流式细胞仪操作规程
流式细胞仪操作规程
流式细胞仪操作规程流式细胞仪是一种用于单个细胞分析的高通量仪器，广泛应用于生物医学研究、药物开发和临床诊断等领域。
为了确保流式细胞仪的正常运行和准确结果的获取，需要制定一套规范的操作规程。
以下是流式细胞仪操作规程的一些基本要点：一、实验前准备：1.确保流式细胞仪处于稳定状态，并将其连接到电源并打开电源。
2.检查仪器的液氮箱和压力容器，确保液氮和气源充足。
3.准备实验所需的标本样品和相应试剂。
4.检查流束对齐和测量准备：校准激光、确定流速、检查流束质量控制。
二、流式细胞仪样品制备：1.使用无菌技术制备样品，并严格遵循相关操作规范。
2.样品的准备应考虑到细胞的数量和稳定性，避免细胞聚集、损伤或死亡。
3.样品的制备应注意避免氧化和污染的发生，以确保结果的准确性。
三、样品装载和分析：1.使用无菌技术将样品加载到流式细胞仪中，并确保样品注射器和管道清洁和无气泡。
2.对于多个样本的分析，应注意正确的样品顺序和识别，以避免混淆。
3.设置合适的仪器参数和测量条件，例如流速、激发和发射光源、滤光片设置和增益调节等。
4.开始样品分析之前，应进行负空白检测和仪器的系统背景校正。
5.开始实验后，密切观察结果窗口，并根据需要进行相应的数据记录和保存。
四、实验后操作：1.实验结束后，关闭流式细胞仪和相关辅助设备，并进行正常关机程序。
2.将仪器和试剂的残留物清洁干净，并按照相关操作规范进行废弃物的处理。
3.维护仪器的常规保养，例如清洁仪器表面、更换滤光片、标定仪器等。
4.及时记录和整理实验数据，并进行必要的数据分析和结果解释。
五、安全注意事项：1.在操作过程中，应遵守相关的生物安全和化学安全规范，例如穿戴好实验室服装、戴手套、戴眼镜等。
2.对于辐射性或有毒性样品的操作，应采取额外的防护措施，例如使用密封容器、穿戴防护服等。
3.在使用激光和其他高能源光源时，注意防护眼睛和暴露部位，避免直接观察激光光源。
总结：流式细胞仪是一种复杂的仪器，需要严格的操作规范来确保实验结果的准确性和数据的可靠性。
流式细胞仪的日常操作规范
流式细胞仪的日常操作规范
一、仪器开/关机程序
1、开机程序
检查仪器鞘液桶和废液桶。
打开流式细胞仪。
气压阀置于加压位置，并排除管路中气泡。
打开电脑。
等待机器预热5—10分钟后可开始实验。
2、关机程序
用4ml10%漂白剂作样品，将样品支撑架置于旁位，以外管吸入2ml。
将样品支撑架置于中位，以HI RUN 5分钟，使内管吸入2ml。
将样品换成蒸馏水重复1-2步。
放置盛有1ml蒸馏水的试管于样品支撑架上。
选择Standby模式10分钟。
关闭电脑，再关掉仪器。
二、维护保养
1、每日保养
用蒸馏水作样品，将样品支架支撑置于旁路，以外管吸入2ml
将样品支撑架置于中位，以HI RUN 5分钟，使内管吸入2ml.
选择Standby模式10分钟。
关闭电脑，再关掉仪器。
2、每月保养
将10%漂白剂装入鞘液桶。
旁路鞘液过滤器,以防损害。
将盛有3ml10%漂白剂的试管置于样品支架上,以HI RUN 20-30分钟。
将鞘液和样品换成蒸馏水重复步骤。
流式细胞仪AccuriC6操作规程
流式细胞仪Accuri C6一、启动Accuri C6仪器①依次开仪器电源、电脑显示器及主机电源②5～10分钟后，双击电脑桌面“CFlow Plus”图标，进入仪器控制软件界面。
软件界面信号灯指示为黄色，显示仪器与电脑没有连接好；软件界面信号灯指示为绿色，显示仪器与电脑已连接好③检查仪器旁边四个液体容器，清空“Waste”桶中的废液，检查“Sheath”、“Cleanning fluid”、“Decontamination”三个桶中液体量是否满足实验要求，若存放时间超过1个月，则需要进行更换。
其中“Sheath”为超纯去离子水，“Cleanning fluid”有效氯离子为1％的次氯酸钠，“Decontamination”为细菌消毒液，1295µl杀菌液原液用超纯水定容250ml④载物台上放置空管，点击软件界面Instrument/Run backflush cycle，可以看见少许液体从进样针中流出来，作用为反冲，清除进样针中的残留物⑤在软件96孔板界面中任选1孔，载物台上放置1管去离子水，⑥选择运行速度为“High”，运行时间设置为10分钟，点击“Run”按钮运行10分钟自动停止。
该步骤的作用是：激光器预热，清晰管路⑦该孔收集数据后变为蓝色，鼠标选中该孔，点击“Delete Sample Data”，删除孔内数据，启动步骤完成，即可开始检测样品二、Accuri C6样品检测①将样品放置在载物台上，在软件96孔界面选择样品的位置，并命名②设置检测停止条件。
（1）无限制检测Run unlimited，手动点击停止；（2）收集多少个细胞后停止，在events框中填写；（3）收集多长时间停止，在min和sec框中填写；（4）收集多少体积停止，在µl框中填写③在Fluidics框设定进样速度，可选择慢速、中速和快速，或者在Custom框中手动设置进样速度④“Set Threshold”设定阈值，需要根据实验设定合适的阈值，阈值设置太低，背景荧光对目标细胞的荧光信号产生较大的干扰，阈值设置太高，无法有效检测目标细胞⑤“Set Color Compensation”设定颜色补偿，一般在数据处理分析过程中进行⑥点击“Run”按钮，开始样品检测三、样品检测过程中注意事项：①样品之间无需用去离子水冲洗，当完成所有样品检测时，必须运行Instrument/Cleanning fluid cycle清晰程序。
临床流式细胞仪系统安全操作及保养规程
临床流式细胞仪系统安全操作及保养规程1. 引言随着流式细胞仪在临床诊断、生物学研究等领域的应用日益广泛，为了保障操作人员和仪器设备的安全性，制定了一系列的操作规程和保养规程。
