动物生物安全实验室

（一）实验动物设施的一般生物安全管理要求：
防护设施（secondary
barrier,二级屏障）：
实验室的设施结构和通风设计构成二级物理 防护。二级防护的能力取决于实验室分区和 室内气压，要根据实验室的安全要求进行设 计。一般把实验室分为洁净、半污染和污染 三个区。实验室的墙壁保持密闭，空调通风 的气流方向永远保持：外界－HEPA－洁净 区－半污染区－污染区－HEPA－外界。

三、动物生物安全实验室设施与防护要求：

生物安全动物实验室的设计原则就是要做到三保护：保 护人、保护环境和保护实验动物。 保护人员免受相关危害。如感染、过敏、中毒或被动物 抓挠撕咬等； 保护动物即保证实验动物质量和保证人道主义使用实验 动物； 保护环境即保证室内空气、污水及废弃物（垫料、粪便、 动物组织、动物尸体）等不污染室外环境。 为达到三保护的原则，生物安全动物实验室主要通过设 施（Facilities）、设备（Equipment）、 人员及素质 （Practices）的有效结合加以实现。
（7）器具、饮水瓶、垫料等须经高压灭菌后方可 使用。动物饮用、屏障系统内使用灭菌水。 （8）每周更换笼具、饮用水两次。用过的器具及 时清洗并高压消毒。实验结束后及时清洗并消毒。 （9）按操作规程抓持、固定动物，实验操作。 （10）设置安全出口、出口指示、灭火器械。配置 应急洗眼器。 （11）废弃物由污物走廊传出。专门放在指定位置 统一处理
动物级别 环境级别（洁净度，落下菌）
普通动物
SPF动物 无菌动物或悉生动物
开放系统（－，30个/皿）
屏障系统（万级，3个/皿） 隔离系统（百级，0个/皿）
（二）实验动物级别
一级动物（普通动物）不携带主要人畜共患病和动 物烈性传染病的病原。 二级动物（清洁动物，国际上无此等级）除不能携 带主要人畜共患病和动物烈性传染病的病原外，不 能携带对动物危害大和对科研干扰大的病原。 三级动物（SPF级，无特定病原体动物）除一、二 级动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条 件致病和对科研干扰大的病原。 四级动物（无菌动物）不携带可检出的一切病原体。 悉生动物则是在无菌动物物体内移入一种或几种已 知微生物后的动物。
第二、实验动物，特别是实验用动物(Experjmental animals)本身可能患有能感染人的人畜共患病 （zoonotic Disease）。病例如下：
动物实验室出现的这两大危害有力说明：动物实验 室无论在操作技术规范的制订，个人安全防护设备 的设置，以及实验室设施的设计和建设上，都有很 大的特点和特殊的要求。 第一种危害要用实验室设施（二级隔离）来防范，通 过静态隔离（负压梯度）动态隔离和排风处理 （HEPA过滤）等措施，把产生的动物性气溶胶牢 牢地控制在污染区内，确保不向外环境扩散。 第二种危害，则要用安全防护设备（一级隔离）和其 他个人防护设备（personnel protective Equipment PPES）来防止病原微生物对实验人员的感染。
实验动物设施是进行实验动物饲养、保
种维持、生产、实验研究、实验等设施 的总称。

医疗卫生机构的实验动物设施一般包括更衣室、淋 浴室、洗涤消毒室、监控室、洁净区外库房、样品 室、样品配置、手术室、行为实验室、动物尸体及 废物存放室、洁净区内库房、动物检疫室、大、小 鼠饲养室、家兔饲养室、豚鼠饲养室等等。
动物生物安全实验室 及其实验活动的 技术原理、设置要求和安全管理
一、实验动物及实验动物设施的简介 二、动物实验室产生生物危害的来源 三、动物生物安全实验室设施与防护要求
（一）实验动物设施的一般生物安全管理要 求 （二）动物实验过程（活动）的行为规范 四、各级动物生物安全防护实验室技术原 理、 设置要求和安全管理 五、无脊椎动物使用安全原则 六、相关的法律、法规和部门规范

二、动物实验室产生生物危害的来源：


动物生物安全实验室是一种特殊的通过人工或自 然感染进行动物感染实验的实验室。 第一、动物性气溶胶（Animal Aerosol）的产生： 感染动物在观察饲养期间，它们在呼吸、排泄、 抓咬、挣扎、逃逸、跳跃时，在更换垫料、饲料， 进行感染接种（特别是鼻腔内接种）时，在尸体 剖检、病理组织、排泄物的处理等过程中会大量 产生传播危害性极大的动物性气溶胶。因此对气 溶胶的生物安全防护，应当是动物实验室建设中 的核心。

