诊断-免疫学检验
免疫学检验的方法和特点
免疫学检验的方法和特点免疫学检验是一种通过检测机体免疫系统产生的抗体或抗原来诊断疾病的方法。
它基于免疫反应的原理,利用特定的抗体和抗原之间的相互作用来检测人体内的免疫反应物质。
目前,免疫学检验已经成为临床诊断和科研领域中不可或缺的重要手段之一1.免疫层析:免疫层析是一种将待检测物质(抗体或抗原)移动到特定层析纸或凝胶柱上,通过与特异抗体或抗原的结合来检测它们的方法。
这种方法操作简单,成本较低,适用于检测体液中的抗体或抗原。
2.酶联免疫吸附实验(ELISA):ELISA是一种利用酶的催化作用检测抗体或抗原的方法。
它包括直接ELISA、间接ELISA、竞争ELISA等多种形式。
ELISA具有高灵敏度、高特异性、操作简便和成本低廉等优点,广泛应用于临床诊断和科研领域。
3.放射免疫分析(RIA):RIA是一种利用放射性标记物来检测抗体或抗原的方法。
它的原理是将放射性同位素标记在待测抗体或抗原上,通过测量标记物的放射活性来确定待测物质的含量。
RIA具有高灵敏度和高特异性的优势,但由于放射性标记物的使用,操作相对复杂且安全性要求较高。
4.免疫荧光:免疫荧光是一种利用荧光标记的抗体或抗原来检测待检测物质的方法。
它通过检测标记物的荧光强度或光谱来确定待测物质的存在。
免疫荧光具有高灵敏度、高特异性、操作简便等优势,广泛应用于病原微生物、肿瘤标志物等的检测。
5.流式细胞术:流式细胞术是一种通过流式细胞仪检测细胞表面或细胞内的免疫分子的方法。
它通过将目标细胞与标记有特定抗体的荧光染料反应,再用流式细胞仪对标记的细胞进行激光照射并收集荧光信号来测定免疫分子的表达水平。
流式细胞术具有高灵敏度、多参数分析等优势,广泛应用于细胞免疫学研究和临床诊断。
6.免疫组化:免疫组化是一种利用特异抗体与待检测抗原结合,再通过染色等方法来检测组织或细胞中特定抗原的方法。
免疫组化具有高特异性、高灵敏度、可定量等优势,广泛应用于病理学研究和临床诊断。
免疫学诊断及检测技术
现已明确支气管哮喘是以气道炎症细胞(包括嗜酸性粒细胞、肥大细胞等)浸润为主要病理特征的免疫性疾病。
在其发病过程中,免疫系统的多种成分如T细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、免疫球蛋白、细胞因子和粘附因子等起着关键的作用。
对这些成分的免疫学监测有助于阐明支气管哮喘的病因、发病过程以及对疾病严重程度的r解,并可指导支气管哮喘的治疗。
这些检测大致可分为特异性的免疫学检测和非特异性的免疫学检测两大类。
第一节特异性免疫学检测试验特异性免疫试验主要包括体内过敏试验、体外特异性IgE抗体的检测、嗜碱性粒细胞释放能力的检测等,这些试验可以直接或间接反映引起支气管哮喘发作的过敏原、体内特异性IgE的水平。
一、体内过敏试验主要有过敏原皮试和激发试验两种。
(一)过敏原皮试过敏性哮喘患者产生的针对某一种或多种过敏原的IgE或IgG4与皮肤粘膜下层的肥大细胞、嗜碱性粒细胞Fe受体结合。
局部接触过敏原后,引起I型变态反应,从而使局部充血,水肿,形成风团和红晕等临床表现,故我们通过皮试来了解过敏性哮喘患者的过敏原以及机体的敏感状态和脱敏的疗效。
常用的过敏原皮试法有皮内试验、点刺法、抓痕法、斑贴法、被动皮肤转移试验法等五种,其中前两种的应用较为广泛。
皮试的部位一般采用上臂的伸侧,也可在大腿或背部。
1.皮内试验(intradermal test) 常用过敏原皮试液的浓度为1:100,对于花粉浸液则可用l1000或1:10000。
方法及步骤:酒精消毒局部皮肤后,用1ml注射器分别吸入不同过敏原的皮试液,在受试部位依次注入皮内0.02ml,使之形成一3-4mm直径的皮丘。
为避免结果互相影响,相邻皮丘间距为3cm左右。
15分钟后观察结果。
有些患者反应较迟,可在皮试后30分钟时再观察一次。
皮内试验的结果主要表现为风团和红晕,其分级判断标准参见表14-1。
皮内法结果敏感、准确、重复性较好,但由于其注入的过敏原量较多,有可能使高度敏感的病人产生过敏性哮喘或过敏性休克等全身反应,因此有一定的危险性。
常用免疫学检验检测技术
要点一
总结词
要点二
详细描述
蛋白质分析的常用技术
免疫印迹技术是一种用于分离、检测和识别蛋白质的常用 技术。该技术通过将蛋白质混合物在凝胶上进行电泳分离 ,然后将其转移到膜上,再与特异性抗体结合,最后通过 显色反应检测目标蛋白质。免疫印迹技术具有高灵敏度、 高特异性和可同时检测多个蛋白质的特点,广泛应用于生 物学、医学和生物工程领域。
注意事项
由于放射性同位素具有放射性,操作过程中需要注意安全防护,避免对操作人员和环境造成污染。同 时,由于放射免疫分析需要使用放射性同位素标记的抗原,因此成本较高。
优缺点分析
优点
放射免疫分析具有较高的灵敏度和特异性, 可以用于痕量物质的定量检测;操作简便, 易于自动化;测量结果准确可靠。
缺点
由于使用放射性同位素,操作过程中存在安 全风险;成本较高,需要特殊仪器和实验室 条件;对于某些样品,可能存在交叉反应或 非特异性干扰。
化学发光免疫分析(CLIA)
总结词
快速、高灵敏度的定量检测技术
详细描述
化学发光免疫分析是一种基于化学发光反应 的免疫分析技术,通过测量化学发光反应过 程中释放的光子数量来检测抗原或抗体的浓 度。该技术具有快速、高灵敏度和低背景干 扰的优点,广泛应用于传染病、肿瘤标志物
和激素等生物分子检测领域。
免疫印迹技术(Western Blot)
