甘油悬液保藏法
2022年黑龙江生态工程职业学院生物制药技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案)
2022年黑龙江生态工程职业学院生物制药技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、原生动物是______色、无______，能______运动的单细胞真核生物。
2、鞭毛是细菌的运动器官，观察细菌是否生鞭毛可通过______或______在光学显微镜下观察。
3、与营养缺陷型有关的菌株有三种：①从自然界分离到的任何菌种的原始菌株称为______，②它经诱变剂处理后所发生的丧失某酶合成能力的菌株称为______，③再经回复突变或重组后的菌株称为______。
4、现代发酵罐除罐体外，还要有一系列必要的附属装置，包括______、______、______、______、______和______等。
5、酵母菌的无性孢子有______、______和______等数种。
6、病毒粒的对称体制有______、______和______。
7、汞的微生物转化主要包括3个方面______，______和______。
8、生长因子异养微生物很多，如______、______、______和______ 等。
9、巴斯德效应是发生在很多微生物中的现象，当微生物从______转换到______下，糖代谢速率______，这是因为______比发酵作用更加有效地获得能量。
10、T细胞在识别抗原的同时也识别自身______。
二、判断题11、黄曲霉毒素是著名的致癌剂，人或动物摄入足够剂量后，不必经过体内代谢活化即可诱导肝癌的发生。
（）12、在分离化能无机自养细菌时，必须使用以硅胶作凝固剂的无机培养基平板。
（）13、呼吸链中的细胞色素系统只能传递电子而不能传递质子。
（）14、API细菌数值鉴定系统对细菌的鉴定带来极大的方便，在它可鉴定的700余种细菌中，只要购买一张统一的鉴定卡，就可对其中某一细菌进行鉴定。
（）15、存在于白喉棒杆菌和结核分枝杆菌等细胞中的异染粒，其生理功能是作为碳源或能源贮藏物。
（）16、毛霉菌的无性繁殖产生孢囊孢子，有性生殖产生卵孢子。
2022年江西师范大学生物科学专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2022年江西师范大学生物科学专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、细菌菌落的形状一般为______；边缘______；大小______；表面______；颜色______，常见的颜色为______；质地常为______。
2、病毒在寄主体外，很易因外界环境如高温，射线等作用而______；带封套的病毒容易被______溶剂破坏，因而可用消毒剂如______来消毒。
3、微生物有两种同化CO2的方式：______和______。
自养微生物固定CO2的途径主要有3条：卡尔文循环途径，可分为______、______和 ______3个阶段；还原性三羧酸途径，通过逆向的三羧酸循环途径进行，多数酶与正向三羧酸循环途径相同，只有依赖于ATP的______是个例外；乙酰辅酶A途径，存在于甲烷产生菌、硫酸还原菌和在发酵过程中将CO2转变乙酸的细菌中，非循环式CO2固定的产物是______和______。
4、碳源对微生物的功能是______和______，微生物可用的碳源物质主要有______、______、______、______、______和______等。
5、Ainsworth（1973）真菌分类系统将真菌门分成______亚门、______亚门、______亚门、______亚门和______亚门。
6、人类对微生物的发现和认识，比对动、植物晚得多，其原因是微生物具有______、______、______和______四个特点。
7、物理灭菌因素的种类很多，例如______、______、______、______、______和______等。
8、一般来说，在土壤中，各种微生物含量按递减顺序排列如下：______、______、______、______、______和______。
9、微生物的自发突变一般有三个主要原因：① ______，② ______，③ ______。
10、病原体的一般感染途径有______、______、______、______和______。
甘油冷冻管保藏法
甘油冷冻管保藏法利用甘油作为保护剂，甘油进入细胞后，降低细胞的脱水作用，在-20- -70℃下大大降低细胞代谢水平。
在新的培养物中加入15-20℅甘油，置于-70或-20℃冰箱保存，一般可保存6-12月。
