烟草黑胫病菌致病力的影响因子及其互作效应
烟草黑胫病发病机理及防治方法研究进展
烟草黑胫病发病机理及防治方法研究进展1. 引言1.1 烟草黑胫病概述烟草黑胫病是一种常见的烟草病害，主要由真菌感染引起，对烟草种植造成严重的危害。
烟草黑胫病的发病特点是在烟草叶片上形成黑色斑点，逐渐蔓延并导致叶片坏死。
这不仅影响了烟草的品质和产量，还给农民带来了经济损失。
烟草黑胫病的传播途径主要有空气传播和土传两种方式。
在潮湿的环境下，真菌会迅速繁殖并侵染烟草植株，加剧病害的发展。
病原真菌还会在烟草植株残体和种子上长时间存活，为病害的再次发作提供了条件。
为了有效防治烟草黑胫病，农民需要加强田间管理，保持烟田通风和排水良好，及时清除病变叶片和烟草残体，避免病原真菌的传播。
选择抗病品种、合理施肥、科学使用化学农药也是防治烟草黑胫病的重要措施。
通过对烟草黑胫病的认识和防治方法的研究，可以有效减少病害的发生，保障烟草产量和质量，为农民增加收益提供技术支持。
2. 正文2.1 烟草黑胫病的发病机理烟草黑胫病是由真菌类病原体引起的一种重要病害，主要发生在烟草的根部和地下茎部。
发病机理主要包括以下几个方面：1. 病原侵入：烟草黑胫病的发病过程首先是病原菌通过伤口或根部吸收器官侵入植株，损害其正常功能。
病原菌在植株内部迅速繁殖，导致病变的扩散和加重。
2. 植物抗性：烟草黑胫病的发病机理还与植物本身的抗病性相关。
一些研究表明，植株的遗传背景和生长环境都会影响其对病原菌的抵抗能力，进而影响疾病的发生和发展。
3. 气候环境：烟草黑胫病的发病还受气候环境的影响。
高温多湿的气候条件有利于病原菌的生长和繁殖，从而增加疾病的发生风险。
烟草黑胫病的发病机理是一个复杂的过程，受到多种因素的影响。
深入研究这些因素之间的相互作用，可以帮助我们更好地理解烟草黑胫病的发生规律，找到有效的防治方法。
2.2 烟草黑胫病的防治方法烟草黑胫病的防治方法可以采取多种措施，包括遗传改良、农艺管理、化学防治和生物防治等方面。
在遗传改良方面，选育抗病品种是预防烟草黑胫病的首要措施。
烟草内生细菌防治烟草黑胫病及促生作用研究
植物学通报 2005, 22 (4): 426￣431Chinese Bulletin of Botany①重庆市教委科学技术研究项目（１１８０７）资助。
②通讯作者。
Ａｕｔｈｏｒ ｆｏｒ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ． Ｅ－ｍａｉｌ： ｗａｎｎｅｎｇｗ＠ｃｑｉｔ．ｅｄｕ．ｃｎ收稿日期： ２００４－０７－２９ 接受日期： ２００４－０９－２３ 责任编辑： 崔郁英， 于昕实验简报烟草内生细菌防治烟草黑胫病及促生作用研究①１王万能② １全学军 ２肖崇刚１ （重庆工学院生物工程学院 重庆 ４０００５０） ２（西南农业大学植保学院 重庆 ４００７１６）摘要 筛选烟草内生细菌防治烟草黑胫病， 获得了对烟草黑胫病有很好防效的内生细菌１１８、５７和９３等菌株。
在温室控病实验中它们的防效分别可达６９．２３％、６１．５３％和６５．３８％。
１１８菌株对烟草疫霉（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｐａｒａｓｉｔｉｃａ ｖａｒ． ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ）菌丝生长有明显的拮抗作用。
１１８菌株具有较广的抗菌谱， 且对烟草有促生效果， 烟草的鲜重增产率为１３．１０％。
关键词 烟草黑胫病， 内生细菌， 生物防治The Disease-controlling and Growth-promoting Effects ofEndophytic Bacteria in Tobacco１ＷＡＮＧ Ｗａｎ－Ｎｅｎｇ② １ＱＵＡＮ Ｘｕｅ－Ｊｕｎ ２ＸＩＡＯ Ｃｈｏｎｇ－Ｇａｎｇ１ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ ４０００５０） ２（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ， Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ ４００７１６ ）Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａ ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ｉｎ ｐｌａｎｔｓ ｃａｎ ｓｔａｂｌｙ ｄｅｖｅｌｏｐ ａｎｄ ｐｒｏｐａｇａｔｅ． Ｔｏｂａｃｃｏｂｌａｃｋ ｓｈａｎｋ （Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｐａｒａｓｉｔｉｃａ ｖａｒ． ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ） ｉｓ ａ ｓｅｖｅｒｅ ｄｉｓｅａｓｅ ｏｆ ｔｏｂａｃｃｏ． Ｗｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａ ｔｏ ｃｏｎｔｒｏｌ ｔｏｂａｃｃｏ ｂｌａｃｋ ｓｈａｎｋ ａｎｄ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｓｔｒａｉｎｓ １１８， ５７ ａｎｄ ９３． Ｔｈｅｉｒ ｃｏｎｔｒｏｌｅｆｆｅｃｔｓ ｗｅｒｅ ６９．２３％， ６１．５３％ ａｎｄ ６５．３８％ ｉｎ ｔｈｅ ｇｒｅｅｎｈｏｕｓｅ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｓｔｒａｉｎ １１８ ｃａｎ ｒｅｓｔｒｉｃｔ ｔｈｅｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｈｙｐｈａ ｏｆ Ｐ． ｐａｒａｓｉｔｉｃａ ｖａｒ． ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ ． Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ， ｓｔｒａｉｎ １１８ ｃａｎ ｒｅｓｔｒａｉｎ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆｓｅｖｅｒａｌ ｍａｉｎ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｏｆ ｔｏｂａｃｃｏ ｏｎ ｐｌａｔｅｓ ａｎｄ ｃａｎ ｐｒｏｍｏｔｅ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｔｏｂａｃｃｏ．Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ Ｔｏｂａｃｃｏ ｂｌａｃｋ ｓｈａｎｋ， Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａ， Ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ烟草黑胫病（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｐａｒａｓｉｔｉｃａｖａｒ． ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ）是烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ）上主要的毁灭性病害， 从苗期到成株期都可发生。
不同药剂对烟草黑胫病的防治效果对比分析
不同药剂对烟草黑胫病的防治效果对比分析烟草黑胫病是由黑胫菌（Pythium aphanidermatum）引起的一种烟草病害，主要通过土壤传播。
该病害会导致烟草的根系受到破坏，根部出现黑色腐烂的症状，严重影响烟草的生长和产量。
对于烟草黑胫病的防治非常重要。
在防治烟草黑胫病的过程中，常使用的药剂有有机磷类、多菌灵、菌酯类及拮抗菌等。
本文将对这几种药剂在烟草黑胫病防治中的效果进行比较分析。
有机磷农药是一种常用的防治烟草黑胫病的药剂。
有机磷农药具有较好的土壤活性，能迅速吸附于土壤颗粒上，起到较好的控制作用。
研究表明，有机磷农药对于烟草黑胫病的控制效果较好，可以显著减轻病害的发生和发展。
多菌灵是一种广谱杀菌剂，也是一种常用的防治烟草黑胫病的药剂。
多菌灵对烟草黑胫病有较好的防治效果，能够抑制病害的发生和发展。
研究表明，多菌灵可以通过调节烟草的免疫系统，增强烟草的抗病能力，提高烟草对黑胫菌的抵抗力，从而减轻病害的发生。
菌酯类是一类新型杀菌药剂，对于烟草黑胫病也有一定的防治效果。
菌酯类药剂可以通过破坏病原菌的细胞膜结构和功能，抑制病原菌的生长和繁殖。
研究表明，在合理使用菌酯类药剂的情况下，可以有效控制烟草黑胫病的发生。
利用拮抗菌防治烟草黑胫病也是一种常见的方法。
拮抗菌可以与黑胫菌竞争营养物质和空间，抑制其生长和繁殖，从而起到防治病害的作用。
研究表明，拮抗菌在防治烟草黑胫病方面具有一定的潜力，可以在一定程度上减轻病害的发生和发展。
不同药剂对烟草黑胫病的防治效果有差异。
有机磷农药、多菌灵、菌酯类药剂以及拮抗菌在防治烟草黑胫病方面都具有一定的效果，但具体应用时需要根据病情、气候条件和土壤类型等综合因素来选择合适的药剂。
在使用药剂的还应注意合理的用量和使用方法，以充分发挥药剂的防治效果。
烟草“两黑病”的防治措施
zhi w u bao hu11烟草“两黑病”的防治措施张顺(普洱市职业教育中心，云南普洱665000)摘要:烟草“两黑病”指的是烟草黑胫病和烟草根黑腐病。
烤烟产业是普洱市的重要支柱产业，而烟草病虫害又是制约普洱烟草产业发展的重要因素之一，其中的烟草黑胫病和烟草推■黑腐病是两种重要的病害,且在普洱烟区烟草黑胫病和烟草推■黑腐病经常混合发生。
本文从烟草黑胫病和烟草根黑腐病的症状特征、发病规律以及烟草黑胫病和烟草根黑腐病的防治方法几个方面进行了阐述。
关键词:普洱市;烟草两黑病；防治方法中图分类号：S435.72 文献标识码：A DOI编号：10.14025/ki.j lny.2017.04.025烟草“两黑病”指的是烟草黑胫病和烟草根黑腐病。
普再市位于云南省西南部，幅员面积45385平方公里，总人口259万。
烤烟产业是普'再市的重要支柱产业，近年来全市的烤烟产量已 经突破了 100万担，烤烟产业成为了农民脱贫致富，政府增加 税收的重要产业。
普洱市处于热带、亚热带地区，年均温度 15.3尤~ 20.2'C,年降水量1102.8~ 2779.0毫米,在烤烟生长的 季节温度较高，湿度较大，因此病虫害发生较多。
烟草病虫害是制约普再烟草产业发展的重要因素之一，而其中的烟草黑E病和烟草根黑腐病又是其中重要的两种病害，且在普再烟区烟草 黑腔病和烟草根黑腐病经常混合发生。
本文就烟草黑腔病和烟草根黑腐病在普洱的发生规律和防治方法进行阐述。
