名词解释-核糖体与核酶
福建师范大学14春学期课程考试《分子生物学》作业考核试题

福建师范大学网络学院《分子生物学》期末考试一.名词解释1.增色效应:当DNA 变性时吸光度增加的现象。
2.核酶:具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。
3.DNA半不连续复制:一条新链连续合成而另一条链不连续合成的模式。
4.操纵子:细菌基因表达和调控的单位,包括结构基因和能被调控基因产物识别的DNA 控制元件。
5.增强子:是一个顺式作用序列,能够提高一些真核生物启动子的利用,并能够在启动子任何方向以及任何位置(上游或者下游)作用。
6.核小体:染色质的基本结构亚单位,由200bpDNA和组蛋白质八聚体组成。
7.核糖体:核糖体是细胞内一种核糖核蛋白颗粒, 其功能是按照mRNA的指令将氨基酸合成蛋白质多肽链,所以核糖体是细胞内蛋白质合成的分子机器。
8.启动子:结合RNA 聚合酶并起始转录的DNA 区域。
9.终止子:转录本后部所代表的DNA 序列,能够引起RNA 聚合酶终止转录。
10.DNA克隆:指在体外对DNA分子按照既定目的和方案进行人工重组,将重组分子导入适当细胞内,使其在细胞扩增和繁殖,从而获得该DNA分子大量拷贝的过程称为分子克隆,又叫基因克隆或重组DNA技术。
二.请选择正确的选项1.以下哪个是核蛋白( B )A.角蛋白B.染色质C.组蛋白D.蛋白聚糖2.DNA中的一段5''-AGTCTGACT-3''序列等同于RNA中的哪一段( D )A.5''-AGUCUGACU-3''B.5''-UGTCTGUTC-3''C.5''-UCAGUCUGA-3''D.5''-AGUCAGACU-3''3.DNA解链温度是指( B )A.A260nm达到最大值时的温度B.A260nm达到最大值50%的温度C.DNA开始解链时所需要的温度D.DNA完全解链时所需要的温度4.1953年Watson和Crick提出( A )A.多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋B.DNA的复制是半保留的,常常形成亲本-子代双螺旋杂合链C.三个连续的核苷酸代表一个遗传密码D.遗传物资通常是DNA而非RNA5.以下哪一个在260nm波长下具有最大的单位质量吸收( B )A.双链DNAB.单核苷酸C.RNAD.蛋白质6.pUC系列载体是第一次利用蓝-白斑进行筛选的载体,蓝-白斑筛选被用于( B )A.检测外源DNA片段是否在细菌中表达B.检测质粒是否插入外源DNA片段C.检测细菌是否含有质粒D.提示克隆化外源DNA片段的性质7..以下哪一个是大肠杆菌和真核生物染色体的共同之处( D )A.DNA是环状的B.DNA被包装成核小体C.DNA位于核中D.DNA是负超螺旋8.反密码子中哪个碱基对参与了密码子的简并性(摇摆)( A )A.第一个B.第二个C.第三个D.第一个和第二个9.PCR扩增目的片段时,在第几个循环后才出现目的片段长度的双链DNA分子(C)A.第一个循环B.第二个循环C.第三个循环D.第四个循环10.原核生物中,后随链的引物是被( C )清除的A.3’至5’外切核酸酶B.DNA连接酶C.DNA聚合酶ID.DNA聚合酶III11..原核生物启动序列-10区的共有序列称( C )A.TATA盒B.CAAT盒C.Pribnow盒D.GC盒12.由146bp DNA片段,组蛋白八聚体构成的复合体称为(B)A.核小体B.核小体核心C.核糖体D.螺线管13.人体中的脱辅基脂蛋白B在肝细胞中产生一个512kDa的载脂蛋白B100,而在肠细胞中,由于脱辅基脂蛋白B前mRNA 第6666位的一个碱基C变换为U,结果产生一个终止密码子,因此在肠细胞中,脱辅基脂蛋白B只产生一个241kDa的截短的载脂蛋白B48,产生这种现象是因为( B )的结果A.RNA可变剪接B.RNA编辑C.RNA翻译后加工D.偶然突变14.某限制性内切酶酶切割5 ’ …GG↓AATTCC…3 ’序列后产生( A )A.5 ’突出末端B.3 ’突出末端C.5 ’ 及3 ’突出末端D.平末端15.原核生物的起始氨基酸是( A )A.甲酰甲硫氨酸B.甲硫氨酸C.组氨酸D.色氨酸16.下面哪个结构域是DNA结合结构域( A )A.螺旋-转角-螺旋结构域B.螺旋-环-螺旋结构域C.亮氨酸拉链D.酸性激活结构域17.DNA光复活修复中哪种酶起关键作用( A )A.DNA光解酶B.烷基转移酶C.DNA糖基化酶D.AP内切核酸酶18.转化是( A )A.细菌吸收一个质粒B.细菌表达一个基因C.细菌吸收一个噬菌体D.从细菌中分离一个质粒19.一种细菌mRNA 由360个核苷酸组成,它所编码的蛋白质长度是( D )A.约360个氨基酸B.约1080个氨基酸C.120个氨基酸D.少于120个氨基酸20.SV40基因组是( B )A.双链线状DNAB.双链环状DNAC.单链线状DNAD.单链环状DNA三.问答题1.请简述遗传密码的特性答:(1)、密码子的连续性(无标点、无重叠)(2)、密码子的简并性(3)、密码子的摆动性(变偶性)(4)、密码子的通用性(近于完全通用)2.请简要说明cDNA文库构建的步骤答:cDNA文库的构建的步骤分为六个阶段。
第六章 核糖体与核酶
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裂殖酵母中N-端氨基酸对蛋白质半衰期的影响 裂殖酵母中 端氨基酸对蛋白质半衰期的影响
末端氨基酸 残基 Arg Lys Phe Leu Trp His Asp Asn Tyr Gln 半衰期 2 min 3 min 3 min 3 min 3 min 3 min 3 min 3 min 10 min 10 min 末端氨基端 残基 Ile Glu Pro Cys Ala Ser Thr Gly Val Met 半衰期 30 min 30 min >5 hr >30 hr >30 hr >30 hr >30 hr >30 hr >30 hr >30 hr
6.3.1 核糖体的功能位点: 核糖体的功能位点:
原核生物核糖体中有四种与RNA分子结合的 分子结合的 原核生物核糖体中有四种与 位点,其中一个是与mRNA结合的位点,另 结合的位点, 位点,其中一个是与 结合的位点 三个是与tRNA结合的位点 。 三个是与 结合的位点 ● A位点 site) :与新掺入氨酰tRNA结合位 位点(A 与新掺入氨酰 结合位 位点 点 ● P位点 site):与肽酰tRNA结合位点 位点(P : 结合位点 位点 位点(exit site ,E site):空载位点 ● E 位点 : ● mRNA结合位点 结合位点