将待保藏的菌种接种于斜面试管或平板，适温适时培养后(细菌24—48h，酵母菌72h。
形成孢子的微生物则宜保藏孢子，故放线菌和丝状真菌培养7---10d)，用无菌接种环轻轻刮取菌苔，并通过接种环与试管壁之间的轻轻摩擦而使细菌充分扩散到预先装于试管中的无菌蒸馏水中，调整菌液浓度，向已制备好的菌悬液中加入等体积浓度为30％的无菌甘油，得到15％甘油菌悬液。
注意甘油浓度不宜过高，否则会影响细菌细胞渗透压，引起细菌死亡。
轻轻振摇小管，使内容物充分混合，分装于无菌小试管，制好的甘油冷冻管最好在—80℃条件下贮存，从冷冻之日起一般可保存两年。
注：甘油粘稠，计量不准，一般先加生理盐水或蒸馏水配制成30-40℅或15℅水溶液。
取30ml/100ml三角瓶，塞棉塞，外包牛皮纸，高压灭菌20-30min备用。
制作过程：3.1 30-40℅无菌甘油水溶液：菌悬液=1:1,混合均匀后分装事先灭菌菌种保藏管（2ml塑料离心管）.3.2吸取15℅无菌甘油生理盐水溶液7-10ml于斜面中，无菌长滴管刮取菌苔，摇均，获培养物与甘油混合物，转移至无菌试管种，用无菌镊子取一支灭菌1.5-1.8mlEP管，用移液抢或刻度吸管吸取1ml混合液于EP（微量离心管）管中，迅速冻结，于-20℃冰箱保存。
-20℃保存6-12月，-70℃可保存1-10年，采取幼龄菌好。
3.3 将80%的甘油高压蒸汽灭菌待用。
培养好的斜面菌种用无菌水制成高浓度的菌悬液(108～1010/ml)。
取1ml灭菌甘油放入与甘油充分混匀，使甘油浓度约为10%-20%，于-70℃下冻存。
-20℃保存时间较短。
或采用体积比为8：2的甘油－生理盐水，加入新鲜培养的菌体肉汤，混合均匀后至-20℃冰箱保存。
甘油冷冻保藏法
甘油冷冻保藏法本方法适合于中、长期菌种保藏，保藏时间一般为2-4年左右。
（1）用火焰灭菌的接种环取斜面菌种在平皿上划线分离单菌落。
（2）平皿倒置于30℃或37℃恒温培养箱，培养24-48小时，至单菌落的大小为3mm左右。
（3）挑取一个单菌落，接种于一个装50mL的300mL三角瓶中30℃或37℃振荡培养10-15小时，至菌密度OD600为1.0-1.5。
（4）用火焰灭菌的接种环取少量种子液，涂片后，作革兰氏染色，在显微镜下观察菌体的形态，及是否有杂菌。
（5）按30%甘油：种子液为1：1（V/V）的量加入无菌甘油，混合后分装至事先灭菌的菌种保存管（1-2mL/管），-70℃或液氮保存。
冷冻干燥保藏法（1）准备安瓿管用于冷冻干燥菌种保藏的安瓿管宜采用中性玻璃制造，形状可用长颈球形底的，亦称泪滴型安瓿管，大小要求外径6-7.5mm，长105mm，球部直径9-11mm，壁厚0.6-1.2mm。
也可用没有球部的管状安瓿管。
塞好棉塞，1.05kg/cm2，121.3℃灭菌30分钟，备用。
（2）准备菌种，用冷冻干燥法保藏的菌种，其保藏期可达数年至十数年，为了在许多年后不出差错，故所用菌种要特别注意其纯度，即不能有杂菌污染，然后在最适培养基中用最适温度培养，使培养出良好的培养物。
细菌和酵母的菌龄要求超过对数生长期，若用对数生长期的菌种进行保藏，其存活率反而降低。
一般，细菌要求24—48小时的培养物；酵母需培养3天；形成孢子的微生物则宜保存孢子；放线菌与丝状真菌则培养7-10天。
（3）制备菌悬液与分装以细菌斜面为例，用脱脂牛乳2ml左右加入斜面试管中，制成浓菌液，每支安瓿管分装0.2ml。
（4）冷冻冷冻干燥器有成套的装置出售，价值昂贵，此处介绍的是简易方法与装置，可达到同样的目的。
将分装好的安瓿管放低温冰箱中冷冻，无低温冰箱可用冷冻剂如干冰（固体CO2）酒精液或干冰丙酮液，温度可达-70℃。
将安瓿管插入冷冻剂，只需冷冻4-5分钟，即可使悬液结冰。
论述菌种的保藏方法
论述菌种的保藏方法菌种的保藏是指将某一种菌株保存在适宜的条件下，以确保其长期存活和保持其遗传特性的一种操作。
菌种的保藏对于科学研究和应用具有重要意义，因为菌株的失活或突变可能导致实验结果的不准确性或应用价值的丧失。
本文将介绍几种常见的菌种保藏方法。
一、冷冻保藏法冷冻保藏法是将菌株保存在低温条件下，以减缓菌株的代谢和生长速率，达到延长其存活时间的目的。
常见的冷冻保藏方法有两种：液氮冷冻和低温冷冻。
1. 液氮冷冻：将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的甘油或乙二醇等保护剂，然后分装至冷冻管中，迅速将冷冻管浸入液氮中进行冷冻保存。
液氮的温度极低，可以有效地抑制菌株的代谢活动，保证其长期存活。
2. 低温冷冻：将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的甘油或乙二醇等保护剂，然后分装至冷冻管中，置于-80℃的低温冰箱中保存。
相比于液氮冷冻，低温冷冻的操作更加简便，且可以在普通实验室条件下进行。