1烟草黑胫病的症状特征及发病规律1.1烟草黑胫病症状特征烟草黑胫病在普洱烟区主要在大田期发病，先从茎基部发 病，再向上发展，然后在烟株的茎干上形成一条黑色的长形条斑,最后坏死的条斑横向发展，导致茎基部变黑干枯。
由于病原菌破坏了烟株的输导组织,影响了水分的运输会导致烟株的叶片白天向下萎垂,晚上恢复正常的现象，俗称“穿大褂”。
如果把发病的茎干拿来肖岍，则可看见发病部位的髓部呈现碟片状。
烟草黑胫病发生因素及综合防治研究进展
湖南农业科学（HUNAN AGRICULTURAL SCIENCES )2020 ( 11 )：99-103引用格式：赵辉，王喜英，刘国权，等.烟草黑胫病发生因素及综合防治研究进展[J].湖南农业科学，2020(11): 99-103.D O I：10.16498/j.c n k i.h n n y k x.2020.011.026烟草黑胫病发生因素及综合防治研究进展(1.铜仁学院，赵辉\王喜英\刘国权2,谭智勇1贵州铜仁564300; 2.贵州省烟草公司思南县分公司，贵州铜仁565100)摘要：烟草黑胫病由烟草疫霉菌引起的土传性病害。
目前，烟草黑胫病已在我国广大烟区普遍蔓延，给烟农造成了重大损失，严重制约着烤烟产业的持续健康发展。
从黑胫病发生的机理、症状、发病因素和防治方法进行了分析，重点对化学防治和生物防治进行了论述，提出生物防治（包括植物源杀菌剂和诱导防治）是未来黑胫病防治的重要措施之一。
针对烟草黑胫病的综合性防治，可通过选择适合的抗病品种、建立烤烟轮作或间作制度、建立科学合理的施肥和田间管理措施以及开展化学药剂混合防治，实现烟叶生产的可持续发展。
关键词：烟草；黑胫病；发生规律；综合防治；综述中图分类号：S572 文献标识码： A 文章编号：1006-060X (2020 ) 11-0099-05 Research Progress on Occurrence of Tobacco Black Shank(Ph^^'toph'tkara parasi^tica var.nicotianae)and Its Integrated ControlZHAO Hui1，WANG Xi-ying1，LIU Guo-quan2，TAN Zhi-yong1(1. Tongren College, Tongren 564300, PRC; 2. Sinan County Tobacco Branch Company, Guizhou Provincial Tobacco Company,Sinan 565100, PRC )A bstract：Tobacco black shank is a soil-borne disease caused by Phytophthora parasitica var. nicotianae.Tobacco black shank has been widespread in many tobacco areas in our country, bringing serious loss to farmers, and restricting the sustainable and healthy development of the flue-cured tobacco industry. This article analyzes the mechanism, symptoms, pathogenic factors and prevention methods of tobacco black shank, focusing on chemical control and biological control, and proposes that biological control (botanical fungicides, induced resistance) is one of the important measures for the future prevention of black shank disease. The sustainable development of tobacco production will be ultimately achieved by selecting suitable disease-resistant varieties, establishing a flue-cured tobacco rotation or intercropping system, establishing scientific and reasonable fertilization and field management measures, and carrying out comprehensive chemical control.Key w ords：tobacco; black shank (Phytophthoraparasitica var. nicotianae); occurrence; integrated control; review烟草黑胫病（tobacco black shank)又称为烟草疫病、黑秆疯、黑根和乌头病，于1896年在印度尼西亚 爪哇被发现并命名，随后在全世界范围内迅速蔓延[1]。
4种生防菌对烟草黑胫病的防治作用
【科普惠农植物保护与栽培ZHI WU BAO HU YU ZAI PEI烟草黑胫病是一种由烟草疫霉菌（Phytophthora parasitica var.Nicotianae）[1]引起的典型高温高湿土传性病害，在全国地区一般与烟草青枯病混合发生，常给烟草种植业带来重大经济损失[2]。
目前对烟草黑胫病的防治主要是以化学防治为主，由于长期大量使用化学农药，使病原菌产生抗药性，导致防治效果差和农药残留等问题。
采用以生防菌为基础的生物防治技术可以避免这些弊端，并且具有防效快、无毒害、无残留、对环境友好等特点，符合绿色生态防控、绿色优质烟叶生产的要求。
据报道，迄今为止用于烟草黑胫病的生物防治菌主要有假单胞杆菌（Pseudomonas spp.）、芽孢杆菌（Bacillus spp.）、木霉菌（Trichoderma spp.）、放线菌（actinomyces spp.）等[3-4]。
笔者综述这4种微生物菌对烟草黑胫病防治的研究进展，为防治该病害提供参考依据。
1假单胞杆菌非致病性假单胞杆菌（Pseudomonas spp.）广泛活跃于烟草根际，主要通过嗜铁素对铁的营养竞争、抗生作用、次生代谢产物[5-8]等方式对病原菌起着生防效应，蒋海霞[9]对铜绿假单胞菌（Pseudomo ns aeruginosa）生防菌株抑菌代谢产物的研究中认为，铜绿假单胞菌分泌嗜铁素、吩嗪类等多种代谢产物对疫霉菌等具有良好的拮抗作用。
据报道，荧光假单胞杆菌（Pseudomonasfluorescens）、绿针假单胞菌（Pseudomonaschlororaphis）、铜绿假单胞菌（Pseudomo nsaeruginosa）、恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）[10]等在生物防治方面发挥着重要作用。
荧光假单胞杆菌（Pseudomonas fluorescens）能产生抗生素物质，抑制烟草黑胫病菌孢子的萌发与生长，进而达到控制烟草黑胫病的目的[11]。
烤烟不同间作对烟草黑胫病防控效果的影响
（ １ ． Ｚ ｈ ｅ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｔ ｏ ｂ ａ ｃ ｃ ｏＲ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈＩ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｏ ｆ Ｃ ＮＴ Ｃ ， Ｚ ｈ ｅ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ４ ５ ０ ０ ０ １ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ； ２ ． Ｚ ｈ ｕ ｍａ ｄ ｉ ａ ｎＴ ｏ ｂ ａ ｃ ｃ ｏ Ｃ ｏ ｍｐ ａ ｎ ｙ ｏ ｆ Ｈｅ ｎ ａ ｎ
摘 要：为选 择适 宜的烤烟 间作 防控烟草黑胫病 ，通过 田间试 验研 究 了烤烟 间作花 生、黑麦草 、大蒜对土壤烟草 黑胫病菌数
量、 病情指数和防治效果 的影响。结果表 明， 烤烟不 同间作的土壤 烟草黑胫 病菌数量和病 情指数趋势相 同， 均表现为烤烟 间
作大蒜＜ 烤烟间作黑麦草＜ 烤烟 间作花 生＜ 烤烟单作 ， 对烟草黑胫 病的防控 效果表现 为烤 烟间作 大蒜＞ 烤烟 问作 黑麦草＞ 烤烟 间
Ｅ ｆｅ ｃ ｔ ｏ ｆ Ｄｉ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ Ｃｒ ｏ ｐ ｓ Ｉ ｎ ｔ ｅ ｒ ｃ ｒ ｏ ｐ ｐ ｉ ｎ ｇ ｗｉ ｔ ｈ Ｆ ｌ ｕ ｅ － ｃ ｕ ｒ ｅ ｄ Ｔ ｏ ｂ ａ ｃ ｃ ｏ ｏ ｎ Ｔｏ ｂ ａ ｃ ｃ ｏ
Ｂｌ ａ ｃ ｋ Ｓ ｅ ｒ ｉ ｍｅ ｎ ｔ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｃ ａ ｒ ｒ ｉ ｅ ｄ ｏ ｕ ｔ ｔ ｏ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｔ ｈ ｅ ｅ ｉｅ ｒ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ ｄ ｉ ｆｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｉ ｎ ｔ ｅ ｒ ｃ ｒ ｏ ｐ ｐ ｉ ｎ ｇ ｃ ｒ ｏ ｐ ｓ ｏ ｎ ｔ ｏ ｂ ａ ｃ ｃ ｏ ｂ ｌ ａ ｃ ｋ ｓ ｈ ａ ｎ ｋ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ． Ｒｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ｓ ｈ ｏ ｗｅ ｄ ｔ ｈ ａ ｔ ｔ ｈ ｅ￣ｅ ｎ ｄ ｓ ｏ ｆ ｓ ｏ ｉ ｌ Ｐ ｈ ｙ ｔ ｏ ｐ ｈ ｔ ｈ ｏ ｒ ａ ｐ ａ ｒ ａ ｓ ｉ ｔ ｉ ｃ ａ ｖ ａ ｒ ． ｎ ｉ ｃ ｏ ｔ ｉ ａ ｎ ａ ｅ ｎ ｕ ｍｂ ｅ ｒ ａ ｎ ｄ ｔ ｏ ｂ ａ ｃ ｃ ｏ ｂ ｌ ａ ｃ ｋ ｓ ｈ ａ ｎ ｋ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｉ ｎ ｄ ｅ ｘ ｗｅ ｒ ｅ ｔ ｈ ｅ ｓ ａ ｍｅ ． ｗｉ ｔ ｈ ｔ Ｉ １ ｅ ｏ ｒ ｄ ｅ ｒ
烟草黑胫病发病机理及防治方法研究进展
烟草黑胫病发病机理及防治方法研究进展烟草黑胫病是一种常见的烟草病害，其主要症状为烟草植株的根部和茎部产生黑色坏疽病斑，导致植株生长受阻甚至死亡。
其发病机理主要与土壤中的病原菌侵染和植株抗性有关。