E.coli小亚基 种蛋白质的排列 小亚基21种蛋白质的排列 小亚基
6.1.3 细菌核糖体的结构模型
6.2 核糖体的生物发生 核糖体的生物发生(biogenesis) 6.2.1 核糖体 核糖体rRNA基因的转录与加工 基因的转录与加工 编码rRNA基因的过量扩增 ■ 编码 基因的过量扩增 细胞为了满足大量需求的rRNA,通过两种 , 细胞为了满足大量需求的 方式扩大rRNA基因的拷贝数: 基因的拷贝数: 方式扩大 基因的拷贝数 在染色体上增加rRNA基因的拷贝数 基因的拷贝数; ● 在染色体上增加 基因的拷贝数 通过基因扩增 基因扩增(gene amplification)。 ● 通过基因扩增 。
第六章核糖体和核酶
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1. 发现核糖体及核糖体功能鉴定的两个关键技术是什么?答:核糖体最早是Albert Claude于1930s后期用暗视野显微镜观察细胞的匀浆物时发现的,当时称为微体(Microsomes),直到1950s中期,George Palade在电子显微镜下观察到这种颗粒的存在。
当时George Palade和他的同事研究了多种生物的细胞, 发现细胞质中有类似的颗粒存在, 尤其在进行蛋白质合成的细胞中特别多。
后来Philip Siekevitz 用亚细胞组份分离技术分离了这种颗粒, 并发现这些颗粒总是伴随内质网微粒体一起沉积。
化学分析揭示, 这种微粒富含核苷酸, 随之命名为ribosome,主要成分是核糖体RNA(rRNA),约占60%、蛋白质(r蛋白质)约占40%。
核糖体的蛋白质合成功能是通过放射性标记实验发现的。
将细胞与放射性标记的氨基酸短暂接触后进行匀浆,然后分级分离,发现在微粒体部分有大量新合成的放射性标记的蛋白质。
后将微粒体部分进一步分离,得到核糖体和膜微粒,这一实验结果表明核糖体与蛋白质合成有关。
两个关键技术是亚细胞组份分离技术和放射性标记技术。
2•说明人体单倍体染色体组中四种rRNA基因的组成、排列方式和拷贝数。
答:在人基因组的四种rRNA基因中,18S、5.8S和28S rRNA基因是串联在一起的,每个基因被间隔区隔开,5S的rRNA基因则是编码在另一条染色体上。
前3个基因组成一组,分布在人的13、14、15、21、22 等5条染色体上。
在间期核中,所有这5条染色体rRNA基因区域,转录时聚集在一起,形成一个核仁。
在人体单倍体染色体组中,每组rRNA基因有200个拷贝。
每一拷贝为一个rDNA 转录单位。
这 3 个基因是纵向串联排列在核仁组织者的DNA 上。
真核细胞核糖体的5S rRNA基因则是独立存在于一个或几个染色体上,拷贝数达几千个。
在人的细胞中,该基因的拷贝有24000 个之多,它们串联排列在 1 号染色体接近末端处。
生化名词解释、
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(A)氨基端:蛋白质的基本组成单位,广义上指分子中既有氨基又有羧基的化合物。
氨基酸脱羧作用:在微生物中很普遍,在高等动、植物组织内也有此作用,但不是氨基酸代谢的主要方式α-氧化:长链脂肪酸的α-碳在加单氧酶的催化下氧化成羟基生成α-羟脂酸的过程成为α-氧化(B)Β折叠:重复性结构,靠相邻肽链间的氢键维持结构稳定性,反平行结构更为稳定Β转角:(β弯曲)发夹结构Β凸起:小的非重复性结构,能单独存在,大多数为反平行β折叠中的一种不规则情况变性:天然蛋白质因受物理或化学因素的影响,其分子内部原有的高度规律性结构发生变化,致使蛋白质的理化性质和生物学性质都有所改变,但一级结构不被破坏的现象吡喃糖:C1与C3上的羟基形成六元环不可逆抑制剂:与酶的必需基因以共价键结合,引起酶永久性失活,其抑制作用不能用透析、别构效应:蛋白质在表现其生物功能时,构象发生改变从而改变整个分子性质的现象超滤等温和物理手段解除别构调节:具有别构作用的酶大多是寡聚酶,一般由两个或连个以上的亚基所组成别构酶:具有别构调节作用的酶,通常是由多个亚基组成的寡聚酶,可具有多个活性部位与调节部位比活力:每毫克酶蛋白所具有的酶活力单位数,是酶样品纯度的指标丙酮酸脱氢酶系:(多酶复合物)线粒体内膜上有,,催化丙酮酸进行下进行不可逆的氧化与脱羧反应,并使之与CoA结合形成乙酰CoA。
必需脂肪酸:必需由食物获得必需氨基酸:由食物中获取,苏氨酸,赖氨酸,甲硫氨酸,色氨酸,苯丙氨酸缬氨酸,亮氨酸,异亮氨酸半缩醛:单糖分子中醛基和其他碳原子上的羟基成环反应生成的反应半保留复制:DNA的两条链彼此分开各自作为模板,按碱基配对规则合成互补链,由此产生的子代DNA的一条链来自亲代,另一条链是以这条亲代链为模板合成的新链半不连续复制:DNA复制时,一条链是连续合成的,另一条链都是由间断合成的短片段连接而成不依赖于ρ因子的终止子:通常有一个富含AT的区域和一个或多个富含GC的区域,具有回文对称序列,该序列转录生成的RNA能形成茎环二级结构,终止RNA聚合酶的转录作用摆动性:tRNA上的反密码子与mRNA的密码子配对时,密码子的第一位、第二位碱基是严格按照碱基配对原则进行的,而第三位碱基配对则不很严格的现象(C)超二级结构:若干相邻的二级结构中的构象单元彼此相互作用,互成有规则的,在空间上能够辨认的二级结构组合体操纵子:功能相关的基因常串联在一起,由共同的调控元件调控,并转录成同一mRNA分子,可指导多种蛋白质合成的结构,原核细胞基因表达的协调单位。
《细胞生物学》核糖体与核酶自习报告
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核糖体与核酶引言:1.核糖体(ribosome)是细胞内的一种核糖蛋白颗粒,其唯一的功能是按照mRNA的指令将氨基酸合成蛋白质多肽链,所以核糖体是细胞内蛋白质合成的分子机器。
6.1 核糖体的形态结构1.核酶是具有催化活性的反义RNA6.1.1 核糖体的类型和化学组成6.1.1.1 核糖体的类型和大小1.核糖体有种类型:细胞质核糖体、线粒体核糖体、叶绿体核糖体2.核糖体分为:真核生物核糖体和原核生物核糖体3.核糖体由大小两个不同的亚基组成,在不进行蛋白质合成时是分开的,各自游离在细胞质中,在进行蛋白质合成时结合在一起4.在真核细胞中,核糖体在进行蛋白质合成时:1.游离在细胞质中称游离核糖体2.附着在内质网的表面,称膜旁核糖体或附着核糖体。
