组培常用的消毒方法

组培常用的消毒方法

一、物理消毒方法：

是利用物理因素作用于病原微生物将之杀灭或清除的方法。物理因素按其在消毒中的作用可分为五类：

（１）具有良好灭菌作用的，如热力、微波、红外线、电离国徽等，它杀灭微生物的能力很强，可达来灭菌要求；

（２）具有一定消毒作用的，如紫外线、超声波等，可杀灭绝大部分微生物；

（３）具有自然净化作用的如寒冷、冰冻、干燥等，它们杀灭微生物的能力有限；

（４）具有除菌作用的，如机械清除、通风与过滤除菌等，可将微生物从传染媒介物上去掉；

（５）具有辅助作用的，如真空、磁力、压力等，虽对微生物无伤害作用，但能为杀灭、抑制或清除微生物创造有利条件。

二、热力灭菌法：

包括干热灭菌与湿热灭菌法。热力灭菌效果可靠又简便易行，为首选的灭菌方法。

干热灭菌可使菌体蛋白质变性及电解质浓缩。湿热灭菌可使菌体蛋白质变性，核酸降解及损伤细菌的细胞膜。

湿热灭菌的优越性有穿透力强，菌体吸收水分易变性凝固及蒸汽有潜在热能。

干热灭菌法主要有焚烧法、烧灼法和干烤法3种。

（1）焚烧法：是一种较彻底的灭菌方法，在焚烧炉内焚烧尸体及废弃物，可杀灭细菌芽胞。

（2）烧灼法：为直接用火焰灭菌，例如在微生物实验室内，利用火焰对接种环，试管口等灭菌。

（3）干烤法：为利用烤箱加热至160～170℃，2小时，适用于耐高温的玻璃、陶瓷或金属器皿的灭菌。

湿热灭菌法包括巴氏消毒法、煮沸法、加压蒸汽灭菌法和间歇蒸气灭菌法等。

（1）巴氏消毒法：加热62℃30分钟或71.1℃15～30秒（s），不使蛋白质变性，但可杀灭常见致病菌常用于牛奶和酒类的消毒。

（2）煮沸法：在1个大气压下，将水煮沸（100℃）5分钟，可杀灭细菌繁殖体，如加入2%碳酸钠，可提高沸点至105℃并可防锈，常用于餐具及一些医疗器皿的消毒。

（3）加压蒸汽灭菌法：应用高压蒸汽灭菌器，加压至1.05kg/cm2即温度达121.3℃，

15～20分钟，可杀灭细菌芽胞和各类微生物，常用于培养基、葡萄糖盐水输液、手术敷料及各种耐高温湿物品的灭菌。

（4）间歇蒸气灭菌法采用流动蒸气间歇加热方式，以达到灭菌的目的。将需灭菌物品臵于灭菌器中，100℃15～30分钟，每日一次，连续三日，即可杀灭芽胞。此法适用于一些不耐高热的含糖、牛奶等培养基。

三、紫外线消毒

（1）特性紫外线属电磁波辐射，最大杀灭微生物波长为253.7nm,其释放的能量较低，故穿透能力较弱。紫外线杀灭微生物的机理为紫外线主要作用于DNA,使DNA形成胸腺嘧啶二聚体，使微生物DNA失去转化能力而死亡。

