革兰阳性球菌培训课件

2/6/2021
革兰阳性球菌
• 触酶试验阳性 • 凝固酶阳性、耐热DNA酶阳性
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4.抗原构造
1、蛋白抗原--葡萄球菌A蛋白 （staphylococcal protein A SPA）
SPA能与IgG1、2、4的Fc段发生非特异性结 合。IgG 的 Fab段仍可同Ag特异性结合—— 协同凝集反应。（co-agglutination）用于多 种细菌抗原的检测。
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• 是指革兰染色为阳性的一群兼性厌氧 球菌
• 通常引起各种化脓性感染 • 包括9个菌属 • 最重要的为葡萄球菌属、链球菌属和
肠球菌属
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第一节 葡萄球菌属（staphylococcus）
• 一类触酶阳性的革兰染色阳性球菌， 包括金葡、表葡、和腐生葡萄球菌、 溶血葡萄球菌等。
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6.抵抗力
• 对理化因素抵抗力强，耐热，耐干燥， 耐高盐，是抵抗力最强的无芽胞细菌。
• 能在含有10%～15%的NaCl琼脂中生长 • 对碱性染料（龙胆紫）敏感 • 易产生耐药性，特别对青霉素
Fra Baidu bibliotek
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二、微生物学检验
• 1．标本 • 根据不同病症和体征采集不同标本。 • 化脓性感染病灶采集脓汁、渗出液、穿刺
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• 菌落的性状：
• （1）金葡：直径6~8mm，光滑、完整、稍隆起、 半透明，金黄色或者橙黄色色素，并在菌落周围
出现或不出现透明溶血环。
• （2）表葡：5~6mm，某些产黏液株能黏附在平板 表面，无色素或白色色素。
• （3）溶血：光滑奶酪状，不透明，无色素或奶油 色、黄色。
液、咽拭子标本； • 菌血症、败血症采集血液标本； • 脑膜炎采集脑脊液标本； • 食物中毒采集粪便、呕吐物或剩余的食物
标本。
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• 2．鉴定
• (1)涂片革兰染色镜检：标本或增菌液 直接涂片，革兰染色镜检见革兰阳性、呈葡 萄串状排列的球菌，无芽孢，无荚膜，即可 作出“查见革兰阳性球菌，葡萄串状排列， 疑为葡萄球菌”的初步报告。
• 金葡为其中最重要的致病菌，常引起 化脓性感染。
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第一节 葡萄球菌属（staphylococcus）
• 一、生物学性状 • 1.形态与染色 • 球形，葡萄串状，革兰染色阳性 （G+）
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第一节 葡萄球菌属（staphylococcus）
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• 2)脓汁、咽拭子、尿道分泌物等标本： 可直接分离培养于血琼脂平板。经24～48 小时培养，可形成直径1～3mm或更大、不 同色素的菌落。
• 金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的菌落为 金黄色，周围有明显的β-溶血环；部分菌落 可呈灰白色或柠檬色。
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• 乳胶凝集试验(如slidex staph plus)可快速 鉴定金黄色葡萄球菌。基本原理是：在纸 板或玻片上滴加包被有人类纤维蛋白原和 抗金黄色葡萄球菌单克隆IgG抗体的蓝色胶 乳颗粒，然后用接种环挑取待鉴定葡萄球 菌的新鲜培养物与之混匀，出现肉眼可见 凝集现象为阳性。此试验不仅可检测金黄 色葡萄球菌凝固酶，还可检测葡萄球菌A蛋 白。
• （4）里昂：边缘整齐稍扁，奶色或黄色。
• （5）腐生：光滑、凸起、不透明、白色或柠檬色。
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(2)分离培养
• 1)血液、脑脊液等标本：接种增菌液培 养基进行增菌，如增菌液发生混浊、内有胶 胨样凝块等现象，可进一步转种血琼脂平板 进行分离培养；如无细菌生长，须培养至7 天，再转种血琼脂平板确定有无细菌生长。
• 在液体培养基中呈均匀混浊生长。
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• 金葡菌在血琼脂平板上典型菌落
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• 高盐甘露醇平板呈淡 橙黄色色菌落
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3.生化反应
• 生化反应活跃，能够分解多种糖类（葡萄 糖、麦芽糖等，产酸不产气，致病性葡萄 球菌可分解甘露醇产酸）和蛋白质
白色 柠檬色 血平板 • 某些菌种溶血产生溶血 环
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2、培养特性
• pH—7.4 • 温度—35~37摄
氏度
• 菌落形态：2~3 cm、圆形、凸 起、表面光滑、 边缘整齐、湿 润不透明。
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• 金黄色葡萄球菌在羊血琼脂平板上的典型菌 落为金黄色、光滑整齐、微隆起、不透明菌 落，其周围有明显的β溶血环.
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• (3)生化反应
• 1)触酶试验阳性。
• 2)血浆凝固酶试验：可用玻片法和试管 法检测。金黄色葡萄球菌阳性，而表皮、腐 生或溶血性葡萄球菌阴性。
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凝固酶试验
玻片法：测定结合 型凝固酶，10秒钟 观察结果。
试管法：测定游离 型凝固酶，4小时后 观察结果。
• 一、生物学性状 • 1.形态与染色 • 在液体培养基中或脓汁标本中可见成单、成双或
短链状排列。
• 无芽胞，无鞭毛，某些菌株可形成荚膜。
• 当细菌衰老、死亡、被吞噬后或在青霉素等药物 作用下(可形成L型菌)，菌体可呈革兰阴性。
• 细菌L型—G-
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2.培养特性
营养要求低，易培养 普通平板 • 有色素 金黄色
2、多糖抗原：具有群特异性。
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5.分类
• 35个种，17个亚种 • 主要致病性菌种：
• 金黄色葡萄球菌 • 表皮葡萄球菌 • 头状葡萄球菌 • 人葡萄球菌 • 腐生葡萄球菌 • 凝固酶阳性和凝固酶阴性的葡萄球菌(CNS) • 噬菌体分型、质粒分型、血清学分型等
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• 尿标本必要时作细菌菌落计数。粪便、呕吐 物或剩余的食物标本接种于高盐甘露醇平板 或卵黄高盐平板。
• 金黄色葡萄球菌在高盐甘露醇平板上呈淡黄 色菌落；表皮或腐生葡萄球菌呈白色或柠檬 色菌落。
• 金黄色葡萄球菌在卵黄高盐平板上，其菌落 周围形成白色沉淀环，而表皮或腐生葡萄球 菌则无此现象。
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