ABO血型检测(玻片法)

3．ABO红细胞血型检测

波片法

原理:

根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原,将血型分为A型、B型、AB型、及O型四种。可利用红细胞凝集试验即用已知抗A或抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原。

ABO抗体有天然和免疫两种。天然抗体是指未经可察觉的抗原刺激而产生的抗体。人在出生前尚未产生抗体，一般在出生几个月后才开始形成自己的抗体；到5-6岁时，具有较高的效价。

样本：

在操作前应先看说明书，有的厂商推荐用全血，有的厂商指定用盐水、血清或血浆悬浮的浓度较低的红细胞悬浮液。

试剂：

有卫生部颁发的生产许可证和批准文号的厂家生产的经中国药品生物制品检定所批批检定合格，并贴有防伪标签的试剂。

试剂盒组成：

1．有生产许可证的单克隆或多克隆抗A抗原抗体。

2．有生产许可证的单克隆或多克隆抗B抗原抗体。

3．有生产许可证的单克隆或多克隆抗A、B抗原抗体。

4．玻璃载波片或划分成小格的检测板。

5．蘸试剂棒。

操作步骤：

1．取清洁玻片，标明抗A、抗B、抗A、B,

2．在标记好的洁净波片上滴一滴抗-A

3．在另一标记好的洁净波片上滴一滴抗-B。

4．在每一波片的试剂上滴一滴已混匀的要检测的红细胞悬浮液（在盐水、血清或血浆）。

5．每一块波片用一个洁净的试剂棒将试剂和红细胞充分混匀，使混合物的面积大约为20mm x 40mm。

6．轻微倾斜波片2分钟。不要把波片放于发热的表面上。

7．判断，解释并记录所有的反应结果。

结果判读：见表：

红细胞的ABO定型

正向定型结果判读

抗A 抗B抗A,B

O

+ + A

+ + B

+ + + AB

有明显的凝集块为阳性结果，2分钟后仍为均匀的红细胞悬液则为阴性结果。

注意：

1．波片法较试管法更易使操作者接触样本，工作人员必须阅读厂商说明书上的安全措施

2．波片法不适用于患者和供者血清中的抗体。