二、干燥保藏法干燥保藏法是将菌株保存在无水条件下，通过降低菌株周围环境的水分含量，抑制菌株的代谢活动，并防止细胞内酶的活性。
常见的干燥保藏方法有两种：冷冻干燥和真空干燥。
1. 冷冻干燥：将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的保护剂，然后在真空下进行冷冻干燥。
冷冻干燥的过程中，通过降低温度和压力，使水分直接从固态转变为气态，从而达到保护菌株的目的。
2. 真空干燥：将培养基中的菌株悬浮液均匀涂布在无菌的滤纸或硅胶膜上，然后将其置于真空干燥器中进行真空干燥。
真空干燥的过程中，通过降低压力，将水分从菌株周围环境中蒸发掉，使菌株处于无水状态。
三、液氮冷冻法液氮冷冻法是将菌株保存在液氮中的一种方法。
液氮的温度极低，可以有效地抑制菌株的代谢活动，保证其长期存活。
该方法适用于多种菌株的保藏，包括细菌、真菌和酵母等。
液氮冷冻法的操作步骤如下：1. 将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的甘油或乙二醇等保护剂，以增加菌株的抗冻性。
2. 将菌株悬浮液分装至冷冻管中，每支约0.5-1.0 mL，然后封闭冷冻管。
实验室菌种保藏的方法
实验室菌种保藏的方法菌种是主要的生物资源，也是食用菌生产首要的生产资料。
一个优良的菌种被选育出来以后，必须保持其优良性状不变或尽可能地少变慢变，才不至于降低生产性能，能长期在生产中使用。
因此，菌种保藏在食用菌生产上具有重要的意义。
各种微生物由于遗传特性不同，因此适合采用的保藏方法也不一样。
一种良好的有效保藏方法，首先应能保持原菌种的优良性状长期不变，同时还须考虑方法的通用性、操作的简便性和设备的普及性。
下面介绍几种常用的菌种保藏方法：1斜面低温保藏法将菌种接种在适宜的斜面培养基上，待菌种生长完全后，置于4。
C左右的冰箱中保藏，每隔一定时间（保藏期）再转接至新的斜面培养基上，生长后继续保藏，如此连续不断。
此法广泛适用于细菌、放线菌、酵母菌和霉菌等大多数微生物菌种的短期保藏及不宜用冷冻干燥保藏的菌种。
放线菌、霉菌和有芽匏的细菌一般可保存6个月左右，无芽抱的细菌可保存1个月左右，酵母菌可保存3个月左右。
如以橡皮塞代替棉塞，再用石蜡封口，置于4。
C冰箱中保藏，不仅能防止水分挥发、能隔氧，而且能防止棉塞受潮而污染。
这一改进可使菌种的保藏期延长。
此法由于采用低温保藏，大大减缓了微生物的代谢繁殖速度，降低突变频率；同时也减少了培养基的水分蒸发，使其不至于干裂。
该法的优点是简便易行，容易推广，存活率高，故科研和生产上对经常使用的菌种大多采用这种保藏方法。
其缺点是菌株仍有一定程度的代谢活动能力，保藏期短，传代次数多，菌种较容易发生变异和被污染。
2石蜡油封藏法此法是在无菌条件下，将灭过菌并已蒸发掉水分的液体石蜡倒入培养成熟的菌种斜面（或半固体穿刺培养物）上，石蜡油层高出斜面顶端IC明使培养物与空气隔绝，加胶塞并用固体石蜡封口后，垂直放在室温或4。
C冰箱内保藏。
使用的液体石蜡要求优质无毒，化学纯规格，其灭菌条件是：150~170。
C烘箱内灭菌Ih;或121。
C高压蒸汽灭菌60~80min,再置于80℃的烘箱内烘干除去水分。
微生物遗传习题
第七章微生物遗传习题一、名词解释1、F'菌株：当Hfr菌株细胞内的F质粒因不正常切离而脱离核染色体组时，可重新形成游离的、但携带整合位点邻近一小段核染色体基因的特殊F质粒，称F’质粒或F’因子。
凡携带F’质粒的菌株，称为F’菌株。
2、变异：指生物体在某种外因或（和）内因作用下，所引起的遗传物质结构或数量的改变，即遗传型的改变。
3、表型：指某一生物所具有的一切外表特征和内在特性的总和，是遗传型在适合环境条件下通过代谢和发育得到的具体体现。
遗传型+环境条件→表型4、补充培养基：凡只能满足相应的营养缺陷型突变株生长需要的组合或半组合培养基称补充培养基。
5、超诱变剂：可以做到即使未经淘汰野生型菌株，也可直接获得12%-80%的营养缺陷型菌株。
6、低频转导：指通过一般溶源菌释放的噬菌体所进行的转导，因其只能形成极少数转导子，故称“低频转导”。
7、颠换：嘌呤和嘧啶之间的置换8、点突变：仅涉及一对碱基被另一对碱基所置换。
9、复壮：狭义复壮：是一种消极措施是指菌种在已发生衰退的情况不经过纯种分离和测定典型性状，产生性能等指标，从已衰退的的种群中筛选出少数尚未退化的个体，以达到恢复原菌株固有性状的相应措施。
广义复壮：一种积极措施，即有菌种的典型特征或生产性状尚未衰退之前，就经常有意识地采取纯种分离和生产性状测定工作，以期从中选择到自发的突变体。
10、甘油悬液保藏法：用15%~30%的甘油缓冲液制成细胞密度为10^7~10^8细胞/ml的悬浮液，混匀，密封，置-70℃冰箱。
保藏期可达10年。
