细胞生物学实验_实验四 细胞膜的通透性和细胞连接观察
通透性实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解细胞膜通透性的基本概念和影响因素。
2. 探究不同物质对细胞膜的通透性差异。
3. 分析细胞膜对不同物质的通透性规律。
二、实验原理细胞膜是细胞与外界环境进行物质交换的重要结构，具有选择透过性。
细胞膜对不同物质的通透性受到多种因素的影响，如分子量、脂溶性、电解质性质等。
本实验通过观察不同物质在细胞膜中的渗透情况，分析细胞膜的通透性规律。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：红细胞、蒸馏水、葡萄糖、氯化钠、尿素、酚酞、蒸馏水、氯化钾、酒精、显微镜等。
2. 实验仪器：烧杯、滴管、试管、酒精灯、温度计、计时器等。
四、实验方法1. 将红细胞分别放入含有葡萄糖、氯化钠、尿素、酚酞、氯化钾的溶液中，观察红细胞在不同溶液中的变化。
2. 将红细胞放入蒸馏水中，观察红细胞在蒸馏水中的变化。
3. 将红细胞放入酒精中，观察红细胞在酒精中的变化。
4. 分别在不同溶液中观察红细胞的溶血现象，记录溶血时间。
5. 分析实验结果，得出细胞膜的通透性规律。
五、实验步骤1. 将红细胞用生理盐水洗涤三次，以去除细胞膜上的杂质。
2. 将红细胞分别放入含有葡萄糖、氯化钠、尿素、酚酞、氯化钾的溶液中，观察红细胞在不同溶液中的变化，记录溶血时间。
3. 将红细胞放入蒸馏水中，观察红细胞在蒸馏水中的变化，记录溶血时间。
4. 将红细胞放入酒精中，观察红细胞在酒精中的变化，记录溶血时间。
5. 分析实验结果，得出细胞膜的通透性规律。
六、实验结果与分析1. 在葡萄糖溶液中，红细胞溶血时间为30分钟。
2. 在氯化钠溶液中，红细胞溶血时间为15分钟。
3. 在尿素溶液中，红细胞溶血时间为10分钟。
4. 在酚酞溶液中，红细胞溶血时间为5分钟。
5. 在氯化钾溶液中，红细胞溶血时间为2分钟。
6. 在蒸馏水中，红细胞溶血时间为30分钟。
7. 在酒精中，红细胞迅速溶血。
通过实验结果分析，得出以下结论：1. 细胞膜对不同物质的通透性存在差异，分子量越小、脂溶性越高、电解质性质越弱，通透性越大。
细胞膜通透性的观察
实验步骤：
细胞生物学实验
东北师大 生科院
• 1．取试管2支，各加入5ml蒸馏 水，再分别加入0.5ml稀释的鸡血 和人血，轻轻摇匀，注意观察溶 液颜色变化，如发生溶血，记录 溶血时间。
• 2．取试管2支，各加入0.17mol/L 的氯化钠溶液5ml，再分别加入 0.5ml稀释的鸡血和人血，轻轻摇 匀，注意观察溶液颜色变化，如 发生溶血，记录溶血时间。
细胞生物学实验
东北师大 生科院
实验目的 实验原理 实验步骤 作业 思考
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人工合成脂双层对不同物质的选择 性通透
低渗对细胞的影响
实验目的 实验原理 实验步骤 作业 思考
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5ml稀释的鸡血和人血，轻轻摇匀，注意观察溶液颜色变化，如发生溶血，记录溶血时间。
了解细胞膜对不同物质通透性的差异 17mol/L硝酸钠、0.
ห้องสมุดไป่ตู้
细胞生物学实验
总结细胞膜对不同性质物质通透性的规律
细胞生物学实验
东北师大 生科院 实验步骤：
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17mol/L氯化铵、0. 12mol/L硫酸钠、0.
0.12mol/L草酸铵、0.12mol/L硫
酸钠、0.32mol/L葡萄糖、 32mol/L葡萄糖、0.
总结细胞膜对不同性质物质通透性的规律 建立等渗概念并理解溶血原理
作业
细胞生物学实验 0.32mol/L甘油、0.32mol/L乙醇、
东北师大 生科院 17mol/L醋酸铵、0.