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其他常用免疫学检验检测技术
时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)
总结词
高灵敏度、高特异性的定量检测技术
详细描述
时间分辨荧光免疫分析是一种基于荧光能量共振转移的免疫分析技术,通过测量荧光标 记物的发射光谱来检测抗原或抗体的浓度。该技术具有高灵敏度、高特异性和低背景干
临床免疫学检验项目
临床免疫学检验项目一、引言临床免疫学检验项目是通过检测人体免疫系统的功能和免疫相关指标,以辅助临床诊断和监测疾病进展的一种重要实验室检查方法。
免疫学检验项目广泛应用于各个领域,包括感染病、自身免疫病、肿瘤、器官移植、过敏性疾病等。
二、常见的临床免疫学检验项目1. 免疫球蛋白检测免疫球蛋白(Immunoglobulins,Ig)是人体内最重要的抗体,可分为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE等不同类型。
通过检测免疫球蛋白的水平,可以评估人体免疫系统的功能状态,判断是否存在免疫缺陷或免疫异常。
2. 细胞免疫功能检测细胞免疫功能检测主要包括淋巴细胞亚群分析、细胞因子检测和免疫细胞功能评价等。
淋巴细胞亚群分析可通过检测CD4+和CD8+T 细胞的比例,评估免疫系统对感染和疾病的应答能力。
细胞因子检测可以检测IL-2、IL-6、IFN-γ等细胞因子的水平,用于评估炎症反应和免疫调节功能。
免疫细胞功能评价可以通过检测免疫细胞的增殖、杀伤力和吞噬功能等指标,评估免疫细胞的功能状态。
3. 自身抗体检测自身抗体是指机体免疫系统异常产生的针对自身组织或器官的抗体。
自身抗体检测可以帮助诊断自身免疫病,如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等。
常见的自身抗体检测项目包括抗核抗体(ANA)、类风湿因子(RF)、抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCAs)等。
4. 过敏原检测过敏原检测是通过检测人体对特定过敏原的免疫反应,帮助诊断和治疗过敏性疾病。
常见的过敏原检测方法有皮肤划痕试验、血清特异IgE抗体检测和免疫球蛋白E(IgE)介导的组织释放试验等。
5. 肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测是通过检测体液或血清中特定蛋白质的水平变化,辅助肿瘤的早期诊断、疾病进展监测和预后评估。
常见的肿瘤标志物检测项目包括癌胚抗原(CEA)、前列腺特异性抗原(PSA)、甲胎蛋白(AFP)等。
三、临床意义和应用临床免疫学检验项目在临床诊断和治疗中具有重要意义。
通过对免疫学指标的检测,可以辅助诊断免疫缺陷病、自身免疫病、感染病等,并评估疾病的严重程度和预后情况。
临床免疫学检验方法与应用
临床免疫学检验方法与应用免疫学是一门研究机体对抗病原体、维持免疫平衡的科学,其在临床诊断中起着举足轻重的作用。
免疫学检验方法多种多样,能够准确地检测机体的免疫状态,有助于诊断和治疗各种疾病。
本文将介绍几种常见的临床免疫学检验方法及其应用。
1. ELISA法ELISA(酶联免疫吸附测定)是一种常用的免疫学检验方法,通过酶标法测定抗体或抗原的存在量。
ELISA法可用于检测HIV、乙肝、梅毒等疾病的抗体水平,也可用于测定药物浓度或病毒载量。
由于ELISA法操作简便、灵敏度高,因此在临床诊断中得到广泛应用。
2. 免疫荧光法免疫荧光法是一种通过检测抗体或抗原在细胞或组织中的荧光信号来进行免疫检测的方法。
免疫荧光法被广泛用于自身免疫性疾病的诊断,如风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等。
通过观察免疫荧光信号的强度和分布,可以判断患者的免疫状态和疾病程度。
3. 免疫印迹法免疫印迹法(Western Blot)是一种通过检测抗体与特定抗原结合而形成的免疫复合物来进行检测的方法。
免疫印迹法主要用于检测蛋白质的表达水平和鉴别不同蛋白质。
在临床上,免疫印迹法常用于肿瘤标记物的检测和分析,有助于早期发现恶性肿瘤。
4. 细胞免疫学方法细胞免疫学是研究机体免疫细胞及其功能的学科,其方法主要包括细胞毒活性测定、淋巴细胞亚群分析、细胞因子测定等。
这些方法在免疫性疾病、感染性疾病和移植排斥反应的诊断和治疗中起着关键作用。
5. 其他免疫学检验方法除了上述几种常见的免疫学检验方法外,还有许多其他方法,如流式细胞仪、PCR法、化学发光法等。
这些方法在特定疾病的诊断和治疗中有其独特的应用价值,为临床医生提供了更多的诊断手段和治疗选择。
总结免疫学检验方法在临床诊断中发挥着不可替代的作用,能够帮助医生准确判断患者的免疫状态和疾病情况,指导治疗方案的制定和调整。
不断发展的免疫学技术为医学进步提供了强大的支持,相信随着科学技术的不断创新和进步,免疫学检验方法将在临床应用中发挥越来越重要的作用。
免疫学检验
免疫学检验概述免疫学检验是一种通过检测人体免疫系统的功能和状态来评估健康状况的方法。
免疫学检验主要用于检测和诊断免疫相关疾病、监测免疫治疗效果和评估免疫功能。
在免疫学检验中,通常使用抗体和抗原相互作用的原理进行检测。
抗体是一种由免疫系统产生的特异性蛋白质,可以与抗原结合,形成免疫复合物。
通过检测免疫复合物的形成和浓度变化,可以获得相关信息和数据来评估免疫系统的功能和状态。
常见的免疫学检验方法免疫荧光检测免疫荧光检测是一种常用的免疫学检验方法。