11、感受态：是指受体细胞最易接受外源DNA片段并能实现转化的一种生理状态。
12、高频转导：在局限转导中，若对双重溶源菌进行诱导，就会产生含50%左右的局限转导噬菌体的高频转导裂解物，用这种裂解物去转导受菌体，就可获得高达50%左右的转导子，故称这种转导为高频转导。
13、光复活修复：把经UV照射后的微生物立即暴露于可见光下时，就可出现明显降低其死亡率的现象。
2022年赣南师范大学生物科学专业《微生物学》期末试卷A(有答案)
2022年赣南师范大学生物科学专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、菌落特征主要取决于______和______。
2、T4噬菌体由______、______和______三部分组成。
3、乙醛酸循环中的两个关键酶是______英文缩写是______和______英文缩写是______，它们可使______和______等化合物源源不断地合成______，以保证微生物正常合成的需要。
4、微生物的营养物可为它们的正常生命活动提供______、______、______和必要的______。
5、曲霉分生孢子头的构造为：分生孢子梗的基部有一特征性的______，向上则分化出______、______、______和______，这四种总称为______。
6、微生物在能源供应方面与人类关系密切，例如______、______、______、______和______等。
7、抗生素的作用机制有______、______、______和______。
8、细菌沥滤又称细菌冶金，主要分三阶段：______，______，______；其中后一步是关键，它由化能自养细菌______来完成的。
9、如果让大肠杆菌生长在较高的温度下（如42～50℃），某些基因则迅速表达，诱导产生热激蛋白，这种现象称为______。
10、体液免疫分子主要包括______、______和______；而______和______分别是非特异免疫和特异免疫的主要体液成分。
二、判断题11、由于间体是细胞膜内陷形成的，因此其组成结构和功能与细胞膜是完全相同的。
（）12、在微生物学实验室中，蛋白胨、牛肉膏和酵母膏是最常用的有机氮源。
（）13、在固氮酶的两个组分中，组分Ⅱ（铁蛋白）要比组分Ⅰ（钼铁蛋白）对氧更为敏感。
（）14、在病毒分离时，经盲传3代仍无感染症状出现，便可认定没有病毒存在。
（）15、无隔菌丝是多核的单细胞菌体，只有细胞核的分裂，没有细胞数量的增加。
2022年西藏大学生物科学专业《微生物学》期末试卷A(有答案)
2022年西藏大学生物科学专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、能产芽孢的细菌较少，主要是属于革兰氏______性细菌的______属和______属，前者是好氧菌，其芽孢囊呈______状，后者是厌氧菌，其芽孢囊的外形常呈______状。
2、当宿主细胞内的大量子代噬菌体成熟后，由于水解细胞膜的______ 和水解细胞壁的______等的作用，促进了细胞的裂解。
3、异型乳酸发酵的双歧杆菌途径的特点是2分子葡萄糖可产生______、______和5分子ATP。
4、化能自养型和化能异养型微生物，生长所需的能量前者来自于______的氧化放能，而后者则来自于______的氧化放能；生长所需的碳源前者以______为主，后者则以______为主要来源。
5、我国自古以来就利用曲霉做发酵食品，如利用______的蛋白分解能力作酱，利用______的糖化能力制米酒。
6、微生物代谢类型的多样性表现在：① ______，② ______，③ ______，④ ______，⑤ ______，⑥ ______，⑦ ______。
7、利用干燥对微生物影响的原理，在日常生活中常用______、______ 和______等方法保存食物。
8、微生物生态学是生态学的一个分支，它的研究对象是______与其周围的______和______环境条件间的相互作用规律。
9、当前对原核受体细胞来说，在遗传工程中的最合适外源基因载体是 ______和______，对真核细胞受体来说，在动物方面主要有______，植物方面则主要是______。
10、当前已开发的新型疫苗有______、______、______、______、______和______等。
二、判断题11、好氧性芽孢杆菌的菌体形态呈梭状，厌氧性芽孢杆菌的菌体形态呈杆状。
（）12、用分装器将培养基分装试管时，应谨防培养基沾染试管口。
（）13、与乳酸发酵分成同型、异型相似，微生物的酒精发酵也有同型与异型之分。
