BO及Rh血型鉴定流程图
ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程
ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程(一)检验目的检测红细胞表面ABO血型抗原、RhD抗原及血清(或血浆)中抗A、抗B抗体，确定受检者ABO及RhD血型。
(二)检验原理1.手工试管法、玻片法或纸板法利用标准IgM抗A／B血清鉴定红细胞表面ABO抗原即正定型，利用已知ABO 血型反定型红细胞鉴定同一标本血清(或血浆)中的抗A／B 抗体即反定型，综合正反定型结果确定受检标本ABO血型；利用标准IgM抗D直接鉴定RhD血型。
2.微柱凝胶法ABO／RhD卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶颗粒中，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法ABO／RhD卡的微管中装填有玻璃微珠和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工、半自动、全自动ABO血型及RhD血型鉴定试验。
(四)设备性能参数各种血型检测系统性能指标参见相应血型检测系统说明书。
(五)器材与试剂1.器材WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO 血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro AutoVue Innova全自动血型配血系统、B600-A型低速离心机、KA-2200血清学专用离心机、阅片灯箱、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×12mm和75m m×l2mm)、血型鉴定专用纸板、玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
2.试剂Diana DG Gel ABO-CDE血型卡、DiaMed ABO／RhD血型卡、OTHROBiovueABO／RhD血型卡、2％氢氧化钠溶液、生理盐水、抗A／B标准血清、抗D标准血清、3％～5％反定型试剂红细胞、1％反定型试剂红细胞。
血型鉴定 ppt课件
四、实验步骤
1、取清洁玻片两块，分别标明“抗A”和 “抗B” 2、将标准抗A和抗B血清各一滴，分别滴在 相应玻片上的中央处 3、用75%乙醇的棉球消毒指端或耳垂，用 消毒采血针刺破皮肤取血
血型鉴定
4．用消毒牙签沾血少许与充分混合。
ABO血型系统根据受试者红细胞上是否含有 凝集原和凝集原的种类，将血型分为A, B, O及AB 型。ABO血型鉴定是将受试者红细胞分别加入到 标准A型血清、标准B型血清中进行鉴定。
血型鉴定
含某种凝
集原的红 细胞
+
含相应凝 集素的血
清
=
红细胞凝 集反应
血型鉴定
血型(blood group)通常指红细胞膜上特异性 抗原的类型.
血型鉴定
4.注意区别凝集现象与红细胞叠连。发生 红细胞凝集时，肉眼观察呈朱红色颗粒， 且液体变得清亮。
血型鉴定
七.实验小结
1.含某种凝集原的红细胞与含相应凝集素 的血清相遇，会产生凝集现象 .因此血型 不相容的两人不能互相输血。
2.临床上在输血前必须注意鉴定血型,进行 交叉配血,以确保安全输血。
ABO血型鉴定
血型鉴定
目录
一.实验目的 二.实验原理及相关知识 三.实验材料 四.实验步骤 五.实验结果 六.注意事项 七.实验小结
血型鉴定
精品资料
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
血型鉴定
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
Rh(D)血型鉴定标准操作程序
SOP_10-2 Rh(D)血型鉴定标准操作程序一、目的：确保输血安全，严格检验质量标准，为临床提供及时、可靠的结果报告。
二、适用范围：血型鉴定。
三、操作人员：检验科授权工作人员四、操作步骤：1. 原理：1.1 Rh血型系统：Rh血型是一个极为复杂的血型系统，其重要性仅次于ABO血型系统。
ISBT现已确定Rh血型系统中共有46个血型抗原。
其中主要的抗原D、C、c、E、e分别表示为RH1、RH2、RH3、RH4、RH5或004001、04002、004003、004004、004005。
其抗原中包括了五个抗原之间的复合体以及弱表达等等，但在临床中主要的问题大都出自这五个抗原:抗E、抗e、抗C、抗c、抗D。
用这五种抗血清检查红细胞抗原可以有18种表现型，在临床输血中一般只做D抗原的鉴定。
1.2 D抗原：含有D（正常D抗原）；弱D（weak D）；不完全D（partial D）；不完全弱D；增强性D（elevated D）；正常D抗原。
由于红细胞上的D抗原较少，弱D抗原不能与盐水抗体（IgM）凝集，只能通过与不完全抗体的结合用抗球蛋白试验检出Del。
一些非常弱的D型抗原，只能被吸收放散试验（如三氯乙烯和三氯甲烷放散法）检测出来。
1.3 Rh 抗体：Rh血型的免疫原性强度可能仅次于ABO血型，其中以D抗原最强，其次为E、c、C、e。
绝大部分Rh抗体为免疫抗体，但少部分可能为自然发生的抗体。
2 试剂：（1）抗D试剂，包括完全抗体性质的单克隆或多克隆抗体及改性IgG抗体等低蛋白试剂；（2）Rh对照试剂（通常可用自身血清或抗A、B管代替）；（3）Rh阳性和阴性5%红细胞悬液；（4）待检2~5%红细胞悬液。
3 方法：3.1 样本采集：真空抽血2ml至一次性抗凝管（EDTA－K2干粉）中，混匀后备用。
3.2 操作：3.2.1 玻片法：使用完全抗体性质的单克隆或多克隆抗体等低蛋白试剂。
不适合于输血前献血者和病人的血型鉴定，仅适合于临床体检时的RH血型鉴定。
ABO血型及Rh血型PPT课件
盐水介质检测
PCR-SSP
阳性
阴性
测序
抗人球蛋白介质
阳性 加做直抗实验
阴性 吸收放散实验
阳性
阴性
阳性
阴性
放散实验 再次定型
Weak D/Partial D
Del
11
.