它利用荧光标记的抗体与目标分子(如抗原、细胞表面分子等)发生特异性结合,然后使用荧光显微镜观察荧光信号的强度和分布情况。
免疫荧光检测具有高灵敏度和特异性的优势,可以用于检测抗体、抗原和免疫细胞的分布和表达情况。
在临床诊断中,免疫荧光检测常用于检测自身抗体、病毒抗体和细胞免疫功能等方面。
免疫酶联免疫吸附试验(ELISA)免疫酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种常见的免疫学检验方法。
它基于酶标记的抗体与抗原特异性结合的原理,利用酶催化的反应产生可测量的信号。
ELISA具有高精确性和灵敏度的特点,可用于检测抗体、抗原和细胞因子的浓度。
在临床检验中,ELISA常用于检测病毒感染、风湿性疾病和免疫调节等方面。
流式细胞术流式细胞术是一种免疫学检验方法,可以同时检测和分析多种免疫细胞类型和功能的改变。
它基于细胞表面标志物的特异性结合和荧光标记的抗体的检测,通过流式细胞仪实现高通量的细胞检测和分析。
流式细胞术广泛应用于免疫学研究和临床诊断中。
它可以用于检测细胞表面分子的表达情况、分析细胞亚群的比例和功能状态,并可进行细胞分选和细胞功能实验等。
免疫学检验的临床应用免疫学检验在临床诊断和治疗中具有重要的应用价值。
它可以用于检测和诊断多种免疫相关疾病,如自身免疫病、感染性疾病和免疫缺陷病等。
在自身免疫病的诊断中,免疫学检验可以检测自身抗体的产生和水平变化,帮助确定疾病类型和活动度。
免疫学检验的方法和特点
免疫学检验的方法和特点免疫学检验是一种通过检测和分析机体免疫系统相关指标来评估机体免疫功能的方法。
它可以用于疾病的诊断、预防和治疗过程中,对于研究免疫系统的功能和疾病的免疫机制也具有重要意义。
免疫学检验的方法主要包括体外诊断试验、免疫组化技术和流式细胞术等。
下面将逐一介绍这些方法的特点和应用。
1. 体外诊断试验:体外诊断试验是最常用的免疫学检验方法之一,包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫分析(RIA)、免疫印迹(Western Blot)等。
这些试验通过检测血清中的抗体或抗原来评估机体的免疫状态。
其特点是操作简单、结果准确可靠、样本来源广泛,可以用于检测多种疾病,如感染病、自身免疫病等。
体外诊断试验的优势在于可以进行大规模筛查,对于人群健康状况的监测和疾病的早期诊断具有重要意义。
2. 免疫组化技术:免疫组化技术是利用抗体与组织或细胞中特定分子的结合反应来检测和定位这些分子的方法。
常用的免疫组化技术包括免疫组织化学(IHC)和免疫荧光染色(IF)等。
这些技术可以用于检测和定位肿瘤标志物、炎症细胞因子、免疫细胞表面标志物等,对于疾病的诊断和治疗有重要的指导意义。
免疫组化技术的优势在于可以直接观察到分子的表达和分布情况,具有较高的灵敏度和特异性。
3. 流式细胞术:流式细胞术是一种通过检测和分析细胞表面标志物来鉴定和分类细胞的方法。
通过标记细胞表面的抗原或抗体,结合流式细胞仪的高速流式分析技术,可以对单个细胞进行高通量的检测和分析。
流式细胞术可以用于检测和鉴定免疫细胞亚群、肿瘤细胞、干细胞等,对于疾病的诊断和治疗选择有重要的指导作用。
流式细胞术的优势在于可以同时检测多个指标,对于复杂的样本分析有较高的效率和准确性。
免疫学检验的特点包括以下几个方面:1. 高度特异性:免疫学检验方法可以通过特异的抗体-抗原反应来检测和定量分析特定的分子或细胞,具有较高的特异性。
这使得免疫学检验方法在疾病的诊断和治疗中具有重要的优势,可以准确地鉴定和区分不同的疾病类型。
临床免疫学检验
临床免疫学检验临床免疫学检验是一种透过检验身体免疫系统的功能状态来诊断和治疗人体免疫疾病的医学检验技术。
它主要应用于检测人体免疫功能的变化,例如免疫缺陷、自身免疫性疾病、过敏反应等。
其检测结果成为了判断疾病是否存在、发展过程和预后的重要依据。
一、临床免疫检查所涉及的项目1、全血细胞计数:包括白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白、血小板等。
白细胞计数对疾病监测有重要意义,其异常值可能暗示某些疾病的存在,如感染、免疫疾病、白血病等。
2、单个抗体检测:单个抗体检测用于检测某个特定的抗体,例如细菌感染、病毒感染、肿瘤标志物等。
3、自身抗体检测:自身抗体检测用于检测人体免疫系统对自身组织或成分的免疫反应。
例如自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等。
4、流式细胞术:流式细胞术通过检测细胞表面标志物和细胞内物质,可以识别不同的细胞类型,例如白细胞分化、肿瘤细胞的识别等。
5、免疫固定电泳:免疫固定电泳是一种检测血清蛋白质的方法,其主要应用于鉴定血清蛋白质成分的变化,例如蛋白质异常增加、某些种类蛋白质缺失等,以及某些疾病的辅助诊断。
二、临床免疫检验的意义临床免疫学检验在筛选、诊断、治疗疾病、预测预后等方面有重要的意义。
1、疾病筛查:许多免疫学检查项目可以用于常见和罕见疾病的筛查。
例如,促甲状腺激素检查可以预先诊断甲状腺自身免疫疾病,抗心肌抗体和心肌肌原纤维蛋白抗体可以诊断心肌病,肝疾病特异性抗体可以确定患者是否感染肝炎病毒等。
2、疾病诊断:免疫学检查也可以用于特定疾病的诊断,如类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、白血病、骨髓增生异常综合征等。