烟草黑胫病的病原菌主要有烟草黑胫镰刀菌（Rhizoctonia solani）、烟草白胫菌（Fusarium spp.）和烟草红胫菌（Thielaviopsis basicola）等。
这些病原菌通过土壤侵染方式进入植株根部和茎部，利用其产生的各种外生酶降解植株细胞壁，破坏植株的组织结构，导致坏疽病斑的形成。
一些病原菌还可以产生毒素，对植株造成进一步伤害。
植株抗性是影响烟草黑胫病病害发生的重要因素。
不同品种的烟草对黑胫病的抗性不同，抗病品种对病原菌的侵染和毒素的产生具有一定的抵抗能力。
研究表明，抗病品种的抗病性主要通过根系特化和激活抗病基因来实现。
目前，对烟草黑胫病的防治方法主要包括生物防治、化学防治和物理防治等。
生物防治是一种环境友好且可持续的防治方法。
研究表明，一些拮抗细菌和真菌具有对烟草黑胫病的防治效果。
一种名为Pseudomonas sp. WR-1的拮抗细菌能够产生一种具有抑制黑胫菌生长和破坏根尖的菌落形成物质，可有效减轻黑胫病的发生。
一些拮抗真菌如Trichoderma spp.和Gliocladium spp.也具有一定的防治效果。
这些生物防治方法可以通过种植抗黑胫病品种或施用拮抗菌剂等方式来实施。
化学防治是目前烟草黑胫病防治的常用方法。
常用的化学药剂包括多菌灵、咪鲜胺等。
这些药剂可以通过土壤处理、种子浸种和茎匀施用等方式来防治黑胫病，有效降低病害发生。
物理防治主要是通过改善土壤环境和种植措施来减轻烟草黑胫病的发生。
加入有机肥料和有机质可以改善土壤结构，促进根系生长，提高植株的抗病能力。
合理的轮作制度和间作种植也可以减少病害的发生。
烟草黑胫病的发病机理主要与病原菌的侵染和植株抗性有关。
目前，生物防治、化学防治和物理防治是主要的防治方法。
微生物菌剂对惠水烤烟黑胫病的防治效果及产量的影响
微生物菌剂对惠水烤烟黑胫病的防治效果及产量的影响摘要：贵州惠水处于亚热带季风气候，整体地势为北高南低，平均海拔为1100m左右。
惠水于1949年便开始种植烤烟，迄今已有71的历史。
如今惠水在烤烟生产规模方面进一步拓展，烤烟生产行业也开始走向可持续发展的方向，但在烤烟种植过程中，黑胫病的多发成为了影响当地烤烟生产也发展的一大因素，对此本文便围绕惠水地区烤烟黑胫病展开研究，探讨微生物菌剂这一新型方法的防治效果以及对烤烟产量带来的影响。
关键词：微生物菌剂；烤烟生产；黑胫病防治引言：惠水县烤烟种植有着多年的历史，所以重茬问题较为明显，烟草镰刀菌根腐病与和精病等病害时有发生，这也是近些年影响惠水县烤烟种植的主要问题。
黑胫病属于根茎类病害，通常由青枯劳尔氏菌引起的土传真菌病害，针对这一病害，传统的防治手段大多利用霜霉威、甲霜灵等化学农药，但化学农药的滥用不但会造成严重的环境污染问题，而且病原菌的耐药性也会不断提高。
因此在可持续发展的战略理念下，微生物菌剂这一生物防治手段成为了备受关注的话题，微生物菌剂具有绿色安全无污染的优势，在重茬作物微生物病害防治方面可以起到显著作用。
1 材料与方法1.1 试验地点选择实验地点选择惠水县某烤烟种植区，该地地势较为平坦且图纸诉讼，质地为黄棕壤。
1.2 试验材料试验选择的烤烟品种为惠水K326，微生物试剂选择三炬微生物菌剂与三炬灌金液。
其中三炬军妓将有机质作为媒介，功能菌为胶冻样芽孢杆菌与烟草节秆菌等，三炬灌金液为胶冻样芽孢杆菌发酵液[1]。
1.3 试验设计所选试验地段的田间发病多为黑胫病，其他病害为青枯病与病毒病等，但黑胫病占比较大。
根据完全随机原则设计3个处理：T1为三炬微生物菌剂750kg/hm2和灌金液750mL/hm2；T2只有三炬微生物菌剂750kg/hm2；CK为对照组，不添加任何微生物菌剂。
每个处理方案重复开展3次，整体上划分为9个区间，每个区间种植烤烟150株，行间距1.4m、株距60cm、垄高25cm。
烟草黑胫病菌分子生物学研究进展
烟 草 黑 胫 病 由 寄 生 疫 霉 菌 （ Phytophthora nicotianae，又称 Phytophthora nicotianae Breda de Haan, Phytophthora parasitica var. nicotianae）侵染 烟草引起，俗称烟草疫病，为世界性的烟草病害， 在美洲、非洲和亚洲都有发生，是烟草生产上最具 毁灭性的病害之一，每年给烟草生产造成巨大损失。 目前在我国除黑龙江以外的各烟区均有发生，发生 较重的省份有云南、贵州、四川、河南、山东等[1]。 由于黑胫病的巨大危害，多年来相关学者对该病进 行了大量研究，在病害症状、病原微生物学特性、 病害遗传规律以及病害流行规律等方面取得了较 大进展。随着分子生物学技术的兴起，对黑胫病分 子生物学特性的研究也随之展开，特别是近年来测 序技术的迅猛发展大力推动了该领域的研究，因此 本文总结了烟草黑胫病病原菌的起源和分类名称、
全基因组序列、线粒体基因组序列以及功能基因等 方面的研究进展，探讨了利用分子生物学技术深入 开展烟草黑胫病菌研究的未来发展方向，以期为黑 胫病致病机理的解析和烟草抗黑胫病分子育种提 供参考。
1 烟草黑胫病菌的起源、分类和名称 由来
烟草黑胫病菌隶属于藻物界（Chromista)、卵 菌纲（Oomycetes）、霜霉目（Peronosporales）、腐 霉科（Pythiaceae）、疫霉属（Phytophthora）[2]。化 石证据显示，最古老的卵菌类似结构可以追溯到 360—400 百万年前的泥盆纪时期[3]。卵菌很大程度 上起源于海洋环境，包括很多动物病原菌和植物病 原菌，其中植物病原菌占到 60%以上[4]。
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P. phaseoli
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3 烟草黑胫病菌已克隆基因
烟草黑胫病菌致病力的影响因子及其互作效应
烟草黑胫病菌致病力的影响因子及其互作效应
马国胜;高智谋
【期刊名称】《江苏农业科学》
【年(卷),期】2013(41)12
【摘要】采用3因素随机区组设计方法研究接种方法、烟草品种、菌种3种因子对烟草黑胫病菌致病力的影响。
结果表明：各因子对烟草黑胫病菌致病力的影响依次为接种方法＞烟草品种＞菌种，不同接种方法接种后的病斑长度依次为菌丝块茎基部创伤接种＞游动孢子悬浮液灌根接种＞菌丝块茎基部不创伤接种，不同烟草品种接种后的病斑长度依次为红大＞G140＞NC89，接种不同菌株后的病斑长度依次为BZ-8＞FY-10＞SX-3；接种方法与烟草品种间的互作效应达到了显著水平，其他因子互作效应均未达到显著水平。
【总页数】3页(P111-113)
【作者】马国胜;高智谋
【作者单位】安徽农业大学植物保护学院，安徽合肥 230036; 苏州农业职业技术学院生态环境系，江苏苏州215008;安徽农业大学植物保护学院，安徽合肥230036
【正文语种】中文
【中图分类】S435.72
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烤烟种质资源黑胫病抗性再鉴定
烤烟种质资源黑胫病抗性再鉴定烤烟是我国重要的经济作物之一，也是世界上最重要的经济作物之一。
在烟草生产中，黑胫病是一种常见的病害，给烟草的生产和质量带来了很大影响。
随着烟草种质资源的不断增加和鉴定工作的不断开展，研究黑胫病抗性的再鉴定工作也显得尤为重要。
黑胫病是由黑胫病菌引起的一种烟草真菌病害，主要危害烟草的地下部分。
黑胫病菌侵染烟草根系，导致植株发育不良，影响养分吸收和植株生长，从而严重影响烟草产量和质量。
研究烟草种质资源的黑胫病抗性，对于保障烟草生产的稳定和提高烟草质量具有重要意义。
烟草种质资源是指一定地理环境下某一时间点上的烟草种群，包括了不同地域、不同品种、不同类型的烟草植株，具有丰富的遗传多样性。
在研究烟草种质资源的黑胫病抗性时，首先需要对烟草种质资源进行充分的收集和筛选。
通过实地调查和采集，收集不同地域、不同品种、不同类型的烟草种质资源，构建烟草种质资源的多样性数据库，为后续的研究工作奠定基础。
得到烟草种质资源样品后，需要进行黑胫病抗性的再鉴定工作。
再鉴定工作主要包括烟草种质资源的黑胫病抗性鉴定和分析，以及相关基因的分子标记和功能分析等内容。
通过鉴定工作，可以获得不同烟草种质资源对黑胫病的抗性程度，找到在不同环境条件下表现出较好黑胫病抗性的烟草品种，进而培育和选育出黑胫病抗性好、产量高、质量优的新品种或新系列。
在黑胫病抗性的再鉴定工作中，研究人员需要运用现代生物技术手段，对烟草种质资源样品进行分子水平的分析和鉴定。
通过分子标记技术，可以对烟草种质资源中与黑胫病抗性相关的基因进行标记和检测，寻找与黑胫病抗性相关的分子标记，为后续的分子辅助选育工作奠定基础。
还需要利用生物信息学和基因组学等技术手段，对黑胫病抗性相关基因进行功能分析和表达调控研究，揭示烟草对黑胫病的抗性机制和途径，为提高烟草抗病能力提供理论依据。
除了分子水平的分析和鉴定工作，还需要对烟草种质资源样品进行病原菌侵染和抗性表现的生理生化特性分析工作。
哈茨木霉施用方式对烟草生长、黑胫病防治及诱导抗性的影响
㊀山东农业科学㊀２０２３ꎬ５５(２):１１９~１２６ＳｈａｎｄｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ㊀ＤＯＩ:１０.１４０８３/ｊ.ｉｓｓｎ.１００１－４９４２.２０２３.０２.０１６收稿日期:２０２２－０５－２７基金项目:河南省自然科学基金项目(２１２３００４１０１６０)ꎻ河南省烟草公司许昌市公司科技项目(２０１８４１１０００２４００４３)作者简介:匡志豪(１９９７ )ꎬ男ꎬ河南潢川人ꎬ硕士研究生ꎬ研究方向:烟草栽培与生理生化研究ꎮＥ－ｍａｉｌ:１８３２７８６５４８＠ｑｑ.ｃｏｍ通信作者:殷全玉(１９７５ )ꎬ女ꎬ河南固始人ꎬ博士ꎬ副教授ꎬ主要从事烟草栽培和生理研究ꎮＥ－ｍａｉｌ:ｑｕａｎｙｕｙ＠１２６.ｃｏｍ哈茨木霉施用方式对烟草生长、黑胫病防治及诱导抗性的影响匡志豪１ꎬ王典２ꎬ云菲１ꎬ王兆双２ꎬ韩梦园１ꎬ张幸博２ꎬ王景１ꎬ殷全玉１(１.河南农业大学烟草学院ꎬ河南郑州㊀４５０００２ꎻ２.河南省烟草公司许昌市公司ꎬ河南许昌㊀４６１０００)㊀㊀摘要:为探究生防菌株哈茨木霉对烟草生长促进和黑胫病防治效果的最佳施用方式ꎬ本试验在温室盆栽条件下分析了哈茨木霉浸种㊁灌根和叶面喷施３种施用方式对烟草生物学性状㊁生理特性㊁烟草黑胫病防治效果以及诱导抗性的影响ꎮ结果表明ꎬ哈茨木霉浸种㊁灌根㊁叶面喷施处理对烟草地上部和地下部生物学性状及生物量积累均具有显著促进作用ꎬ整体表现为灌根>浸种>叶面喷施ꎮ哈茨木霉对烟株叶面积促进效果高于株高和茎围ꎬ移栽后２８ｄ经灌根处理烟株根系更加发达ꎬ总根长㊁根体积㊁分枝数较对照显著增加ꎬ地上部和地下部鲜质量较对照分别增加８６.１４％和８４.１６％ꎮ灌根处理后烟株硝酸还原酶活性㊁根系活力㊁叶绿素含量均随时间推移逐渐升高ꎬ在移栽后２１ｄ达到稳定ꎮ哈茨木霉定殖量与防御性酶活性和烟草黑胫病防治效果呈正相关关系ꎬ经诱导烟草根系ＰＯＤ㊁ＰＰＯ㊁ＰＡＬ和ＣＡＴ活性显著升高ꎮ各时期灌根处理烟株体内哈茨木霉定殖量均显著高于浸种和叶面喷施处理ꎬ烟草黑胫病发病率较对照降低７５.