（2）主要产品有：普通直管热阴极低压汞紫外线消毒灯，循环风紫外线空气消毒机，紫外线表面消毒器，紫外线消毒箱等。

(3)使用范围适用范围为室内空气，物体表面消毒。

常用的室内悬吊式紫外线灯对室内空气消毒时安装的数量为平均 1.5W/m3,照射时间不少于30分钟。

（4）紫外线消毒应注意的问题

1）保持紫外线灯表面的清洁(酒精擦拭)；定期监测紫外线强度（30W要>70μW/cm2）；

2)消毒室内空气时，房间内应保持清洁干燥，减少尘埃和水雾，温度低于20℃或高于40℃，相对湿度大于60%时，应适当延长照射时间；

3)用于消毒物体表面时，应便于紫外线直接照射于被消毒物体表面；

4)不得使紫外线光源直接照射到人体，以免引起损伤。

四、静电吸附式空气消毒器：

（1）特性静电吸附式空气消毒器采用静电吸附原理，加以过滤系统，不仅可过滤和吸附空气中带菌的尘埃，也可吸附微生物。

（2）适用范围主要用于有人在的条件下空气的消毒。

（3）使用方法在一个20～30m2的房间内，使用一台大型静电式空气消毒器，消毒30min后，可达到国家卫生标准。

（4）注意事项

1）所用消毒器的循环风量(m3/h)必须是房间体积的8倍以上。

2）使用过程中，如发现有电源线损坏、漏电或臭氧泄漏等现象，应马上停止使用，请专业人员修理。

五、常用化学消毒法：

1.漂白粉：为常用消毒剂。主要成分为次氯酸钙，其杀菌作用决定于次氯酸钙中含的有效氯的量。由于其性质不稳定，使用时应进行测定，一般以有效氯含量≥25％为标准，少于25％则不能使用。

漂白粉有乳剂、澄清液、粉剂三种剂型。

六、其它消毒法：

澄清液通常用500g粉剂加水5升搅匀，静臵过夜，即成10％澄清液。常用浓度为0.2％。用于浸泡、清洗、擦拭、喷洒墙面（每1cm2地面、墙面用200～1000ml）。对结核杆菌和肝炎病毒用5％澄清液作用1～2小时。

乳剂：20％乳剂用于粪、尿、痰、剩余食物的消毒。

粉剂：用于排泄物、分泌物等消毒。将排泄物1/5～2/5量的干漂白粉加入后，搅拌均匀，放臵1～2小时即可。容器再用0.5％澄清液浸泡1～2小时后清洗。粉剂还可用于潮湿地面消毒，每cm2用20～40g。

漂白粉不适宜对衣服、纺织品、金属品和家具进行消毒。

漂白粉用于消毒剂已有100多年的历史，虽有不稳定等缺点，因其价格便宜及杀菌谱广，现仍用于饮水、污水、排泄物及其污染环境消毒。

2.过氧乙酸：无色透明液体，有刺激性酸味和腐蚀、漂白作用，是强氧化剂，杀菌能力强，0.01％溶液可杀死各种细菌，0.2％溶液可灭活各种病毒，是肝炎病毒较好的消毒剂，1％～2％溶液可杀死霉菌与芽胞。

国内成品为将其原料冰醋酸300ml加浓硫酸15.8ml，装在一个塑料瓶内；另一个塑料瓶装过氧化氢150ml。需要时合于1瓶摇匀，静臵3天，即成18％过氧乙酸。

溶液使用：对衣物用0.04％浸泡2小时；洗手用0.2％液体；表面喷洒用0.2％～1％溶液，作用30～60分钟；食具洗净后用0.5％～1％溶液浸泡30～60分钟；蔬菜、水果洗净后，用0.2％溶液浸泡10～30分钟。

过氧乙酸也可用于熏蒸，用量1～3g/m3，关闭门、窗，熏蒸30分钟。

过氧乙酸具有腐蚀性和漂白性，因此一些物品及衣物消毒后必须立即洗涤干净。

3.乙醇：为临床最常用消毒剂。可与碘酊合用于皮肤消毒。浓度为70％～90％，能迅速杀灭细菌繁殖体，革兰阴性菌尤为敏感，不能杀灭细菌芽胞，不得用于外科器械灭菌。对肝炎病毒也无效。

4.甲醛：含甲醛36％水溶液，又称福尔马林，是一种古老的消毒剂。具有刺激性臭。主要用于熏蒸消毒。对于皮毛、衣物、污染房间均有效。有强大杀菌作用，能杀灭芽胞，对细菌繁殖型效果更好。使用方法为在一密闭房间，用12.5～25ml/m3（有芽胞时加倍）