3、治疗效果观察:对于特定的疾病或治疗方式,需要通过免疫学检查来了解患者的治疗效果,如慢性乙型肝炎治疗后的血清HBV DNA状态、各类肿瘤治疗后肿瘤标志物水平的变化、免疫调制药物治疗后CD4/CD8等细胞水平的变化等。
4、预后预测:免疫学检查还可以为临床预后预测提供指导,如系统性红斑狼疮患者抗双链DNA抗体和抗精氨酸胞浆蛋白抗体储量高则易发生肾脏损害,骨髓增生异常综合征患者骨髓造血功能可通过检查免疫球蛋白储量进行评估。
免疫学检测的方法有哪几种
免疫学检测的方法有哪几种免疫学检测是以分子生物学、免疫学等作为理论基础,应用于多种疾病诊断以及病情预估的检测方法。
尽管免疫学检测在临床中较为常见,但多数人对其包含的具体方法了解的并不透彻,下面就免疫学的检测项目及方法进行科普。
1. 免疫学检测项目临床免疫学检测的项目包含种类很多,以下列几种的应用较为频繁,临床较为常见,即细胞免疫检测、体液免疫检测、感染免疫检测、肿瘤标志物检测以及自身抗体检测,而移植免疫学检测项目则较为少见。
(1)细胞免疫检测:细胞免疫学检测通常会针对多种类型的细胞进行含量及形态的测定,除了我们熟悉的淋巴细胞、粒细胞以及巨噬细胞以外,还包含前体细胞及单核细胞等[1]。
(2)体液免疫检测:体液免疫检测是针对免疫球蛋白(IgA、IgE 、IgG、IgM)、血清B因子以及血清补体(CH50、C3、C4)进行含量及形态的测定。
通过体液检测结果能够让医师了解受检者的体液免疫功能情况,进而判断其是否患有免疫性疾病或者感染性疾病;通过对血清补体指标的检测结果还能判断受检者是否患有肾小球肾炎、急性感染性疾病或者红斑狼疮等疾病[2]。
(3)感染免疫检测:感染免疫检测主要通过对寄生虫、病毒及细菌等指标的测定,判断受检者是否感染轮状病毒、结核杆菌、脑炎病毒、艾滋病毒、寄生虫或者微生物等。
(4)肿瘤标志物检测:肿瘤标志物检测是针对酶类、激素类、组织多肽抗原、糖类抗原、甲胎蛋白(AFP)以及癌坯抗原(CEA)等多种标志物的检测。
医师可通过检测结果判断受检者是否患有肿瘤及肿瘤的良恶程度,进而对病情、预后以及治疗效果展开预估和评价[3]。
(5)自身抗体检测:自身抗体检测是针对多种不同抗体的测定,包括抗核抗体、抗组织细胞、风湿因子等。
医师可根据这些指标的检测结果判断受检者是否患有炎性疾病、甲状腺以及风湿免疫性疾病等。
(6)移植免疫学检测:移植免疫学检测主要针对接受移植治疗的患者,并对其移植前后的相关指标进行检测和比较,有助于医师判断移植组织是否出现排斥反应,以便能够及时作出应对[4]。
免疫学检验的这些基础知识你都了解吗
免疫学检验的这些基础知识你都了解吗免疫学检验是指应用免疫学原理进行检测,以发现人体内某些物质(例如抗体、抗原、病原体等)的检验方法。
它已经成为临床医学中不可缺少的检测手段之一,广泛应用于医疗、科研、食品卫生等领域。
本文将从免疫学检验的基础知识、分类、原理和应用方面进行介绍。
一、免疫学检验的基础知识1.抗原和抗体抗原是指能够诱导机体产生免疫应答的物质,包括细菌、病毒、细胞、蛋白质、多糖等。
抗体是由机体的B淋巴细胞分泌的一种特异性免疫球蛋白,能够与特定的抗原结合,从而参与机体的免疫反应。
2.特异性和敏感性免疫学检验是一种特异性和敏感性较高的检验方法。
特异性是指检验结果仅针对特定的抗原或抗体,不会与其他物质产生反应。
敏感性是指检验方法能够检测到极小浓度的抗原或抗体。
3.免疫反应的基本原理免疫学检验基于机体的免疫反应原理。
当机体感染病原体或接种疫苗后,免疫系统会产生相应的抗体。
免疫学检验通过检测血清中特定抗体或抗原的存在与否,来判断患者是否感染了某种病原体或是否存在某种疾病。
二、免疫学检验的分类免疫学检验根据检测原理和方法的不同,可以分为多种类型,包括:1.直接检测法直接检测法是指通过检测病原体本身或其组成成分来判断是否感染某种病原体。
例如,检测病毒核酸或细菌的荚膜多糖等。
2.间接检测法间接检测法是指通过检测体内特定抗体的存在与否,来判断患者是否感染某种病原体。
例如,乙肝表面抗原(HBsAg)的检测就是一种间接检测法。
3.荧光素检测法荧光素检测法是一种常用的免疫学检测方法,可以通过荧光素染色或荧光素标记来检测抗原或抗体的存在。
荧光素检测法有许多不同的形式,包括免疫荧光检测、酶联免疫吸附测定法(ELISA)等。
免疫荧光检测法是利用荧光素标记的抗体与待检测标本中的抗原结合,在荧光显微镜下观察荧光信号的强度和分布情况,来判断是否存在特定抗原或抗体。
该方法具有高度的灵敏度和特异性,且结果可视化,适用于许多病原体的检测,如流感病毒、HIV、病毒性肝炎等。
实验诊断-一院检验-免疫学检测
(三) T细胞分化抗原测定
【原理】 流式细胞术
【参考值】
CD3+: 61--85% ;
CD3+CD8+ (Ts): 19--48%;
CD3+CD4+ (Th):28--58% ; CD4+CD8+ (Th/Ts): 0.9--2.0;
【临床意义】 (1)T细胞总数的变化(CD3)
肝癌的疗效观察、预后判断;
【临床意义】
生殖腺胚胎癌,胃癌,胰腺癌 病毒性肝炎,肝硬化AFP有不同程度升高,通常<300ug/L。 妇女妊娠3个月后AFP↑,7-8个月达高峰,分娩后3周正常。 AFP-L3有助于区分良恶性肝病,AFP-L3/AFP>15%为阈值。 AFU在诊断肝癌中敏感性好,阳性率高,对AFP阴性病例及
AFU是溶酶体酸性水解酶,广泛存在于人体各组织细胞溶酶 体和体液中。
【参考范围】 AFP<25μg/L;AFP-L3<10%;AFU:234-414 μmol/L;
【临床意义】