本文档旨在介绍临床流式细胞仪系统的安全操作及保养规程，以确保仪器使用的高效性和安全性。
2. 安全操作规程2.1 实验室准备工作在进行流式细胞仪实验之前，需要进行以下准备工作：•清洁实验室环境，确保无杂物和化学品的泄漏。
•核实仪器设备的电源和气源是否连接正常。
•检查实验室的安全设备，包括灭火器和紧急停电开关等。
2.2 操作人员准备工作操作人员需要遵守以下准备工作：•穿戴符合要求的个人防护装备，包括实验室工作服、手套、安全眼镜等。
•对于某些特殊实验，如使用有毒试剂或放射性物质，需要进行专门的培训和认证。
2.3 流式细胞仪操作规程在进行流式细胞仪操作时，需要遵守以下规程：•仪器操作前必须启动后续操作计划，并对样本进行标记。
•根据实验需要，选择合适的仪器参数和染色剂。
•每次使用细胞仪之前，确保仪器已校准，包括流速、激光功率等参数。
•将需要运行的样本按要求装载到样本针筒中，避免气泡的产生。
•仔细调整仪器参数，如判定色彩的门限和探测器增益等。
•启动仪器运行后，及时监测仪器状态，确保实验顺利进行。
•操作结束后关闭仪器电源，并进行必要的数据保存和备份。
2.4 紧急情况处理在遇到紧急情况时，操作人员需要迅速采取以下措施：•紧急情况包括仪器故障、化学品泄漏等，首先要保证操作人员的人身安全。
•关闭仪器电源，切断气源和电源供应。
•立即向实验室主管或安全主管报告，并按照应急预案进行处理。
3. 保养规程为了确保流式细胞仪系统的正常运行和延长设备的使用寿命，需要按照以下保养规程进行操作：3.1 仪器日常保养•定期对仪器进行外部清洁，使用柔软的布擦拭仪器表面。
•检查仪器连接线是否松动，如有松动应及时进行固定。
•定期清理样本针筒和流体管道，避免堵塞。
3.2 激光器保养•激光器是流式细胞仪的核心部件，需要定期检查激光器的功率和稳定性。
流式细胞术操作规程
流式细胞术操作规程
《流式细胞术操作规程》
流式细胞术是一种用于研究细胞表型和功能的重要技术。
在进行流式细胞术时，操作规程的严谨性和标准化是非常重要的。
以下是流式细胞术操作规程的一般步骤：
1. 样品准备：首先，需要准备好待测的细胞样品。
这包括细胞的培养和收集，以及必要的处理和染色。
2. 仪器准备：在进行流式细胞术之前，需要确保流式细胞术仪器的正常运行。
这包括检查流式细胞仪和细胞分选仪的通电和冷却系统，以及其它相关设备的准备。
3. 校准仪器：在进行流式细胞术之前，需要对流式细胞仪进行校准，以确保其准确测量样品中细胞的特定参数。
4. 样品测量：将准备好的细胞样品加入流式细胞仪，并进行测量。
测量完毕后，需要对数据进行分析和记录。
5. 数据分析：对测量得到的数据进行分析，包括确定细胞的表型和功能，以及对其它相关参数进行分析和比较。
6. 结果解释：根据数据分析的结果，进行结果的解释和报道，并对相关实验现象进行讨论和总结。
在进行流式细胞术时，需要严格遵守操作规程，以确保实验结果的准确性和可靠性。
此外，对于一些特殊的实验操作，可能
还需要根据具体情况进行相应的调整和改进。
流式细胞术的操作规程是一个很重要的研究工具，它可以帮助研究人员进行高效、准确的实验，从而为科学研究和医学诊断提供更为可靠的数据和方法。
cytoflex操作规程
cytoflex操作规程CytoFLEX流式细胞分析仪是一种高性能、多参数流式细胞仪，广泛应用于细胞分析、免疫学研究、荧光染色等领域。
为了保证操作安全和数据准确性，以下是CytoFLEX 操作规程。
1. 开机准备a. 检查仪器电源是否插入正确，打开电源开关。
b. 检查电脑是否连接到CytoFLEX流式细胞分析仪。
c. 启动分析软件，如CytExpert。
d. 检查流式细胞分析仪的滤光片配置是否正确。
2. 设定仪器参数a. 在主界面上选择“Acquisition”进行实验参数设置。
b. 选择合适的波长和功率来激发和检测样品中的荧光染料。
c. 根据样品类型和实验要求，设置正确的流速和取样量。
3. 样品制备a. 根据实验要求，选择合适的细胞悬液和染色方法。
b. 遵循标准的样品制备过程，包括细胞计数、离心和悬浮液的制备。
c. 样品处理过程中要保持无菌条件，避免污染和细胞损伤。
4. 样品加载a. 在样品管中加入合适的染料和细胞悬液。
注意避免气泡的产生。
b. 将样品管放入样品架中，确保样品管与固定夹密封紧密。
5. 调节仪器设置a. 使用设置好的仪器参数进行样品调试。
b. 如有需要，调整观察点、光强和阈值，以获得最佳的数据。
6. 开始实验a. 点击软件界面上的“Acquisition”按钮，开始采集样品数据。
b. 实时监控样品流速和染料发光情况，如有异常情况要及时停止实验检查。
7. 数据保存和分析a. 实验完成后，保存数据文件到指定的位置。
b. 使用分析软件对采集到的数据进行后续分析和图表绘制。
8. 清洁和关机a. 关闭采集软件和电脑。
b. 使用清洁剂和纸巾擦拭仪器外壳、玻璃仪器件和样品台面。
c. 关闭CytoFLEX流式细胞分析仪的电源开关。
以上是CytoFLEX操作的基本规程，用户在使用时要按照操作要求仔细操作，确保数据的准确性和仪器的正常运行，同时在实验过程中遵循实验安全规范，确保操作的安全性。
流式细胞术操作规程
流式细胞术操作规程流式细胞术是一种常用的细胞分析技术，它可以用来检测和分析细胞表面标记物、细胞数量、细胞分布等信息。
以下是一份流式细胞术操作规程，详细介绍了该技术的操作步骤和注意事项。
一、实验前准备1. 准备所需的实验材料，包括流式细胞仪、标记抗体、孵育培养基、样本组织、显微镜片等。
2. 检查流式细胞仪的功能是否正常，确认仪器能够正常运行。
3. 清洁实验台面，确保操作环境干净整洁。
