基因治疗专题知识讲座培训课件
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
本章，我们讨论4个问题。 1.概述 2.基因治疗的原理 3.基因治疗中外源基因导入技术 4.基因治疗的应用研究
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
(原核或真核)
3. 靶 细 胞
原、真核
4. DNA体外重组
√
5. 重组DNA导入宿主细胞 √
6. 后处理
√
基因治疗 标志基因+治疗基因
(真核) 真核
√ √ √
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
第三节 基因转移技术
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
基因转移 间接体内疗法 直接体内疗法
转导细胞的筛 选与鉴定
利用标记基因和目的基因的表达产物 利用核酸分子杂交
回输体内
考核疗效和安全性
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
基因治疗与处，基请联因系工网站程或的本人比删除较。
基因工程
1. 目的基因
应用或研究基因
2. 载 体
象外科移植手术，切除病变部分，换上正 常健康基因，这在目前还难以做到
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
( 二 ) 基 因处，取请联代系网或站或基本人因删除干。预
基因置换 (gene replacement)
通过体内基因同源重组,原位替换病变细胞内的致病基因
基因增补 (gene augmentation)
外源基因→直接导入体内有关组织器官→进入 相应组织器官进行表达→从而达到基因治疗目的。
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
第二节
基因治疗的 基本原理
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
基因治疗的处基，请本联程系网序站(或基本人本删原除。理或基本步骤)：
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
对于内源基因突变: 至今未找到令人满意的治疗方法。 基因治疗仅仅处于初始阶段。 全世界接受基因治疗者106人，受试者600人
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
一、基因治处，疗请联的系网概站或念本人删除。
第一节 概 述
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
人类疾病的发生，往往涉及到内源基因的突变 （如遗传病）和外源基因的入侵（如感染性疾病）。 机体对外来侵袭抵御体现在以下4个层次：
1.整体水平，诸如动物的打斗撕咬； 2.细胞水平，如Mφ对“异已”吞噬作用； 3.分子水平，如抗原抗体反应，人可以产生 106抗体分子，对付外来侵袭； 4.基因水平，对付外源基因入侵，在原核生 物中有一种限制性核酸内切酶可将外源基因水解掉。
正常表达和持续时间。
⑦角化细胞(keratinoyte)
⑧多种肿瘤细胞
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
四、基因治疗的途径
1.间接体内疗法（ex vivo） 体外将治疗基因→靶细胞内,再将经基因修饰
靶细胞→病人,使这种外源基因(细胞)在体内表达， 从而达到基因治疗目的.(目前多采用这种疗法)。 2.体内法(in vivo)
治疗性基因的选择
基因载体的选择 病毒载体 非病毒载体
载体与治疗基因 将重组DNA导入靶细胞,检测目 重组及筛选鉴定 的基因和标记基因的表达产物
靶细胞的选择 体细胞 生殖细胞
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
基因治疗的处基，请本联程系网序站(或基本人本删原除。理或基本步骤)：
定义：
广义地说，基因治疗是应用基因或基因产物， 治疗疾病的一种方法。从狭义地说，基因治疗 是把外界的正常基因或治疗基因，通过载体转 移到人体的靶细胞，进行基因修饰和表达，改
善疾病的一种治疗手段。
基因治疗是治疗基因突变性疾病的一项根本 性措施，同时它为非基因突变性疾病提供了一 个新的治疗手段。
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
三、基因处治，请疗联中系网的站或靶本细人删胞除。
生殖细胞: 优点——治本 困难——①生殖(学)生物学问题，极其复杂且不清楚。 ②伦理学问题
名人精子库”，“美女卵子库”，总是别人的 “种”，不好办，即使这个问题解决，恐怕未必 然，爱因斯坦生了个弱智女，马克思后代在开出 租车（不是说开出租车不好，特此声明）
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
体细胞——目前常用体细胞有：
①淋巴细胞 ②骨髓细胞 ③内皮细胞 ④皮肤纤维细胞 ⑤肝细胞 ⑥肌细胞
附:选择靶细胞依据 ①疾病累及的主要部位。 ②靶细胞来源的难易程度。 ③体外培养的成活率和存活时间。 ④接受正常基因的能力。 ⑤新的正常基因能否在靶细胞能否
二、基因处，治请疗联系的网站策或本略人删除。
两个基本策略: 原位矫正病变基因 基因取代或基因干预
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
(一)原位处，矫请联正系病网站变或基本人因删除(。纠正异常碱基)
图11-1 镰形红细胞贫血病人的Hb为HbS(由β 珠蛋白基因点突变引起)
不除去异常基因，向靶细胞导入外源基因通过非定点 整合，使其表达产物，从而弥补缺陷基因的功能
基因干预 (gene interference)
在转录或翻译水平阻断某些基因的异常表达。包括反义 RNA、核酶、三链DNA及干扰RNA技术
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
转移基因方法
பைடு நூலகம்
生物学方法
非生物学方法
①逆转录病毒载体
①磷酸钙共沉淀法
②腺病毒载体
②质粒DNA/脂质体法
③腺相关病毒载体
③电击法
④单纯疱疹病毒载体
④受体介导转移法
⑤注射法