００个百分点ꎬ病情指数降至１３.８９ꎮ综上可知ꎬ移栽期哈茨木霉灌根处理能有效提高烟株生长质量ꎬ诱导烟株抗性增强ꎬ降低烟草黑胫病发生ꎮ关键词:哈茨木霉ꎻ施用方式ꎻ生物学性状ꎻ生理特性ꎻ烟草黑胫病ꎻ诱导抗性中图分类号:Ｓ４３５.７２㊀㊀文献标识号:Ａ㊀㊀文章编号:１００１－４９４２(２０２３)０２－０１１９－０８ＥｆｆｅｃｔｏｆＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｈａｒｚｉａｎｕｍＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎＭｅｔｈｏｄｏｎＴｏｂａｃｃｏＧｒｏｗｔｈꎬＢｌａｃｋＳｈａｎｋＣｏｎｔｒｏｌａｎｄＩｎｄｕｃｉｎｇＲｅｓｉｓｔａｎｃｅＫｕａｎｇＺｈｉｈａｏ１ꎬＷａｎｇＤｉａｎ２ꎬＹｕｎＦｅｉ１ꎬＷａｎｇＺｈａｏｓｈｕａｎｇ２ꎬＨａｎＭｅｎｇｙｕａｎ１ꎬＺｈａｎｇＸｉｎｇｂｏ２ꎬＷａｎｇＪｉｎｇ１ꎬＹｉｎＱｕａｎｙｕ１(１.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＴｏｂａｃｃｏꎬＨｅｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＺｈｅｎｇｚｈｏｕ４５０００２ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＸｕｃｈａｎｇＢｒａｎｃｈｏｆＨｅｎａｎＴｏｂａｃｃｏＣｏｍｐａｎｙꎬＸｕｃｈａｎｇ４６１０００ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ㊀ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｂｅｓｔａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｏｆｔｈｅｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌｓｔｒａｉｎＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｈａｒｚｉａｎｕｍｆｏｒｐｒｏｍｏｔｉｎｇｔｏｂａｃｃｏｇｒｏｗｔｈａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇｂｌａｃｋｓｈａｎｋꎬｔｈｅｐｏｔｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄｉｎｇｒｅｅｎｈｏｕｓｅｂｙｓｅｔ￣ｔｉｎｇｔｈｒｅｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓａｓｓｅｅｄｓｏａｋｉｎｇꎬｒｏｏｔｉｒｒｉｇａｔｉｏｎａｎｄｆｏｌｉａｒｓｐｒａｙｉｎｇ.Ｔｈｅｉｒｅｆｆｅｃｔｓｏｎｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｔｒａｉｔｓꎬｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓꎬｂｌａｃｋｓｈａｎｋｃｏｎｔｒｏｌａｎｄｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｔｏｂａｃｃｏｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄ.ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｓｅｅｄｓｏａｋｉｎｇꎬｒｏｏｔｉｒｒｉｇａｔｉｏｎａｎｄｆｏｌｉａｒｓｐｒａｙｉｎｇｗｉｔｈＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｈａｒｚｉａｎｕｍｓｉｇｎｉｆｉ￣ｃａｎｔｌｙｐｒｏｍｏｔｅｄｔｈｅａｂｏｖｅ￣ｇｒｏｕｎｄａｎｄｕｎｄｅｒ￣ｇｒｏｕｎｄｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｔｒａｉｔｓａｎｄｂｉｏｍａｓｓａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｏｆｔｏｂａｃｃｏｗｉｔｈｔｈｅｏｖｅｒａｌｌｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｏｆｒｏｏｔｉｒｒｉｇａｔｉｏｎ>ｓｅｅｄｓｏａｋｉｎｇ>ｆｏｌｉａｒｓｐｒａｙｉｎｇ.ＴｈｅｌｅａｆａｒｅａｏｆｔｏｂａｃｃｏｐｌａｎｔｓｗａｓｐｒｏｍｏｔｅｄｂｙＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｈａｒｚｉａｎｕｍｍｏｒｅｔｈａｎｐｌａｎｔｈｅｉｇｈｔａｎｄｓｔｅｍｃｉｒｃｕｍｆｅｒｅｎｃｅ.Ｔｈｅｒｏｏｔｓｙｓｔｅｍｄｅｖｅｌ￣ｏｐｅｄｂｅｔｔｅｒｕｎｄｅｒｉｒｒｉｇａｔｉｏｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｈａｒｚｉａｎｕｍａｔ２８ｔｈｄａｙａｆｔｅｒｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇꎬａｎｄｔｈｅｔｏｔａｌｒｏｏｔｌｅｎｇｔｈꎬｒｏｏｔｖｏｌｕｍｅａｎｄｎｕｍｂｅｒｏｆｒｏｏｔｂｒａｎｃｈｅｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌ.Ｔｈｅａ￣ｂｏｖｅ￣ｇｒｏｕｎｄａｎｄｕｎｄｅｒ￣ｇｒｏｕｎｄｆｒｅｓｈｍａｓｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙ８６.１４％ａｎｄ８４.１６％ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌꎬｒｅ￣ｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.Ｔｈｅｎｉｔｒａｔｅｒｅｄｕｃｔａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙꎬｒｏｏｔｖｉｇｏｒａｎｄｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｈｅｔｏｂａｃｃｏｐｌａｎｔｓｕｎｄｅｒｉｒｒｉｇａ￣ｔｉｏｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｉｎｃｒｅａｓｅｄｇｒａｄｕａｌｌｙｗｉｔｈｔｈｅｔｉｍｅｅｘｔｅｎｓｉｏｎａｎｄｗａｓｓｔａｂｌｅａｆｔｅｒ２１ｄａｙｓｏｆｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇ.ＴｈｅｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎａｍｏｕｎｔｏｆＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｈａｒｚｉａｎｕｍｗａｓｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｄｅｆｅｎｓｉｖｅｅｎｚｙｍｅｓａｃｔｉｖｉｔｉｅｓａｎｄｔｏｂａｃｃｏｂｌａｃｋｓｈａｎｋｃｏｎｔｒｏｌｅｆｆｅｃｔ.ＴｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＰＯＤꎬＰＰＯꎬＰＡＬａｎｄＣＡＴｉｎｔｏｂａｃｃｏｒｏｏｔｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙａｆｔｅｒｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｈａｒｚｉａｎｕｍ.ＴｈｅｉｎｖｉｖｏｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎｏｆＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｈａｒｚｉａｎｕｍｉｎｔｏ￣ｂａｃｃｏｕｎｄｅｒｉｒｒｉｇａｔｉｏｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｕｎｄｅｒｓｅｅｄｓｏａｋｉｎｇａｎｄｆｏｌｉａｒａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎꎬａｎｄｔｈｅｉｎｃｉｄｅｎｃｅｏｆｔｏｂａｃｃｏｂｌａｃｋｓｈａｎｋｒｅｄｕｃｅｄｂｙ７５.００ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｐｏｉｎｔｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌꎬａｎｄｔｈｅｄｉｓｅａｓｅｉｎｄｅｘｗａｓｒｅｄｕｃｅｄｔｏ１３.８９.ＩｎｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎꎬｒｏｏｔｉｒｒｉｇａｔｉｏｎｗｉｔｈＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｈａｒｚｉａｎｕｍａｔｔｒａｎｓ￣ｐｌａｎｔｉｎｇｔｉｍｅｃｏｕｌｄｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｇｒｏｗｔｈｑｕａｌｉｔｙｏｆｔｏｂａｃｃｏｐｌａｎｔｓꎬｉｎｃｒｅａｓｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅａｎｄｒｅｄｕｃｅｔｈｅｉｎｃｉｄｅｎｃｅｏｆｔｏｂａｃｃｏｂｌａｃｋｓｈａｎｋ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ㊀ＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｈａｒｚｉａｎｕｍꎻＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄꎻＢｉｏｌｏｇｉｃａｌｔｒａｉｔｓꎻＰｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓ￣ｔｉｃｓꎻＴｏｂａｃｃｏｂｌａｃｋｓｈａｎｋꎻＩｎｄｕｃｉｎｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ㊀㊀烟草是中国重要的经济作物ꎬ由于长期连作及过量化肥㊁农药施用ꎬ烟区土壤质量下降㊁病害发生日益严重㊁烟叶品质降低ꎬ同时对生态环境产生一系列负面影响[１]ꎮ烟草黑胫病是由烟草疫霉菌(Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｎｉｃｏｔｉａｎａｅ)引起的