4.RHD血型输血策略
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❖ （ 一 ） 弱 D 患 者 要 看 作 Rh （ D ） 阴 性 尽 量 输 Rh（D）阴性血（供者为弱D要当Rh（D）阳 性血用）
❖ 我们现在通常把红细胞上含有D抗原的称为RH 阳性，而不含有D抗原的称为RH阴性
❖RH系统还有RhC、c 、E 、e 四种抗原， RhAG系统等
❖ RH阴性的个体在亚洲汉族人当中很稀有，比率 为0.3%左右。
❖ RH血型不合的输血，有可能产生危及生命的溶 血性输血反应，胎、母RH血型不合的妊娠有可 能发生新生儿溶血病，甚至新生儿死亡或 胎死 宫内。
ABO血型和Rh(D)血型
广州医科大学附属第五医院输血科
2017年5月3日
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1. ABO血型
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❖ 天然抗体
❖ ABO血型系统的特殊之处在于：正常人的血液中持 续存在抗体，而其他系统一般没有天然抗体，需 要通过输血或妊娠引入抗原后才会产生抗体（免 疫抗体）。
❖ 正定型：病人红细胞+标准血清（试剂）
▪ 鉴定技术 1. 用抗A，抗AB，抗H做正定型 2. 反定型，检测有无抗A1 3. 吸收放散实验 4. 唾液分泌型物质的检测 ❖ 判断:凝集强度
6
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4. 特殊血型-孟买类孟买
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❖ 孟买 ❖ Oh，正定型：不与抗A，抗B，抗H反应，正定型易误作O
ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程
ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程(一)检验目的检测红细胞表面ABO血型抗原、RhD抗原及血清(或血浆)中抗A、抗B抗体，确定受检者ABO及RhD血型。
(二)检验原理1.手工试管法、玻片法或纸板法利用标准IgM抗A／B血清鉴定红细胞表面ABO抗原即正定型，利用已知ABO 血型反定型红细胞鉴定同一标本血清(或血浆)中的抗A／B 抗体即反定型，综合正反定型结果确定受检标本ABO血型；利用标准IgM抗D直接鉴定RhD血型。
2.微柱凝胶法ABO／RhD卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶颗粒中，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法ABO／RhD卡的微管中装填有玻璃微珠和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工、半自动、全自动ABO血型及RhD血型鉴定试验。
(四)设备性能参数各种血型检测系统性能指标参见相应血型检测系统说明书。
(五)器材与试剂1.器材WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO 血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro AutoVue Innova全自动血型配血系统、B600-A型低速离心机、KA-2200血清学专用离心机、阅片灯箱、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×12mm和75m m×l2mm)、血型鉴定专用纸板、玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
2.试剂Diana DG Gel ABO-CDE血型卡、DiaMed ABO／RhD血型卡、OTHROBiovueABO／RhD血型卡、2％氢氧化钠溶液、生理盐水、抗A／B标准血清、抗D标准血清、3％～5％反定型试剂红细胞、1％反定型试剂红细胞。
最新ABO、Rh(D)血型鉴定PPT课件
缺点：
1、只能检测出完全抗体（抗-A、抗-B）引起的血 型不合，对免疫性抗体引起的血型不合不能检出， 有输血史或不明输血史及妊娠史不能用该法。