6.1.1.2 核糖体的化学组成1.核糖体的大小两个亚基都是由核糖体RNA(rRNA)和核糖体蛋白质组成。
6.1.2核糖体的蛋白质与rRNA6.1.2.1 核糖体蛋白1. E.coli核糖体21个小亚基,为S1~S21,大亚基的核糖体蛋白命名为L1~L336.1.2.2 核糖体rRNA1.30S核糖体亚基的形态主要是由16S rRNA决定的6.1.3细菌核糖体的结构模型1.S4、S5、S8、S12等4个蛋白定位在核糖体的小亚基上,并且是背向大亚基。
2.小亚基中确定了与信使RNA(mRNA)和转移RNA(tRNA)结合位点3.催化肽键形成的位点位于大亚基,和GTP水解的功能区6.2核糖体的生物发生1.在细胞内,核糖体是自我装配的。
2.核糖体的生物发生包括蛋白质和rRNA的合成、核糖体亚基的组装等。
6.2.1 核糖体rRNA基因的转录与加工1.编码核糖体的基因分为两类:一类是编码蛋白质的基因,另一类是rRNA基因6.2.1.1 编码rRNA基因的过量扩增1.细胞为了满足大量需求的rRNA,在进化的过程中形成了一种机制:增加编码rRNA基因的拷贝数。
2.增加拷贝数有两种方法:1.在染色体上增加rRNA基因的拷贝数2.通过基因扩增6.2.1.2 真核生物18S、5.8S、28S rRNA和5S rRNA基因1.在真核生物的染色体中,18S、5.8S、28S rRNA和5S rRNA基因是串联在一起的,每个基因被间隔区隔开,5S rRNA基因位于不同的染色体上。
生化 名词解释
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1. peptide unit肽单元:在多肽分子中肽键的6个原子(Cα1,C,O,N,H,Cα2)位于同一平面,被称为肽单元2. motif模体:在蛋白质分子中,可发现二个或三个具有二级结构的肽段,在空间上相互接近,形成一个特殊的空间构象,并具有相应的功能,被称为模体。
3. 蛋白质变性: 在某些理化因素作用下,致使蛋白质的空间构象破坏,从而改变蛋白质的理化性质和生物活性,称为蛋白质变性。
4.谷胱甘肽:由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成的三肽,半胱氨酸的巯基是该三肽的功能基团。
它是体内重要的还原剂,以保护体内蛋白质或酶分子等中的巯基免遭氧化。
5. β-pleated sheetβ折叠: 在多肽链β折叠结构中,每个肽单元以Cα为旋转点,依次折叠成锯齿状结构,氨基酸残基侧链交替地位于锯齿状结构的上下方。
两条以上肽链或一条肽链内的若干肽段的锯齿状结构可平行排列,其走向可相同,也可相反。
并通过肽链间的肽键羰基氧和亚氨基氢形成氢键从而稳固β-折叠结构.6. chaperon分子伴侣: 分子伴侣是一类帮助新生多肽链正确折叠的蛋白质。
它可逆的与未折叠肽段的疏水部分结合随后松开,如此重复进行可以防止错误的聚集发生,使肽链正确折叠。
分子伴侣对于蛋白质分子中二硫键的正确形成起到重要作用。
7. protein quaternary structure四级结构:数个具有三级结构的多肽链,在三维空间作特定排布,并以非共价键维系其空间结构稳定,每一条多肽链称为亚基。
这种蛋白质分子中各个亚基的空间排布及亚基间的相互作用,称为蛋白质的四级结构。
8. 结构域:蛋白质的三级结构常可分割成1个和数个球状区域,折叠得较为紧密,各行其能,称为结构域。
9. 蛋白质等电点:在某一pH溶液中,蛋白质分子所带的正电荷和负电荷相等,净电荷为零,此溶液的pH值,即为该蛋白质的等电点。
10. α-螺旋: α-螺旋为蛋白质二级结构类型之一。
在α-螺旋中,多肽链主链围绕中心轴作顺时钟方向的螺旋式上升,即所谓右手螺旋。
第9章 核糖体和核酶
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RNA在生命起源 RNA在生命起源 中的地位及其演 化过程
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生命是自我复制的体系
三种生物大分子,只有 三种生物大分子,只有RNA既具有信息载体 既具有信息载体 功能又具有酶的催化功能。因此,推测RNA 功能又具有酶的催化功能。因此,推测 可能是生命起源中最早的生物大分子。 可能是生命起源中最早的生物大分子。 核酶(ribozyme):具有催化作用的RNA。 :具有催化作用的 核酶 。 由RNA催化产生了蛋白质 催化产生了蛋白质
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核糖体的化学组成
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核糖体的装配
原核生物核糖体的装配 ◆小亚基的rRNA和蛋白质的装配关系: 小亚基的rRNA和蛋白质的装配关系: 小亚基的rRNA和蛋白质的装配关系 组成核糖体的蛋白质和rRNA 在大小 组成核糖体的蛋白质和 rRNA在大小 rRNA 亚基中均有一定的空间排布。 亚基中均有一定的空间排布。
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核 糖 体 的 大 小 亚 基
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Mg2+ 浓度对大小亚基的聚合和解离的 影响: 影响:
70S 核糖体在Mg 的浓度小于1mm/L的溶液中 ◆70S 核糖体在 Mg2+ 的浓度小于 1mm/L 的溶液中 易解离; 易解离; 浓度大于10 10mm/L, ◆当Mg2+ 浓度大于10mm/L, 两个核糖体通常形 100S的二聚体。 成100S的二聚体。
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r蛋白质的主要功能
折叠成有功能的三维结构是十分重要的; 对rRNA 折叠成有功能的三维结构是十分重要的; 在蛋白质合成中, 某些 蛋白可能对核糖体的构象 在蛋白质合成中 某些r蛋白可能对核糖体的构象 微调”作用; 起“微调”作用; 在核糖体的结合位点上甚至可能在催化作用中, 核 在核糖体的结合位点上甚至可能在催化作用中 糖体蛋白与rRNA共同行使功能。 共同行使功能。 糖体蛋白与 共同行使功能4核糖体的类型