4. 准备所需的试剂和溶液，如PBS缓冲液、抗体染色溶液等。
二、样本处理1. 准备样本组织，将其转移到离心管中，并添加适量的孵育培养基使其完全浸泡。
2. 使用离心机将样本离心，去除上清液。
3. 重悬样本，将其转移到离心管中，并加入足够的PBS缓冲液进行洗涤。
4. 重复洗涤过程，直到样本完全洗净。
三、标记抗体染色1. 取出经过洗涤的样本，将其转移到离心管中，并加入足够的标记抗体溶液。
2. 在黑暗条件下孵育样本，使其与标记抗体充分结合。
3. 静置反应15-30分钟，确保充分染色。
4. 在光线和温度适宜的条件下冰冻样本，避免抗体的结合。
5. 根据实验需求，可以选择单标记或多标记抗体。
四、样本准备1. 取出经过标记抗体染色的样本，将其转移到离心管中，并加入足够的PBS缓冲液进行洗涤。
2. 将样本离心并去除上清液。
3. 重悬样本，并根据实验需要加入适量的PBS缓冲液进行稀释。
4. 检查样本的细胞数目和活性是否符合实验要求，如有必要，可以使用显微镜进行观察和计数。
五、流式分析1. 打开流式细胞仪，并确认仪器的设置和参数是否符合实验要求。
2. 调整仪器的流速和灵敏度，使其适应样本的特性。
3. 将样本转移至流式细胞仪的样本管中。
4. 开始流式细胞分析，记录并保存实验数据。
5. 根据实验需要，可以进行不同的数据分析和处理，包括细胞分布、细胞数量、表面标记物的表达等。
六、实验后处理1. 关闭仪器，清洁工作台和操作区域。
2. 处理和储存实验数据，可以使用相应的图像科学软件进行数据处理和结果分析。
流式细胞仪使用规范
流式细胞仪使用规范流式细胞仪（Flow Cytometer）是一种常用的细胞分析仪器，广泛应用于细胞学、免疫学、生物学、医学等领域。
流式细胞仪可以对细胞进行快速、准确的多参数分析，能够检测和分离不同细胞类型、测定细胞数量、评估细胞活性以及研究细胞表面标记物等。
为了保证流式细胞仪的正常使用，以下是一些流式细胞仪的使用规范和注意事项。
1.准备工作：a.检查仪器：确认仪器的状态，包括是否通电、通气、光源是否正常工作等。
b.清洁样品室：使用无菌纯水或适当的清洁剂擦拭样品室，确保没有杂物或污染物。
c.校准仪器：根据仪器规定进行标定和校准，确保仪器的准确性和稳定性。
2.样品准备：a.细胞处理：合理处理样品，保证单细胞悬浮状态。
可以通过胰酶消化、筛选等方法获取单细胞悬浮液。
b.细胞计数：使用合适的细胞计数仪进行细胞计数，计算出所需的细胞悬浮液浓度。
c.细胞染色：根据实验需求对样品进行适当的荧光染色或抗体标记，以便在流式细胞仪中检测和分析。
3.流式细胞仪操作：a.设置参数：根据实验设计和研究目的，设置合适的仪器参数，包括激光器选择、激发波长、检测波长、门控设置等。
b.样品加载：将样品注入流式细胞仪样品室，避免气泡的产生，并确保样品完整进入样品室。
c.数据采集：开始数据采集前，进行流式细胞仪的标定、峰位校正和峰间校正，以保证数据的准确性和可靠性。
d.数据分析：对采集到的数据进行分析和解读，根据实验要求选取合适的分析策略和软件进行数据处理。
4.清洁和保养：a.实验后清洁：实验结束后，及时清洁仪器，避免样品残留和交叉污染。
b.仪器维护：定期检查仪器的部件和附件，保证其正常工作。
如需要更换部件或常规维护，请按照厂家指南进行操作。
c.长时间停用：如果流式细胞仪长时间不使用，应按照厂家指南进行仪器的合理关闭和长期存储。
5.安全注意事项：a.避免直接接触激光线：在进行样品加载和设置参数时，避免接触激光线以避免损伤眼睛。
b.使用无菌操作：在样品加载和处理过程中，使用无菌操作和材料，避免细菌污染和交叉感染。
流式细胞仪使用规程
流式细胞仪使用程序1.目的规范流式细胞仪的相关使用操作、以及维护操作。
2.适用范围适用于本实验室使用流式细胞仪。
3.职责操作人员应熟练掌握并自觉遵守本标准操作程序。
如需获得更多信息，请参阅该仪器用户手册。
4.支持性文件流式细胞仪使用说明书。
5.操作规程5.1仪器开/关机程序5.1.1开机程序5.1.1.1 检查仪器鞘液桶和废液桶。
5.1.1.2 打开流式细胞仪。
5.1.1.3 气压阀置于加压位置，并排除管路中气泡。
5.1.1.4 打开电脑。
5.1.1.5 等待机器预热5—10分钟后可开始实验。
5.1.2关机程序5.1.2.1 用4ml10%漂白剂作样品，将样品支撑架置于旁位，以外管吸入2ml。
5.1.2.2 将样品支撑架置于中位，以HI RUN 5分钟，使内管吸入2ml。
5.1.2.3 将样品换成蒸馏水重复1-2步。
5.1.2.4 放置盛有1ml蒸馏水的试管于样品支撑架上。
5.1.2.5 选择Standby模式10分钟。
5.1.2.6 关闭电脑，再关掉仪器。
5.2仪器校验和分析参数设置程序（FACSComp操作程序）5.2.1CaliBRITE Beads 的准备5.2.1.1 在装有1ml鞘液的FALCON管加一滴充分混匀CaliBRITE Beads，并标上unlabeled；若配有双激光做四色，则须在unlabeled管中再加一滴APC-beads；5.2.1.2 在另一装有3ml鞘液的FALCON管加入unlabeled-、FITC-、PE-、PerCP-、和APC-beads（若做四色）各一滴，混匀，在管壁上标上mixed（PerCP不很稳定，最好在上机前加入）；5.2.1.3 避光放置，准备上机。