2、本实验中的生理盐水对血清（浆）中的抗体有 稀释作用，易导致配血结果假阴性。
3、易受冷凝集素的干扰。
聚凝胺配血法 1、在盐水配血法操作完后，主、次侧加入低离子强度
2.从“切合题目”的角度分析本诗，恰当的一项 是（ ）。 A.第一、二句中的“西山”“南浦”切合“野” 字。 B.第三、四句“海内”“天涯”切合“野望“二 字。 C.第五、六句中的“迟暮”“涓埃”切合“望 “字。 D.第七句中的“出郊”“极目”切合“野望”二 字。
(三)阅读下面一首唐诗，完成选择题。 题李凝幽居 贾岛
细胞、吸管、玻片等
方法：正定型和反定型 原理：正定型是检测红细胞表面的抗原，用标
准抗A和抗B分型血清测定红细胞上有无相应 的A抗原或（和）B抗原；反定型是检测血清 （浆）中的抗体，用标准A型细胞和B型细胞 测定血清中有无相应的抗A和（或）抗B抗体。
Rh(D)血型定型
目的：鉴定红细胞表面是否含有D抗原。 适用范围：受血者、献血者Rh(D)血型鉴定 使用器材和材料：Rh抗(-D)标准血清、吸管、玻片等
无 凝 集
3400r/ min，
各加重悬
开
红 细
液2滴， 胞
离心 10S。
轻摇试管，
均 匀
观察结果。 散
凝 集 红 细 胞 凝 集 成 团
不畏浮云遮望眼 自缘身在最高层
诗歌鉴赏选择题解法探究
三台中学补习中心 李俊科
教学目标
1、了解高考诗歌鉴赏客观题的设题角度 （考什么?） 。 2、探究高考诗歌鉴赏客观题的设题陷阱
ABO和Rh (D) 血型鉴定操作规程(盐水法)
ABO和Rh (D) 血型鉴定操作规程（盐水法）一．目的规范ABO/Rh (D) 血型鉴定的操作流程；保证临床用血的安全性及有效性。
二．职责血库技术人员负责ABO和Rh (D) 血型鉴定。
三．适用范围适用于血库ABO和Rh（D）血型鉴定血标本。
四．所需材料和设备1.材料抗-A、抗-B、抗-D试剂、A、B、O型反定型试剂红细胞、生理盐水、小试管、滴管、患者血标本。
2.设备普通离心机、显微镜、血型血清学专用离心机。
五．操作步骤1.将标本2000r/分钟离心2分钟，使标本血浆/血清与红细胞分离，并吸取红细胞配制3%悬液。
2.取小试管3支，分别标明-A、抗-B、抗-D，用滴管分别加抗-A、抗-B、抗-D试剂各2滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者3%红细胞悬液1滴，混匀。
3.另取小试管3支，分别标明A、B、O细胞，用滴管分别加入受检者血清2滴于试管底部，再分别以滴管加入3% A、B、O型试剂红细胞悬液1滴，混匀。
页脚内容14.以1000r/分钟离心1分钟。
5.将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集（或溶血）现象，如肉眼不见凝集，应将反应物倒在玻片上，再以显微镜检查。
6. ABO血型结果判定（见下表）：ABO血型结果判断分型试剂+受检者红细胞（正定型）受检者血清+试剂红细胞（反定型）抗-A 抗-B A细胞B细胞O细胞血型注：“＋”凝集；“－”不凝集7.Rh（D）血型判定：红细胞与抗-D试剂凝集为Rh (D) 阳性无凝集为Rh阴性。
8.凝集强度判断标准：页脚内容24+ 红细胞凝集成一大块，背景清晰透明；3+ 红细胞凝集成数小块，背景尚清晰；2+ 红细胞凝块分散成许多小块，背景可见到游离红细胞；1+ 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞；±镜下可见数个红细胞凝集在一块，周围有许多游离红细胞；混合外观凝集（Mixed Field, MF）是指镜下可见少数红细胞凝集，而绝大多数红细胞仍分散分布；－（阴性）镜下未见凝集，红细胞均匀分布。
RH血型鉴定
• 抗D抗体最强，其次是抗c和抗E。
• 三、Rh血型的遗传和命名 • 四、Rh血型鉴定
是否含有D抗原 因Rh抗体多为不完全抗体，所以多采用酶介质、 抗人球蛋白等试验方法。
• （一）聚凝胺法 • 【原理】 • 聚凝胺：产生很多阳离子 • 低离子强度溶液：降低红细胞的Zate电位 • 红细胞表面含D抗原，与抗D抗体凝集 • 柠檬酸盐解聚液：消除聚凝胺的正电荷，使正 常红细胞的非特异性凝集解散，而抗原抗体引 起的凝集仍然存在
聚凝胺 低离子强度溶液
柠檬酸盐解聚液
• （二）酶介质法 • 【原理】 • 酶（木瓜酶、菠萝酶等）可破坏红细胞表面 带负电荷的唾液酸，降低红细胞表面负电荷， 使红细胞之间排斥力减小，红细胞间距缩小， 在不完全抗体的作用下发生凝集。