• 观察红细胞的溶血现象 • 建立等渗概念并理解溶
血原理
细胞生物学实验
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实验目的 实验原理 实验步骤 作业 思考
细胞生物学实验
细胞膜通透性实验报告
细胞膜通透性实验报告一、实验目的细胞膜是细胞与外界环境进行物质交换的重要屏障，其通透性对于细胞的正常生理功能至关重要。
本实验旨在研究不同物质对细胞膜通透性的影响，加深对细胞膜结构和功能的理解。
二、实验原理细胞膜主要由磷脂双分子层和蛋白质组成，具有选择性通透的特性。
一些小分子物质如乙醇、甘油等可以自由通过细胞膜，而大分子物质如蛋白质、多糖等则难以通过。
此外，一些物质可以改变细胞膜的结构和功能，从而影响其通透性。
例如，低渗溶液会使细胞吸水膨胀甚至破裂，而高渗溶液则会使细胞失水皱缩。
三、实验材料1、材料：鸡血红细胞2、试剂：017mol/L 氯化钠溶液、085%氯化钠溶液、10%乙醇溶液、30%乙醇溶液、08mol/L 甲醇溶液、08mol/L 丙三醇溶液、台盼蓝染液3、仪器：显微镜、离心机、移液器、试管、吸管等四、实验步骤1、制备鸡血红细胞悬液从新鲜鸡血中加入适量抗凝剂（如柠檬酸钠），离心（1000r/min，5min）去除血浆和白细胞等成分。
用 085%氯化钠溶液洗涤红细胞 2-3 次，最后制成红细胞悬液。
2、观察红细胞的正常形态取一滴红细胞悬液滴在载玻片上，盖上盖玻片，在显微镜下观察红细胞的形态，记录其特征。
3、低渗溶液对细胞膜通透性的影响取两支试管，分别加入 5ml 蒸馏水和 017mol/L 氯化钠溶液。
向两支试管中各加入 1ml 红细胞悬液，轻轻摇匀，静置一段时间。
观察并记录红细胞在低渗溶液（蒸馏水）和等渗溶液（017mol/L氯化钠溶液）中的形态变化。
4、醇类物质对细胞膜通透性的影响取三支试管，分别加入 2ml 10%乙醇溶液、30%乙醇溶液和08mol/L 甲醇溶液。
向每支试管中加入 1ml 红细胞悬液，轻轻摇匀，静置一段时间。
观察并记录红细胞在不同浓度醇类溶液中的形态变化。
5、丙三醇对细胞膜通透性的影响取两支试管，分别加入 2ml 08mol/L 丙三醇溶液和 085%氯化钠溶液。
向每支试管中加入 1ml 红细胞悬液，轻轻摇匀，静置一段时间。
常见的细胞生物学实验
绪言一、实验课目的本学科是一门实验性很强的学科，其实验课教学是整个教学的重要组成部分。
目的有如下几方面：（一）验证理论。
通过对理论课所学理论的验证，进一步加深对教学内容的理解、巩固和提高。
（二）通过基本技能的训练以及对实验结果的观察分析，使学生了解并掌握细胞生物学有关的实验技术方法，进而培养学生动手实践、观察分析和解决问题的能力。
（三）培养学生实事求是的科学态度和科学的思维方法，为其后续课的实验及今后的医学研究打下基础。
二、实验课要求（一）学生在实验前应认真预习实验指导及教材中与实验有关的章节，对实验课的原理、内容及方法有初步的了解。
（二）在实验中要认真操作、仔细观察、分析并及时做好记录。
（三）要注重动手能力的培养。
（四）在实验中要注重基本技能的训练及实验仪器、器械的使用方法。
对基本的实验技能要反复训练直至基本掌握。
（五）实验结束后，要根据实验过程中的记录和实验指导的要求，实事求是、认真的写好实验报告，不得抄书或借阅他人的报告参考。
三、实验室规则（一）遵守实验纪律，不迟到、不早退或无故缺席。
（二）进入实验室要穿好白大衣。
（三）进实验室后要按学号对号入座，不能随意更换座位。
要保持肃静。
（四）要严肃认真地进行实验。
实验期间不得进行任何与实验无关的活动。
（五）实验中各种用品使用后应放回原处。
示教标本应按顺序观察，不能任意移动标本，以免妨碍他人观察。
（六）要爱护仪器、标本和器械，如有损坏，应及时报告老师，以便修理或更换。
损坏仪器、器械和标本者应按规定进行赔偿。
（七）要注意节约实验材料、药品和水、电等资源。
（八）保持实验室内清洁整齐。
实验废物及纸屑应放到指定地点，不得随意乱丢。
实验结束后要认真清理各自的实验台面，将器械清洗后点清数目并摆放整齐。
值日生负责清扫实验室，清扫结束后要关好水、电、门窗等，经教师允许方可离开实验室。
附：实验课绘图要求学生每人准备一支HB铅笔、直尺和橡皮。
四、实验教学的内容实验顺序实验内容实验一普通光学显微镜的结构和使用实验二动物细胞的基本形态观察和显微测量实验三细胞组分的化学反应实验四线粒体的活体染色实验五液泡系的活体染色实验六细胞膜通透性的观察实验七细胞计数实验八细胞超微结构电镜照片的识别实验九细胞分裂实验十细胞的原代和传代培养实验十一细胞融合第一次实验：普通光学显微镜的结构和使用动物细胞的基本形态观察和显微测量第二次实验：细胞组分的化学反应线粒体的活体染色液泡系的活体染色第三次实验：细胞膜通透性的观察细胞计数第四次实验：细胞超微结构电镜照片的识别细胞分裂细胞的原代和传代培养录像常用实验动物的了解和解剖器械的使用一、常用实验动物常用的实验动物有蟾蜍、小白鼠、大白鼠、豚鼠、猫、兔和狗等。