5.2.2软件环境的设置5.2.2.1 从苹果菜单进入，选择FACSComp软件；5.2.2.2 在Sign In视窗中填入下列信息：操作者、机构、实验室主任（操作者是必须填入的，计算机将保存这些信息），点击Accept；5.2.2.3 进入Set Up视窗，在Assay Selection中，选择你需要的Assay：Lyse/Wash、Lyse/No Wash或HLA-B27 Calib；在CaliBRITE Beads Lot Ids中，根据每一种beads所对应的编码输入Lot ID；在Automatic Saving Options中，你可以选择自动保存或不保存Summary Report，你可以通过单击Location来更改文件名以及保存的位置；最后在Set Up视窗的右下角点击Run。
流式细胞仪操作规程
流式仪操作规程
1. 首次操作时务必在负责人的指导下进行。
2. 操作前需检查所有瓶中的液体，鞘液桶补满超纯水（2L），废液桶倒空，清洗液和消毒液不是空的。
3. 清洗液和消毒液配置方法：清洗液为1% BD FACS Cleaning solution(原液为10%，即稀释十倍使用)，消毒液为BD detergent solution concentrate。
4. 开机前，确保样品支架上放置的EP管内至少装500uL ddH2O。
5. 仪器启动期间，软件界面上仪器当前状态会显示黄色的灯，该过程中仪器会用鞘液冲洗液流管路，持续大约13分钟，直到显示绿灯表示仪器和软件连接完成。
6. 根据实验设计选择软件选项，进行上样。
7. 上样完毕后，用SIP程序清洗进样针，根据提示先上2ml 1% FACS Clean，再上2ml ddH2O。
8. 保证清洗液和消毒液的量，在进样针上放2ml ddH2O，轻触（不能超过3秒）仪器上电源键，仪器自动运行13min cleaning the fluidics程序后自动关机。
9. 清理桌面，写好仪器使用记录。
10.将房间卫生整顿好，垃圾带出实验室，负责人检查后方可离开。
流式细胞仪安全操作及保养规程
流式细胞仪安全操作及保养规程1. 前言流式细胞仪是一种高端的生命分析仪器，广泛应用于医学、化学、生物学等领域，已经成为现代实验室不可或缺的仪器之一。
然而，流式细胞仪的操作较为复杂，使用过程中需要注意许多安全问题，否则会对自身和实验室环境造成潜在的危害。
为了确保流式细胞仪的正常、安全使用，特制定以下操作及保养规程。
2. 流式细胞仪操作规程2.1 准备工作在使用流式细胞仪前，应注意以下准备工作：2.1.1 带上个人防护装备在使用流式细胞仪时，需要带上一定的个人防护装备，如实验手套、口罩、眼镜等，以防范样本物质对自身的伤害。
2.1.2 样品制备精确地制备样品是获得准确、可重复的流式细胞仪数据的关键。
在制备样品时，需要注意以下事项：•样品应洁净，纯度高；•样品应稀释至适合的浓度；•样品需要避免暴露在光线下。
2.1.3 流式细胞仪清洁使用流式细胞仪前，应将设备清洗并按照操作手册正确设置。
注意声音警报器和信号灯的功效。
2.2 实验操作2.2.1 启动流式细胞仪启动流式细胞仪的前提条件是样品审核通过、清洁完毕并符合清洁过程中设定的安全警戒线。
按照以下操作步骤进行启动：1.将流式细胞仪插头插入电源插座；2.打开流式细胞仪前面板上的电源开关；3.检查设备是否能够正常通电；4.检查设备上的液晶屏是否正常显示。
2.2.2 样品操作样品操作是流式细胞仪的核心，需要遵循以下步骤：1.打开样品架门；2.将样品检测管放在样品架上，注意是否正确安装；3.关上样品架门，并设置喷雾器；4.按下样品检测管的开关，将样品进入流式细胞仪；5.启动流式细胞仪，进行检测。
2.2.3 关闭流式细胞仪实验室操作完毕后，需要及时关闭流式细胞仪，避免发生紧急事故。
按照以下步骤进行：1.关闭流式细胞仪喷雾器；2.将样品架门打开，取出检测管；3.关闭前面板的电源开关；4.拔出插头，关闭电源。
2.3 安全注意事项在实验操作中，需要注意以下安全事项：•在操作流式细胞仪前，应认真阅读使用说明书和操作手册。
流式细胞仪操作步骤
流式细胞仪操作步骤一、样品准备1. 确认样品是否符合实验要求，如细胞浓度、荧光标记等。
2. 根据实验需求，选择合适的试管和细胞样品。
3. 确认样品中是否有杂质或污染物，必要时进行离心和洗涤。
4. 尽可能缩短样品处理时间，避免细胞活性受到影响。
二、样品上机1. 打开流式细胞仪，确认仪器正常工作。
2. 将样品加入到流式细胞仪的样品管中。
3. 根据实验需求，设置合适的流速和压力。
4. 开始采集数据，观察仪器工作状态，确保数据准确可靠。
三、参数设置1. 根据实验需求，选择合适的荧光标记和检测参数。
2. 根据细胞类型和特性，设置合适的门控和阈值。
3. 确认仪器校准和定标工作已完成。
4. 根据需要，设置多色分析，以便于进行细胞分群和定量分析。
四、数据采集1. 在采集数据时，观察仪器工作状态，确保数据准确可靠。
2. 根据实验需求，确定采集的数据量，确保数据具有代表性。
3. 记录采集数据的时间和条件，以便于后续数据分析。
4. 在采集数据时，注意观察细胞活性、浓度和分布情况，及时调整实验条件。
五、数据分析1. 使用专业软件对采集的数据进行处理和分析。
2. 根据实验需求，对数据进行去噪、归一化和定量分析。
3. 进行细胞分群、细胞周期和细胞凋亡等分析。
4. 对数据进行统计学分析和可视化展示。
六、结果输出1. 根据分析结果，输出相应的图表和数据表格。
2. 对结果进行解释和注释，以便于读者理解和应用。
3. 如果需要，可将结果整理成报告形式，提供给相关人员参考和使用。
七、质量控制八、实验室清理。
《流式细胞术操作规程》
《流式细胞术操作规程》一、操作准备1.准备所需材料和试剂：包括流式细胞仪、标记抗体、细胞悬液、PBS缓冲液、显微镜玻片、培养基等。
2.检查仪器：确保流式细胞仪各项功能正常，包括激光、光电倍增管等。
3.样本处理：根据实验需要，选择适当的细胞处理方法，如细胞孵育、酶解消化等，确保获取到高质量的细胞悬液。