细胞生物学(第五版)-第10章-核糖体精选全文完整版
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二、蛋白质的合成
又称蛋白质的翻译,是细胞中最复杂、最精确的生 命活动之一。蛋白质合成需要各种携带氨基酸的 tRNA、核糖体、mRNA、多种蛋白质因子、阳离子 及GTP等的参与
蛋白质合成分为三步:
起始(Initiation)包括核糖体与mRNA 结合,形 成起始复合物,其中含有第一个氨酰-tRNA。
仅发现在哺乳动物成熟的红细胞 等极个别高度分化的细胞内没有 核糖体,线粒体和叶绿体中也含 有核糖体。 核糖体是细胞最基本的不可缺少 的结构。
核糖体是一种不规则颗粒状的结构,其主 要成分是RNA和蛋白质,直径约25 nm 核糖体蛋白分子主要分布在核糖体表面, 核糖体RNA(rRNA)位于内部,二者靠共价 键结合在一起。
甲基转移酶催化形成的。
30S小亚基与mRNA的结合需要 起始因子(initiation factor,IF)的 帮助。 这些起始因子仅位于30 S亚基上。 一旦30 S亚基与50 S亚基结合形 成70S核糖体后便释放。 起始因子的主要作用:帮助形成 起始复合物。 原核细胞有3种起始因子: IF1、IF2和IF3。
主要包括4个步骤: 1、氨酰-tRNA进入核糖体A位点的选择 2、肽键的形成 3、转位(translocation) 4、脱氨酰-tRNA的释放。
1.氨酰-tRNA在核糖体A位点的入位
起始的tRNAiMet占据P位点, 核糖体接受第2个氨酰-tRNA进 入A位点,这就是肽链延伸的 第一步。 为了有效地结合A位点,第二 个氨酰-tRNA必须与有GTP的 延伸因子(elongation factor, EF)EF-Tu结合形成复合物氨酰 -tRNA·EF-Tu·GTP。
三、核糖体蛋白质与rRNA的功能
核糖体上具有一系列与蛋白质合成有关的结合位 点与催化位点
【2024版】第十一章-核糖体
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可编辑修改精选全文完整版第十一章核糖体核糖体是一种核糖核蛋白颗粒(ribonucleoprotein particle),是细胞内合成蛋白质、没由膜包被的细胞器,其功能是按照mRNA的信息将氨基酸高效精确地合成蛋白质多肽链。
因为富含核苷酸,1958年Roberts建议把这种颗粒命名为核糖蛋白体,简称核糖体(ribosome)第一节核糖体的类型与结构一、核糖体的基本类型与化学组成:生物界有两种基本类型的核糖体:一种是原核细胞核糖体;另一种是真核细胞核糖体。
两种核糖体都有两个大小不同的亚基(subunit)组成,每个亚基都含有rRNA和蛋白质。
原核细胞核糖体沉降系数为70S,相对分子质量为2.5*106,易解离为50S与30S的大小亚基。
真核细胞核糖体沉降系数为80S,相对分子质量为4.8*106,易解离为60S与40S的大小亚基。
rRNA中的某些核苷酸残基被甲基化修饰,甲基化常发生在rRNA序列较为保守的区域。
核糖体大小亚基常常游离于细胞基质中,只有当小亚基与mRNA结合后打牙祭才与小亚基结合形成完整的核糖体。
肽链合成终止后,大小亚基解离,又游离于细胞质基质中。
二、核糖体的结构结构与功能的分析方法表明:(1)离子交换树脂可分离纯化各种r蛋白。
(2)核糖体中r蛋白与rRNA的结构关系:纯化的r蛋白与纯化的rRNA进行核糖体的重组装的过程中,某些蛋白质必须首先结合到rRNA上,其他蛋白才能装配上去,即表现出现后层次。
(3)双功能的交联剂和双向电泳分离:可用于研究r蛋白在结构上的相互关系。
(4)电镜负染色与免疫标记技术结合:研究r蛋白在核糖体的亚单位上的定位。
(5)对rRNA,特别是对16S rRNA结构的研究已十分成熟:①16SrRNA的一级结构是非常保守的②16SrRNA的二级结构具有更高的保守性③16SrRNA可以分为四个结构域:中心结构域,5'端结构域,3'端结构域和主结构域。
蛋白质合成过程中很多重要步骤与50S核糖体大亚单位相关:(1)依赖延伸因子Tu(EF-Tu)的氨酰tRNA的结合;(2)延伸因子G(EF-G)介导的转位作用;(3)依赖于起始因子2的fMet-tRNA的结合;(4)依赖于释放因子的蛋白合成终止作用;(5)应急因子与核糖体结合产生阻断蛋白合成等。
细胞生物学名词解释
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细胞生物学名词解释一.绪论细胞生物学是从细胞的整体水平,亚显微水平,分子水平3 个层次,以整体与动态的观点研究细胞的结构,功能,以及各种生命活动本质和基本活动的科学。
二.细胞生物学的研究方法1.细胞培养(cell culture):从活体中取出的细胞或其他建系细胞,在体外无菌条件下,给予一定的条件进行培养,使其能继续生存、生长和繁殖的一种方法。
2.原代培养(primary culture):直接取材于有机体组织的细胞培养。
3.传代培养(secondary culture):将原代培养的细胞取出,以1:2以上的比例转移到另一盛有新鲜培养液的器皿中进行培养的过程称传代培养。
用这种方法可重复传代。
4.接触抑制:一般分散的细胞悬液在培养瓶中很快就贴壁铺展并进行分裂繁殖,形成紧密的单层细胞,当这些细胞表面互相接触时,就停止分裂增殖,不再进入S期,这种现象称细胞的接触抑制。
5.细胞系(cell line):原代培养细胞成功传代即为细胞系。
有限细胞系(50代以内)6.细胞融合:是指用自然或人工的方法使两个或几个不同细胞融合为一个细胞的过程。
7.Southern杂交:是体外分析特异DNA序列的方法,操作时先用限制性内切酶将核DNA或线粒体DNA切成DNA片段,经凝胶电泳分离后,转移到醋酸纤维薄膜上,再用探针杂交,通过放射自显影,即可辨认出与探针互补的特殊核苷序列。
8.Northern杂交9.PCR技术:是在体外快速扩增特异性DNA片段的技术,它利用DNA半保留复制原理,通过控制温度,使DNA 处于“变性—复性—合成”反复循环中。
每一个循环的产物又作为下一个循环的模板,每循环一次,DNA分子就按2n指数倍增,结果可获得数百万个拷贝的目的DNA片段。
三.细胞概述细胞是一切有机体的基本结构和功能单位,各种生命活动都是以细胞为单位进行的,细胞的形态结构和功能特异,但其化学组成基本相似。