一种土传真菌病害[２]ꎬ在中国各烟区普遍发生ꎬ严重地块发病率高达７５％以上[３]ꎬ是危害烟叶生产的主要病害之一ꎬ严重影响了烟叶生产的可持续发展ꎮ木霉菌是一类广泛存在于土壤中的拮抗真菌ꎬ通过竞争优势㊁重寄生作用以及诱导植物产生抗性[４]等方式ꎬ达到高效㊁安全㊁绿色防治效果ꎮ王献慧等[５]在花生种植前利用哈茨木霉浸种ꎬ有效提高了植株叶片数和侧枝长ꎬ显著降低了叶斑病发病率ꎮ王依纯等[６]通过棘孢木霉㊁哈茨木霉和拟康氏木霉灌根ꎬ均提高了黄瓜幼苗叶绿素含量㊁硝酸还原酶活性以及根系活力ꎬ促进幼苗生长ꎮ张敏等[７]采用绿色木霉叶面喷施玉米ꎬ对株高㊁根长均有促进效果ꎬ根活力㊁过氧化物酶活性及叶绿素含量较对照显著升高ꎮ木霉制剂对植物促生防病效果随使用方式不同存在较大差异ꎬ如刘峰等[８]利用哈茨木霉浸种㊁拌土和叶面喷施处理均能促进玉米幼苗生长ꎬ其中拌土处理对植株地上部生长性状㊁根长及生物量积累提高效果更显著ꎮ张敏等[７]认为木霉浸种和叶面喷施混合处理能有效增强玉米防御类酶活性ꎬ提高对玉米丝黑穗病的防治效果ꎮ肖密[９]比较了哈茨木霉菌Ｔ２－１６孢子悬浮液浸种㊁灌根以及掺拌基质对西瓜枯萎病的防治效果ꎬ其中木霉菌掺拌基质处理下的西瓜过氧化物酶(ＰＯＤ)㊁苯丙氨酸解氨酶(ＰＡＬ)和多酚氧化酶(ＰＰＯ)活性提高最显著ꎬ防治效果达到６０％ꎮ当前ꎬ利用木霉菌防治植物病害报道已有很多ꎬ但木霉菌施用方式对烟草的生长㊁病害防效以及诱导抗性的影响缺乏系统研究ꎮ本课题组利用前期筛选出对烟草黑胫病病菌有较强拮抗效果的哈茨木霉菌ꎬ研究哈茨木霉浸种㊁灌根和叶面喷施３种施用方式对烟草生物学性状㊁生理特性㊁诱导抗性及烟草黑胫病防治的影响ꎬ旨在提高生产中木霉菌剂使用效果ꎬ为绿色烟叶生产提供技术支撑ꎮ１㊀材料与方法１.１㊀试验材料１.１.１㊀供试烟草品种㊀Ｋ３２６由河南农业大学烟草学院提供ꎮ１.１.２㊀供试培养基㊀ＰＤＡ:马铃薯２００ｇꎬ葡萄糖２０ｇꎬ琼脂１５~２０ｇꎬ蒸馏水１０００ｍＬꎬｐＨ自然ꎮ燕麦琼脂培养基(ＯＡ):燕麦仁６０ｇꎬ蔗糖２０ｇꎬ琼脂８ｇꎬ蒸馏水１０００ｍＬꎬｐＨ自然ꎮ１.１.３㊀供试菌株㊀哈茨木霉ＣＧＭＣＣ２３２９４由中国农业科学院农业微生物菌种保藏中心提供ꎻ烟草疫霉菌(Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｎｉｃｏｔｉａｎａｅ)由河南农业大学烟草学院提供ꎮ１.１.４㊀菌液制备㊀将哈茨木霉接入ＰＤＡ平板于０２１㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５５卷㊀(２７ʃ１)ħ培养５~７ｄ后ꎬ用无菌水冲洗孢子ꎬ制成１ˑ１０７ｃｆｕ/ｍＬ孢子悬浮液备用ꎮ将烟草疫霉菌接入燕麦琼脂(ＯＡ)培养基ꎬ(２６ʃ１)ħ培养６~７ｄ后ꎬ用无菌水冲洗孢子ꎬ并调节为１ˑ１０５ｃｆｕ/ｍＬ孢子悬浮液备用ꎮ１.２㊀试验处理本试验于２０２１年６月至１０月在河南农业大学许昌校区烟草基地温室大棚内进行ꎬ棚内温度２８ħꎬ湿度４０％ꎮ盆栽土壤采用大田耕层土壤ꎬ基础土壤肥力:速效钾１４４.６１ｍｇ/ｋｇꎬ速效磷１１８.８９ｍｇ/ｋｇꎬ碱解氮７０.５０ｍｇ/ｋｇꎬ有机质１６.４５ｇ/ｋｇꎬ除去杂草和石子后过１ｃｍˑ１ｃｍ筛网ꎬ按１.８３ｇ/ｋｇ添加复合肥(ＮʒＰ２Ｏ５ʒＫ２Ｏ＝１ʒ１.５ʒ３)ꎬ充分混匀ꎬ装入内口径２０.５ｃｍ㊁高度１３.５ｃｍ的花盆ꎬ每盆装土量３ｋｇꎮ１.２.１㊀对照处理㊀将烟草种子表面消毒(质量分数７５％乙醇ꎬ１ｍｉｎꎻ３０％双氧水ꎬ５ｍｉｎ)后ꎬ播种于装有已灭菌基质的漂浮育苗盘中培育ꎬ总计５０株ꎮ１.２.２㊀浸种处理㊀烟草种子表面消毒后ꎬ用哈茨木霉孢子悬浮液浸种处理４８ｈꎬ无菌水漂洗干净ꎬ播种于装有已灭菌基质的漂浮育苗盘中ꎬ待烟苗到达成苗期装盆移栽至温室大棚ꎬ总计５０株ꎮ１.２.３㊀灌根处理㊀消毒后的烟草种子ꎬ采用常规漂浮育苗ꎬ待烟苗到达成苗期装盆移栽ꎬ利用哈茨木霉孢子悬浮液进行灌根处理ꎮ每株烟接种２０ｍＬꎬ总计５０株ꎮ１.２.４㊀叶面接种处理㊀烟苗长至成苗期后移栽ꎬ移栽当天ꎬ将哈茨木霉孢子悬浮液均匀喷施在烟苗叶片上直至叶表面布满一层细微水珠而不滴落为止ꎬ每株烟均匀喷施２０ｍＬꎬ总计５０株ꎮ哈茨木霉孢子悬浮液灌根与叶面喷施处理时间相同ꎬ各处理挑选长势均匀一致烟株同一时间移栽ꎬ且移栽方式与后续管理措施保持一致ꎮ１.３㊀测定指标及方法１.３.１㊀生物学性状测定㊀移栽后２８ｄ进行生长量指标测定ꎬ各处理选取５株ꎬ测量株高㊁茎围㊁叶片长度和宽度(自上而下第５片叶)ꎬ计算叶面积(叶面积＝０.６３４５ˑ叶长ˑ叶宽)ꎮ将盆内土壤倒出ꎬ轻轻抖落根部土壤ꎬ用清水反复冲洗干净ꎬ吸水纸吸干水分称量地上部和地下部鲜质量ꎻ通过ＥＰＳＯＮ根系扫描仪将根系完整扫描的图像存入计算机ꎬ利用ＷｉｎＲＨＩＺＯ分析总根长㊁根表面积㊁平均根直径㊁根体积及分支数ꎻ扫描后的根部同地上部在１０５ħ烘箱杀青１５ｍｉｎ后ꎬ７０ħ烘干测干质量及根冠比(地下部鲜质量/地上部鲜质量)[１０]ꎮ１.３.２㊀生理生化指标测定㊀移栽后７㊁１４㊁２１㊁２８ｄ分别采集各处理烟株自上而下第４片叶ꎬ避开叶脉ꎬ在叶片中部环状切取０.５ｇꎬ采用丙酮乙醇提取比色法ꎬ测定叶绿素含量[１１]ꎻ将烟苗挖出ꎬ根部清洗干净并吸干水分ꎬ称取１.０ｇꎬ参照朱秀云等[１２]的方法ꎬ采用ＴＴＣ法测根系活力ꎻ另外取０.１ｇ烟株根部参照张春秋等[１３]的方法ꎬ采用活体分光光度法测根系硝酸还原酶活性ꎬ各生理指标测定３次重复ꎬ每次重复均来自同一烟株ꎮ１.３.３㊀哈茨木霉在烟株体内定殖规律㊀在移栽后７㊁１４㊁２１㊁２８ｄ分别取各处理烟株根部㊁茎基部和叶片各０.１ｇ混合ꎬ每株烟重复取样３次ꎬ将混合样品在液氮中冻干研磨成粉ꎬ采用生工生物工程(上海)股份有限公司试剂盒进行真菌ＤＮＡ提取ꎮ依照哈茨木霉测序结果根据其ｒＤＮＡ转录间隔区特有保守序列设计引物ＥＦ１－７２８Ｆ(５ᶄ－ＣＡＴＣＧＡＧＡＡＧＴＴＣＧＡＧＡＡＧＧ－３ᶄ)和ＴＥＦ１ＬＬＥｒ￣ｅｖ(５ᶄ－ＡＡＣＴＴＧＣＡＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧ－３ᶄ)并对其序列进行ＰＣＲ扩增ꎮＰＣＲ反应体系:模板ＤＮＡ４.０μＬꎬＥＦ１－７２８Ｆ和ＴＥＦ１ＬＬＥｒｅｖ各１.０μＬꎬ２ˑＴａｑＰＣＲＳｔａｒＭｉｘ２５μＬꎬ加ｄｄＨ２Ｏ补足至５０μＬꎮＰＣＲ反应程序:９４ħ预变性４ｍｉｎꎻ９４ħ变性４５ｓꎬ５７ħ退火３０ｓꎬ７２ħ延伸１ｍｉｎꎬ共３５个循环ꎻ７２ħ延伸１０ｍｉｎꎬ１６ħ保存ꎮ取４０μＬ扩增产物在１％琼脂糖凝胶中进行电泳检测ꎬ采用ＴｏｌｏＰｒｅｐ柱式ＰＣＲ纯化/胶回收试剂盒对目标条带进行纯化ꎬ利用超微量分光光度计检测其浓度ꎬ取３次结果平均值ꎬ各处理重复３次ꎮ１.３.４㊀抗病性及诱导抗性指标测定㊀各处理烟苗在移栽后２８ｄꎬ采用灌根接种法ꎬ将配制好的烟草疫霉孢子悬浮液(１ˑ１０５ｃｆｕ/ｍＬ)２０ｍＬ均匀接种在烟株根部土壤ꎬ１４ｄ后调查发病率ꎬ计算病情指数及防治效果ꎬ并测定各处理烟株根部过氧化物酶(ＰＯＤ)㊁多酚氧化酶(ＰＰＯ)㊁苯丙氨酸解氨酶(ＰＡＬ)和过氧化氢酶(ＣＡＴ)活性[１４]ꎬ各处理３次重复ꎮ烟草黑胫病分级标准参照中华人民共和国烟草行业标准ＹＣ/Ｔ３９ １９９６ꎮ１２１㊀第２期㊀㊀㊀匡志豪ꎬ等:哈茨木霉施用方式对烟草生长㊁黑胫病防治及诱导抗性的影响发病率(％)＝病株数/调查总株数ˑ１００㊀ꎻ病情指数＝ð(病级数ˑ该级病株数)/(最高病级数ˑ调查总株数)ˑ１００㊀ꎻ防治效果(％)＝(对照病情指数－处理病情指数)/对照病情指数ˑ１００㊀ꎮ１.４㊀数据处理利用ＭｉｃｒｏｓｏｆｔＥｘｃｅｌ２０１９进行数据处理和图表制作ꎬ通过ＳＰＳＳ２５.０在０.０５水平上对数据进行差异显著性检验ꎮ２㊀结果与分析２.１㊀哈茨木霉不同施用方式对烟草生物学性状的影响２.１.１㊀哈茨木霉不同施用方式对烟草地上部生物学性状的影响㊀由表１和图１可知ꎬ与对照相比ꎬ在移栽后２８ｄꎬ哈茨木霉不同施用方式对烟草地上部生长均具有明显促进作用ꎬ以灌根处理对烟草株高和叶面积提高效果最显著ꎬ较对照分别增加５４.２２％和６７.４２％(Ｐ<０.０５)ꎬ显著高于浸种和叶面喷施处理ꎻ相比对照处理ꎬ３种施用方式对烟株茎围影响均达显著水平ꎬ以叶面喷施处理增幅最大ꎬ达到２３.４０％(Ｐ<０.０５)ꎮ整体来看ꎬ哈茨木霉对烟草叶面积促进效果优于茎围和株高ꎮ㊀表１㊀哈茨木霉不同施用方式烟株地上部生物学性状处理株高(ｃｍ)茎围(ｃｍ)叶面积(ｃｍ２)对照３１.６５ʃ１.６２ｄ３.２９ʃ０.３２ｂ２３８.０３ʃ１３.１２ｃ浸种４４.２６ʃ３.２２ｂ３.７７ʃ０.３４ａ３３６.９３ʃ２４.２０ｂ灌根４８.８１ʃ２.８５ａ３.８５ʃ０.３９ａ３９８.５２ʃ２５.６１ａ叶面喷施３９.２７ʃ２.３９ｃ４.０６ʃ０.４５ａ３１５.１８ʃ１７.２９ｂ㊀㊀注:表中数据为平均值ʃ标准差ꎻ数据后不同小写字母表示不同处理间差异显著(Ｐ<０.０５)ꎮ下同ꎮ２.１.２㊀哈茨木霉不同施用方式对烟草地下部生物学性状的影响㊀由图２和表２可知ꎬ３种施用方式对烟草根部各指标表现出不同程度地促进作用ꎬ哈茨木霉灌根处理的烟株在移栽后２８ｄ根系更发达ꎬ各根系指标均高于浸种和叶面喷施处理ꎮ经灌根处理烟株总根长㊁根表面积㊁平均根直径㊁根体积和分支数较对照增加显著ꎬ增幅分别达４３.２１％㊁６２.９１％㊁８７.６３％㊁１１９.７９％和８０.４６％ꎻ浸种处理对烟草根系各指标提高也较显著ꎬ较对照分别提高２８.８６％㊁４９.６０％㊁２７.８４％㊁８５.０３％和４２.８７％ꎻ相比对照ꎬ叶面喷施处理对烟草根表面积㊁平均根直径及根体积影响不显著ꎬ较对照增加１４.０２％㊁４.１２％和１７.４７％ꎮ结合烟株地上部发育(表１)可知ꎬ哈茨木霉施用方式对烟草地上部和地下部生物学性状影响相同ꎬ即灌根>浸种>叶面喷施ꎮＡ:烟株地上部长势ꎻＢ:去除泥土后烟株生物学形态(从左到右依次是对照㊁浸种㊁灌根和叶面喷施处理)ꎮ图１㊀移栽后２８ｄ哈茨木霉不同施用方式下烟株长势Ａ:对照ꎻＢ:浸种处理ꎻＣ:灌根处理ꎻＤ:叶面喷施ꎮ图２㊀移栽后２８ｄ哈茨木霉不同施用方式下烟株根系扫描图２２１㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５５卷㊀㊀表２㊀哈茨木霉不同施用方式烟株地下部生物学性状处理总根长(ｃｍ)根表面积(ｃｍ２)平均根直径(ｍｍ)根体积(ｃｍ３)分支数(个)对照６８２.１６ʃ４８.７１ｂ２２５.９９ʃ３１.５５ｂ０.９７ʃ０.０９ｃ５.６１ʃ０.７３ｂ６８７７ʃ５５４ｃ浸种８７９.０２ʃ６１.１４ａ３３８.０８ʃ３０.６５ａ１.２４ʃ０.３１ｂ１０.３８ʃ１.８５ａ９８２５ʃ７７３ｂ灌根９７６.９４ʃ７０.７６ａ３６８.１６ʃ２８.８３ａ１.８２ʃ０.３５ａ１２.３３ʃ２.６７ａ１２４１０ʃ９５１ａ叶面喷施８３３.０８ʃ７８.５９ａ２５７.６７ʃ２５.８１ｂ１.０１ʃ０.１３ｃ６.５９ʃ１.３２ｂ８７２７ʃ６０２ｂ２.１.３㊀哈茨木霉不同施用方式对烟草生物量积累的影响㊀由表３可知ꎬ哈茨木霉浸种㊁灌根和叶面喷施处理后烟株地上部和地下部生物量积累均高于对照ꎮ以灌根处理对烟株生物量积累促进作用最强ꎬ其次是浸种处理ꎬ叶面喷施效果相对较弱ꎮ灌根处理烟株地下部鲜质量㊁地上部鲜质量㊁地下部干质量和地上部干质量较对照分别增加８４.１６％㊁８６.