二、细胞标记1.标记抗体的选择：根据实验需求，选择适当的标记抗体，包括单抗、荧光染料、生物素等。
2.细胞标记试剂的制备：根据实验方案，将标记抗体按照要求的浓度进行稀释，制备成相应的标记试剂。
3.细胞标记操作：将所需细胞悬液分散在适量的PBS缓冲液中，加入标记试剂，轻轻摇晃混合，静置于室温下孵育一段时间，使标记抗体与细胞表面结合。
三、流式细胞术操作1.调整流式细胞仪参数：根据实验需求，设置细胞悬液的流速、激光功率、波长和光电倍增管放大倍数等参数。
2.流式细胞术管套的准备：取一个净化过的管套，用流式细胞术管套清洁剂反复洗涤，然后用蒸馏水清洗，最后用细胞稀释液冲洗一遍。
3.样本装入：将已标记好的细胞悬液加入清洗过的流式细胞术管套中，再用细胞稀释液冲洗一下，确保样本进入流式细胞仪前不会发生凝集或沉淀。
4.样本检测：将样本放入流式细胞仪中，启动仪器开始检测。
通过选择适当的波长和参数，记录并分析细胞的标记情况，如荧光强度、细胞计数、细胞大小等。
5.数据分析：根据实验需求，使用相关软件对所得的数据进行处理和分析，生成数据图表和归纳、总结实验结果。
四、实验结束与清洁1.实验结束：在完成实验后，将仪器设置恢复到初始状态，关闭仪器和电源，清理工作台和废弃物。
2.仪器清洁：使用适当的清洗剂和纯水，清洁仪器内部和外部的各个部分，如样品流路、流式细胞仪的探头等，确保仪器干净整洁。
3.数据保存：将实验所得数据保存到与实验相关的记录文件夹中，以备后续数据分析和验证。
以上是流式细胞术的操作规程。
在进行实验前，要确保仪器的正常运行和合适的细胞标记试剂的选择，严格按照操作规程进行操作，保证实验的顺利进行和数据的准确性。
流式细胞仪标准操作规程
流式细胞仪标准操作规程××医院检验科临床免疫室作业指导书文件编号：××-JYK-MY-×××版本：生效日期：共页第页1.目的建立规范标准的××型流式细胞仪操作程序确保流式细胞检测结果准确可靠2.仪器名称及型号××（品牌）××（型号）流式细胞仪。
3.应用范围适用于免疫组经授权的检验技术人员。
4.仪器简介和测试原理流式细胞仪可同时进行多参数测量，信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号，工作在测量区进行。
所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点。
液流中央的单个细胞通过测量区时，受到激光照射会向立体角为2x的整个空间散射光线，散射光的波长和入射光的波长相同。
散射光的强度及其空间分布与细胞的大小、形态、质膜和细胞内部结构密切相关，因为这些生物学参数又和细胞对光线的反射、折射等光学特性有关。
未遭受任何损坏的细胞对光线都具有特征性的散射，因此可利用不同的散射光信号对不经染色活细胞进行分析和分选。
经过固定的和染色处理的细胞由于光学性质的改变，其散射光信号当然不同于活细胞。
散射光不仅与作为散射中心的细胞的参数相关，还跟散射角及收集散射光线的立体角等非生物因素有关。
因此流式细胞仪综合了激光技术、计算机技术、半导体技术、流体力学、细胞化学等各门学科。
5.开展项目包括：常规免疫功能检测、细胞周期检测、细胞凋亡检测、免疫细胞分型、造血干细胞检6.仪器环境要求无尘、通风良好的环境，无直接日照。
温度：18～25℃，温度的改变应该<2℃/h。
室内湿度：30%～80%。
7.操作规程7.1·设备每日开机程序：开启稳压电源、变压器，打开流式细胞仪电源。
开启其他周边配备电源，如打印机，开启计算机。
确认鞘液筒有八分满，废液桶近似空的，桶盖是旋紧的；所有管线及管路装置连接通畅，无扭曲、折叠。
流式细胞检测服务安全操作及保养规程
流式细胞检测服务安全操作及保养规程流式细胞仪是一种常用于细胞和微生物学研究的仪器。
由于其高分辨率和高灵敏度，越来越多的实验室选择使用流式细胞仪进行细胞分析和排序。
然而，流式细胞仪需要经常维护和保养，以确保其正常运行和获得准确的结果。
本文将介绍流式细胞检测服务的安全操作和保养规程。
安全操作1. 禁止直接接触样本流式细胞仪中的样本可能含有病原体或有害物质，因此最好避免直接接触样本。
在操作前，请佩戴手套和口罩。
2. 使用防护措施在操作流式细胞仪时，应注意使用防护措施，如佩戴防护眼镜、手套和口罩。
如果意外溅洒了样本或试剂，请立即用大量水冲洗受影响的区域。
3. 清洁工作区在每次使用流式细胞仪后，应及时清洁工作区，以防止潜在的污染。
使用酒精或消毒液擦拭工作区表面。
4. 注意电气安全在插拔电源线和其他电气部件时，务必注意先拔掉电源线。
在更换零部件时，要使用符合安全标准的工具。
5. 遵守细胞培养实验室的规则流式细胞检测服务通常在细胞培养实验室进行，因此应遵守实验室的规则和标准操作程序。
在细胞培养前，请先了解实验室的操作规程。
保养规程1. 定期检查系统保持流式细胞仪的正常运行，需要定期对其进行检查。
这包括检查光源、光学透镜、过滤器、激光、探头、定标等。
如果出现问题，请及时联系售后服务。
2. 定期清洁为了确保流式细胞仪的精度和可靠性，应定期对其进行清洁和消毒。
在清洁过程中，应使用无菌水、酒精或消毒液。
清洁应按照制造商的指示进行。
3. 定期更换耗材流式细胞仪需要定期更换各种耗材，如样本管、石英反射板、过滤器、校准微球和荧光探头等。
更换耗材应按照制造商的指示进行。
4. 避光保存流式细胞仪的灵敏度和可靠性都受光线影响，因此必须避光保存。
在保存和运输流式细胞仪时，应使用防光袋或盒子。
使用前，请检查仪器是否暴露在光线下。
5. 定期校准为了保证流式细胞仪的准确度和可重复性，应定期进行校准。
校准包括流速校准、信号放大器增益校准、定标和荧光补偿等。
仪器操作规程-BD流式细胞仪基本上机操作流程操作注意事项及...