1.生物大分子:细胞内由小分子物质聚合而成的结构复杂,具独特特性,负责装配细胞组成,催化细胞内化学变化,产生运动,反应以及遗传变异的生命活动的物质。
细胞学第7讲-核糖体和核酶知识分享
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40
7.4.3 核酶(ribozyme)
具有催化活性的RNA,其化学本质是核糖 核酸(RNA)。其功能很多,有的能切割RNA, 有的能切割DNA,有些具有RNA连接酶、磷酸 酶等活性;
与蛋白质酶相比,核酶的催化效率较低, 是一种较为原始的催化酶。
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核 酶 的 作 用
42
核酶的发现 ●1980s ●Thomas Cech等 ●研究四膜虫的26S rRNA前体加工 ●发现:26S rRNA前体可进行自剪接
◆真核生物中, 18S、5.8S和28S rRNA的基因在 核仁内串连在一起转录,而5S rRNA 的基因在 核仁外转录。
◆某些生物3’ 端通常有多余的核苷酸,在加工时 被切除。
14
7.2.1.2 原核生物核糖体rRNA基因的 转录与加工
原核生物rRNA基因转录 ●细菌的16SrRNA、23SrRNA、5SrRNA基因
30
第一个氨酰tRNA进入核糖体的P位点
原核生物: 携带甲酰甲硫氨酸的tRNA通过反密码子与
mRNA中的AUG的识别进入核糖体。起始tRNA与 GTP、IF2结合形成GTP-IF2-tRNAfmet复合物,复 合物与mRNA的AUG结合后,结合小亚基的IF3释 放。
31
完整复合物的装配
起始tRNA与AUG结合后,大亚基与GTPIF2-tRNAfmet复合物结合,形成核糖体-mRNA 起始复合物。
蛋白质的合成。
35
多 聚 核 糖 体
36
7.4 Ribozyme and Antisense RNA
◆核酶(ribozyme) ◆反义RNA(Antisense RNA)
37
7.4.1 真核细胞中的小分子RNA( small RNA)
【2024版】第十二章-核糖体
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平台 (platform)
头部 (head)
主体 (Body)
横跨界面
5
三、核糖体蛋白质与rRNA的功能
核糖体具有一系列与蛋白质合成有关的结合位点与催化位点: ① 与mRNA结合的位点 蛋白质的起始合成首先需要mRNA与小亚基结合 ② A位点 与新掺入的氨酰-tRNA结合的位点 ——氨酰基位点 ③ P位点 与延伸中的肽酰-tRNA结合的位点—— 肽酰基位点 ④ E位点 脱氨酰tRNA的离开A位点到完全释放的一个位点 ⑤ 与肽酰tRNA 从A位点转移到P位点有关的转移酶(即延伸因子EF-G)的结合位点 ⑥ 肽酰转移酶的催化位点 核糖体最主要的活性部位
如A位点 mRNA是UAA、UGA或UAG终止密码子,由于没有与之匹配的反密码子, 氨酰-tRNA不能结合到核糖体上,蛋白质合成终止。 释放因子(RF) 识别终止密码子,催化蛋白质合成的终止(促使肽酰转移酶催化水 分子添加到肽酰-tRNA上。
14
四环素 链霉素 氯霉素 环己酰亚胺 利福霉素
15
三、核糖体与RNA世界
4
rRNA
- 一级结构在进化上非常保守; - 16 S rRNA的二级结构具有更高的保守性,都折叠成相似的二级结构,
即由多个茎环(stem-loop structure)所组成的结构,分四个结构域; - 三级结构的稳定涉及多种作用力(rRNA螺旋间的相互作用以及腺嘌呤插入螺旋小沟
的作用力等),在形成三级结构后,16s RNA每一个大的结构域都对应小亚基的一个 形态部位,而23S rRNA的6个结构域在50S 大亚基中是相互交织在一起的,形成一 个“集成”结构。
二、核糖体的结构
3
对核糖体高分辨率的X射线衍射图谱分析表明: ① 每个核糖体含有4个RNA分子的结合位点,其中1个位点供mRNA结合,3个位
名词解释
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1.细胞通讯:一个细胞发出的信息通过介质传递到另一个细胞并与靶细胞相应的受体相互作用,然后通过细胞信号转导产生胞内一系列生理生化变化,最终表现为细胞整体的生物学效应的过程。
细胞间的通讯对于多细胞生物体的发生和组织的构建,协调细胞的功能,控制细胞的生长、分裂、分化和凋亡是必须的。
2.细胞识别:细胞之间通过细胞表面的信息分子相互作用引起细胞反应的现象。
3.信号分子:是细胞的信息载体,种类繁多,包括化学信号诸如各类激素、局部介质和神经递质等以及物理信号诸声、光、电和温度变化等。
根据其溶解性可分为亲脂性和亲水性其共同特点是:特异性,高效性,可被灭活4.受体:一种能够识别和选择性结合某种配体(信号分子)的大分子物质,多为糖蛋白,少数是糖脂。
一般至少包括两个功能区域,与配体结合的区域和产生效应的区域,当受体与配体结合后,构象改变而产生活性,启动一系列过程,最终表现为生物学效应5.分子开关:两组在进化上保守的胞内蛋白在信号转导中行使功能,一类是GTPase开关蛋白,包括三聚体G蛋白和单体G蛋白,当结合GTP时呈现活化的开启状态,当结合GDP时呈现失活的关闭状态。
开关蛋白通过两种状态的转换控制下游靶蛋白的活性。
另一类是通过蛋白激酶使靶蛋白磷酸化,通过蛋白磷酸酶使靶蛋白去磷酸化,从而调节蛋白质的活性。
6.蛋白激酶:一类磷酸转移酶,其作用是将 ATP 的γ磷酸基转移到底物特定的氨基酸残基上,使蛋白质磷酸化,蛋白激酶在信号转导中的作用:一是通过磷酸化调节蛋白质的活性,磷酸化和去磷酸化是绝大多数信号通路组分可逆激活的共同机制;其二是通过蛋白质的逐级磷酸化,使信号逐级放大,引起细胞反7. G蛋白:三聚体GTP结合调节蛋白(trimeric GTP-binding regulatory protein)简称G蛋白,位于质膜胞质侧,由α、β、γ三个亚基组成,α和γ亚基通过共价结合的脂肪酸链尾结合在膜上。
G蛋白在信号转导过程中起着分子开关的作用,当α亚基与GDP结合时处于关闭状态,与GTP结合时处于开启状态,α亚基具有GTP酶活性,能催化所结合的GTP水解,恢复无活性的三聚体状态8.自磷酸化:RTKs在静息状态激酶活性是很低的。
分子生物学名词解释