2021年湖南食品药品职业学院生物制药技术专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2021年湖南食品药品职业学院生物制药技术专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、______、______和______等细菌在细胞质内储存有大量的聚-β-羟丁酸（PHB），具有______、______和______等作用。
2、T4噬菌体由______、______和______三部分组成。
3、整个肽聚糖的合成过程约有______步，研究对象主要是采用革兰氏 ______性细菌Staphylococcus aureus金黄色葡萄球菌。
根据合成时的反应部位不同，可分成在______中合成、______上合成和______外合成3个阶段。
4、微生物的营养类型可分为______、______、______和______。
5、蕈菌典型肉质子实体的构造包括______、______、______、______ 和______五个主要部分。
6、现代微生物学发展有以下几个特点：______，______，______，______，______，______。
7、为获得微生物的高密度生长，常可采用以下几个措施：① ______，② ______，③______，④ ______等。
8、在自然界中存在许多极端环境，并进化出与这类环境相适应的各种极端微生物，如______、______、______、______、______、______和______等。
9、典型质粒的核酸分子是______，存在于质粒上的特定基因，使微生物获得了若干特殊功能，如______、______、______、______、______ 或______等。
10、T细胞在识别抗原的同时也识别自身______。
二、判断题11、所有原核生物细胞内都没有核膜和各种被膜的细胞器。
（）12、被动扩散是微生物细胞吸收营养物质的主要方式。
（）13、酿酒酵母只进行同型酒精发酵，而绝不存在异型酒精发酵。
（）14、噬菌体核酸既有单链DNA、双链DNA，又有单链RNA、双链RNA。
发酵工程简答题期末复习
发酵工程复习1.什么是微生物工程？微生物工程也称之为微生物发酵工程。
微生物工程学是以微生物学、生物化学和生物工程学为基础，又与工程技术紧紧联系在一起而建立的一个完整的科学与工程技术体系。
它是研究利用微生物（包括“工程微生物”在内）及其代谢产物与工艺生产过程原理的科学。
2.了解微生物工程发展的4个阶段及每个阶段的特点？（1）微生物工程的孕育时期——天然发酵（或自然发酵）；（2）第一代微生物发酵技术——纯培养技术的建立，柯赫，发明固体培养基建立了纯培养；（3）第二代（近代）微生物发酵技术——深层培养技术，如抗生素工业生产带动了生化工程的建立；（4）第三代微生物发酵技术——微生物工程，主流发展方向为工程菌；（5）第四代微生物发酵技术——微生物工程。
3.微生物代谢产物的三种类型？（1）初级代谢产物：微生物通过代谢活动所产生的、自身生长和繁殖所必需的物质。
（2）次级代谢产物：微生物生长到一定阶段才产生的化学结构十分复杂、对该微生物无明显生理功能，或并非是微生物生长和繁殖所必需的物质。
（3）转化产物：以外源物质为底物，通过微生物细胞的酶或酶系对底物某一特定部位进行化学反应，使它转变成结构相类似但更具有经济价值的化合物。
4.工业菌种必须满足的条件是什么？（1）生产力：能在廉价的培养基上迅速生长，所需的代谢产物的产量高，其它代谢产物少（2）操作性：培养条件简单，发酵易控制，产品易分离（3）稳定性：抗噬菌体能力强，菌种纯粹，不易变异退化（4）安全性：是非病源菌，不产有害生物活性物质或毒素5.掌握实验室及工厂常用的微生物培养方法。
（1）固体培养实验室常见的固体培养方法；生产中常见的固体培养基：小麦麸皮（2）液体培养实验室常见的液体培养：试管液体培养，浅层液体培养，摇瓶培养，发酵罐培养；生产中常见的液体培养：浅盘培养，发酵罐深层培养，连续培养（恒化培养：通过控制培养基中营养物的浓度，使微生物在低于最高生长速率的条件下生长繁殖；恒浊培养：可控制微生物在最高生长速率与最高细胞密度的水平上生长繁殖，达到高效率培养的目的；多级连续培养；固定化细胞连续培养），补料分批培养，混合培养。
2021年杭州师范大学微生物学专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2021年杭州师范大学微生物学专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、G＋菌细胞壁的主要成分是______和______；前者的双糖单位是由一个______通过______与另一个______相连构成，这一双糖单位易被______水解，而导致细菌细胞壁“散架”而死亡。