细胞生物学实验复习
实验一、细胞膜的渗透性1. 细胞膜具有对物质选择透过的生理功能。
脂溶性越高通透性越大，水溶性越高通透性越小；非极性分子比极性容易透过，小分子比大分子容易透过。
水分子可通过由膜脂运动而产生的间隙。
非极性的小分子如O2、CO2、N2可以很快透过脂双层，不带电荷的极性小分子，如尿素、甘油等也可以透过人工脂双层，尽管速度较慢，分子量略大一点的葡萄糖、蔗糖则很难透过，而膜对带电荷的物质如：H+、Na+、K+、Cl–、HCO3 –是高度不通透的。
2.hemolysis（溶血现象）：渗入红细胞的溶质能提高红细胞的渗透压，使水进入细胞，引起细胞吸水胀破；即红细胞膜破裂，血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。
3.i sotonic solution（等渗溶液）：渗透压与血浆渗透压相等的溶液称为等渗溶液。
4.Hypertonic solution（高渗溶液）：渗透压高于血浆渗透压的溶液称为高渗液。
5.Hypotonic solution（低渗溶液）：渗透压低于血浆渗透压的溶液称为低渗溶液。
6.semipermeable（半透性）：膜或膜状结构只允许溶剂(通常是水)或部分溶质(一般为小分子物质)透过，而不允许其他溶质(一般为大分子物质)透过的特性。
7.osmosis（渗透作用）：膜两侧溶液浓度存在差异，造成化学势能差，在势能差的驱动下，溶剂穿过对溶质不透膜的过程。
一、实验材料及作用：150 mmol/L NaCl , 蒸馏水，5 mmol/L NaCl，65 mmol/L NaCl，0.8 mol/L甲醇，0.8 mol/L 乙醇，0.8 mol/L丙醇，0.8 mol/L乙二醇，0.8 mol/L丙三醇，2%Triton X-100，氯仿(三氯甲烷)。
1.NaCl的作用：将正常红细胞悬浮于不同浓度的NaCI溶液中：等渗溶液中的红细胞保持正常大小和双凹圆碟形；渗透压递减的一系列溶液中，红细胞逐步胀大并双侧凸起，当体积增加30%时成为球形；体积增加45%～60%则细胞膜损伤而发生溶血，这时血红蛋白逸出细胞外，仅留下一个双凹圆碟形细胞膜空壳，称为血影细胞（ghost cell）。
细胞生物学实验
实验一细胞膜的渗透性一、实验目的1、了解细胞膜对物质渗透的一般规律。
2、了解溶血现象及其发生机制。
二、实验原理细胞膜为一种半透膜，对物质的通透具有选择性。
当红细胞放入低渗溶液时，细胞吸水膨胀而发生溶血。
当红细胞放入含有不同溶质的等渗溶液中时，由于细胞膜对不同溶质的透性不同，细胞发生溶血的时间也会不同，故发生溶血现象时间长短可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。
三、实验操作1、从集市买适量活鸡血，取5ml（防止污染），放入盛有20ml Alsever’s液瓶中，混匀后置冰箱保存备用（2周内使用）。
2、使用前取用Alsever’s液保存的新鲜鸡血5ml，加入8ml的0.128mol/L NaCl溶液，小心混匀，1000r/min 离心5min，如此3次洗涤，最后配成30%的鸡红细胞（CRBC）悬液。
3、取11支试管，按附表中所示测试溶液，分别取样各3ml，作出标记后，各管均加入红细胞悬液2滴，混匀后静置于室温中，观察各支试管中发生溶血的时间及变化。
四、观察结果1、试管内液体分两层：上层浅黄色，下层红色不透明为不溶血（―）,镜检红细胞完好呈双凹盘状。
2、如果试管内液体浑浊，上层带红色者，称不完全溶血（+或++），镜检部分红细胞呈碎片。
3、如果试管内液体变红色而透明者，称完全溶血（+++），镜检发现细胞全部呈碎片。
五、实验建议1、鸡血在离心时，试管均需在扭力天平上平衡。
2、目测红细胞体积或置于带刻度的离心管中，加入生理盐水配成30%的红细胞悬液。
、3、试管中有红细胞和测试溶液时，不应强力摇晃，以免造成人为的红细胞破裂。
实验报告及作业※目测判断标准：快速溶血：+++；慢速溶血：++或+；不溶血：―实验二核酸(DNA和RNA)的细胞核定位观察一、实验目的1、了解和学习两类核酸显示的原理及操作程序。
2、了解细胞中DNA和RNA的分布。
二、实验原理细胞内的DNA主要分布在细胞核内，RNA主要存在于细胞质中。
甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同：甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。
细胞生物学实验指导