原发性肝癌的普查与早期筛选; 原发性肝细胞癌的早期诊断指标之一;
1)血清阈值>400ug/L,持续4W; 2)400ug/L>血清阈值>200 ug/L,持续8W; 3)AFP在50~200ug/L,随访AFP上升可能为“亚临床”;
升高见于各种消化道肿瘤、卵巢癌 对于胃癌如与CA153同时检测,对于胃癌如与CEA 同时检测可提高阳性率。
(3) CA199
CA19-9为消化道癌相关抗原,主要是胰腺癌和结、直肠癌 的标志物。 【参考值】 血清内正常值<3.7万U/L 【临床意义】
免疫学检验的基本原理与方法
免疫学检验的基本原理与方法免疫学检验是一种常见的实验室技术,在医学、生物学等领域具有广泛的应用。
本文将介绍免疫学检验的基本原理和常用的方法,并探讨其在疾病诊断、病毒检测和药物研发中的应用。
一、免疫学检验的基本原理免疫学检验基于机体免疫系统的特性,利用抗原与抗体之间的特异性结合反应来检测和定量分析抗原或抗体的存在。
其基本原理如下:1. 特异性识别:抗体可以识别并结合与之对应的抗原,形成特异性的抗原-抗体复合物。
2. 高度敏感性:免疫学检验可以检测极低浓度的抗原或抗体,提供高度敏感的结果。
3. 双重验证:通过采用一对互补的抗原和抗体,可以用于验证检测结果的准确性。
二、常见的免疫学检验方法在免疫学检验中,常用的方法包括酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫印迹(Western Blotting)、免疫荧光等。
下面将对这些方法进行具体介绍:1. 酶联免疫吸附实验(ELISA)ELISA是一种常见且广泛应用的免疫学检验技术。
它利用酶标记的抗体与待检测样品中的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标记物复合物。
通过添加底物,酶标记物能够催化底物的反应,产生可测量的信号。
ELISA可用于定量或半定量测定目标物的浓度,并可应用于多种领域,如感染性疾病的诊断、蛋白质的定量等。
2. 免疫印迹(Western Blotting)免疫印迹是一种常用于检测特定蛋白质的免疫学技术。
该方法通过将复杂的蛋白质混合物经SDS-PAGE电泳分离后,将之转移到固体载体上。
然后,用特异性抗体与目标蛋白质结合,并通过酶标记的二抗与一抗结合,产生可见的信号。
免疫印迹可用于诊断疾病、检测蛋白质相对分子质量和检测表达水平等。
3. 免疫荧光免疫荧光是一种利用抗体对荧光染料标记的抗原进行特异性识别的免疫学技术。
该技术通过与荧光探针结合并激发荧光信号,来检测细胞或组织中特定抗原的定位和表达。
免疫荧光广泛应用于免疫组织化学、细胞信号转导、病毒感染等领域,可用于研究细胞和组织的结构、功能以及疾病的发生机制。
《免疫学检验》教学大纲
免疫学检验教学大纲1. 理论基础1.1 免疫系统•免疫系统的组成和功能•免疫系统中的细胞、分子和信号通路•免疫系统的调节机制1.2 免疫学检验的基本原理•免疫学检验的种类和原理•抗原与抗体的基础知识•免疫学检验的灵敏度和特异性1.3 免疫学检验的临床应用•免疫学检验在疾病诊断、治疗和预防中的应用•免疫学检验在生命科学研究中的应用2. 实验操作2.1 免疫学检验的常用实验操作•酶联免疫吸附试验(ELISA)•免疫荧光试验(IFA)•免疫印迹(Western blot)•免疫沉淀(Immunoprecipitation)•流式细胞术(Flow cytometry)2.2 实验设计和实验结果分析•免疫学检验实验设计的要点•实验结果分析的基本方法和思路3. 诊断评估与质量控制3.1 免疫学检验诊断评估的基本原理•性能指标的计算和解释•临床样本的诊断评价方法3.2 免疫学检验质量控制的重要性和方法•内部质量控制•外部质量评估4. 安全与道德•实验中的安全问题•道德问题和实验守则5. 教学要点5.1 宣传免疫学检验的重要性和意义•免疫学检验在临床中的应用•免疫学检验在生命科学中的应用5.2 强化核心概念的理解和掌握•免疫学检验的基本原理•免疫系统的组成和功能5.3 实战训练和实验分析•免疫学检验的实验操作•实验结果分析的基本方法6. 实践环节实验操作和结果分析实践环节,进行酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验(IFA)实验操作,实验结果分析。
7. 课程评估与7.1 学生评估•学生对于课程效果和教学内容的满意度•学生对于教师的教学能力和教学方案的评价7.2 教师•教学目标的完成情况•教学中存在的问题和改进方向免疫学检验是一门重要的实验学科,对于疾病的诊断和治疗具有重要意义,同时也是生命科学研究的基础。
通过对本教学大纲的学习,希望能够增强学生的实验操作技能以及对免疫学检验的理解,提高学生综合素质和能力。
免疫学检验常用的方法
免疫学检验常用的方法
免疫学检验是临床医学中非常重要的一门学科,主要用于诊断疾病的发病机制、检测疾病的标志以及评估疾病的预后。
下面列举几种常用的免疫学检验方法: 1. 抗体检测:抗体检测是免疫学检验中最常用的方法之一。
它主要用于检测患者体内是否存在特定病原体的抗体,例如乙肝抗原抗体检测、艾滋病抗体检测等。
2. 抗原检测:抗原检测是指通过检测患者体内是否存在特定抗原来诊断疾病的方法。
例如,流感病毒抗原检测可用于诊断季节性流感。
3. 免疫荧光检测:免疫荧光检测是一种常用的免疫学检验方法。
它主要用于检测细胞内的蛋白质、抗体等分子。
例如,免疫荧光染色可用于检测宫颈鳞状细胞中 HPV 病毒的存在。