2、病毒一步生长曲线有三个最重要的特征参数，即______期（包括______期和______期）和______期的长短以及______的大小。
3、细菌的二次生长现象是指当细菌在含有葡萄糖和乳糖的培养基中生长时，优先利用______，当其耗尽后，细菌经过一段停滞期，不久在______的诱导下开始合成______，细菌开始利用______。
该碳代谢阻遏机制包括______和______的相互作用。
4、在用曲法对微生物进行固体培养时，根据培养容器和规模的不同，可把它分为______、______、______、______、______和______等形式。
5、真菌的特点有：①______；② ______；③ ______；④ ______；⑤ ______和⑥ ______等。
6、微生物学的发展简史可分为______、______、______，现处于______。
7、描述指数期的三个重要参数分别是：______、______和______。
8、植物根际微生物对植物有害的方面有______和______等。
9、限制性酶的命名是根据分离出此酶的______而定的，即取______的第一个字母和______的头两个字母组成3个斜体字母加以表示，遇有株名，再加在后面。
如果同一菌株先后发现几个不同的酶，则用罗马数字加以表示。
10、在产抗体细胞的激活和抗体的形成过程中，需要有三种免疫活性细胞发挥作用：______，______，______。
二、判断题11、链霉菌是霉菌，其有性繁殖形成接合孢子。
（）12、大多数真菌需要高碳氮比的营养物，而动物致病细菌需要低碳氮比的营养物。
菌种的保藏
第八章菌种的保藏第一节菌种的衰退和复壮在微生物的基础研究和应用研究中，选育一株理想的菌株是一件艰苦的工作，而欲使菌种始终保持优良性状的遗传稳定性，便于长期使用，还需要做很多日常的工作。
实际上，由于各种各样的原因，要使菌种永远不变是不可能的，菌种衰退是一种潜在的威胁。
只有掌握了菌种衰退的某些规律，才能采取相应的措施，尽量减少菌种的衰退或使已衰退的菌种得以复壮。
一、菌种的衰退（一）菌种衰退的现象菌种衰退（degeneration）是指由于自发突变的结果，而使某物种原有的一系列生物学性状发生量变或质变的现象。
菌种衰退的具体表现有以下几个方面：1. 菌落和细胞形态改变。
每一种微生物在一定的培养条件下都有一定的形态特征，如果典型的形态特征逐渐减少，就表现为衰退。
例如，泾阳链霉菌“5406”的菌落原来为凸形变成了扇形、帽形或小山形；孢子丝由原来螺旋形变成波曲形或直形，孢子从椭圆形变成圆柱形等。
2. 生长速度缓慢，产孢子越来越少。
例如，“5406”的菌苔变薄，生长缓慢(半个月以上才长出菌落)，不产生丰富的桔红色的孢子层，有时甚至只长些黄绿色的基内菌丝。
3. 代谢产物生产能力的下降，即出现负突变。
例如，黑曲霉糖化力、放线菌抗生素发酵单位的下降以及各种发酵代谢产物量的减少等，在生产上是十分不利的。
4. 致病菌对宿主侵染能力下降。
如白僵菌对宿主致病能力的降低等。
5. 对外界不良条件（包括低温、高温或噬菌体侵染等）抵抗能力的下降等。
如抗噬菌体菌株变为敏感菌株等。
值得指出的是，有时培养条件的改变或杂菌污染等原因会造成菌种衰退的假象，因此在实践工作中一定要正确判断菌种是否退化，这样才能找出正确的解决办法。
（二）菌种衰退的原因菌种衰退不是突然发生的，而是从量变到质变的逐步演变过程。
开始时，在群体细胞中仅有个别细胞发生自发突变（一般均为负变），不会使群体菌株性能发生改变。
经过连续传代，群体中的负变个体达到一定数量，发展成为优势群体，从而使整个群体表现为严重的衰退。
2022年中国海洋大学生物技术专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2022年中国海洋大学生物技术专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、细菌的鞭毛是由______构成的，它从______长出，穿过______伸出体外。
2、烈性噬菌体生活史可分五个阶段，即______、______、______、______和______。
3、一切生物，在新陈代谢的本质上既存在着高度的______，又存在着明显的______。
4、对培养基pH进行内源调节的主要方式是借______调节和以______作备用碱调节两种；外源调节是根据实际需要从外界流加______或______液调节培养液的pH值。
5、我国自古以来就利用曲霉做发酵食品，如利用______的蛋白分解能力作酱，利用______的糖化能力制米酒。
6、微生物与人类关系的重要性，你怎么强调都不过分，微生物是一把十分锋利的双刃剑，它们在给人类带来______的同时也带来______。