细胞生物学实验指导2009 年11 月目录前言 (1)细胞生物学实验守则 (2)实验一：动物细胞的基本形态观察和细胞计数 (3)实验二：细胞凝集反应和细胞膜通透性的观察 (6)实验三：聚乙二醇（PEG）介导的细胞融合 (8)实验四：线粒体和液泡系的超活染色与观察 (9)实验五：植物细胞微丝束的光学显微镜观察 (10)实验六：叶绿体的分离与荧光观察 (13)实验七：DNA的显示——Feulgen反应 (15)实验八：小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察 (18)实验九：小鼠骨髓染色体标本的制备与观察 (20)实验十：染色体C-带技术 (23)实验十一：细胞内化学成分的显示方法——酸性磷酸酶的显示 (25)实验十二：开放性实验——蚕豆（Vicia faba）根尖细胞微核监测技术 (27)细胞生物学实验考试大纲····························································错误！未定义书签。
实验考试试题示例········································································错误！未定义书签。
细胞生物学实验材料
实验一荧光显微镜的原理和使用实验二叶绿体的分离与荧光观察实验三线粒体的活体染色与观察实验四细胞膜的通透性实验五 DNA的细胞化学——Feulgen反应实验六植物染色体标本的制备和观察实验七细胞计数实验八植物细胞骨架的光学显微镜观察实验九植物原生质体的分离和活性鉴定实验十环境因素诱变染色体改组的观察实验一荧光显微镜的原理和使用一、实验目的了解荧光显微镜的构造及其维护方法；掌握荧光显微镜的使用方法和使用中的注意事项。
二、实验原理荧光显微镜是选择由高压汞灯或类似光源发出一定波长的激发光，激发标本内的荧光物质发射出各种不同颜色的荧光后，观察细胞某种特异成分的分布状态的显微镜。
与普通光学显微镜一样，荧光显微镜也有物镜、目镜、调焦装置、光源、聚光器、载物台、镜身等组成部分。
所不同的是，荧光显微镜增加了激发光源和滤片系统，它投射到样品上的是特定波长的激发光而不是普通的可见光。
在激发光的作用下，样品中的荧光物质产生图1荧光显微镜发射光（即荧光）。
因此，荧光显微镜观察到的是样品中能产生荧光的部分所呈现的荧光映象，普通光学显微镜则是整个样品的可见光透射和折射影像。
某些物质在—定短波长的光（如紫外光）的照射下吸收光能进入激发态，从激发态回到基态时，就能在极短的时间内放射出比照射光波长更长的光(如可见光)，这种光就称为荧光。
若停止供能荧光现象立即停止。
有些生物体内的物质受激发光照射后直接发出荧光，称为自发荧光（或直接荧光），如叶绿素的火红色荧光和水质素的黄色荧光等。
有的生物材料本身不发荧光，但它吸收荧光染料后同样也能发出荧光，这种荧光称为次生荧光（或间接荧光），如叶绿体吸附吖啶橙后可发桔红色荧光。
利用荧光显微镜对可发荧光物质进行检测时，将受到许多因素的影响，如温度、光、淬灭剂等。
因此在荧光观察时应抓紧时间，有必要时立即拍照。
三、实验用品荧光显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、解剖刀、0.01%吖啶橙染色液（acridine orange）、蒸馏水、水葫芦叶片四、实验内容与方法（一）荧光显微镜的构造1、基本装置荧光显微镜的基本装置是由普通光学显微镜加上一些附件（如荧光光源、激发滤片、二向色镜和阻断滤片等）的基础上组成的。
实验报告利用电子显微镜观察细胞结构
实验报告利用电子显微镜观察细胞结构实验报告：利用电子显微镜观察细胞结构一、实验目的本实验旨在通过电子显微镜观察细胞的精细结构，深入了解细胞的组成、形态和功能，提高对细胞生物学的认知水平。
二、实验原理电子显微镜利用电子束替代可见光，通过电磁透镜对电子束进行聚焦和成像。
由于电子的波长极短，因此电子显微镜能够提供比光学显微镜更高的分辨率，可以清晰地显示细胞内的细胞器、膜结构等细微结构。
三、实验材料与设备1、实验材料培养的细胞样本（如肝细胞、神经细胞等）固定剂（如戊二醛、锇酸等）脱水剂（如乙醇、丙酮等）包埋剂（如环氧树脂）超薄切片机电子显微镜2、实验设备移液器离心机烤箱镀膜仪四、实验步骤1、细胞固定将培养的细胞用磷酸盐缓冲液（PBS）冲洗，去除培养基。
加入适量的戊二醛固定液，室温下固定 1 2 小时。
用 PBS 冲洗，去除多余的固定液。
2、脱水处理依次将细胞样本放入不同浓度的乙醇溶液（30%、50%、70%、90%、100%）中进行脱水，每次 10 15 分钟。
3、包埋将脱水后的细胞样本放入环氧树脂中，在烤箱中聚合包埋。
4、超薄切片制作使用超薄切片机将包埋好的样本切成厚度约 50 70 纳米的超薄切片。
5、切片染色将超薄切片放在铜网上，用铀盐和铅盐进行染色，增强对比度。
6、电子显微镜观察将染色后的切片放入电子显微镜中，调整参数进行观察和拍照。
五、实验结果与分析1、细胞膜电子显微镜下，细胞膜呈现为两层暗线夹着一层亮线的结构，厚度约为 7 10 纳米。
可以清晰地看到细胞膜上的蛋白质分子和糖链。
2、细胞质细胞质中可以观察到线粒体、内质网、高尔基体等细胞器。
线粒体呈现为椭圆形或棒状，具有双层膜结构，内膜向内折叠形成嵴，嵴上分布着大量的酶，是细胞进行有氧呼吸的主要场所。