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分子生物学名词解释第二章核酸的结构与功能1. DNA的变性与复性(denaturation and renaturation of DNA): 双链DNA(dsDNA)在变性因素(如过酸、过碱、加热、尿素等)影响下,解链成单链DNA(ssDNA)的过程称之为DNA变性。
DNA变性后,生物活性丧失,但一级结构没有改变,所以在一定条件下仍可恢复双螺旋结构。
热变性的DNA经缓慢冷却后,两条互补链可重新恢复天然的双螺旋构象,这一现象称为复性,也称退火。
2.核酸分子杂交(hybridization of nucleic acids):是核酸研究中一项最基本的实验技术。
其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子。
杂交双链可以在DNA与DNA链之间,也可在RNA与DNA链之间形成。
这种现象称为核酸分子杂交。
简称杂交(hybridization)3.增色效应与减色效应(hyperchromic effect and hypochromic effect): DNA变性时,双螺旋值增高称之为增色效应;除去变性因素后,单链DNA依碱基配对规律恢复松解,碱基暴露,OD260值减小称为减色效应。
双螺旋结构,OD2604. 核酶(ribozyme):核酶是具有催化功能的RNA分子。
大多数核酶通过催化转磷酸酯和磷酸二酯键水解反应参与RNA自身剪切、加工过程。
5.探针:探针是经过特殊标记的核酸片段,具有特定的序列,能够与待测的核酸片段互补结合,因此可用于检测核酸样品中的基因。
第八章核苷酸代谢1. 从头合成途径(de novo synthesis pathway): 利用磷酸核糖、氨基酸、一碳单位及CO2等简单物质为原料合成嘌呤或嘧啶核苷酸的过程,称为从头合成途径,是体内的主要合成途径。
2. 补救合成途径(salvage synthesis pathway):利用体内游离嘌呤或嘧啶碱基和游离嘌呤或嘧啶核苷,经简单反应过程生成嘌呤或嘧啶核苷酸的过程。
第11章 核糖体与核酶
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E.coli (a)核糖体小亚单位中的部分r蛋白与rRNA的结合位点) (b)及其在小亚单位上的部位
(三)核糖体的装配
• 1、rRNA的转录与加工
• (1)真核生物:18S、5.8S和28S基因是串联一起, 每个基因被间隔区隔开。该基因在RNA聚合酶Ⅰ 作用下,首先转录成一个45S的前rRNA,然后 被加工成41S前rRNA,再被切割成20S前rRNA 和32S前rRNA,20S rRNA加工为成熟的18S rRNA,32S rRNA加工为28S和5.8S rRNA • 5SrRNA基因位于不同染色体上,由RNA聚合酶Ⅲ 转录,仅进行简单加工或不加工
原核生物与真核生物核糖体成分的比较
二、核糖体的结构
(一)核糖体结构与功能的分析方法
离子交换树脂可分离纯化各种r蛋白; 纯化的r蛋白与纯化的rRNA进行核糖体的重组装, 显示核糖体中r蛋白与rRNA的结构关系 双向电泳技术可显示出E.coli核糖体在装配各阶段中, 与rRNA结合的蛋白质的类型 双功能的交联剂和双向电泳分离可用于研究r蛋白在 结构上的相互关系 电镜负染色与免疫标记技术结合,研究r蛋白在核糖 体的亚单位上的定位。 70S核糖体小亚基16S rRNA结构及与全部r蛋白关系
(二)蛋白质合成的基本过程
1、链的起始: • (1)30S亚基与mRNA的结合:在原核生物, mRNA依靠SD序列只和游离的30S小亚基结合; 真核生物,小亚基识别mRNA5’端甲基化帽结构, 然后沿mRNA滑动,直到遇到识别序列,典型的 识别序列为5’-CCACCAUGC-3’,含AUG • 小亚基与mRNA结合还需要起始因子(initiation factor, IF)的帮助.原核生物命名为IF,有IF1,IF2和 IF3,IF3帮助mRNA与核糖体结合;真核生物为eIF, 至少有10个,eIF4帮助mRNA与核糖体结合.
生物化学名词解释必考(3)
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生物化学名词解释必考(3)生物化学名词解释必考58.糖核苷酸:单糖与核苷酸通过磷酸酯键结合的化合物,是双糖和多糖合成中单糖的活化形式与供体。
59.限制性核酸内切酶:能作用于核酸分子内部,并对某些碱基顺序有专一性的核酸内切酶,是基因工程中的重要工具酶。
60.内含子:真核生物的mRNA 前体中,除了贮存遗传序列外,还存在非编码序列,称为内含子。
61.外显子:真核生物的mRNA 前体中,编码序列称为外显子。
62.基因表达:是基因中的DNA序列生产出蛋白质的过程。
步骤大致从DNA转录成mRNA开始,一直到对于蛋白质进行后转译修饰为止。
生物化学重点名词解释2017-04-09 08:04 | #2楼生物化学:研究生物体分子组成及变化规律的基础学科,是对生命现象最为基础、深入的分子水平的机制探讨a 生物体的化学组成、分子结构、性质及功能。
b 生物分子的分解与合成,反应过程中的能量变化、及新陈代谢的调节与控制c 生物信息分子的合成及其调控,也就是遗传信息的贮存、传递和表达必需氨基酸:人体和其它哺乳动物自身不能合成,机体又必需,需要从饮食中获得的氨基酸。
氨基酸等电点:指氨基酸的正离子浓度和负离子浓度相等时的pH 值,用符号pI表示。
构型:指在立体异构体中不对称碳原子上相连的各原子或取代基团的空间排布。
构型的转变伴随着共价键的断裂和重新形成。
蛋白质的一级结构:指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序,以及二硫键的位置。
蛋白质的二级结构:在蛋白质分子中的局部区域内,多肽链沿一定方向盘绕和折叠的方式。
蛋白质α-螺旋的特点:①右手螺旋②氨基酸侧链伸向螺旋外侧③每3.6个氨基酸残基螺旋上升一圈,螺距为0.54nm ④α-螺旋的每个肽链的N-H和第四个肽链的羰基氧形成氢键,氢键的方向与螺旋长轴基本平行。
β-折叠结构又称为β-片层结构,它是肽链主链或某一肽段的一种相当伸展的结构,多肽链呈扇面状折叠。
(1)两条或多条几乎完全伸展的多肽链(或肽段)侧向聚集在一起,通过相邻肽链主链上的氨基和羰基之间形成的氢键连接成片层结构并维持结构的稳定(2)氨基酸之间的轴心距为0.35nm(反平行式)和0.325nm(平行式)。
细胞生物学(王金发版)章节总结.
