不同生长年限滇重楼中4种重楼皂苷的含量比较
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不同生长年限滇重楼中 4 种重楼皂苷的含量比较Δ
张 烨＊， 吕霜霜， 周 浓， 马云霞， 高科江， 邬思文 （大理学院药学院， 大理市 671000）
中图分类号 R284.1； R927.2 文献标识码 A 文章编号 1001-0408 （2011） 43-4081-03
摘 要 目的： 研究滇重楼中 4 种重楼皂苷的含量与其生长年限的关系。方法： 采用高效液相色谱法测定不同生长年限滇重楼中 重楼皂苷Ⅰ 、 Ⅱ、 Ⅵ、 Ⅶ的含量 。 色谱柱为 Agilent Zorbax SB-C18 （150 mm× 4.6 mm， 5 μ m） ， 流动相为乙腈 - 水 （梯度洗脱） ， 流速为 -1 1.0 mL ㊃ min ， 检测波长为 203 nm， 柱温为 35 ℃。结果： 不同生长年限滇重楼中重楼皂苷的含量差异较明显， 3 年生药材重楼皂苷 的含量比较低， 4、 5 年生药材含量明显升高， 5 年以上药材含量有下降趋势。结论： 重楼皂苷含量的变化规律可为确定滇重楼采收 年限提供参考依据。 关键词 高效液相色谱法； 滇重楼； 重楼皂苷； 含量； 比较
Comparison of 4 Kinds of Chonglou Saponins Contents in Paris polyphylla of Different Growing Years ZHABaidu NhomakorabeaG Ye，LÜ Shuang-shuang，ZHOU Nong，MA Yun-xia，GAO Ke-jiang，WU Si-wen （College of Pharmacy，Dali University，Dali 671000，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To investigate the relationship of 4 kinds of chonglou saponins contents in Paris polyphylla with different growing years. METHODS：HPLC method was adopted to determine the contents of chonglou saponins Ⅰ ， Ⅱ， Ⅵ， Ⅶ in P. polyphylla of different growing years. Agilent Zorbax SB-C18 （150 mm× 4.6 mm， 5 μ m） column was used with mobile phase composed of acetonitrile-water （gradient elution） at the flow rate of 1.0 mL㊃min-1. The detection wavelength was set at 203 nm，and the column temperature was 35 ℃. RESULTS：The diversity of the content of chonglou saponins in P. polyphylla of different growing years was great. The ingredients in 3 years of P. polyphylla were in the lower levels，the ingredients in 4 and 5 years increased significantly，and the ingredients in over 5 years had a decreasing tendency. CONCLUSION：The changing rules of 4 chonglou saponins in P. polyphylla provide scientific basis for the collecting year. KEY WORDS HPLC；Paris polyphylla；Saponins；Content；Comparison 滇重楼系百合科植物云南重楼 Paris polyphylla Smith var. yunnanensis （Franch.）Hara 的干燥根茎[1]， 为 《中国药典》 收载的 常用中药材 ， 具有抗癌 、 止血 、 镇痛 、 镇静等生物活性 ， 应用广 泛 [2]。 在云南 ， 滇重楼是一些著名中成药如云南白药 、 宫血宁 胶囊、 楼莲胶囊等的主要原料之一， 每年仅云南省的滇重楼用 量就达数百吨， 市场需求量较大。由于滇重楼生长缓慢， 加之 长期掠夺式的采挖， 使其资源日益减少， 其工业药用原料严重 紧缺， 现已列为云南省 30 种稀缺濒危天然药物之一[3]。 甾体皂苷是滇重楼的主要活性成分 ， 具有多种独特的药 4] 理活性 [3， ， 其含量高低是衡量药材质量的重要指标之一 。 随 着野生资源的日渐减少， 人工栽培品越来越多， 已有学者从不 同海拔、 土壤性质、 栽培技术等方面探讨了对滇重楼品质的影 响因素[5～10]。但对不同生长年限滇重楼的品质评价， 尚未见系 统的研究报道。因此， 本试验采用高效液相色谱 （HPLC） 法对 5 批不同生长年限滇重楼中 4 种重楼皂苷的含量进行了比较研 究， 以期探讨滇重楼种植年限的科学性问题 ， 对其质量评价 、 采收年限的选择及资源的可持续利用具有重要的参考意义。 进样器、 柱温箱、 DAD 检测器、 Agilent chemstation 化学工作站 （美国 Agilent 公司） ； KQ-250B 型超声波清洗器 （昆山市超声仪 器有限公司） ； RE-2000 型旋转蒸发仪 （上海亚荣生化仪器厂） ； SHZ- Ⅲ循环水式真空泵 （巩义市予华仪器有限责任公司） ； AE240 天平 （梅特勒-托利多仪器 （上海） 有限公司） 。 重楼皂苷Ⅰ 、 Ⅱ、 Ⅵ、 Ⅶ对照品 （中国药品生物制品检定 所 ，批 号 分 别 为 111590-200402、111591-200402、111592200402、 111593-200402， 供含量测定用） ； 乙腈 （色谱纯 ， 美国 Tedia 公司） ； 水为娃哈哈纯净水， 其余试剂均为分析纯； 滇重楼 5 批样品于 2009 年 10 月 18 日采自云南省云龙县关坪乡人工种 植基地 ， 经大理学院药学院生药学教研室周浓讲师鉴定为百 合科植物云南重楼 P. polyphylla var. yunnanensis （Franch.） Hara 的干燥根茎。