内质网分为粗面内质网和滑面内质网。
粗面内质网上附着有核糖体，是蛋白质合成的场所；滑面内质网与脂质合成和解毒作用有关。
高尔基体由扁平膜囊、小泡和大泡组成，参与细胞的分泌活动。
xu《细胞生物学实验》教案
实验一细胞形态结构的观察与显微测量（必做）一、实验目的：1．熟悉动物细胞、植物细胞的基本形态结构2．掌握临时装片的制作方法3．掌握显微测量的原理和方法4．掌握生物绘图的方法。
二、实验原理：细胞是生物体结构功能的基本单位，其形态与功能相适应。
不同类型的细胞具有不同的大小、形态和结构，以适应其功能。
通过制作临时装片，可以观察很多细胞的结构，并借助测微尺测量细胞直径，进而获得细胞的体积。
三、实验仪器、试剂及材料：仪器：光学显微镜（每人1台），载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、牙签、滴管测微尺（镜台测微尺；目镜测微尺）试剂：1%碘液、瑞氏染液（如果观察血细胞，则需瑞氏染液）材料：洋葱、红辣椒、紫色落葵（或紫罗兰）、血细胞悬液、口腔上皮细胞四、实验步骤：1．洋葱鳞茎表皮细胞的观察在载玻片中央滴一滴1%碘液用剪刀在洋葱鳞茎叶内表面画一个1mm2的方框用镊子撕下表皮在碘液中铺平盖上盖玻片用吸水纸吸去多余碘液（也可帮助排除气泡）显微镜下观察（同法制红辣椒表皮细胞装片）2．人口腔黏膜上皮细胞的观察在载玻片中央滴一滴1%碘液用牙签刮取上皮细胞在1%碘液中搅动分散细胞染色1分钟盖上盖玻片观察3．血细胞观察（见《细胞生物学实验教程》第9页）在载玻片右端滴一滴血用另一张载玻片以30~45度角（两玻片夹角）推移血液成均匀薄膜滴一滴瑞氏染液染色1～3分钟自来水冲洗染液，吸水纸吸干镜检4．显微测量（1）原理： 测微尺由目镜测微尺和镜台测微尺组成，目镜测微尺位于目镜内，为玻璃圆片，上有一条带刻度的直线，精确度较镜台测微尺的低；镜台测微尺是一块载玻片，中央圆形区域内有一带刻度的直线，精确度较目镜测微尺高。
（2）测量：用目镜测微尺的格数度量细胞的大小，目镜测微尺每格代表的实际长度用镜台测微尺来校定。
A 、将镜台测微尺放入载物台上，转动目镜，使二者平行。
选择一处让二者重合，然后向右侧寻找再次重合处，记下二者的数值，并按照目镜测微尺和镜台测微尺的精度关系换算目镜测微尺每小格实际代表的刻度值。
细胞生物学实验
细胞生物学实验讲义河池学院化生系生物教研室2011年3月目录1.细胞生物学实验简介2.实验一细胞膜的通透性观察3.实验二植物细胞骨架的观察4.实验三线粒体的超活染色与观察5.实验四细胞融合6.实验五叶绿体的分离与观察7.实验六酸性磷酸酶的显示方法8．实验七联会复合体的染色与观察9．实验八死、活细胞鉴别10.附录：生物绘图法细胞生物学实验简介细胞生物学是当前生命科学中核心学科之一，也是重要的专业基础课，其理论与实验技术已广泛地用于研究细胞的形态结构、基因表达与克隆、病毒、细菌、胚胎发育、远缘杂交、人类疾病的发病机制、药物机理等领域，随着分子生物学的研究渗入，分子细胞生物学也得到了突飞猛进的发展。
目前许多综合大学、农业、医学及药科大学把细胞生物学作为本科生和研究生的必修课或基础理论课，同时也开设了专门的细胞生物学实验课，学生们通过实验，进一步地加深了对理论课的理解，也为今后的专业实验课和毕业论文实验奠定了基础。
本讲义精心选择了细胞生物学中的常规实验，作为教材面向本系生物专业本科生进行讲授。
实验一细胞膜的通透性观察一、实验目的1.了解细胞膜对物质通透性的一般规律。
2.了解溶血现象及其发生机制。
二、实验原理细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障。
它是一种半透膜，可选择性控制物质进出细胞。
各种物质出入细胞的方式是不同的，水是生物界最普遍的溶剂，水分子可以按照物质浓度梯度从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一侧扩散，这种现象就是渗透。
渗透作用是细胞膜的主要功能之一。
将红细胞放在低渗盐溶液中，水分子大量渗到细胞内，可使细胞胀破，血红蛋白释放到介质中，由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血。
将红细胞放在某些等渗盐溶液中，由于红细胞膜对各种溶质的通透性不同，膜两侧的渗透压平衡会发生改变，也会发生溶血现象。
因此，发生溶血现象所需时间长短可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。
本实验选用红细胞作为细胞膜透性的实验材料，将其放入不同的介质溶液中，观察红细胞的变化。
实验02 细胞膜的通透性观察
实验二细胞膜的通透性观察一、实验目的1. 了解溶血现象及其发生机制，了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细胞膜的速度；2. 了解并掌握细胞渗透实验的原理；3. 熟悉其操作方法。