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第一章:细胞概述1. 基本概念:主要分清细胞、原生质、细胞质、细胞学、细胞生物学等基本概念;2. 细胞的发现和细胞学说的创立:了解英国学者胡克发现细胞的起因, 以及发现细胞的基本条件。
对于细胞学说, 侧重于学说的基本内容和该学说对细胞科学发展的推动作用。
3. 细胞的基本功能和特性:重点掌握细胞生命的三个最基本的功能: 自我增殖和遗传、新陈代谢和运动性; 并对细胞结构上的同一性有基本的理解。
4. 细胞的分子基础:充分认识细胞是由化学物质构成的, 生命是物质的,是一种特殊形式的物质运动,它是物质、能量和信息诸变量在特定时空的“表演”,其运转有赖于生命系统有组织的守时和对空间环境的合拍。
5. 细胞的类型和结构体系:主要了解真核细胞与原核细胞的结构组成和体系,比较二者的异同。
同时注意动物细胞与植物细胞在结构上的差异。
本章的核心内容是细胞学说的创立和细胞的类型与结构体系。
一、名词解释1、细胞生物学cell biology2、显微结构microscopic structure二、填空题1、细胞生物学是研究细胞基本规律的科学,是在、和三个不同层次上,以研究细胞的、、、和等为主要内容的一门科学。
2、细胞生物学的发展历史大致可分为、、、和分子细胞生物学几个时期三、选择题1、第一个观察到活细胞有机体的是()。
a、Robert Hookeb、Leeuwen Hoekc、Grewd、Virchow2、细胞学说是由()提出来的。
a、Robert Hooke和Leeuwen Hoekb、Crick和Watsonc、Schleiden和Schwannd、Sichold和Virchow3、细胞学的经典时期是指()。
a、1665年以后的25年b、1838—1858细胞学说的建立c、19世纪的最后25年d、20世纪50年代电子显微镜的发明4、()技术为细胞生物学学科早期的形成奠定了良好的基础。
a、组织培养b、高速离心c、光学显微镜d、电子显微镜四、判断题1、细胞生物学是研究细胞基本结构的科学。
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在原核生物中, 核糖体中与mRNA结合位点位于16S rRNA 的3'端,mRNA中与核糖体16S rRNA结合的序列称为SD序列(SD sequence),它是1974年由J.Shine 和 L.Dalgarno发现的,故此而命名。SD序列是mRNA中5'端富含嘌呤的短核苷酸序列,一般位于mRNA的起始密码AUG的上游5~10个碱基处,并且同16S rRNA 3'端的序列互补。
5. P位点(P site)
即肽酰tRNA位点(peptidyl-tRNA site), 又叫供位(donor site), 或肽酰基位点, 主要位于大亚基, 是肽基tRNA移交肽链后肽酰tRNA所占据的位置, 即与延伸中的肽酰tRNA结合位点。
6. E 位点(exit site, E site)
蛋白酶体存在于所有真核细胞中,其活性受γ干扰素的调节。
12. 核酶(ribozyme)
核酶一词用于描述具有催化活性的RNA, 即化学本质是核糖核酸(RNA), 却具有酶的催化功能。核酶的作用底物可以是不同的分子, 有些作用底物就是同一RNA分子中的某些部位。核酶的功能很多,有的能够切割RNA, 有的能够切割DNA, 有些还具有RNA 连接酶、磷酸酶等活性。与蛋白质酶相比,核酶的催化效率较低ibosomes)
在蛋白质合成过程中,同一条mRNA分子能够同多个核糖体结合,同时合成若干条蛋白质多肽链,结合在同一条mRNA上的核糖体就称为多聚核糖体(polysome 或polyribosomes)。
在mRNA的起始密码子部位,核糖体亚基装配成完整的起始复合物,然后向mRNA的3'端移动,直到到达终止密码子处。当第一个核糖体离开起始密码子后,空出的起始密码子的位置足够与另一个核糖体结合时,第二个核糖体的小亚基就会结合上来,并装配成完整的起始复合物,开始蛋白质的合成。同样,第三个核糖体、第四个核糖体、……依次结合到mRNA上形成多聚核糖体。根据电子显微照片推算,多聚核糖体中,每个核糖体间相隔约80个核苷酸。
10. N-端规则(N-end rule)
每一种蛋白质都有寿命特征, 称为半衰期(half-life)。蛋白质的半衰期与多肽链N-端特异的氨基酸有关,它们对蛋白质的寿命有控制作用。如末端是精氨酸或赖氨酸的多肽,寿命就很短,而末端是缬氨酸或甲硫氨酸的多肽,寿命就很长。蛋白质N-末端与半衰期的关系,称为N端规则。
5S rRNA基因是由RNA聚合酶Ⅲ转录的,原初转录物的5'端与成熟的5S rRNA的5'端完全相同。在某些生物中,3'端通常含有多余的核苷酸,在加工时要被切除。所以,5S rRNA只需要进行简单的加工,或者根本不需要进行加工。
4. A位点(A site)
即氨酰基位点,是与新掺入的氨酰tRNA(aminoacyl-tRNA )结合的位点, 又叫受位(entry site),主要位于大亚基,是接受氨酰tRNA的部位。
9. 嘌呤霉素(puromycin)
嘌呤霉素是一种蛋白质合成抑制剂,它具有与tRNA分子末端类似的结构, 能够同氨基酸结合,代替氨酰化的tRNA同核糖体的A位点结合,并掺入到生长的肽链中。虽然嘌呤霉素能够同A位点结合,但是不能参与随后的任何反应, 因而导致蛋白质合成的终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟的多肽。
13. 小分子RNA(small RNA)
存在于真核生物细胞核和细胞质中,它们的长度为100到300个碱基(酵母中最长的约1000个碱基)。多的每个细胞中可含有105 ~106 个这种RNA分子,少的则不可直接检测到, 它们由RNA聚合酶Ⅱ或RNA聚合酶Ⅲ所合成, 其中某些象mRNA一样可被加帽。
19. 核糖核酸酶 P (ribonuclease P)
