HIV抗体检测试验原始记录(英科新创试剂)

HIV抗体检测试验（ELISA法）原始记录

编号:（张疾控）字（原始记录）第（）号第页共页

试剂名称：（英科新创）试剂批号：试剂效期：样品状态：

样品来源：送检人群：环境温度：

检测仪器：1.北京普朗DNM-9602型酶酶标仪 2.北京普朗DNM-9620型洗板机

3. 电热恒溫水浴箱

4. 移液器

检测地点：检测日期：检测份数：

检测依据：《全国艾滋病检测技术规范》(2009年修订版)

实验步骤：

1．实验准备：样品、试剂、酶标条置室温（18-25℃），平衡时间_30_分钟。按实验室SOP做好试剂准备。2．温育期间配制洗涤液：按1：19稀释，取20×洗涤液 ml，加蒸馏水 ml。（）

3. 将酶联反应板从密封袋中取出，取下孔板条，放在板架上。按顺序编号，设一个空白对照孔，两个阳性（1）对照孔，两个阳性（2）对照孔，两个阴性对照孔。（）

4．取阳性对照和阴性对照分别充分混匀后各50µl加入对照孔中，空白孔不加，其余每个孔加待检血清50µl，轻轻振荡，充分混匀。并填写加样顺序表(见下表)。（）

5．用不干胶封片封盖反应板，置37℃温育60分钟。（）

6．撕去贴膜，用洗涤液洗5次（洗板机洗，程序已编好），然后在吸水纸上拍干。（）

7．除空白孔外每孔加酶标抗原100µl，用不干胶片封盖反应板。37℃温育30分钟。（）

8. 撕去贴膜，用洗涤液洗5次（洗板机洗，程序已编好），然后在吸水纸上拍干。（）

9．每孔加显色剂A 50µl ，显色剂B 50µl，轻轻振荡后置37℃避光暗处显色30分钟。（）

10. 每孔加终止剂50µl。混匀。（）

11．选择酶标仪450nm或630 nm双波长测定，空白孔调零点，测定各孔的吸光度。并打印结果。（）

12. 加样顺序表：

A

B

C

D

E

F

G

H

13

14.判定公式：Cut off值=阴性对照平均值+0.10 当阴性对照平均值≤0.05时，按0.05计算。本次检测临界值为：____________。标本A值小于1值为阴性，大于或等于1值为阳性。

15.结果分析：呈阳性反应，需确认；其余均为阴性反应。

检验者：复核人签字：