张 烨＊， 吕霜霜， 周 浓， 马云霞， 高科江， 邬思文 （大理学院药学院， 大理市 671000）
中图分类号 R284.1； R927.2 文献标识码 A 文章编号 1001-0408 （2011） 43-4081-03
摘 要 目的： 研究滇重楼中 4 种重楼皂苷的含量与其生长年限的关系。方法： 采用高效液相色谱法测定不同生长年限滇重楼中 重楼皂苷Ⅰ 、 Ⅱ、 Ⅵ、 Ⅶ的含量 。 色谱柱为 Agilent Zorbax SB-C18 （150 mm× 4.6 mm， 5 μ m） ， 流动相为乙腈 - 水 （梯度洗脱） ， 流速为 -1 1.0 mL ㊃ min ， 检测波长为 203 nm， 柱温为 35 ℃。结果： 不同生长年限滇重楼中重楼皂苷的含量差异较明显， 3 年生药材重楼皂苷 的含量比较低， 4、 5 年生药材含量明显升高， 5 年以上药材含量有下降趋势。结论： 重楼皂苷含量的变化规律可为确定滇重楼采收 年限提供参考依据。 关键词 高效液相色谱法； 滇重楼； 重楼皂苷； 含量； 比较
Comparison of 4 Kinds of Chonglou Saponins Contents in Paris polyphylla of Different Growing Years ZHABaidu NhomakorabeaG Ye，LÜ Shuang-shuang，ZHOU Nong，MA Yun-xia，GAO Ke-jiang，WU Si-wen （College of Pharmacy，Dali University，Dali 671000，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To investigate the relationship of 4 kinds of chonglou saponins contents in Paris polyphylla with different growing years. METHODS：HPLC method was adopted to determine the contents of chonglou saponins Ⅰ ， Ⅱ， Ⅵ， Ⅶ in P. polyphylla of different growing years. Agilent Zorbax SB-C18 （150 mm× 4.6 mm， 5 μ m） column was used with mobile phase composed of acetonitrile-water （gradient elution） at the flow rate of 1.0 mL㊃min-1. The detection wavelength was set at 203 nm，and the column temperature was 35 ℃. RESULTS：The diversity of the content of chonglou saponins in P. polyphylla of different growing years was great. The ingredients in 3 years of P. polyphylla were in the lower levels，the ingredients in 4 and 5 years increased significantly，and the ingredients in over 5 years had a decreasing tendency. CONCLUSION：The changing rules of 4 chonglou saponins in P. polyphylla provide scientific basis for the collecting year. KEY WORDS HPLC；Paris polyphylla；Saponins；Content；Comparison 滇重楼系百合科植物云南重楼 Paris polyphylla Smith var. yunnanensis （Franch.）Hara 的干燥根茎[1]， 为 《中国药典》 收载的 常用中药材 ， 具有抗癌 、 止血 、 镇痛 、 镇静等生物活性 ， 应用广 泛 [2]。 在云南 ， 滇重楼是一些著名中成药如云南白药 、 宫血宁 胶囊、 楼莲胶囊等的主要原料之一， 每年仅云南省的滇重楼用 量就达数百吨， 市场需求量较大。由于滇重楼生长缓慢， 加之 长期掠夺式的采挖， 使其资源日益减少， 其工业药用原料严重 紧缺， 现已列为云南省 30 种稀缺濒危天然药物之一[3]。 甾体皂苷是滇重楼的主要活性成分 ， 具有多种独特的药 4] 理活性 [3， ， 其含量高低是衡量药材质量的重要指标之一 。 随 着野生资源的日渐减少， 人工栽培品越来越多， 已有学者从不 同海拔、 土壤性质、 栽培技术等方面探讨了对滇重楼品质的影 响因素[5～10]。但对不同生长年限滇重楼的品质评价， 尚未见系 统的研究报道。因此， 本试验采用高效液相色谱 （HPLC） 法对 5 批不同生长年限滇重楼中 4 种重楼皂苷的含量进行了比较研 究， 以期探讨滇重楼种植年限的科学性问题 ， 对其质量评价 、 采收年限的选择及资源的可持续利用具有重要的参考意义。 进样器、 柱温箱、 DAD 检测器、 Agilent chemstation 化学工作站 （美国 Agilent 公司） ； KQ-250B 型超声波清洗器 （昆山市超声仪 器有限公司） ； RE-2000 型旋转蒸发仪 （上海亚荣生化仪器厂） ； SHZ- Ⅲ循环水式真空泵 （巩义市予华仪器有限责任公司） ； AE240 天平 （梅特勒-托利多仪器 （上海） 有限公司） 。 重楼皂苷Ⅰ 、 Ⅱ、 Ⅵ、 Ⅶ对照品 （中国药品生物制品检定 所 ，批 号 分 别 为 111590-200402、111591-200402、111592200402、 111593-200402， 供含量测定用） ； 乙腈 （色谱纯 ， 美国 Tedia 公司） ； 水为娃哈哈纯净水， 其余试剂均为分析纯； 滇重楼 5 批样品于 2009 年 10 月 18 日采自云南省云龙县关坪乡人工种 植基地 ， 经大理学院药学院生药学教研室周浓讲师鉴定为百 合科植物云南重楼 P. polyphylla var. yunnanensis （Franch.） Hara 的干燥根茎。