以逆转录病毒法最为常用，以磷酸钙法最为便宜（经济），以注射 法最为简捷，最值得研究和推广应用（笑话，也最危险。）
本章，我们讨论4个问题。 1.概述 2.基因治疗的原理 3.基因治疗中外源基因导入技术 4.基因治疗的应用研究
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
(原核或真核)
3. 靶 细 胞
原、真核
4. DNA体外重组
√
5. 重组DNA导入宿主细胞 √
6. 后处理
√
基因治疗 标志基因+治疗基因
(真核) 真核
√ √ √
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
第三节 基因转移技术
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
基因转移 间接体内疗法 直接体内疗法
转导细胞的筛 选与鉴定
利用标记基因和目的基因的表达产物 利用核酸分子杂交
回输体内
考核疗效和安全性
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
基因治疗与处，基请联因系工网站程或的本人比删除较。
基因工程
1. 目的基因
应用或研究基因
2. 载 体
象外科移植手术，切除病变部分，换上正 常健康基因，这在目前还难以做到
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
( 二 ) 基 因处，取请联代系网或站或基本人因删除干。预
基因置换 (gene replacement)
通过体内基因同源重组,原位替换病变细胞内的致病基因
基因增补 (gene augmentation)
外源基因→直接导入体内有关组织器官→进入 相应组织器官进行表达→从而达到基因治疗目的。
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
第二节
基因治疗的 基本原理
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
基因治疗的处基，请本联程系网序站(或基本人本删原除。理或基本步骤)：
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
对于内源基因突变: 至今未找到令人满意的治疗方法。 基因治疗仅仅处于初始阶段。 全世界接受基因治疗者106人，受试者600人
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
一、基因治处，疗请联的系网概站或念本人删除。
第一节 概 述
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
人类疾病的发生，往往涉及到内源基因的突变 （如遗传病）和外源基因的入侵（如感染性疾病）。 机体对外来侵袭抵御体现在以下4个层次：
1.整体水平，诸如动物的打斗撕咬； 2.细胞水平，如Mφ对“异已”吞噬作用； 3.分子水平，如抗原抗体反应，人可以产生 106抗体分子，对付外来侵袭； 4.基因水平，对付外源基因入侵，在原核生 物中有一种限制性核酸内切酶可将外源基因水解掉。
正常表达和持续时间。
⑦角化细胞(keratinoyte)
⑧多种肿瘤细胞
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
四、基因治疗的途径
1.间接体内疗法（ex vivo） 体外将治疗基因→靶细胞内,再将经基因修饰
靶细胞→病人,使这种外源基因(细胞)在体内表达， 从而达到基因治疗目的.(目前多采用这种疗法)。 2.体内法(in vivo)
治疗性基因的选择
基因载体的选择 病毒载体 非病毒载体
载体与治疗基因 将重组DNA导入靶细胞,检测目 重组及筛选鉴定 的基因和标记基因的表达产物
靶细胞的选择 体细胞 生殖细胞
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
基因治疗的处基，请本联程系网序站(或基本人本删原除。理或基本步骤)：
定义：
广义地说，基因治疗是应用基因或基因产物， 治疗疾病的一种方法。从狭义地说，基因治疗 是把外界的正常基因或治疗基因，通过载体转 移到人体的靶细胞，进行基因修饰和表达，改
善疾病的一种治疗手段。
基因治疗是治疗基因突变性疾病的一项根本 性措施，同时它为非基因突变性疾病提供了一 个新的治疗手段。
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
三、基因处治，请疗联中系网的站或靶本细人删胞除。
生殖细胞: 优点——治本 困难——①生殖(学)生物学问题，极其复杂且不清楚。 ②伦理学问题
名人精子库”，“美女卵子库”，总是别人的 “种”，不好办，即使这个问题解决，恐怕未必 然，爱因斯坦生了个弱智女，马克思后代在开出 租车（不是说开出租车不好，特此声明）
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
体细胞——目前常用体细胞有：
①淋巴细胞 ②骨髓细胞 ③内皮细胞 ④皮肤纤维细胞 ⑤肝细胞 ⑥肌细胞
附:选择靶细胞依据 ①疾病累及的主要部位。 ②靶细胞来源的难易程度。 ③体外培养的成活率和存活时间。 ④接受正常基因的能力。 ⑤新的正常基因能否在靶细胞能否
二、基因处，治请疗联系的网站策或本略人删除。
两个基本策略: 原位矫正病变基因 基因取代或基因干预
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
(一)原位处，矫请联正系病网站变或基本人因删除(。纠正异常碱基)
图11-1 镰形红细胞贫血病人的Hb为HbS(由β 珠蛋白基因点突变引起)
不除去异常基因，向靶细胞导入外源基因通过非定点 整合，使其表达产物，从而弥补缺陷基因的功能
基因干预 (gene interference)
在转录或翻译水平阻断某些基因的异常表达。包括反义 RNA、核酶、三链DNA及干扰RNA技术
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
转移基因方法
பைடு நூலகம்
生物学方法
非生物学方法
①逆转录病毒载体
①磷酸钙共沉淀法
②腺病毒载体
②质粒DNA/脂质体法
③腺相关病毒载体
③电击法
④单纯疱疹病毒载体
④受体介导转移法
⑤注射法
以逆转录病毒法最为常用，以磷酸钙法最为便宜（经济），以注射 法最为简捷，最值得研究和推广应用（笑话，也最危险。）