• （三）抗人球蛋白法 • 【原理】： • 不完全IgG类抗D抗体,使红细胞致敏,加入经 一定稀释的抗人球蛋白血清后,将致敏红细 胞连接，发生肉眼可见的凝集。
消除聚凝胺的正电荷使正常红细胞的非特异性凝集解散而抗原抗体引起的凝集仍然存在低离子强度溶液柠檬酸盐解聚液酶木瓜酶菠萝酶等可破坏红细胞表面带负电荷的唾液酸降低红细胞表面负电荷使红细胞之间排斥力减小红细胞间距缩小在不完全抗体的作用下发生凝不完全igg类抗d抗体使红细胞致敏加入经一定稀释的抗人球蛋白血清后将致敏红细胞连接发生肉眼可见的凝集
• 三、标准血清要求 • 1、特异性 • 2、效价 • 3、亲和力 • 4、不含冷凝集素 • 5、不含补体，无任何污染 • 四、标准红细胞悬液的制备
• 五、ABO血型鉴定方法 • 正定型： • 反定型：
用已知抗A、抗B和抗A＋B分型血清来测定 红细胞上有无相应的A、B抗原 用已知A抗原和B抗原红细胞来测定 血清中有无相应的抗A、抗B抗体。
血型鉴定方法
谢谢
二 实验原理
血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在 ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种 抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。血型 鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清 （含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗 体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者 红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系 统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、 B、AB、O四型。 见下表
A型RBC
反定型
B型RBC O型RBC
结果
+ -
+
+
+
+
+ -
-
O
A B
+
+
-
-
-
AB
五 注意事项
玻片、试管都要标记！！！， A及B标准血清绝对不能相混,不 要依靠用染料颜色标记血清。工作中要形成自己的习惯！ 所用玻片、试管实验前必须清洗干净，以免出现假凝集现象。 红细胞悬液滴管头不能接触标准血清液面，竹签一端去混匀一 侧就不能去接触另一侧。 一般先加血清，然后再加红细胞悬液，便于核实是否漏加血清。 离心时间、速度严格要求，以防假阳 性或假阴性结果。 试验用血清和试剂红细胞都应标准化。 要在光亮的背景下观察凝集,可使用光镜检查小的凝集,同时应 注意观察凝集强度，有助于A、B亚型的发现，观察后立即记录 观察结果。
ＡＢＯ正反定型结果不一致的常 见原因有哪些？
（１）人为因素：①试剂不标准、失效或污染； ③操作中加错样本或试剂、离心速度不足或过 度、细胞与血清比例不当、结果判断错误等。 （２）客观因素：①因某些疾病导致抗原减弱 如：白血病，MDS（骨髓增生异常综合征）患 者血型抗原减弱导致误定血型。②受检者抗体 效价低（如婴幼儿、老年人、大量输液的患者， 血浆蛋白低下等）③某些药物干扰如输注右旋 糖酐后会干扰血型检定。
血型鉴定的步骤
血型鉴定是确定一个人的血型类型的过程，一般包括以下步骤：
采集血样：使用无菌的针头或采血器具采集被测者的静脉血样本。
常用的采集部位是腕部或肘窝。
血型抗体试验：将被采集的血液样本分成几个小样本，每个样本与已知血型的抗体混合。
根据凝集反应来确定被测者的血型。
常见的血型抗体试验包括ABO血型和Rh血型。
ABO血型鉴定：使用抗A和抗B血清，将其与被测者的血样混合。
如果血样与抗A血清凝集，表示被测者具有A型血；如果血样与抗B血清凝集，表示被测者具有B型血；如果血样与抗A和抗B血清都凝集，表示被测者具有AB型血；如果血样与抗A和抗B血清都不凝集，表示被测者具有O型血。
Rh血型鉴定：使用抗Rh(D)血清，将其与被测者的血样混合。
如果血样与抗Rh(D)血清凝集，表示被测者具有Rh阳性血型；如果血样与抗Rh(D)血清不凝集，表示被测者具有Rh阴性血型。
结果确认：根据凝集反应的结果，确定被测者的血型类型。
结果应该由专业的实验室技师或医生进行解读和确认。