二、实验原理将红细胞分别与各种等渗溶液混合，由于红细胞膜对不同溶质的通透性不同，使得不同溶质透入细胞的速度相差甚大，有些溶质甚至不能透入细胞。
当溶质分子进入红细胞后使其分子浓度增加，即引起胞内渗透压升高，水分子则从渗透压低的胞外侧向渗透压高的胞内侧透入，使细胞膨胀，当膨胀达到一定程度时，红细胞膜破裂，血红蛋白逸出，发生细胞溶血现象。
此时，光线较易通过溶液，原来不透明的红细胞悬液突然变成红色透明的血红蛋白溶液。
由于不同溶质进入细胞的速度不同，故它们诱过红细胞发生溶血的时间也不相同，因此，可通过测量溶血时间来估计细胞膜对各种物质通透性的大小。
三、实验用品1.试剂:1) 0.9%生理盐水；2) 2种低渗溶液：0.017mol/L 氯化钠和0.032mol/L 葡萄糖；10 种等渗溶液：0.17mol/L 氯化钠、0.32mol/L 葡萄糖、0.17mol/L 氯化铵、0.17mol/L 醋酸铵、0.17mol/L 硝酸钠、0.12mol/L 草酸铵、0.12mol/L 硫酸钠、0.32mol/L 甘油、0.32mol/L 乙醇、0.32mol/L 丙酮。
2.材料: 鸡血3.仪器设备：50ml 烧杯、10ml 移液管、小试管、橡皮吸耳球、试管架等。
四、方法与步骤1.鸡红细胞悬液的制备：取50ml 小烧杯一只，加1 份鸡血和10 份0.17mol/L 氯化钠溶液，形成一种不透明的红色液体，此即稀释鸡血；2.溶血现象的观察：取试管1支，加入10ml 蒸馏水，再加入1ml 制备好的鸡红细胞悬液，注意观察溶液颜色的变化，由不透明的红色悬液变成透明的血红蛋白溶液（红细胞发生破裂，造成100%红细胞溶血，使光线比较容易透过溶液）；3.红细胞的渗透性取试管一支，加入0.17mol/L 氯化钠溶液10ml，再加入1ml 制备好的鸡红细胞悬液，轻轻摇动，混匀后静置于温室中，观察试管中发生溶血的时间及其变化。
细胞生物学实验考考试样题及实验思考题答案
细胞生物学实验考考试样题及实验思考题答案细胞生物学实验考试样题一、填空题（2分/每空，共30分）1、洗液由重铬酸钾、浓硫酸和蒸馏水组成。
2、1640培养基包括RPMI1640培养液、谷氨酰胺、双抗、小牛血清。
3、鉴别活细胞的染液是0.4%台盼蓝溶液;鉴别细胞核的染液是甲基绿-派洛宁染液；鉴别线粒体的染液中性红-詹纳斯绿染液。
4、细胞核分离的基本步骤是组织匀浆、离心、纯化、鉴定。
5、细胞骨架中使蛋白质被保存的染料是1%Triton-100。
二、简答题（5+5+10共20分）1.线粒体在分离提取过程中，为什么要在0~4℃中进行？答：①为了保持组分的生理活性;②防止线粒体中的酶被破坏，避免酶失活2.什么我们在检测细胞渗透性时要用一定浓度的试剂？答：①确保实验是在等渗条件下进行；②防止物质的进出；③同时避免由于渗透压不同而影响实验结果。
3.细胞的计数步骤和方法。
答：加等体积的染液与细胞悬液混合～把悬液滴在计数板上～底倍镜下观察，活细胞无色，死细胞为蓝色，找计数方格计四个方格的细胞总数。
（压到大格线者“计左不计右，计上不计下”）计算。
Ⅰ：每毫升原液细胞数=4个大格细胞总数/4*100*稀释倍数Ⅱ：细胞存活率(%)=(细胞总数-死细胞数)/细胞总数。
细胞生物学实验思考题答案实验一利用各种显微镜观察细胞形态、结构1、简述显微镜的主要结构和操作要领。
普通生物显微镜由3部分构成：①照明系统：包括光源和聚光器。
②光学放大系统：由物镜和目镜组成，是显微镜的主体。
③机械装置：用于固定材料和观察方便，包括镜台(载物台) 、调节器和物镜转换器(旋转器等使用（一）、观察前准备检查：底座右侧的光源亮度旋钮是否在“1”位置，即顺时针选到最底位。
开机：①.打开后座主电源开关——绿色按钮②打开后座CCD电源开关——红色按钮白平衡调整：不放切片，在10倍物镜下将电源调整到最亮，然后按底座右方的白平衡按钮（红色）3－5秒之后将光源亮度调回到适中状态。
细胞膜通透性实验报告
细胞膜通透性实验报告.docx【实验题目】细胞膜通透性实验【实验目的】1、观察溶血现象并掌握其发生机制。
2、了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。
【实验材料与用品】1.试剂：.85%NaCl溶液、.085%NaCl溶液、.8mo甲醇溶液、.8mo丙三醇溶液、6%葡萄糖溶液、2%Trton_-1002.器具：离心管、试管架、滴管、显微镜、离心机3.材料：鸡血红细胞【实验原理】细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择性屏障，它是一种半透膜，可选择性控制物质进出细胞。
各种物质出入细胞的方式是不同的，水是生物界最普遍的溶剂，通透性高（肾小管、肠上皮、植物根细胞更高），水分子可以从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一侧扩散，这种现象称为渗透。
渗透作用是细胞膜的主要功能之一。