7、由于升汞（HgCl2）有腐蚀作用，所以不能用于______消毒，特别是______制品。
8、微生物间和微生物与它种生物间的主要关系有五种，即______、______、______、______、______。
9、进行自然转化的必要条件为______和______。
10、当前已开发的新型疫苗有______、______、______、______、______和______等。
二、判断题11、古生菌细胞壁假肽聚糖上的糖链与真细菌肽聚糖的糖链一样，都可以被溶菌酶水解。
（）12、大多数放线菌和真菌都是氨基酸自养型生物。
（）13、EMP途径主要存在于厌氧生活的细菌中。
（）14、当前在人类的传染病中，病毒性病原体已占70%～80%，故它是人类健康的重大敌人。
（）15、卵孢子的数量决定于与藏卵器交配的雄器中细胞核的数量。
（）16、“三域学说”是根据对大量微生物DNA的测定后而提出的。
（）17、在相同作用温度下，湿热灭菌法比干热灭菌法的灭菌效果更好。
2022年哈尔滨职业技术学院生物制药技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案)
2022年哈尔滨职业技术学院生物制药技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、在经典遗传学发展至分子遗传学过程中，有四种模式微生物发挥了重大作用，它们是① ______，② ______，③ ______，④ ______。
2、在E.coli细胞膜上存在Mot蛋白和Fli蛋白，前者位于______，其功能为______，后者位于______，其功能为______。
3、微生物菌种保藏的原理是在______、______、______、______和______等环境条件下，使其处于代谢不活泼状态。
4、微生物的生长温度三基点分别是：______、______和______。
5、真菌细胞壁的主要成分是______，另有少量的蛋白质和脂类。
低等真菌的细胞壁成分以______为主，酵母菌以______为主，而高等陆生真菌则以______为主。
6、病毒的存在范围是病毒能够感染并在其中复制的______。
7、土壤放线菌的数量可占土壤微生物总量的______，且在______丰富和______土壤中这个比例较高。
8、PA培养基通常用来培养______，其pH值为______。
9、化能自养菌产能的途径主要是借助于经过呼吸链的氧化磷酸化反应，因此，化能自养菌一般都是______。
10、外毒素的种类很多，常见的如______、______、______和______ 等。
二、判断题11、嗜冷微生物适应环境的生化机制之一是在其细胞膜组成中含有大量不饱和、低熔点脂肪酸。
（）12、从经济的角度和对微生物适用性来看，“C·H·O·N”类均不是多数微生物良好的碳源。
（）13、硝酸细菌生命活动所需的ATP和[H]，是由水合亚硝酸（H2O·NO2－）脱氢，并分别经呼吸链和逆呼吸链传递后提供的。
（）14、从各地人群的粪便中分离到大量大肠杆菌纯培养物，这时就应对它们一一编上各自的菌株名称。
2022年江南大学生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案)
2022年江南大学生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、支原体因缺乏细胞壁，故出现一系列其他特征，包括______、______、______和______等。
2、病毒的存在范围是病毒能够感染并在其中复制的______。
3、Mg2＋以及一个厌氧的环境。
@40、由固氮酶固定的NH3必须与______结合形成______后，才可合成蛋白质和大量其他重要生物体的分子。
4、生长因子异养微生物很多，如______、______、______和______ 等。
5、食用菌一般是指可食用的有大型______的高等真菌，分类上主要属于______，其次为______。
6、1347年的一场由______引起的瘟疫几乎摧毁了整个欧洲，有1/3的人（约2500万人）死于这场灾难。
7、1971年，McCord和Fridovich提出了一个关于厌氧菌氧毒害机制的______学说。
其根据是厌氧菌缺乏______酶，一般也缺乏______酶，因此易受______等的毒害。
8、土壤放线菌的数量可占土壤微生物总量的______，且在______丰富和______土壤中这个比例较高。
9、丝状真菌遗传学研究主要是借助有性过程和______过程，并通过遗传分析进行的，而______是丝状真菌，特别是不产生有性孢子的丝状真菌特有的遗传现象。
10、常用的特异性免疫治疗剂有______、______、______和______等。