１４％㊁６３.２９％和６４.１７％(Ｐ<０.０５)ꎮ浸种处理烟株地上部鲜质量和干质量增幅分别为６２.４９％和５８.３５％(Ｐ<０.０５)ꎬ与灌根处理间无显著差异ꎮ对照㊁浸种和灌根处理之间烟株根冠比差异不显著ꎬ经叶面喷施后烟草根冠比有所下降ꎬ说明哈茨木霉能促进烟草地上部和地下部生物量积累ꎬ并不能有效提高烟草根冠比ꎮ㊀㊀表３㊀哈茨木霉不同施用方式下烟株生物量积累处理地下部鲜质量(ｇ)地上部鲜质量(ｇ)地下部干质量(ｇ)地上部干质量(ｇ)根冠比对照９.９１ʃ０.６７ｃ７４.６８ʃ５.４２ｃ１.５８ʃ０.４１ｃ１２.０３ʃ１.６６ｂ１３.２７ʃ２.１１ａ浸种１５.０７ʃ１.１３ａｂ１２１.３５ʃ１１.０４ａ１.９５ʃ０.３４ｂ１９.０５ʃ２.５９ａ１５.４４ʃ２.７９ａ灌根１８.２５ʃ１.２９ａ１３９.０１ʃ１０.８６ａ２.５８ʃ０.２９ａ１９.７５ʃ２.６８ａ１３.４２ʃ２.１８ａ叶面喷施１２.４２ʃ１.３７ｂｃ９７.５８ʃ６.３７ｂ１.６８ʃ０.３６ｃ１３.７７ʃ２.０３ｂ１０.２３ʃ２.１３ｂ２.２㊀哈茨木霉施用方式对生理特性的影响２.２.１㊀哈茨木霉施用方式对烟草根系硝酸还原酶活性和叶片叶绿素含量的影响㊀由图３可知ꎬ叶绿素含量随移栽时间逐渐增加ꎬ各时期含量均表现为灌根>浸种>叶面喷施>对照ꎮ其中浸种和灌根处理各时期叶绿素含量与对照之间均呈显著差异ꎬ最大增幅为３３.７０％和５１.５２％(Ｐ<０.０５)ꎬ分别出现在移栽后第７天和１４天ꎬ两处理间差异随时间逐渐减小ꎬ在移栽后第２８ｄ浸种与灌根处理之间叶绿素含量无显著差异ꎮ移栽后７ｄ叶面喷施与对照间叶绿素含量差异不显著ꎬ在第２１天ꎬ两处理间差值达到最大ꎬ相比对照提高２１.６１％(Ｐ<０.０５)ꎮ各时期３种施用方式烟草根系硝酸还原酶活性与对照之间均呈显著差异ꎬ总体变化趋势与叶绿素相同ꎬ各处理硝酸还原酶活性随移栽时间逐渐升高ꎬ以灌根处理最高ꎮ浸种和灌根处理酶活性在移栽后２１ｄ较对照增幅达到最大ꎬ分别为２９.５４％和５５.７２％(Ｐ<０.０５)ꎻ叶面喷施处理酶活性在移栽后第１４天较对照提高２４.７７％(Ｐ<０.０５)ꎬ移栽后２８ｄ灌根处理烟草根系硝酸还原酶活性最高ꎬ浸种与叶面喷施处理之间无显著差异ꎮ折线图表示各处理硝酸还原酶活性ꎬ柱状图表示叶绿素含量ꎮ不同小写字母表示同一时期处理间差异显著(Ｐ<０.０５)ꎮ下同ꎮ图３㊀哈茨木霉不同施用方式下烟草硝酸㊀㊀还原酶活性和叶绿素含量２.２.２㊀哈茨木霉施用方式对烟草根系活力的影响㊀由图４可知ꎬ哈茨木霉处理可以不同程度提高烟草根系活力ꎬ３种施用方式烟草根系活力随移栽天数呈现先升高后降低的趋势ꎮ其中以灌根处理促进作用最显著ꎬ峰值出现在移栽后第１４天ꎬ相较对照增幅最大ꎬ达到４１.７１％(Ｐ<０.０５)ꎻ浸种和叶面喷施处理根系活力峰值均出现在移栽后第２１天ꎬ较对照分别提高２０.３５％和１２.９９％(Ｐ<０.０５)ꎮ随移栽时间延长对照处理烟株根系活力逐渐升高ꎬ与各处理间差值呈逐渐缩小趋势ꎬ但在移栽后２８ｄ仍显著低于哈茨木霉处理ꎮ图４㊀哈茨木霉不同施用方式烟草根系活力３２１㊀第２期㊀㊀㊀匡志豪ꎬ等:哈茨木霉施用方式对烟草生长㊁黑胫病防治及诱导抗性的影响２.３㊀不同施用方式下哈茨木霉在烟草体内定殖规律由图５可知ꎬ通过ＰＣＲ扩增检测ꎬ对照处理烟株各时期体内哈茨木霉ＤＮＡ含量均为零ꎮ浸种和灌根处理烟株体内哈茨木霉定殖量随移栽时间延长呈先升高后降低趋势ꎬ分别在移栽后第１４天和第２１天达到最大值ꎬ各时期灌根处理烟株体内哈茨木霉定殖量均显著高于浸种和叶面喷施处理ꎻ经叶面喷施处理烟株体内哈茨木霉定殖量随时间逐渐减少ꎮ图５㊀不同施用方式下哈茨木霉在烟株体内定殖规律２.４㊀哈茨木霉施用方式对烟草诱导抗性的影响２.４.１㊀哈茨木霉施用方式对烟草黑胫病拮抗效果的影响㊀对照处理烟株发病率和病情指数均显著高于哈茨木霉处理ꎬ以灌根处理对烟草黑胫病防治效果最显著ꎬ达到７５.９４％ꎬ病情指数为１３.８９(Ｐ<０.０５)ꎻ浸种和叶面喷施处理下烟草黑胫病发病率㊁病情指数和防治效果差异不显著ꎬ两处理防效分别为５３.３２％和４９.４８％ꎮ㊀㊀表４㊀哈茨木霉不同施用方式下烟草黑胫病拮抗效果处理发病率(％)病情指数防治效果(％)对照９１.６７ʃ０.９６ａ５７.７４ʃ１.８８ａ浸种２９.１７ʃ１.５９ｂｃ２６.９５ʃ０.９４ｂ５３.３２ʃ１.６４ｂ灌根１６.６７ʃ１.３６ｃ１３.８９ʃ０.９６ｃ７５.９４ʃ１.６７ａ叶面喷施３７.５０ʃ１.８３ｂ２９.１７ʃ１.９４ｂ４９.４８ʃ２.２７ｂ２.４.２㊀哈茨木霉施用方式对烟草诱导抗性的影响㊀由表５可知ꎬ哈茨木霉对烟草根部防御性酶活性具有诱导效应ꎮ３种施用方式均有效提高了烟草根部ＰＯＤ活性ꎬ但三者之间无显著差异ꎬ灌根处理后烟草ＰＯＤ活性较对照增加２８.７０％(Ｐ<０.０５)ꎬ高于浸种和叶面喷施处理ꎮＰＰＯ活性以灌根处理最高ꎬ较对照提高７１.３４％(Ｐ<０.０５)ꎻ浸种与叶面喷施处理之间无显著差异ꎬ分别较对照增加３３.８４％和３９.６３％(Ｐ<０.０５)ꎮ浸种处理后烟草根部ＰＡＬ活性较对照升高５.８７％ꎬ与对照间无显著差异ꎻ灌根和叶面喷施处理能显著提高ＰＡＬ活性ꎬ分别提高６６.７５％和３２.５２％(Ｐ<０.０５)ꎮ浸种和灌根处理对ＣＡＴ活性促进作用最明显ꎬ较对照分别提高８０.３３％和１０５.９２％(Ｐ<０.０５)ꎬ叶面喷施效果显著低于浸种和灌根ꎬ与对照之间差异不显著ꎮ综上结果ꎬ３种施用方式对烟草根部ＰＯＤ㊁ＰＰＯ㊁ＰＡＬ和ＣＡＴ活性均有促进作用ꎬ其中以灌根处理对各防御性酶活性诱导效果最显著ꎮＰＯＤ活性受施用方式影响较小ꎬＰＡＬ和ＣＡＴ活性受施用方式影响最大ꎮ在生物胁迫条件下ꎬ灌根处理有利于激发烟草根部ＰＯＤ㊁ＰＰＯ㊁ＰＡＬ和ＣＡＴ活性ꎬ提高烟草诱导抗性ꎮ㊀㊀表５㊀㊀㊀哈茨木霉施用方式对烟草诱导抗性的影响(Ｕ/ｇ)处理ＰＯＤＰＰＯＰＡＬＣＡＴ对照１１.２９ʃ１.１２ｂ３.２８ʃ０.２１ｃ４.０９ʃ０.５２ｃ１３.１７ʃ１.５９ｃ浸种１３.１０ʃ０.８６ａ４.３９ʃ０.０７ｂ４.３３ʃ０.１４ｃ２３.７５ʃ３.２７ａ灌根１４.５３ʃ１.０２ａ５.６２ʃ０.１８ａ６.８２ʃ１.２３ａ２７.１２ʃ２.９７ａ叶面喷施１３.５９ʃ１.３７ａ４.５８ʃ０.５４ｂ５.４２ʃ０.２２ｂ１６.９５ʃ２.６８ｂｃ３㊀讨论与结论木霉菌作为一种广谱性生防菌ꎬ至少对１８个属２０余种病原真菌和多种病原细菌有拮抗效果[１５]ꎮ木霉不仅在植物土传病害防治中具有重要作用ꎬ还能促进植物生长㊁提高植物免疫力㊁增强抗逆性[１６]ꎮ关于木霉促进植株生长已有很多报道ꎮ杨春林等[１７]通过哈茨木霉Ｔ－ｈ－３０灌根处理后ꎬ黄瓜㊁番茄㊁芹菜幼苗株高㊁地茎及鲜质量均较对照显著增加ꎻ王禹佳等[１８]利用绿色木霉处理玉米后ꎬ相比对照总根长㊁根体积和根表面积分别提高７４.０％㊁６５.０％和４７.４％ꎮ本研究中哈茨木霉经３种施用方式处理后的烟株株高㊁叶面积㊁总根长㊁根体积㊁地上部鲜质量和地下部鲜质量等均高于对照ꎬ与前人研究结果相似ꎬ其中灌根处理对以上指标促进效果最显著ꎮ其原因可能是灌根处理后４２１㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５５卷㊀土壤和烟株体内哈茨木霉定殖量更多ꎬ其代谢产物中具有幼苗生长的类植物生长素６－ＰＰ(６－ｎ－ｐｅｎｔｙｌ－６Ｈ－ｐｙｒａｎ－２－ｏｎｅ)以及可降解乙烯前体物质的ＡＣＣ脱氨酶ꎬ缓解了乙烯对烟株生长的抑制作用[１９ꎬ２０]ꎮ哈茨木霉通过诱导增加烟草侧根㊁丛生根㊁延伸根长度等方式ꎬ形成更发达的根系网络[２１]ꎬ其中总根长和分枝数的增加有利于烟株从更广泛的土壤中获取水和养分ꎬ根体积和根表面积的提高扩大了与土壤的接触面积和吸收范围[２２]ꎻ另一方面部分微溶或难溶的矿物质在哈茨木霉作用下溶解后被根系吸收ꎬ从而加快烟株生长[２３]ꎮ各生理指标变化是衡量植株生长质量的重要依据ꎬ有研究表明棘孢木霉和哈茨木霉灌根均能显著提高黄瓜幼苗叶绿素含量㊁根系活力㊁叶片硝酸还原酶活性等生理指标[２４]ꎮ杨春平等[２５]发现在较高浓度木霉Ｌ２４作用下ꎬ浸种处理相较叶面喷施更有利于提高玉米叶绿素含量和根系活力ꎮ本研究结果显示３种施用方式对烟株各生理指标促进效果整体表现为灌根>浸种>叶面喷施ꎬ经灌根处理后ꎬ烟株叶面积和叶绿素含量显著提高ꎬ加快了叶片光合速率ꎬ增加碳水化合物的形成和积累ꎻ同时烟株根系活力和硝酸还原酶活性升高ꎬ提高土壤水肥吸收和氮素利用效率ꎬ进而促进烟株生长和生物量的积累ꎮ植物 木霉 病原菌互作是一个复杂的系统ꎬ诱导抗性在植物抗病过程中起着至关重要的作用ꎬ它是指在外界因子诱导下ꎬ植物启动自身防御系统ꎬ增强对病原菌的抗性现象ꎬ通常以防御性酶活性表示[２６]ꎮ已有研究表明木霉菌能通过诱导植物体内ＰＯＤ㊁ＣＡＴ㊁ＰＰＯ㊁ＰＡＬ等防御性酶活性升高ꎬ抑制病原菌入侵[２７－２９]ꎮ本试验结果显示ꎬ不同施用方式下ꎬ烟株体内哈茨木霉定殖量存在显著差异ꎬ以灌根处理各时期定殖量最高ꎬ同时哈茨木霉定殖量与烟草防御性酶活性和黑胫病防治效果呈正相关ꎮ说明在烟草疫霉胁迫下ꎬ哈茨木霉定殖量是影响烟草防御活性的关键因素ꎮ本试验以灌根处理后烟株根系ＰＯＤ㊁ＰＰＯ㊁ＰＡＬ和ＣＡＴ活性提高最显著ꎬ分别较对照升高２８.７０％㊁７１.３４％㊁６６.７５％和１０５.９２％ꎬ烟草黑胫病防治效果达到７５.９４％ꎮ与宋玉娟[３０]㊁庄敬华[３１]㊁陈捷[３２]等的研究结果一致ꎮ因此ꎬ诱导抗性可能是哈茨木霉防治烟草黑胫病的重要机制ꎮ综上所述ꎬ在移栽时利用哈茨木霉灌根ꎬ能有效促进烟株生长ꎬ提高对烟草黑胫病的防治效果ꎬ在病原菌胁迫下ꎬ有利于诱导烟株产生抗性ꎬ抑制病原菌侵染ꎬ增强抗病能力ꎮ参㊀考㊀文㊀献:[１]㊀施河丽ꎬ向必坤ꎬ彭五星ꎬ等.有机无机肥料配施对植烟土壤养分及细菌群落结构的影响[Ｊ].中国土壤与肥料ꎬ２０１９(４):５８－６６.[２]㊀夏振远ꎬ谷医林ꎬ张宏越ꎬ等.复合微生物制剂改善土壤生物学特性和防治烟草黑胫病的研究[Ｊ].中国土壤与肥料ꎬ２０２１(１):１９２－１９６.[３]㊀桑正林ꎬ杨顺强ꎬ武婷ꎬ等.不同抗性烤烟根系分泌单糖特征及其对黑胫病菌的化感效应[Ｊ].西北植物学报ꎬ２０１８ꎬ３８(４):６９８－７０５.[４]㊀张静洁ꎬ朱云云ꎬ卢亦帆ꎬ等.烟管菌 Ｍ１ 对番茄灰霉病的防治及促生作用[Ｊ].园艺学报ꎬ２０２１ꎬ４８(５):９６０－９７２. 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烟草黑胫病发病机理及防治方法研究进展
烟草黑胫病发病机理及防治方法研究进展烟草黑胫病是一种常见的烟草病害，由烟草黑胫病毒引起。
本文旨在研究烟草黑胫病的发病机理及防治方法，以期增强对该病害的认识并为烟草种植业提供可行的防治方案。
烟草黑胫病的发病机理主要涉及病毒的感染、病原体的传播和烟草的抗性反应。
病毒主要通过虫媒传播，尤其是烟蚜等昆虫。
感染后，病毒会在烟草体内进行复制和扩散，并引起病变，最终导致烟草黑胫病的发生。
烟草作为受体，会产生一系列的抗性反应，如增加细胞壁厚度、产生抗病酶和活性氧化物等，以抵御病毒的侵袭。
病毒也会利用一些机制来克服烟草的抗性反应，从而继续感染烟草。
针对烟草黑胫病的防治方法主要包括物理防治、化学防治和生物防治。
物理防治方法主要包括清除病毒源、灭杀传播媒介和破坏病毒的传播途径等。