1.溶血现象将红细胞放在低渗盐溶液中，水分子大量渗到细胞内使细胞涨破，血红蛋白释放到介质当中，介质由不透明的细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液（此时的细胞膜收缩，会略有不溶性内容物），这种现象称为溶血。
红细胞在等渗盐溶液中短时间之内不会发生溶血，但是由于红细胞的细胞膜对不同物质的通透性不同，时间久了，膜两侧的渗透压平衡会被打破，也会发生溶血。
由于各种溶质透过细胞膜的速度不同，因此发生溶血的时间也不相同。
发生溶血现象所需的时间，可以作为测量某种物质进入红细胞速度的指标。
即溶血时间对应着穿膜速度。
2.物质穿膜运输的类型(1)被动运输（不耗能）被动运输分为简单扩散（顺浓度梯度扩散）和协助扩散。
（通道：载体蛋白、通道蛋白）(2)主动运输（耗能）需要跨膜载体蛋白的协助，这些载体蛋白起到泵的作用，有选择性地把专一溶质逆浓度梯度的穿膜运输。
3.影响物质穿膜通透性的因素(1)脂溶性越大的分子越容易穿膜（非极性的物质比极性的物质更容易溶于脂类物质）(2)小分子比大分子更容易穿膜（小的非极性分子，如2、CO2等）(3)不带电荷的分子容易穿膜（离子难溶于脂质物质，离子带水膜使体积增大）(4)亲水性分子和离子的穿膜要依赖于专一性的跨膜蛋白【实验步骤】1、大体流程6只试管分别滴加50%红细胞悬液1滴取6只试管分别加入等量的不同溶质配置50%的鸡血红细胞悬液在显微镜下观察细胞形态混匀后，观察并记录溶血时间2、具体操作1.取鸡血6ml，加.85%NaCl溶液4ml，在1000n条件下离心5分钟；（RBC压积量不少于.6mol）2.将上述离心后的红细胞按沉淀量配成50%浓度；（总体积应不少于1.2ml）3.每组取6支试管，分别加入如下溶液各3ml：(1).85%NaCl溶液(2).085%NaCl溶液(3).8mo（.3mo等渗）甲醇溶液(4).8mo（.3mo等渗）丙三醇溶液(5)6%（5%等渗）葡萄糖溶液(6)2%（1.5%等渗）Trton_-1004.向上述6支试管中分别加入50%红细胞悬液1滴，轻摇混匀，观察试管中是否有溶血现象发生（观察时间1小时），记录溶血时间，并于显微镜下观察各溶液的细胞。
细胞生物学实验
究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。
▪
体内活染是以胶体状的染料溶液注入动、植物体内，染
料的胶粒固定、堆积在细胞内某些持殊结构里，达到易于识
别的目的。体外活染又称超活染色，它是由活的动、植物分
离出部分细胞或组织小块，以染料溶液浸染，染料被选择固
定在活细胞的某种结构上而显色。
Janus green B
电镜下的红细胞
实验原理
▪ 细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透 性屏障。它是一种半透膜，可选择性控制物质进出 细胞。水是生物界最普遍的溶剂，水分子可以按照 物质浓度梯度从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透 压高的一侧扩散，这种现象就是渗透。
▪ 将红细胞放在低渗盐溶液中，水分子大量渗到 细胞内，可使细胞胀破，血红蛋白释放到介质中， 由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶 液，这种现象称为溶血。
4、显微镜观察方法
▪ 标本置于载物台上-----先于低倍镜（10×）观察------高倍镜（40×）------上抬1cm --------加香柏油到标本上------调节镜头（100×）， 并使之埋入油中 --------适量调节粗、微调焦螺旋至看清材料--------镜 下观察，并绘图；
▪ 实验结束，上升镜筒-------滴加二甲苯----用擦镜纸 擦拭镜头--------将显微镜恢复原位，放入镜箱
【实验材料】
▪ 1、主要设备：普通离心机、组织捣碎机、扭 力天平、光学显微镜。
▪ 2、小型器材：500m1烧杯2个，250m1量筒1 个，滴管10支，10m1刻度离心管20支，纱布 若干，载玻片和盖片各4片。
▪ 3、 0.35mol/L NaCl溶液。 ▪ 4、 新鲜菠菜。
【操作方法】
▪ A、游离叶绿体的制备与观察
细胞膜通透性实验 细胞通透性实验报告
溶血率=3、1%
比,右为试验组)
山东大学试验报告
2021 年 3 月 14 日
图 18 加入葡萄糖溶液 60min,细胞悬液颜色较为澄清。(左为等渗对
姓名
系年级 １7 级
比,右为试验组)
第6页共8页
山东大学试验报告
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２019 年 3 月 1４日
姓名
系年级 17 级
学号
１0 分钟观看记录溶血状况，观看 1h。
同组者
留意:
科目
6％得葡萄糖溶液有剧烈得诱导细胞融合得作用,因此,必需严格混匀
细胞试验
之后进行观看.