核糖核酸酶 P 是一种核糖核蛋白, 含有一个单链RNA分子, 长度为375个碱基, 结合一个相对分子质量为20kDa的多肽(119个氨基酸残基)。RNA具有催化切割tRNA的能力, 蛋白质则起间接的作用,可能是维持RNA结构的稳定。该酶广泛存在于原核生物和真核生物(核仁、叶绿体和线粒体)中,也参与核糖体RNA的加工。
内含子是基因内的间隔序列,不出现在成熟的RNA分子中,在转录后通过加工被切除。大多数真核生物的基因都有内含子。
16. 外显子(exon)
外显子是最后出现在成熟RNA中的基因序列, 又称表达序列。
17. 自我剪接(self-splicing)
具有自我催化能力,将自身的某些部位切除的现象称为自我剪接。在酵母和真菌的线粒体mRNA和tRNA前体加工、叶绿体的tRNA 和rRNA前体加工、某些细菌病毒的mRNA前体加工中都发现了自我剪接现象。
至于卵母细胞中rRNA基因扩增的机制,有人认为可能是通过从染色体上分离出来的环状DNA分子,这种环状DNA中含有rRNA基因,但是第一个含有rRNA基因的环状DNA是如何形成的尚不清楚。由于环状DNA能够通过滚环复制(rolling circle replication)的方式进行复制,因而能够产生大量的rRNA基因。
主要有两种类型的小分子RNA:一类是snRNA(small nuclear RNA),存在于细胞核中;另一类是scRNA(small cytoplasmic RNA),存在于细胞质中。
小分子RNA通常与蛋白质组成复合物, 在细胞的生命活动中起重要的作用, 某些snRNPs和剪接作用密切相关,它们分别与供体和受体剪接位点以及分支顺序相互补。scRNA参与蛋白质的合成和运输, 如SRP颗粒就是一种由一个7SRNA和蛋白质组成的核糖核蛋白体颗粒,主要功能是识别信号肽, 并将核糖体引导到内质网。
11. 蛋白酶体(proteasomes)
蛋白酶体既存在于细胞核中,又存在于胞质溶胶中, 是溶酶体外的蛋白水解体系, 由10~20个不同的亚基组成中空的圆桶形的结构,显示多种肽酶的活性,能够从碱性、酸性和中性氨基酸的羧基侧水解多种与遍在蛋白连接的蛋白质底物。蛋白酶体对蛋白质的降解是与环境隔离的。主要降解两种类型的蛋白质:一类是错误折叠的蛋白质,另一类就是需要进行数量调控的蛋白质。
20 核剪接(nuclear splicing)
核剪接是指发生在细胞核中,主要是对hnRNA中内含子的剪接。这种剪接有三个主要特点∶一是在pre-mRNA中内含子与外显子间有特征性序列,即GT-AG规则;第二是剪接过程中需要snRNA参与,并要形成剪接体;第三要形成套索结构。
细胞中反义RNA的来源有两种途径∶第一是反向转录的产物,在多数情况下, 反义RNA是特定靶基因互补链反向转录产物, 即产生mRNA和反义RNA的DNA是同一区段的互补链。第二种来源是不同基因产物,如OMPF基因是大肠杆菌的膜蛋白基因,与透性有关,其反义基因MICFZE则为另一基因。
15. 内含子(intron)
14. 反义RNA(antisense RNA)
反义RNA是指与mRNA互补的RNA分子, 也包括与其它RNA互补的RNA分子。由于核糖体不能翻译双链的RNA,所以反义RNA与mRNA特异性的互补结合, 即抑制了该mRNA的翻译。通过反义RNA控制mRNA的翻译是原核生物基因表达调控的一种方式,最早是在E.coli 的产肠杆菌素的Col E1质粒中发现的,许多实验证明在真核生物中也存在反义RNA。近几年来通过人工合成反义RNA的基因, 并将其导入细胞内转录成反义RNA, 即能抑制某特定基因的表达,阻断该基因的功能, 有助于了解该基因对细胞生长和分化的作用。
E位点是脱氨酰tRNA(deaminoacyl-tRNA)离开A位点到完全从核糖体释放出来的一个中间停靠点,只是作暂时的停留。当E位点被占据之后,A位点同氨酰tRNA的亲和力降低,防止了氨酰tRNA的结合,直到核糖体准备就绪,E位点腾空,才会接受下一个氨酰tRNA。
7. SD序列(SD sequence)
18. 肽酰转移酶(peptidyl transferase)
肽酰转移酶是催化肽键形成的酶。在蛋白质合成过程中,它催化核糖体A位tRNA上末端氨基酸的氨基与P位肽酰-tRNA上氨基酸的羧基间形成肽键。其结果,使A位的氨酰-tRNA上的多肽延长了一个氨基酸,而P位的氨酰-tRNA形成脱氨酰-tRNA。
在真核细胞中, 核糖体进行蛋白质合成时,既可以游离在细胞质中, 称为游离核糖体, 也可以附着在内质网的表面, 称为膜旁核糖体或附着核糖体。真核细胞含有较多的核糖体, 每个细胞平均有106 ~107 个, 而原核细胞中核糖体较少每个细胞平均只有15×102 ~18×103 个。
典型的原核生物大肠杆菌核糖体是由50S大亚基和30S小亚基组成的。在完整的核糖体中,rRNA约占2/3, 蛋白质约为1/3。50S大亚基含有34种不同的蛋白质和两种RNA分子,相对分子质量大的rRNA的沉降系数为23S,相对分子质量小的rRNA为5S。30S小亚基含有21种蛋白质和一个16S的rRNA分子。
3. 5S rRNA基因(5S rRNAgene)
5S rRNA是核糖体大亚基的一个组份,原核生物和真核生物都有5S rRNA,而且结构相似。真核生物的5S rRNA基因与其它三种rRNA基因不在同一条染色体上,它是由核仁以外的染色体基因转录的,然后运输到核仁内参与核糖体的装配。5S rRNA基因的数量比45S rRNA转录单位多,人的5S rRNA基因有500个拷贝,并且在染色体上串连排列。非洲爪蟾的5S rRNA基因的一个重复单位含有一个5S rRNA基因、一个不转录的假基因(101bp的5S rRNA基因的片段),每个重复单位间被不转录的间隔序列隔开,间隔序列的长度变化不定,最长达400bp;5S rRNA基因转录的速度很快,其结果产生过量的5S rRNA,有些最后要被降解掉。
蛋白酶体对蛋白质的降解通过泛素(ubiquitin)介导,所以又称为泛素降解途径。泛素是由76个氨基酸残基组成的小肽,它的作用主要是识别要被降解的蛋白质,然后将这种蛋白质送入蛋白酶体的圆桶中进行降解。蛋白酶体对蛋白质的降解作用分为两个过程:一是对被降解的蛋白质进行标记,由泛素完成;二是蛋白酶解作用,由蛋白酶体催化。