仪器操作规程-BD流式细胞仪基本上机操作流程操作注意事项及...仪器操作规程-BD 流式细胞仪（基本上机操作流程、操作注意事项及样品要求）一、标准操作规程开机程序：z开启细胞仪电源。
z开启计算机。
z确认鞘流液筒有八分满的FACS Flow，确实旋紧(鞘液筒容量为4L)。
z将废液倒掉，并在废液筒中加入200 ml 家用漂白水(废液筒容量为4L)。
z将减压阀方向调在加压（Pressurize）位置。
z排除液流管路与过滤器中的气泡。
z取下样品管，执行 PRIME 功能两次。
z使用1ml PBS，HIGH RUN 两分钟。
z可开始分析样品。
关机程序：z将样品支持架左移，样品管中加入3 ml 10%次氯酸钠，让仪器的真空系统抽取约 1 ml 的液体。
z将样品支持架回正，按 HI RUN，清洗管路5分钟。
z按 Standby，取下样品管，执行 PRIME功能两次。
z样品管中加入 3 ml 超纯水，重复上述步骤1-3。
z注意最后只留约1 ml 超纯水在试管中。
z倒掉废液，并在废液桶中加入200 ml漂白水。
z按 STANDBY 10分钟，使风扇冷却雷射后，关闭细胞仪。
.z退出软件“File”?“Quit”(如有对话选项，选择“Don‘t save”)。
确认退出计算机中所有BD 应用软件，所有数据数据已储存备份。
z关闭计算机。
“Special”?“Shutdown”。
CELLQuest 软件的简要操作步骤Acquisition获取数据1.打开获取模板（ACQ文件）制作新模板：选择点图或直方图工具，在窗口拖出大小合适的方框，出现点图或直方图对话框，选择：Acquisition获取X Parameter横轴参数：如FSCY Parameter纵轴参数：如SSCGate设门：如G1=R1OK-出现相应的点图或直方图图形设置完毕，选择SA VE AS，保存为ACQ文件2.联机Acquire-Connect to cytometer，出现Acquisition Control窗口3.打开获取条件窗口，调出实验获取条件（Instrument Setting）Cytometer-Detectors/V oltage，Threshold，CompensationCytometer- Instrument Setting-Open打开实验获取条件-Set-Done实验获取条件的调整：Acquisition Control-5Setup-上样-Acquire-进行实验获取条件的调整1)F SC、SSC电压2)FSC阈值（Threshold）：减少碎片3)设门：FSC/SSC点图设门（R1）；荧光（FL）点图（如FL1/FL2）或直方图（如FL1）取门G1=R1（选中图形-Plot-Format Plot-Gate：G1=R1）4)阴性对照管，调整荧光电压（FL1、FL2、FL3、FL4 V oltage），阴性群体在左下角，确定十字位置5)多色实验的补偿管，调整荧光间补偿（Compensation）6)Cytometer- Instrument Setting-Save保存实验获取条件（InstrSet）-Done4.数据获取前的设定Acquire-Acquisition & Storage-设定获取细胞数（10000-All）-OKAcquire-Parameter Discription对话框选择：Folder设定存储数据文件的文件夹File设定数据文件的名字：文件前缀（Prefix）-自定义；文件后缀（Surfix）-管号5.顺序上样，获取数据文件：Acquisition Control- Setup-上样-Acquire-仪器获取足够细胞后，自动保存数据文件（data file）Analysis数据分析1.做FSC/SSC点图，圈细胞R1选择点图工具，在窗口拖出大小合适的方框，出现点图对话框，选择：Analysis分析Select File选择第一管数据文件X Parameter横轴参数-FSCY Parameter纵轴参数-SSCGate设门-No GateOK-出现FSC/SSC点图-选择设门工具，圈细胞R12.做阴性对照管门内细胞的FL1/FL2点图，设十字，区分阴性和阳性界限选择点图，在窗口拖出大小合适的方框，出现点图对话框，选择：Analysis分析Select File选择第一管数据文件（阴性对照管）X Parameter横轴参数-FL1Y Parameter纵轴参数-FL2Gate设门-G1=R1OK-出现FL1/FL2点图-选择十字工具-沿阴性群体设十字3.做各实验管门内细胞的FL1/FL2点图，拷贝阴性对照管的十字选择点图，在窗口拖出大小合适的方框，出现点图对话框，选择：Analysis分析Select File选择实验管数据文件X Parameter横轴参数-FL1Y Parameter纵轴参数-FL2Gate设门-G1=R1OK-出现FL1/FL2点图-点中阴性对照管FL1/FL2点图上的十字-Edit-Copy-点中实验管FL1/FL2点图-Edit-Paste4.做各实验管FL1/FL2点图的十字统计：点中实验管FL1/FL2点图-Stat-Quadrant Stat-出现统计结果-点中统计结果框-Stat-Edit Quadrant Stat-选择输出结果（如Percent of gated门内细胞阳性百分率）5.选择文字工具（A），在报告上添加文字说明，报告实验结果6.Save As保存分析结果（ANA文件），Print打印分析结果二、送样要求样品不能有肉眼可见的团块或絮状物，如果有团块需要经过200目纱网过滤方可上机。
BDFACSCalibur流式细胞术标准操作规程
BD FACSCalibur流式细胞仪操作与维护程序目的：规范BDFACSCalibur流式细胞仪操作与维护程序，正确使用设备，保证实验顺利进行、操作人员人身安全和设备安全。
适用范围：本规程适用于BD FACSCalibur流式细胞仪的使用操作。
责任者：操作人员：负责按照本规程操作仪器设备，对仪器进行日常维护，并作使用记录。
保管人员：负责监管仪器操作是否符合规程，并对仪器进行定期维护、保养。
科室负责人：负责对仪器设备的综合管理。
内容：1.每日开机程序1.1在气压阀减压的状态下检查鞘液桶，确认：1.1.1鞘液充满状态，约3L1.1.2盖紧盖子1.1.3安上金属挡板1.1.4管路畅通，无扭曲1.2.检查废液桶，确认：1.2.1废液桶充满400ml漂白剂1.2.2管路畅通，无扭曲1.3打开流式细胞仪。
1.4打开电脑。
1.5气压阀置于加压位置，并排除管路中气泡。
1.6做Prime。
1.7等待机器预热5~10分钟后可开始试验。
2.每日关机程序2.1用3mlFACSCIean洗液加入样品管中上样，将样品支撑架置于旁位，以外套管吸入1ml。
2.2将样品支撑架置于中位，以HI RUN运行10分钟，使内管吸入约1ml。
2.3将样品管换成蒸馏水重复1-2步。
2.4放置盛有1ml蒸馏水的试管于样品支撑架上。
2.5选择Standby模式10分钟，将激光冷却后可关掉主机。
2.6退出所有应用软件，关闭电脑。
2.7将流式细胞仪的压力阀置于减压状态。
3.每月维护程序3.1将FACSClean洗液1~2L装入鞘液桶。
3.2旁路鞘液过滤器（过滤器上的快速接口从SANLINEFILTER端断开，将鞘液白色管路液路取下联到SANLINE FILTER 端口），以防伤害。
3.3将盛有3ml FACSClean 洗液的试管置于样品支架上，以HI RUN 30 分钟。
3.4将鞘液和样品换成蒸馏水重复步骤3，以HI RUN 60 分钟。
3.5将鞘液桶装满鞘液，恢复过滤器。
仪器操作规程-BD流式细胞仪基本上机操作流程操作注意事项及...