化学防治方法主要通过喷洒杀毒剂或抗病毒药剂来抑制病毒的繁殖和传播。
长期使用化学农药会导致病毒产生抗药性，且化学农药对环境造成的污染也是一个不容忽视的问题。
生物防治方法逐渐受到关注。
生物防治方法主要通过引入天敌、利用拮抗菌和抗病毒基因的转化等手段，来控制病毒的传播和繁殖。
近年来，研究者们在烟草黑胫病的防治方面取得了一些进展。
研究发现烟草黑胫病毒在烟草体内的复制和扩散受到一些基因的调控，通过诱导这些基因的表达可以增强烟草的抗性。
一些拮抗菌对烟草黑胫病毒有一定的抑制作用，可以作为生物防治的潜在候选。
研究者们对烟草黑胫病的发病机理及防治方法进行了一系列的研究，取得了一定的进展。
对于该病害的认识还有待进一步深入，并需要进一步研究和探索更有效的防治手段。
相信随着科技的不断进步，烟草黑胫病的防治工作会取得更大的突破。
烤烟种质资源黑胫病抗性再鉴定
烤烟种质资源黑胫病抗性再鉴定烤烟是中国最重要的经济作物之一，在全球范围内烤烟的种植面积和产量均居于前列。
烟草种质资源黑胫病抗性一直是烟草遗传育种的重要课题。
黑胫病是烟草上的一种严重病害，给烤烟种植者的生产带来了很大的损失。
为了解决这一问题，科研人员一直致力于烟草黑胫病抗性的再鉴定工作。
本文将对烟草黑胫病抗性再鉴定进行详细的介绍和分析。
一、黑胫病的病原特性黑胫病是由烟草黑胫病霉所引起的一种烟草病害，主要侵害烟草的根部和地下茎，病原微生物主要侵染烟草根部，严重损害了植株的生长和发育，使植株根系腐烂，导致植株的萎蔫、死亡。
黑胫病霉可以通过感染烟草种子、土壤和植株残体等途径进行传播，对烟草产量和品质造成严重影响。
二、烤烟黑胫病抗性再鉴定的意义烟草黑胫病抗性的再鉴定工作对于提高烤烟的抗病能力、减少病害发生、保障烟草生产具有重要意义。
再鉴定工作可以鉴定出更多高抗性的种质资源，为烤烟的抗病遗传育种提供更多有益的材料。
对于已有的抗性烤烟品种，再鉴定工作可以为其抗性基因的鉴定、分析提供重要依据，促进烤烟抗性基因的利用和传播。
三、黑胫病抗性品种的筛选和鉴定1. 野外鉴定野外鉴定是通过实地观察和评价烟草植株的黑胫病发病情况，筛选出病情较轻或不发病的品种或材料。
通过大面积的野外鉴定，可以初步找到一些具有一定抗性的烟草种质资源。
2. 人工接种鉴定人工接种鉴定是通过实验室人工接种黑胫病霉对烟草材料进行鉴定。
在人工接种的条件下，可以更加准确地观察和评价烟草植株的黑胫病发病情况，确定烟草的抗病性。
3. 抗性基因鉴定通过分子生物学技术对黑胫病抗性品种的抗性基因进行鉴定和分析，可以揭示烟草品种的抗病机制和抗病基因的遗传规律，为烟草抗性育种提供重要的理论依据。
在通过鉴定筛选出的黑胫病抗性品种可以进行进一步的应用和推广。
研究人员可以利用这些品种进行杂交育种，培育更具抗病能力的新品种，为烤烟种植者提供更好的种质资源。
对于已有的黑胫病抗性品种，可以通过推广种植的方式，在烤烟生产中推广应用，提高烟草的抗病能力，减少病害发生，提高烟叶的产量和品质。
烤烟种质资源黑胫病抗性再鉴定
烤烟种质资源黑胫病抗性再鉴定烤烟是世界上最主要的一种经济作物，它在人类生活中具有非常重要的地位。
烤烟黑胫病是烟草生产中的主要病害之一，其危害性很大，给烟草生产带来了很大的损失。
烟草黑胫病的抗性对烟草的生产和发展至关重要。
针对烟草黑胫病再鉴定其抗性，将对烟草的种质资源进行更进一步的分析和研究。
一、烟草黑胫病的危害黑胫病是由凤梨鸡心草孢病菌侵染引起的一种真菌病害，其主要危害烤烟的根系。
凤梨鸡心草孢病菌在土壤中可以长期存活，一旦环境条件适宜，即可侵染寄主。
黑胫病会引起植株根系的腐烂，严重影响烤烟的生长发育，严重时会导致植株倒伏死亡，给烟农造成较大损失。
二、烤烟黑胫病抗性的研究现状烟草黑胫病的防治一直是烟草生产的难点之一。
目前，为了提高烤烟黑胫病的抗病性，烟草科研工作者一直在进行研究和探索。
研究表明，烤烟的种质资源中存在着一定程度的黑胫病抗性，这为进一步培育黑胫病抗性品种提供了有力的物质基础。
种质资源是烟草育种的重要原料，对种质资源进行研究和鉴定对于培育和推广黑胫病抗性烤烟品种具有重要意义。
再鉴定黑胫病抗性种质资源，可以系统地筛选和鉴定出具有较强抗病性的烤烟品种，为烟草的生产和改良提供了可靠的技术保障。
（一）鉴定对象的选择对烟草黑胫病的抗性再鉴定，首先要选择具有一定黑胫病抗性的种质资源。
经过前期的调查和筛选，选取出符合要求的种质资源，作为研究的对象。
（二）接种材料的培养和准备根据黑胫病的病原特点，选择相应的病原菌株进行培养。
培养好的病原菌株是进行黑胫病抗性鉴定的基础，其培养和准备要做到严谨、准确。
（三）病原接种和鉴定方法将培养好的病原菌株接种到烟草种质资源上，并加以观察和记录。
通过病情的观测和分析，对烟草种质资源的黑胫病抗性进行再鉴定。
最终得出抗病性状的评价和鉴定结果。
通过对烟草种质资源黑胫病抗性的再鉴定，可以筛选出更具抗性的烤烟品种，为烟草的生产和改良提供了可靠的技术支持。
未来的工作还需要从病原菌的遗传变异、病原与宿主的相互作用、遗传育种等方面进行更深入的研究，以期培育更具抗病性的烤烟品种，为烟草行业的可持续发展做出更大的贡献。
恩施烟区烤烟黑胫病菌致病力测定及抗性品种差异鉴定
恩施烟区烤烟黑胫病菌致病力测定及抗性品种差异鉴定黎妍妍;王文静;王林;李亚培;周红审;陈德鑫;许汝冰;李锡宏【摘要】为有效进行恩施烟区烟草黑胫病的防控,本研究采用菌丝块茎基部创伤接种法鉴定了恩施烟区烟草黑胫病菌的致病力.根据黑胫病菌菌株接种K326、红花大金元、云烟202后的AUDPC(病害流行曲线下面积)数值进行了聚类分析,将恩施烟区烟草黑胫病菌划分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 3种致病型.3种致病型病原菌没有表现出典型的强、中、弱致病特性.7个抗性烟草品种对不同致病型黑胫病菌表现出抗性差异,革新3号对3种致病型菌株均表现出较好的抗性.【期刊名称】《中国烟草科学》【年(卷),期】2018(039)005【总页数】5页(P94-98)【关键词】恩施;黑胫病菌;致病力;抗性差异【作者】黎妍妍;王文静;王林;李亚培;周红审;陈德鑫;许汝冰;李锡宏【作者单位】湖北省烟草科学研究院,武汉430030;华中农业大学植物科技学院,湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室,武汉430070;中国农业科学院烟草研究所,青岛266100;湖北中烟工业有限责任公司,武汉430040;湖北省烟草科学研究院,武汉430030;湖北中烟工业有限责任公司,武汉430040;中国农业科学院烟草研究所,青岛266100;湖北省烟草科学研究院,武汉430030;湖北省烟草科学研究院,武汉430030【正文语种】中文【中图分类】S435.72烟草黑胫病是由寄生疫霉烟草致病型[Phytophthora parasitica var.nicotianae (Breda de Haan Tucker)]引起的烟草生产中的一种土传病害，常表现为黑胫、黑膏药、穿大褂、碟片状、腰烂等症状。
1950 年，烟草黑胫病在中国的黄淮地区首次发现[1]。
目前，该病害在我国各主产烟区均有不同程度的发生，且常与烟草青枯病混合发生，故危害更为严重。
烟草黑胫病流行与否取决于病原菌致病性强弱和数量、烟草抗病程度和环境条件[2]，因此，进行黑胫病菌致病力测定与分析是有效进行病害防治的关键。
简述烟草黑胫病的发生与防治措施
简述烟草黑胫病的发生与防治措施摘要：烟草是我国重要的经济作物，烟草行业利税贡献在中央财政收入中占据较大比重，近年来各种烟草病害越来越严重，使烟草的种植饱受威胁，其中烟草黑胫病是一种遍布全世界的烟草土传类病害，发病程度无法预计，使烟草减产甚至绝产，因此研究烟草黑胫病的病因、病症和发病规律，以此进行确诊病害，同时对于采用应时、恰当的防治方式具巨大的价值，本文对以上几个方面进行了概述。
关键词：烟草黑胫病；病害循环；综合防治一、我国烟草黑胫病的发生与危害烟草黑胫病又称烟草疫病，就烟农而言，其俗名为黑根、黑杆疯、乌头病，是烟草种植中最具减产甚至绝产风险的病虫害之一。
1986年，继在印尼爪哇烟草上首次抛头露面后的几十年中，烟草黑胫病在美国多半烟草种植区相继出现，迅传播并造成严重减产。
直至目前为止，世界范围内许多国家和地区的烟田都受到烟草黑胫病的侵染与危害[1]。
在我国，1950年黄淮烟区首次发现，目前，皖、鲁、豫等烟草种植区成为烟草黑胫病重灾区，云贵川等烟草种植区都遭受波及，更棘手的问题是多年连作和土质黏重产区还伴随着青枯病和根结线虫病的混发。
在70、80年代，烟草种植区由于气候湿热，降水多且地势低，耕作方法和土质黏重等因素造成了该病蔓延，烟叶大幅减产，造成巨额的经济损失。
烟草黑胫病酿成了烟草种植上极其惨重的经济损失，是烟草种植中仅次于烟草病毒病的第二大病害。
二、烟草黑胫病症状烟草黑胫病对烟草的危害贯穿于烟草生长的分苗期、团棵期、旺长期和成熟期的各个生育阶段，种植现状表明苗床期发病率远远低于大田成株期，茎基部是集中侵染部位，大田症状为：a.黑膏药。
降水充沛时，病斑早期为水渍状呈暗绿色，之后急速扩增至中央呈黑褐色，轮纹形似“膏药状”；b：黑胫。
茎基部被病菌侵染后，黑斑围绕烟茎向上扩散，烟叶由根至顶变黄；c：穿大褂。
即烟株茎基部侵染后向髓部扩散，叶片根至顶变黄，暴雨后气温高、日光灼，整株烟叶萎蔫；d：腰烂。
烟株中央叶片发病由主脉扩展至叶基，再延伸到茎部，从而致使茎中部腐烂，俗称“腰烂”；e：碟片状。
烟草黑胫病拮抗菌的筛选及其生物效应
烟草黑胫病拮抗菌的筛选及其生物效应曹明慧;冉炜;杨兴明;沈其荣;沈标【摘要】Tobacco black shank is one of the most serious soil-borne diseases in tobacco production. Biological control has been proved effective and environment-friendly, but screening of antagonists against pathogens is the basic work in bio-controlling. Twelve strains of bacteria antagonist against Phytophthora parasitica var. nicotianae were isolated by using the plate-confrontation method from rhizosphere soils under healthy tobacco plants in tobacco fields seriously infected with the pathogen. The averaged inhabiting rates of the antagonists ranged from 59.4％ to 71.1％. The best performer Strain C-5, which was identified as Paenibacillus polymyxa (C-5) based on biochemical tests and 16S rRNA sequence similarity, was then selected for further experiments. Results from antibiotic spectrum experiments show that Strain C-5 was also effective in inhibiting other plant pathogen such as Fusarium osyporunm f. sp melonis , Fusarium osyporum f. sp cucumerinum and P. capsici. Pot experiments show that application of bio-organic fertilizer supplemented with Strain C-5 suppressed the incidence of tobacco black shank by 80％as compared with the control. To our knowledge, this is the first report on the microbiological antagonism of Strain Paenibacillus against Phytophthora parasitica var. nicotianae.