4. 聚合酶链反应 (PCR) 检测:聚合酶链反应检测是一种用于检测病原体的分子生物学方法。
它主要用于诊断病毒、细菌等病原体感染。
例如,PCR 检测可用于诊断 HIV 感染。
5. 免疫细胞检测:免疫细胞检测是一种用于评估免疫系统功能的方法。
它主要用于检测免疫细胞的数量和功能,例如,流式细胞术可用于检测免疫细胞的表型。
以上是几种常用的免疫学检验方法。
除此之外,还有免疫印迹法、生物传感器法、纳米颗粒法等先进的检测技术,这些技术不仅可以提高检测的灵敏度和特异性,还可以降低检测的成本。
临床常用免疫学检查
4.BF 方法:单向免疫扩散法 (0.1-0.4g/L) 意义:增高见于某些自身免疫病、肾病综合征、慢 性肾炎、恶性肿瘤; 2、减低见于肝病、急性肾 小球肾炎、自身免疫性溶血性贫血。 第二节 细胞免疫检测 主要包括有T细胞、B细胞、K细胞、NK细胞及其 亚群;临床常对淋巴细胞的数量,表面标志物及 功能进行检测,以了解机体的细胞免疫功能.
第六节 自身免疫检测 抗核抗体: •ANA阳性:血清滴度>1:40为阳性。最多见于未 治疗的SLE,活动期SLE几乎100%阳性。也可见 于其他自身免疫性疾病。抗核抗体共有4种荧光核 型:均质型,见于SLE、SS、PSS、MCTD;边 缘型,见于SLE、SS;颗粒型,见于SLE、RA; 核仁型,见于PSS、Crest征。 • 抗脱氧核糖核酸测定:分为抗双链 DNA抗体 (ds-DNA)、抗单链DNA抗体(ss-DNA)、抗 Z-DNA抗体。抗双链DNA抗体的检测有重要的临 床意义,它见于活动期的SLE,阳性率70%90%。
• B细胞免疫检测 1. B细胞表面标志物检测: B细胞表面有表面抗原 (CD19、CD20、CD21、CD22、CD40等)与表 面受体(BCR、CKR、CR、FC等) BCR又称B细胞表面免疫球蛋白(SmIg发育阶段 不同而变化。 (1).B细胞表面免疫球蛋白(SmIg)测定:主要用 于检测外周血B细胞的百分率。临床意义: ① SmIg减低见于免疫缺陷性疾病; ② SmIg升高 见于慢性淋巴细胞性白血病、多毛细胞白血病和 原发性巨球蛋白血症。原发性巨球蛋白血症患者 SmIgM阳性细胞可占78%。
(2).B细胞分化抗原测定:临床意义: ① 升高见于 急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病 和Burkitt淋巴瘤等; ② 降低见于无丙种球蛋白 血症、使用化疗或免疫抑制剂后。 • 淋巴细胞功能检测 (1).T细胞转化试验:反映T细胞的免疫功能。临床 意义同T细胞花结形成试验。但Down综合征时明 显增高。 (2).混合淋巴细胞反应:反映机体整体的细胞免疫 功能,还可用于HLA的细胞学分型
检验科免疫室检验项目
检验科免疫室检验项目介绍免疫学是研究机体对抗感染、肿瘤和自身免疫疾病等相关免疫反应的学科。
在医学领域中,免疫学在临床诊断和治疗方面起到了重要的作用。
检验科免疫室是一种具备先进设备和技术,可以进行免疫学检验的专门实验室。
免疫学检验是通过检测机体的免疫反应、抗体和细胞因子等指标来评估机体的免疫状态和判断是否存在免疫相关的疾病。
在免疫室中,进行免疫学检验需要掌握一系列的技术和方法,以确保准确的检测结果并为临床提供可靠的依据。
检验项目分类1.免疫系统功能检测–淋巴细胞亚群分析:通过流式细胞仪等设备检测T细胞、B细胞和NK 细胞等亚群的数量和比例,评估机体免疫系统的功能状态。
–免疫球蛋白测定:检测血清中的免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM等)的水平,评估机体的免疫功能。
2.自身免疫病检测–自身抗体检测:检测血清中是否存在抗核抗体、抗磷脂抗体等,用于早期诊断和监测自身免疫疾病(如系统性红斑狼疮、抗磷脂抗体综合征等)的发展。
–自身抗原检测:通过检测血液或其他组织中的自身抗原(如RF、ANCA等)的水平,用于诊断和评估自身免疫性疾病。
3.传染病相关检测–病原体抗体检测:通过检测血清中的病原体特异性抗体,如HIV抗体、乙肝病毒抗体等,用于确认感染病原体和分析感染状态。
–免疫反应性蛋白检测:通过检测病原体特异性的免疫反应蛋白(如流感病毒抗原、白喉杆菌抗原等),用于早期诊断和监测传染病的发展。
具体检验技术1.免疫层析法–检测原理:利用抗体与抗原发生特异性结合反应,通过检测反应后的彩色条带来判断样本中抗原或抗体的存在与浓度。
–应用范围:常用于一些便携式检测仪器或试纸上,应用于快速检测一些常见的传染病等。
2.酶联免疫吸附试验(ELISA)–检测原理:利用酶标抗体或酶标抗原与待测物特异性结合,通过底物的化学反应生成染色产物,利用光密度计读取并判断待测物的浓度。
–应用范围:广泛应用于抗体和抗原的检测,如HIV抗体检测、肿瘤标志物检测等。
临床常用免疫学检验
免疫学检验
2.Ig含量增高:
多克隆性增高,见于各种慢性感染、慢性肝病、某些自身免疫病,如 SLE、RA、SS等;也见于寄生虫疾病、结节病等。
1
单克隆性增高,又称 “M”蛋白,主要见于免疫增殖性疾病,如多发性骨髓瘤、重链病、轻链病,巨球蛋白血症等。
2
免疫学检验
〖注意事项〗 Ig水平与年龄、性别有一定的关系,Ig 含量因检测方法不同而有差别,各地区参考值也不相同,在判断结果时应综合考虑。如有“M 蛋白”,可进一步作血清或尿液免疫电泳,检测轻链和重链。
免疫学检验
