第二次HIV分子流调不同传播途径HIV-1亚型的分布
采供血
吸毒
吸毒和性途径
性途径
母婴传播
不详
合
亚型 例数 % 例数 %
例数
% 例数 % 例数 % 例数 %
结构基因 包膜(env) 多聚酶(pol) 核心(gag)
HIV-1 (HIV-2)
Gp160/gp120,gp41 (gp140/gp105,gp36)
P66, p55 (P68,P56)
P24, p17 (P26,p16)
HIV-1具有高度变异性
◆逆转录酶的忠实性较差，缺乏3’—5’外切核酸的校读 功能，RNA转录为DNA时经常出现错误
检测HIV抗体(ELISA法)
◆原理:间接法 (第1代,第2代试剂), 双抗原 夹心法(第3代试剂).
◆判断结果有客观依据(临界值).可自动化操 作.
◆可检测多种标本(血清,血浆,唾液,尿液) ◆是使用最广泛的方法
HIV ELISA试剂的发展
固相
标记物
特异性检测
第一代 病毒裂解物
抗人IgG
HIV-1IgG抗体
Reverse T ran scrip tio n
In tegratio n
Fu sio n P en etratio n
T ran slatio n
T ran scrip tio n P rovirus
C ap sid Assem b ly
M aturatio n B u d d in g
HIV的主要结构基因和相应的抗原
0.24 30 7.21 416 1.52 31 23.48 132 0.00 0 0.00 1
合计 200 22.73 303 34.43 124 14.09 91 10.34 7 0.80 155 17.61 880
HIV检测方法的进展和应用
多种HIV检测方法
◆ 检测的目标: HIV抗体、HIV－1P24抗原,HIV RNA,HIV基因组
◆HIV变异的频率是真核细胞DNA基因组的100万倍。真核 细胞DNA多聚酶的错误率大约是10-10-10-9，而HIV-1逆转 录酶平均每一个位点的错误率是10-4-10-3
◆估计每一轮HIV-1的复制都会引入10个错误的碱基
HIV-1具有高度变异性
◆HIV的快速复制速率加上高突变率 ◆HIV从原发感染时的状态进化为一群遗传差异很大的病毒， 每一个成员都保存了生存所必需的基因，但是在不妨碍复制 的基因位点上有细小的差异 ◆高度分化的病毒群体。每一个复制周期都产生基因序列彼 此不同的HIV毒株的混合物，通常称为准种quasispecies）