%烟草黑胫病是烟草生产中危害最严重的土传病害之一,生物防治具有抗病和环保的作用,获得高效拮抗菌株是进行生物防治研究的基础.本研究采用平板对峙法,在烟草黑胫病发生严重的田块中选取健康烟株,从其根际土壤中分离筛选到12株对烟草黑胫病病原菌Phytophthora parasitica var.nicotianae具有拮抗效果的菌株,抑菌率59.4%～71.1%.选择抑菌率最高的C-5菌株进行试验.经鉴定C-5菌株为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa).抗菌谱试验结果表明:C-5菌株不仅对黑胫病病原菌有较强的拮抗作用,同时对甜瓜、黄瓜枯萎病病原菌和辣椒疫病病原菌也具有拮抗作用.苗期盆栽试验结果表明:利用C-5菌株发酵制备的微生物有机肥能抑制烟草黑胫病的发生,苗期防治率达80%.本文首次报道了多粘类芽胞杆菌菌株对烟草疫霉有拮抗作用.【期刊名称】《土壤学报》【年(卷),期】2011(048)001【总页数】9页(P151-159)【关键词】烟草黑胫病;微生物有机肥;多粘类芽孢杆菌;烟草疫霉【作者】曹明慧;冉炜;杨兴明;沈其荣;沈标【作者单位】南京农业大学江苏省固体有机废弃物资源化高技术研究重点实验室,南京,210095;南京农业大学江苏省固体有机废弃物资源化高技术研究重点实验室,南京,210095;南京农业大学江苏省固体有机废弃物资源化高技术研究重点实验室,南京,210095;南京农业大学江苏省固体有机废弃物资源化高技术研究重点实验室,南京,210095;南京农业大学江苏省固体有机废弃物资源化高技术研究重点实验室,南京,210095【正文语种】中文【中图分类】S154.39烟草黑胫病是烟草生产中危害最严重的土传病害之一,在我国云贵川三大烟区均有不同程度发生,每年经济损失高达亿元,仅次于烟草病毒病[1]。
黑胫病菌在烟草品种间的侵染差异及I-S关系研究
黑胫病菌在烟草品种间的侵染差异及I-S关系研究高正良;周本国;雷艳丽【期刊名称】《中国烟草学报》【年(卷),期】2004(010)004【摘要】1997～1999年在田间通过人工接菌方法比较了12个烟草品种间黑胫病菌侵染差异.结果表明,属高度感病的品种有K394、云烟85、红大;属中等程度偏感病的品种有贵烟11、Nc89;属中等程度感病如VA116、Nc37NF、K358、Rg11;属中等抗病有K346、Nc82;高抗病类型有coker371.对烟草黑胫病根茎部发病情况进行系统调查,获得12个品种的普遍率与严重度间对应关系数据,并且分析了两者的关系(I-S关系).结果表明,寄主生育阶段影响烟草黑胫病的I-S关系.各品种前期病株率不能真实反映各品种感病程度的差异,以中后期的病情指数为标准比较品种间抗感染程度较为适宜.不同品种的I-S关系均可用直线方程描述.【总页数】5页(P31-35)【作者】高正良;周本国;雷艳丽【作者单位】安徽农科院烟草研究所,凤阳,233100;安徽农科院烟草研究所,凤阳,233100;安徽农科院烟草研究所,凤阳,233100【正文语种】中文【中图分类】S572.034【相关文献】1.烟草品种防御酶活性对黑胫病菌响应差异 [J], 王戈;杨焕文;赵正雄;李佛琳;易建华2.烟草品种黑胫病抗性鉴定及不同接种方法间的相关性分析 [J], 于海芹;焦芳婵;李德团;张谊寒;卢秀萍3.烟草黑胫病菌侵染叶片的动态 [J], 姚恒;方敦煌;肖炳光4.黑胫病菌侵染过程中油菜响应基因的表达分析 [J], 郝丽芬;燕孟娇;房永雨;史志丹;李子钦;韩冰5.黑胫病菌(Leptosphaeria biglobosa)在油菜叶片和茎中的侵染过程观察 [J], 史志丹;宋培玲;郝丽芬;皇甫海燕;燕孟娇;杨永青;吴晶;赵丽丽;李子钦因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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病力有较 大差 异 ］ 。龚龙 英等研究 指出 ， 不 同接种方 法对烟 草黑胫病 菌致病力测定有一定 的影响 ， 甚至会 产生较大差异 ， 但未作系统研 究 ］ 。本试 验就 影 响烟草 黑胫病 菌致 病力 的 主要 因子及其互作效应进 行研究 ， 以期 为今后致 病力 分化测
定方法的选择 、 寄主植物抗病 性的鉴定 以及烟 草黑胫病 的综
江苏农业科学
２ ０ １ ３年第 ４ １卷第 １ ２期
马国胜 ， 高智谋． 烟 草黑胫病菌致病力 的影响 因子及其互作效应［ Ｊ ］ ．江苏农 业科 学， ２ ０ １ ３ ， ４ １ （ １ ２ ） ： ｌ ｌ １ —１ １ ３
烟草黑胫病 菌致病 力 的影 响 因子及其互作效应
马 国胜 ，高智谋
Ｂ ｒ ｅ ｄ ａ ｄ ｅ Ｈ ａ ａ ｎ ） 引起 的烟草主要病害之一 ， 可 以危害所有栽培 烟草 ， 烟株一旦发病 ， 往往都是整株死亡 ， 严重影响烟草生产 ， 是烟草病害 的攻 克难题 之 一 ， 在 中国各 烟 区广 泛发 生 。 我国过去在进 行抗 黑胫 病品种鉴 定 中， 发现不 同地 区菌株致
１ ． ３ 培 养基 （ 液） 的配制
１ ． ３ ．１ Ｌ Ｂ Ａ 培 养 基 取 ６ ０ ｇ利 马 豆 粉 加 入 去 离 子 水 １ ０ ０ ０ ｍ Ｌ ， ６ ０ ｏ Ｃ恒温水浴加热 １ ｈ ， 用 ４层纱布过滤 ， 取滤液 ， 用去离子水定容至 １ ０ ０ ０ ｍＬ ， 加入琼脂 ２ ０ ｇ ， 在微波炉 内加热
得到有大量孢子的孢子悬 浮液 。取样镜 检测定其浓 度 ， 并将
密度 ２ １万 一 ２ ２ ． ５万￣． ／ ｈ ｍ 。条播时行距 ４ ０ ｃ ｍ 为宜 。
态环境 与植物保护 。Ｅ—ｍａ ｉ ｌ ： ｇ ｏ ｓ ｈ ｉ ｎ ｅ ｍ ａ ＠１ ６ ３ ． ｃ ｏ ｎ。 ｒ
１ ． ４ ． １ 游动孢子悬浮液灌根接种
供试 菌株 在 Ｌ Ｂ Ａ平板 上
２ ５℃暗培养 ３ ｄ ， 从菌落边 缘切取 １ ０块大小 约 ２ ｍｍ ｘ ２ ａ ｒ ｉ ｎ
１ ． ２ 供 试 寄 主、 Ｎ Ｃ ８ ９ 、 红大 ， 均 由安徽 省农 业科 学 院烟草科学研究所提供 。将种子装在布袋内， 催芽至露 白 ， 然 后播入盛有灭菌土壤的盆钵 中进行培 养 ， 待 烟苗长至 ３张真 叶时移栽到底部打孔的塑料杯内 （ ２孑 Ｌ ／ 杯） ， 每天早 晚各浇水 １次 ， 每周用 Ｈ ｏ ａ ｇ ｌ ａ ｎ ｄ完全营养液喷 １ 次 。待 烟苗长至 ７～ ８ 张叶时 ， 供接种用 。
合防治等相关研究提供参考 。
１ 材 料 与 方 法 １ ． １ 供 试 菌 株
至琼脂完全熔化 ， 趁热分装 ， １ ２ １℃灭菌 ２ ０ ｍ ｉ ｎ 。
１ ． ３ ． ２ １ ０ ％Ｖ Ｃ培养液 灭菌 ２ ０ ａ ｒ ｉ ｎ ， 待用 。
１ ． ４ 接 种 方 法
参照 马国胜等方法 配制 ， １ ２ １℃
（ １ ． 安徽农业大学植物保护学院 ， 安徽合肥 ２ ３ ０ ０ ３ ６ ； ２ ． 苏州农 业职业技术 学院生态环境 系， 江苏苏州 ２ １ ５ ０ ０ ８ ）
摘要 ： 采用 ３因素随机 区组 设计方法研究接种方法 、 烟草 品种 、 菌种 ３种 因子对烟 草黑胫病 菌致病力 的影 响。结 果表明 ： 各 因子对 烟草 黑胫 病菌致病力 的影响依次 为接 种方法 ＞烟草 品种 ＞菌种 ， 不 同接种方法接种后 的病斑长度依 次为菌丝块茎基部创伤接种 ＞ 游 动孢子悬浮液灌根接种 ＞ 菌 丝块茎基 部不创 伤接种 ， 不 同烟草品种接种后 的病斑 长 度依次为红大 ＞Ｇ １ ４ ０＞Ｎ Ｃ ８ ９ ， 接种不 同菌株后 的病斑 长度依次为 Ｂ Ｚ一 ８＞Ｆ Ｙ一１ ０＞Ｓ Ｘ一 ３ ； 接种方法 与烟草 品种 间的 互 作效应达到 了显著水平 ， 其他因子互作效应均未 达到显著水平 。 关键词 ： 烟草 黑胫 病菌 ； 致病力 ； 接种方法 ； 烟草品种 ； 菌株
供试 烟草疫霉 菌菌株 为 Ｂ Ｚ一８ 、 Ｆ Ｙ一１ ０ 、 Ｓ Ｘ一３ ， 保存 于
安徽农业 大学植物病原真 菌研究室 ， 均分 离 自烟 草新鲜病 组
织， 分别来 自皖北烟区的安徽省亳州市 、 江淮烟区的安徽省风 阳县 、 皖南烟区的安徽 省歙县。
收稿 日 期： ２ ０ １ ３ — ０ ９一 ｏ ３ 基金项 目： 国家公益性行 业 （ 农业 ） 科 研专项 （ 编号 ： ３—２ ０） ； 江苏 省 高校哲学社会科学研究基金 （ 编号 ： ２ ０ １ １ Ｓ Ｊ Ｂ ７ ９ ０ ０ ２ ３ ） 。 作者简介 ： 马国胜 （ １ ９ ７ ４ 一） ， 男， 安徽 定远人 ， 副教授 ， 研究 方 向为生
的菌丝块 ， 移人盛有 ２ ０ ｍＬ １ ０ ％ Ｖ Ｃ培养液 、 直径 ９ ｏ ｍ 的培
养皿 中， ２ ５℃暗培养 ３ ｄ ， 用灭菌镊子把菌丝丛转移到另一 无 菌培养皿 中 ， 加入 灭 菌 水 ２ ０ ｍＬ ， 并 加 入 ４滴 土 壤 浸 出液 ， ２ ５℃ 光 照培养 ， 每１ ２ ｈ 换１ 次灭菌水 ， 并同时加入 ４滴土壤 浸出液 ， 直 至孢子囊大量形成 。待大量孢子囊产生后 ， 将培养 皿置于 ４℃冰箱 中 １ ５ ｍ ｉ ｎ ， 取出置于 ２ ５℃温度下 ３ ０ ｍ ｉ ｎ ， 即
中图分类号 ： ￥ ４ ３ ５ ． ７ ２ 文献标志码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ ２—１ ３ ０ ２ （ ２ ０ １ ３ ） １ ２一 Ｏ １ １ １— ０ ３
烟 草 黑 胫病 是 由烟 草 疫霉 菌 （ Ｐ ｈ ｏ ｐ ｈ ｔ ｈ ｏ ｒ ａ ｎ ｉ ｃ ｏ ｔ ｉ ａ ｎ ａ ｅ