二、判断题11、古生菌细胞壁假肽聚糖上的糖链与真细菌肽聚糖的糖链一样，都可以被溶菌酶水解。
（）12、病毒、类病毒和朊病毒因其是活细胞内寄生物，不能在人工培养基上培养，故属于难养菌。
（）13、按米切尔的化学渗透学说来看，一切生物都可利用的通用能源就是ATP一种形式。
（）14、噬菌体因为是细菌的病毒，所以不可以通过细菌滤器。
（）15、子囊孢子是子囊菌亚门的无性孢子。
（）16、DNA-DNA杂交主要用于种、属水平上的分类研究，而进行亲缘关系更远（属以上等级）分类单元的比较，则需进行DNA-rRNA杂交。
实验室菌种的保藏方法
实验室菌种的保藏方法一、甘油悬液保藏法此法是将菌种悬浮在甘油蒸馏水中，置于低温下保藏，本法较简便，但需置备低温冰箱。
保藏温度若采用-20℃，保藏期约为0.5～1年，而采用-70℃，保藏期可达10年。
将拟保藏菌种对数期的培养液直接与经121℃蒸汽灭菌20min的甘油混合，并使甘油的终浓度在10％～15％，再分装于小离心管中，置低温冰箱中保藏。
基因工程菌常采用本法保藏。
二、冷冻真空干燥保藏法冷冻真空干燥保藏法又称冷冻干燥保藏法，简称冻干法。
它通常是用保护剂制备拟保藏菌种的细胞悬液或孢子悬液于安瓿管中，再在低温下快速将含菌样冻结，并减压抽真空，使水升华将样品脱水干燥，形成完全干燥的固体菌块。
并在真空条件下立即融封，造成无氧真空环境，最后置于低温下，使微生物处于休眠状态，而得以长期保藏。
常用的保护剂有脱脂牛奶、血清、淀粉、葡聚糖等高分子物质。
由于此法同时具备低温、干燥、缺氧的菌种保藏条件，因此保藏期长，一般达5～15年，存活率高，变异率低，是目前被广泛采用的一种较理想的保藏方法。
除不产孢子的丝状真菌不宜用此法外，其他大多数微生物如病毒、细菌、放线菌、酵母菌、丝状真菌等均可采用这种保藏方法。
但该法操作比较烦琐，技术要求较高，且需要冻干机等设备。
保藏菌种需用时，可在无菌环境下开启安瓿管，将无菌的培养基注入安瓿管中，固体菌块溶解后，摇匀复水，然后将其接种于适宜该菌种生长的斜面上适温培养即可。
三、液氮超低温保藏法液氮超低温保藏法简称液氮保藏法或液氮法。
它是以甘油、二甲基亚砜等作为保护剂，在液氮超低温（-196℃）下保藏的方法。
其主要原理是菌种细胞从常温过渡到低温，并在降到低温之前，使细胞内的自由水通过细胞膜外渗出来，以免膜内因自由水凝结成冰晶而使细胞损伤。
美国ATCC菌种保藏中心采用该法时，把菌悬液或带菌丝的琼脂块经控制致冷速度，以每分钟下降1℃/min的速度从0℃直降到-35℃，然后保藏在-150℃～-196℃液氮冷箱中。
2022年陕西科技大学食品科学与工程专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2022年陕西科技大学食品科学与工程专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、细菌糖被的功能为：① ______、② ______、③ ______和④ ______ 等。
2、影响噬菌体吸附作用的内外因素有______、______、______和______等。
3、化能自养菌产能的途径主要是借助于经过呼吸链的氧化磷酸化反应，因此，化能自养菌一般都是______。
4、微生物在培养基中生长时，由于其______而使培养基______发生改变；所以在配制培养基时，为维持该条件的相对恒定，常在培养基中加入缓冲物质如______或______。
5、真菌生长在基质内的菌丝称为______，其功能主要是______，伸出基质外的菌丝称为______，其功能主要是______。
6、细菌分类鉴定的主要文献是______。
7、测微生物大小使用的主要工具是______、______和______。
8、在自然界中存在许多极端环境，并进化出与这类环境相适应的各种极端微生物，如______、______、______、______、______、______和______等。
9、原核生物大肠杆菌的克隆载体中，能够容纳最大的外源DNA片段的载体是______，可容纳DNA片段大小为______；酵母质粒载体都是利用______质粒与细菌质粒pBR322构建而成的，主要有______、______和______3种。
目前能容纳最大外源DNA片段的载体是______。
10、抗体是由______合成并分泌的免疫球蛋白。
二、判断题11、鞭毛和细菌的须（菌毛）都是由蛋白质构成，因此两者具有相同的生理功能。
（）12、水活度值对微生物的生长十分重要，一般规律是，水生性较强的微生物适合在低水活度的基质中生长，而旱生微生物则宜在高水活度的基质中生长。
（）13、至今所知的一切光合磷酸化作用，都需要叶绿素或菌绿素的参与。
（）14、利用噬菌斑的形态和特点，可进行噬菌体的鉴定、分离和计数。