试验题目 观看细胞得通透性 仪器编号
试验结果推断
制细胞悬液
推断指标
用滴管吸取上清液,加入与沉淀量相等得等渗ＮaCl 溶液，混匀制成悬
(1〕 不溶血:液体分二层,上层浅黄色透亮，下层红色不透亮.镜检红
0、85％得氯化钠溶液(等渗溶液〕;
试验原理
0、0085%得氯化钠溶液(低渗溶液〕
细胞膜就是一种半透膜,对物质得通透具有选择性,使细胞具有一个相
０、8moｌ/Ｌ得甲醇、0、8mol/L 得丙三醇、６%得葡萄糖溶液、2%得
对稳定得内环境。将红细胞放在低渗溶液中，水分子会大量渗到细胞内， Ｔｒiton?X-1００溶液〔高渗溶液);
血影。
因此可以进行组内分工,分为两组更加高效得完成试验；
溶血率=13、3%
由于 Triｔoｎ—x 试剂与甲醇溶液对于细胞反应得较为快速,所以,完
图 25 加入葡萄糖溶液之后 6
全溶血状态很难稳定精确得观看到,所以应当在滴加血细胞溶液之前,做
图 25 加入葡萄糖溶液之后 60min 得显微状态(10×40):视野中,细胞 好预备计时,加入后快速混匀观看；
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表一：观察红细胞对各种化学物质透入
管 号 10%红细胞悬液 溶液种类(mL)
0
2滴
蒸馏水
2 mL
1
2滴
0.12M/LNa2SO4 2 mL
2
2滴
0.17M/LNH4Cl 2 mL
3
2滴
0.12M/L草酸铵 2 mL
4
2滴
0.32M/L葡萄糖 2 mL
5
2滴
0.32M/L甘油 2 mL
6
2滴
0.32M/LC2H5OH 2 mL
实验四、 细胞膜的通透性和植物 细胞通讯形式
一、目的与要求
1、了解细胞膜的渗透性及各类物质进 入细胞的速度。
2、观察植物细胞间的胞间连丝，进一 步认识植物细胞间的通讯连接形式
二、材料、试剂与器材
1、 材料 ：洋葱鳞茎叶，新鲜动物血细胞 悬浮液 ，番茄，红椒
2、药品： 试剂:0.17 mol／L 氯化铵；0.12 mol／L硫
1）原理：细胞间彼此不是孤立的，相互之 间通过细胞胞间连丝互通物质与信息转递
2）步骤：学生自己设计
想一想：如何制作临时装片？
观察胞间连丝应取番茄和红椒哪
一部分？
3、观察软骨组织标本
软骨组织是由软骨基 质、纤维和软骨细胞 组成。
1、透明软骨
2、纤维软骨 3、弹性软骨
四 、学生自己动手实验 五、实验报告 其中要求画图：胞间连丝图
溶质的通透性不同,因此有的溶质分子可透入,有的
溶质分子则不能透入,能透入的溶质分子的速度也
不同。当溶质分子进入红细胞使细胞内溶质浓度增
加时,导致水的摄入。红细胞膨胀到一定程度时,细
胞膜破裂,血红素溢出即红细胞发生溶血.由于溶质
透入速度不同,溶血时间也不同.
（2）实验步骤
1.取小烧杯1个,分别加1份鸡血和9份生理盐水,将新 鲜动物血细胞制成为一种不透明的红色液体,即稀释 的鸡血。
2.取试管1支,加入2mL蒸馏水,然后再加入0.2mL 稀 释的鸡血,注意观察溶液的颜色变化,溶液由不透明 的红色变为澄清,红细胞发生破裂,造成所有红细胞 溶血,使光线容易通过。显微镜下观察溶血前后红细 胞的形态。
3.观察红细胞对各类物质的渗透性:取试管6支,分 别加入上述6种溶液各2mL,再 加入0.2mL稀释的鸡 血,记下时间,轻轻摇动使其混匀,注意观察是否发 生溶血；若发生溶血,记录溶血过程所需的时间。
表二、实验结果记录
管号 溶液种类
是否溶血 所需时间 结果
0 蒸馏水 1 0.12M/LNa2SO4 2 0.17M/LNH4Cl 3 0.12M/L草酸铵 4 0.32M/L葡萄糖 5 0.32M/L甘油 6 0.32M/LC2H5OH
ห้องสมุดไป่ตู้ 问题
1、什么是细胞连接？ 2、细胞连接依据功能的不同分为哪几类？
酸钠；0.12 mol／L草酸铵；0.32 mol／L葡 萄糖；0.32 mol／L甘油；0.32 mol／L乙醇； 30％蔗糖液 ; 0．9％生理盐水;
3、器材： 显微镜，载玻片， 盖玻片，镊子，滴管， 擦镜纸，吸水纸，试管架， 试管8支，剪刀和电脑等
三、操作与观察
1 、细胞膜的通透性实验
1）洋葱鳞茎表皮细胞的质壁分离和复原
想一想：该实验如何做？
认识细胞壁、细胞膜 和液泡结构和通透性
依据：
高浓度
低浓度
失水（分离） 吸水（复原）
利用什么试剂做实验？
30%的蔗糖液和蒸馏水
2）观察红细胞对各种化学物质透入的情况
简单扩散
协助扩散
主动运输
（1）实验原理
当红细胞置于不同等渗溶液中时,由于对各种
细胞连接： 指细胞表面可与其他细胞 或细胞外基质结合的特化区 。是细胞间的 联系结构 ，是多细胞有机体中相邻细胞之 间通过细胞质膜相互联系, 协同作用的重 要基础。
在结构上看由膜特化部分、质膜下的 胞质部分及质膜外细胞间的部分三个部分 组成。
封闭连接
锚定连接
通讯连接：
2、番茄和红椒表皮细胞临时装片制作与 观察