第一章 免疫功能检验 (Immunological Function Test) 免疫功能检验分为细胞免疫功能检验和体液免疫功能检验,对于了解患者的免疫状态,以及细胞的各种功能,为深入研究和认识机体免疫系统的生理、病理改变,阐明某些疾病的发病机制和临床诊断与治疗将提供有利的信息。下面简单介绍临床常用的一些免疫检验项目。
免疫学检验
CAP检测系统 〖原理〗CAP,一个很小的塑料帽状物,其内置有多孔性、弹性和亲水性的纤维素粒,此粒多孔,吸咐了更多的变应原,加入血清,血清中的sIgE就会和变应原结合,再加入酶标抗人IgE,再加入荧光显色系统,在荧光分光光度计上测定荧光强度,计算机提供相应软件,自动计算出结果。报告sIgE含量。
*
免疫学检验
三. 特异性IgE抗体(sIgE)的检测 过敏患者的血清中存在着具有变应原特异性的IgE 称之为特异性IgE,如对牛奶过敏者则有针对牛奶变应原的IgE;对蒿草花粉过敏者,则有针对该花粉的IgE,该抗体只能与该变应原特异性结合。
sIgE的测定在变态反应体外诊断中占有重要地位。在呼吸疾病中,过敏性哮喘,过敏性鼻炎,职业性哮喘等患者血清中均能检出 sIgE。sIgE检测方法有许多种,目前临床上常用的有ELISA,FEIA,免疫印迹等。随着sIgE测定技术的完善,此项测定已日趋商品化,开发了各种检测系统,如CAP过敏原检测系统,Master过敏原检测系统,Px过敏原检测系统等,这些测定系统包括了仪器、试剂、计算机软件处理系统。国内目前应用最多的是CAP检测系统。
免疫学检验知识点
免疫学检验知识点免疫学检验是一种通过检测体内免疫系统的功能状态来评估健康状况的方法。
免疫系统是人体的一种重要的防御机制,可以识别和清除病原体,保护身体免受感染。
免疫学检验可以帮助医生诊断和治疗各种免疫相关的疾病,例如自身免疫性疾病、过敏反应、免疫缺陷等。
本文将介绍一些常见的免疫学检验知识点。
一、抗体检测抗体是一种由免疫系统产生的蛋白质分子,可以识别和结合特定的抗原。
通过检测抗体的存在和量来评估免疫系统对疾病的应答情况。
常见的抗体检测包括ELISA(酶联免疫吸附试验)、Western blotting(蛋白质印迹)等。
这些检测方法可以用于检测感染性疾病的抗体,例如HIV、肝炎病毒等,并可用于确认诊断和评估治疗的效果。
二、免疫球蛋白检测免疫球蛋白是一种由免疫细胞分泌的抗体,可以帮助中和细菌毒素、清除细菌和病毒等。
免疫球蛋白检测可以评估免疫系统的功能状态。
常见的免疫球蛋白检测包括免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)等。
这些检测可以用于评估免疫系统对感染的应答情况、诊断免疫缺陷病、监测免疫治疗的效果等。
三、细胞免疫学检测细胞免疫学检测是一种评估免疫系统功能的重要方法。
常见的细胞免疫学检测包括淋巴细胞亚群分析、细胞毒性检测、细胞增殖试验等。
这些检测可以评估免疫细胞的数量、功能和应答情况,用于诊断免疫相关疾病、评估治疗效果等。
四、炎症指标检测炎症是免疫系统对感染和损伤的一种典型反应。
炎症指标检测可以评估免疫系统对炎症的应答情况。
常见的炎症指标包括C-反应蛋白(CRP)、白细胞计数、红细胞沉降率(ESR)等。
这些指标可以用于评估感染和炎症性疾病的程度、监测治疗效果等。
五、过敏原检测过敏反应是一种免疫系统过度应答一些外界物质的情况,例如花粉、食物、宠物等。
过敏原检测可以帮助确定引发过敏反应的具体物质,以便采取相应的预防和治疗措施。
常见的过敏原检测包括皮肤划痕试验、血清IgE测定等。
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临床常用免疫学检查
熟悉
免疫球蛋白检查
(immunoglobulin, Ig)
免疫球蛋白是指具有抗体活性或者化学结构 上与抗体相似的球蛋白,由浆细胞合成与分 泌,存在于机体的血液、体液、外分泌液和 某些细胞(如淋巴细胞)的膜上。
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临床常用免疫学检查
免疫球蛋白G
熟悉
占血清全部免疫球蛋白的70%-80% ,分为4个亚类。 是唯一能通过胎盘的抗体。5岁达成人水平,40岁后逐渐下降。
阳性见于慢性HBsAg携带者,急性乙型肝炎潜伏 期、急性期、慢迁肝、慢活肝、肝硬化。
急性期病人如3个月不转阴,则易发展为慢性或 肝硬化。
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临床常用免疫学检查
掌握
抗-HBs
针对HBsAg的抗体,它对HBsAg 有一定的中和作用, 可阻止HBV进入新的肝细胞,是一种保护性抗体。
IgA不能通过胎盘,通过初乳获得分泌型IgA。 婴儿出生4-6个月才开始合成IgA,青少年达成人 水平。
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临床常用免疫学检查
临床意义
增高(1)见于IgA型多发性骨髓瘤 (2)SLE、RA
降低(1)见于反复呼吸道感染 (2)原发性和继发性免疫缺陷病 (3)应用免疫抑制剂
血清中检出HBeAg,表明体内有HBV复制,肝细 胞有进行性损伤和具有高度传染性,并表示病情
第七节 临床常用免疫学检验
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临床常用免疫学检查
临床免疫学检查的内容
免疫功能检测 体液免疫检测:免疫球蛋白 补体 细胞免疫检测:T、B、NK、IL-2、TNF 感染免疫检测:病毒感染 细菌感染 自身抗体检测:RF ANA 肿瘤标识物检测:AFP CEA