仪器操作规程-BD 流式细胞仪（基本上机操作流程、操作注意事项及样品要求）一、标准操作规程开机程序：z开启细胞仪电源。
z开启计算机。
z确认鞘流液筒有八分满的FACS Flow，确实旋紧(鞘液筒容量为4L)。
z将废液倒掉，并在废液筒中加入200 ml 家用漂白水(废液筒容量为4L)。
z将减压阀方向调在加压（Pressurize）位置。
z排除液流管路与过滤器中的气泡。
z取下样品管，执行 PRIME 功能两次。
z使用1ml PBS，HIGH RUN 两分钟。
z可开始分析样品。
关机程序：z将样品支持架左移，样品管中加入3 ml 10%次氯酸钠，让仪器的真空系统抽取约 1 ml 的液体。
z将样品支持架回正，按 HI RUN，清洗管路5分钟。
z按 Standby，取下样品管，执行 PRIME功能两次。
z样品管中加入 3 ml 超纯水，重复上述步骤1-3。
z注意最后只留约1 ml 超纯水在试管中。
z倒掉废液，并在废液桶中加入200 ml漂白水。
z按 STANDBY 10分钟，使风扇冷却雷射后，关闭细胞仪。
.z退出软件“File”Æ“Quit”(如有对话选项，选择“Don‘t save”)。
确认退出计算机中所有BD 应用软件，所有数据数据已储存备份。
z关闭计算机。
“Special”Æ“Shutdown”。
CELLQuest 软件的简要操作步骤Acquisition获取数据1.打开获取模板（ACQ文件）制作新模板：•选择点图或直方图工具，在窗口拖出大小合适的方框，•出现点图或直方图对话框，选择：Acquisition获取X Parameter横轴参数：如FSCY Parameter纵轴参数：如SSCGate设门：如G1=R1OK-出现相应的点图或直方图•图形设置完毕，选择SA VE AS，保存为ACQ文件2.联机Acquire-Connect to cytometer，出现Acquisition Control窗口3.打开获取条件窗口，调出实验获取条件（Instrument Setting）•Cytometer-Detectors/V oltage，Threshold，Compensation•Cytometer- Instrument Setting-Open打开实验获取条件-Set-Done实验获取条件的调整：Acquisition Control-5Setup-上样-Acquire-进行实验获取条件的调整1)F SC、SSC电压2)FSC阈值（Threshold）：减少碎片3)设门：FSC/SSC点图设门（R1）；荧光（FL）点图（如FL1/FL2）或直方图（如FL1）取门G1=R1（选中图形-Plot-Format Plot-Gate：G1=R1）4)阴性对照管，调整荧光电压（FL1、FL2、FL3、FL4 V oltage），阴性群体在左下角，确定十字位置5)多色实验的补偿管，调整荧光间补偿（Compensation）6)Cytometer- Instrument Setting-Save保存实验获取条件（InstrSet）-Done4.数据获取前的设定•Acquire-Acquisition & Storage-设定获取细胞数（10000-All）-OK•Acquire-Parameter Discription对话框选择：Folder设定存储数据文件的文件夹File设定数据文件的名字：文件前缀（Prefix）-自定义；文件后缀（Surfix）-管号5.顺序上样，获取数据文件：Acquisition Control- Setup-上样-Acquire-仪器获取足够细胞后，自动保存数据文件（data file）Analysis数据分析1.做FSC/SSC点图，圈细胞R1•选择点图工具，在窗口拖出大小合适的方框，•出现点图对话框，选择：Analysis分析Select File选择第一管数据文件X Parameter横轴参数-FSCY Parameter纵轴参数-SSCGate设门-No Gate•OK-出现FSC/SSC点图-选择设门工具，圈细胞R12.做阴性对照管门内细胞的FL1/FL2点图，设十字，区分阴性和阳性界限•选择点图，在窗口拖出大小合适的方框，•出现点图对话框，选择：Analysis分析Select File选择第一管数据文件（阴性对照管）X Parameter横轴参数-FL1Y Parameter纵轴参数-FL2Gate设门-G1=R1•OK-出现FL1/FL2点图-选择十字工具-沿阴性群体设十字3.做各实验管门内细胞的FL1/FL2点图，拷贝阴性对照管的十字•选择点图，在窗口拖出大小合适的方框，•出现点图对话框，选择：Analysis分析Select File选择实验管数据文件X Parameter横轴参数-FL1Y Parameter纵轴参数-FL2Gate设门-G1=R1•OK-出现FL1/FL2点图-点中阴性对照管FL1/FL2点图上的十字-Edit-Copy-点中实验管FL1/FL2点图-Edit-Paste4.做各实验管FL1/FL2点图的十字统计：点中实验管FL1/FL2点图-Stat-Quadrant Stat-出现统计结果-点中统计结果框-Stat-Edit Quadrant Stat-选择输出结果（如Percent of gated门内细胞阳性百分率）5.选择文字工具（A），在报告上添加文字说明，报告实验结果6.Save As保存分析结果（ANA文件），Print打印分析结果二、送样要求样品不能有肉眼可见的团块或絮状物，如果有团块需要经过200目纱网过滤方可上机。