（4）实验动物发生烈性传染病流行时，应立
即上报实验动物检定机构，同时采取严格的 隔离消毒措施，以免传染病的蔓延。 （5）尸体处理：尸体处理一般要求焚烧，深 埋，大型动物可消毒加工后利用。
3、实验动物房的消毒措施
SPF级动物实验室的一般日常清洁消毒制度
防护设备（primary
barrier,一级屏障 ）：包 括各级生物安全柜和个人防护器材。 人员及素质:良好的专业训练和技术能力对保 证实验室生物安全具有重要的作用 。
动物房和生物安全实验室一样，主要根据所研究病 源微生物的危害评估结果和危害程度分类划分为一 级、二级、三级和四级动物安全水平。 在生物因子方面，包括常规传播途径、所用的体积 和浓度、接种途径和是否能以何种方式排毒及生物 因子的总体危险程度。 在动物方面，包括动物的性质，比如它们的侵犯性 和咬、抓倾向，它们天然的体外寄生虫，易感的动 物病及可能释放的过敏原和动物接种病原微生物后 可能产生的结果等等。
表2 动物实验设施（设备3）环境指标（静态）
项目
小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠 普通环境 温度，℃ 19～26 屏障环境 20～25 隔离环境 普通环境 16～26
指标
犬、猴、猫、小型猪 屏障环境 18～22 隔离环境 鸡 屏障环境 16～26
日温差，℃
≤
4
3

4
3
3
相对湿度，% 换气次数，次/h 气流速度，m/s 压强梯度，Pa 空气洁净度，级 落下菌数，个/皿 氨浓度，mg/m3≤ 噪声，dB ≤ 工作照度 动物照度 昼夜明暗交替时间，h 15～20 ≤ 30 20～502 10000 3 100～150 100 无检出 8～10 10～201 20～502
表1
项目
实验动物繁育、生产设施环境指标（静态）
指标
小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠 普通环境 屏障环境 20～26 4 隔离环境 普通环境 16～28 40～70 8～10 10～201 20～502 8～10 0.1～0.2 ≤ 30 20～502 10000 3 100～150 100 无检出 30 14 60 150～300 15～20 12/12或10/14 100～200 5～10 20～502 10000 3 100～150 100 无检出 20～502 10000 3 10～201 20～502 10～202 犬、猴、猫、小型猪 屏障环境 20～26 4 隔离环境 鸡 屏障环境 16～28 4
1、保障实验动物房生物安全的基本措施
(1) 实验动物设施为单独区域，与办公和其他实验 场所分开。 (2)工作人员应经过适当培训。 （3）具有一定规模的实验动物室建筑，周围至少 应有20m卫生间隔区。不同种属、不同品系、不同 来源的动物必须分室饲养，不同对象、不同内容的 实验分室进行。各室之间定向气流不能交叉循环。 （4）定期检测，更换高、中、低效滤膜，保持系 统处于良好状态。
温度，℃ 日温差，℃ ≤
18～29 -
相对湿度，% 换气次数，次/h 气流速度，m/s 压强梯度，Pa 空气洁净度，级 落下菌数，个/皿 氨浓度，mg/m3≤ 噪声，dB ≤ 工作照度 动物照度 昼夜明暗交替时间，h
注：表中氨浓度指标为动态指标。 1.一般采用全新风，保证动物室有足够的新鲜空气。如果先期去除了粉尘颗粒物和有毒有害气体，不排除使用循环空气的可能，但再循环空气仅限 于同一单元，新鲜空气不得少于50%。并保证供风的温、湿度参数。 2.单走廊设施必须保证饲育室、实验室压强最高。
2、实验动物设施分类
实验动物设施根据对饲养动物的空气净化程度 分为三类。 开放系统（open system）； 屏障系统（barrier system）； 隔离系统（isolation system）。
不同的实验动物设施环境级别对应于不同的动物级别， 二者的对应关系见下表 动物级别和洁净度的对应关系

由于实验动物常采取群体 饲养，极易造成动物疾病 的暴发和流行。造成动物 包括： 传染病流行的病原多种多 1、保障实验动物房生 样，有的病原宿主广泛， 物安全的基本措施 属人畜共患病，可同时引 2、实验动物的检疫和 疾病的控制及处理 起人和动物的疾病，就更 具危险性。严格实验动物 3、实验动物房的消毒 房的管理制度，预防在先， 措施 是杜绝人和动物间疾病传 播的根本保证。

（5）选用具备有效动物繁育合格证书的动物， （6）动物、工作人员、物品分别进入屏障及隔离 系统，并只能由洁净度高的区域向洁净度低的区域 定向移动。房间随时关门。

工作人员更换工作服，戴帽、手套、口罩、鞋套，风淋后方 可进入。 动物由动物传递窗，外包装经紫外线照射或喷洒消毒液后传 入，入室后检疫3-7天。 所有样品、饲料（r辐射灭菌）由物品传递窗经紫外线照射 或喷洒消毒液后传入。 非实验用品（如食物、饮水、香烟等）一律不得带入动物实 验室。
40～70 8～10 0.1～0.2 30 14 60 150～300 100～200 12/12或10/14 5～10 20～502 10000 3 100～150 100 无检出 100～1502 100 无检出 10～201 20～502 10～202
注：表中氨浓度指标为动态指标。 1.一般采用全新风，保证动物房有足够的新鲜空气。如果先期去除了粉尘颗粒物和有毒有害气体，不排除使用循环空气的可能，但再循环空气应取自于 无污染区域或同一单元，新鲜空气不得少于50%。并保证供风的温、湿度参数。 2.单走廊设施必须保证饲育室、实验室压强最高。 3.此处动物实验设备系指动物饲养和实验时，保障动物所处的局部环境应达到本环境指标的设备。