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HBe系统 HBeAg:HBV核心颗粒中的一种可溶性蛋白。 抗-HBe:经HBeAg刺激后产生的一种特异性抗体。 HBc系统 HBcAg:Dane颗粒的核心部位,是一种核心蛋白。 抗-HBc:是HBcAg的抗体。 Pre-S系统
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临床常用免疫学检查
掌握
HBsAg
感染HBV后1-2个月在血清中出现,可维持数周、 数月至数年。
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临床常用免疫学检查
临床意义
增高(1)见于初期病毒性肝炎、肝硬化 (2)IgM型多发性骨髓瘤 (3)SLE、RA
降低(1)先天性免疫缺陷症 (2)免疫抑制疗法后
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临床常用免疫学检查
免疫球蛋白产生的一般规律:初次应答需经一定潜伏期才出现 抗体,且含量低,维持时间短,很快下降,产生的抗体主要是 IgM。再次应答则潜伏期很短,抗体含量大幅度上升,维持时 间长,产生的抗体主要是IgG。
(2)自身免疫性疾病
(3)IgG型多发性骨髓瘤
降低 (1)免疫缺陷病
浆细
胞
(2)应用免疫抑制剂
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临床常用免疫学检查
免疫球蛋白A
熟悉
IgA有血清型和分泌型两种。
血清型是以单体存在,占10-15%。
分泌型为二聚体,在机体局部粘膜抗感染免疫中 起重要的作用。与呼吸道、消化道和泌尿生殖道 的局部感染、炎症或肿瘤等病变密切相关。
抗-HBs阳性见于 既往有过HBV感染,具有一定免疫力; 注射过乙肝疫苗, 抗-HBs >10mIU/ml 对机体有保护
作用;
被动性获得抗-HBs 抗体。
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临床常用免疫学检查
掌握
HBeAg
是HBV核心颗粒中的一种可溶性蛋白质,具有抗原 性,由感染的肝细胞分泌入血,在血液中可游离存在, 与HBV有伴随关系。
Alisei全自动酶免疫分析系统
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临床常用免疫学检查
HAV感染检测
1、抗HAV-IgM: HAV早期感染的指标。发病后2
周为100%,1个月为76.5%,3 个月为23.5%,6个月为5.9%。
但有的为一过性应答,维持约一 周,且为临界水平。
一些感染者抗HAV-IgM应答缺失。
半衰期为16-24天,做人工被动免疫时,以2-3周注射一次为宜。
大多数细菌抗体、病毒抗体均
属于IgG,不少自身抗体如抗核
抗体、抗甲状腺球蛋白等也属于
IgG类。
Behring Nephelometer 100 哈医大二院实特验定诊蛋断白教分研析室Biblioteka 统常曼丽临床常用免疫学检查
临床意义
增高 (1)慢性感染、慢性肝病等
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临床常用免疫学检查
免疫球蛋白M
熟悉
IgM为五聚体,分子量最大,故又称巨球蛋白。 含量占血清Ig总量的5-10%。 在各种感染后,最早出现的抗体是IgM。
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临床常用免疫学检查
免疫球蛋白M
如果在胎儿或新生儿血液内出现高浓度IgM时, 即表明宫内感染。 若成人血清中IgM升高,表示新近感染。 天然血型抗体、冷凝集素、溶血性疾病产生的抗 体、RF等自身抗体多为IgM类抗体。 IgM主要存在于血管内,对防止发生菌血症起重 要作用。
降低:(1) 先天性或获得性免疫缺陷 (2) 应用免疫抑制剂
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临床常用免疫学检查
病毒性肝炎血清标志物检查
Hepatitis A virus 甲型肝炎病毒 Hepatitis B virus 乙 Hepatitis C virus 丙 Hepatitis D virus 丁 Hepatitis E virus 戊 Hepatitis G virus 庚
2、抗HAV-IgA:甲肝早期和急性期,粪便中测得IgA阳性,是早
期诊断甲肝的指标之一。
3、抗HAV-IgG:阳性提示既往感染。
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临床常用免疫学检查
HBV感染检测
掌握
HBs系统 HBsAg:HBV Dane颗粒外层的脂蛋白囊膜。 抗-HBs:患者对HBsAg产生的一种抗体。
初次应答模式图
哈医大二院实再验次诊断应教答研模室式图 常曼丽
临床常用免疫学检查
免疫球蛋白E
熟悉
占Ig总量的0.002%。 IgE能与肥大细胞、嗜碱性粒细胞膜结合,在I型变 态反应性疾病的发病中具有重要作用。 与寄生虫感染有关。
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临床常用免疫学检查
临床意义
增高: (1) IgE型MM (2) 各种过敏性疾病 (3) 寄生虫感染