流式细胞仪操作规程
流式细胞仪操作规程一、开机程序1、检查稳压器电源，打开电源，稳定 5 分钟。
2、打开储液箱，倒掉废液, 并在废液桶中加入 400ml 漂白水原液。
打开压力阀，取出鞘液桶，将鞘液桶加至 4/5 满（一般可用超纯水，特殊情况需要用PBS），合上压力阀。
确实盖紧桶盖，检查所有管路是否妥善安置。
3、将 FACSCalibur 开关打开，此时仪器功能控制钮的显示应是 STANDBY，预热 5－10 分钟。
排出过滤器内的气泡。
4、如果需要打印，打开打印机电源。
5、打开电脑,等待屏幕显示出标准的苹果标志。
6、执行仪器 PRIME 功能一次，以排除 Flow cell 中的气泡。
7、分析样品时，先用 FACAFlow 或 PBS 进行 HIGH RUN 约 2 分钟，以去除可能的管路残片。
二．预设获取模式文件(Acquisition Template Files)1、从苹果标志中选择 CELLQuest，建一个新视窗，可利用此视窗编辑一个获取模式文件。
2、选取屏幕左列绘图工具中的 Dot plot，绘出一个或多个 Dot Plots（点图）。
从 Dot Plot 对话框中选取 Acquisition 作为图形资料来源，并确定适当的 x 轴和 y 轴参数。
3、选取屏幕左列绘图工具中的 Histogram，同上法可绘出 Histogram（直方图）。
4、将此视窗命名后储存于 FACStation G3\BD Applications \CELLQuest Folder\EXP 文件夹中（也可以自己取名，但每个实验人员只能建立一个文件夹），下次进行相同实验时可直接调用。
三．用 CELLQuest 进行仪器的设定和调整1、从苹果画面中选取 CELLQuest，进入 CELLQuest 后在 File 指令栏中打开合适的获取模式文件。
2、从屏幕上方 Acquire 指令栏中，选取 Connect to Cytometer（快捷键：＋B）进行电脑和仪器的连机。
流式细胞术标准操作规程,1200字
流式细胞术标准操作规程流式细胞术（Flow Cytometry）是一种常用的细胞学研究技术，广泛应用于细胞表型分析、细胞分选、免疫学研究等领域。
为了确保流式细胞术的准确性和可靠性，需要遵循一系列的标准操作规程。
1. 实验前准备- 确保流式细胞仪、计算机和相关设备正常工作，包括保证激光器、光学系统等的正常运行。
- 确保光谱校准及标定的准确性，包括日常监测仪器的性能、定期校准补偿参数等。
- 准备所需试剂和标记抗体，确保其质量良好并符合实验要求。
2. 样本处理- 根据实验目的选择合适的细胞来源和取样方式，并保持细胞的完整性及活性。
- 根据细胞类型和实验需要选择适当的预处理方法，如细胞固定、细胞膜穿透等。
- 对于固定样本，要避免过度固定和过度穿透，以免影响细胞染色和光学性能。
3. 样品标记- 预先优化标记抗体的浓度和反应时间，确保准确的抗原检测和最大的靶向效率。
- 避免标记抗体和细胞表面抗原的非特异性结合，应加入相应的负对照组和等位控制。
- 合理选择荧光染料和标记方法，避免光谱重叠和串扰，以确保标记物的准确检测。
4. 流式细胞仪调试及仪器设置- 根据样本类型和实验需求，选择适当的仪器设置，包括选择合适的激光器、滤光片和检测参数等。
- 对于多色染色，进行补偿设置以消除光谱重叠和仪器漂移带来的影响。
- 定期校准和检验仪器的参数，确保仪器性能和数据稳定性。
5. 流式细胞术操作- 严格控制实验要求的温度、湿度和光照等环境条件，避免对细胞和染料的影响。
- 合理设置流速和事件采集数目，以确保准确且充分的样本分析。
- 避免空管事件和双重事件的发生，及时清理堵塞和冲洗流式细胞仪采集管路。
- 对于稀有事件和低频事件，需要增加采集数目和合理的补偿设置，以提高检测敏感性。
- 及时保存数据和相应的控制实验数据，以备后续数据分析和结果验证。
6. 数据分析和结果解释- 使用专业的流式细胞术分析软件进行数据处理和结果分析。
- 对于多色染色，应进行合理的补偿和背景校正，确保数据的准确性和可靠性。
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流式细胞仪操作规程目录
1：淋巴细胞亚群测定及绝对计数
2：活化淋巴细胞亚群、记忆T及纯真T的检测
3：HLA-B27测定
4：CD55／CD59测定
5：干细胞检测和绝对计数
6：白血病免疫分型测定
7：淋巴细胞T细胞亚群细胞内因子IFN-γ/IL-4测定8：细胞周期分析
9：活化血小板检测
10：血小板抗体测定
11：红细胞抗体测定
12：粒细胞抗体测定
淋巴细胞亚群测定
(流式细胞仪)
医院检验科
操作规程文件号：
200 年月日起实施
第1版
(共3页)
本规程每2年复审一次
复审日期：年月日
复审人：
规程编写者：
审批者：
批准日期：年月日
文件分发部门和／或个人
院档案室保管者：
检验科主任：
检验科实验室：
淋巴细胞亚群测定
活化淋巴细胞亚群、记忆T及纯真T的测定
HLA-B27测定
CD55/CD59测定
干细胞检测和绝对计数
白血病免疫分型测定
T细胞亚群细胞内因子IFN-γ/IL-4检测
细胞周期分析
血小板膜表面抗体测定
红细胞膜蛋白结构测定（红细胞抗体）
粒细胞抗体测定。