血液中酒精含量检测作业指导书

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血液中酒精含量检测作业指

导书

-标准化文件发布号:(9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII

1.目的

检测血液中乙醇含量。

2. 适用范围

本标准适用于血液中乙醇的定性、定量分析。

3. 职责

技术负责人批准考核合格的毒物分析专业人员完成此项工作。

4. 试剂与对照品

4.1 乙醇(色谱纯99%,Sigma)

4.2 乙醇溶液:精密称取乙醇1.0097g于100ml容量瓶内,添加蒸馏水至刻度,混匀,得10.00mg/ml乙醇储备液,将储备液用蒸馏水稀释至20倍,得

0.50mg/ml乙醇控制液,放置样品室4℃冰箱保存,有效期为6个月。

4.3 叔丁醇(色谱纯99%,Chem Service)

4.4 内标叔丁醇溶液:精密称取叔丁醇0.5026g于100ml容量瓶内,添加蒸馏水至刻度,混匀,得

5.00mg/ml叔丁醇储备液,将储备液用蒸馏水稀释至125倍,得40ug/ml叔丁醇内标工作液,放置样品室4℃冰箱保存,有效期为6个月。

4.5 乙醇标准溶液(Gerilliant)

乙醇标准溶液: 10mg/dl,20mg/dl,50mg/dl,80mg/dl,100mg/dl,

200mg/dl,300mg/dl

5.血液中乙醇定性、定量的分析

5.1样品处理

用精密移液器取样品血0.10 mL及0.50 mL叔丁醇40μg/mL内标工作液2份,各加入样品瓶内,盖上硅橡胶垫,用密封钳加封铝帽,混匀,置于顶空自动进样器中加热10 min,待测。

5.2 气相色谱仪条件

色谱柱:DB-ALC1毛细管柱(30m0.32mm 1.2m)

柱温:恒温40 C

检测器:火焰离子化检测器(FID)

检测器温度:250C

进样口温度:150C

5.3顶空自动进样分析条件

DANI顶空自动进样器(配1mL定量进样环)工作条件:加热箱温度(Oven)65℃,定量环温度105℃,传输线温度(TR.Line)110℃,样品瓶加热平衡时间(Vial EQ.Time)10.0min,样品瓶加压时间(Pressuriz Time)0.10min,定量环充满时间(Loop Fill Time)0.10min,定量环平衡时间0.05min,进样时间(Inject Time)1.00min。

5.4记录

记录检材中色谱峰乙醇及内标物的峰面积值,填入表中,并根据工作曲线定量计算方程计算出样品血中乙醇的浓度。

5.5定量结果评价

样品应同时平行测定两份,单柱单检测器两份样品测定结果的双样相对相差(双柱双检测器两份样品测定结果的相对偏差)若不超过5%时(有凝血块的血样不超过10%),结果按两份样品结果的平均值计算,双样相对相差若超过5%时(有凝血块的血样超过10%),需要重新测定。

| C1- C2|

双样相对相差(%) = 100

C

C1、C2为两份样品平行定量测定的结果。

式中C为两份样品平行定量测定结果的平均值(C1+ C2)/ 2;

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