烟草蚀纹病毒蛋白酶说明书

TEV Protease

产品概述

TEV Protease (烟草蚀纹病毒蛋白酶；Tobacco etch virus protease) 是来源于烟草蚀纹病毒(TEV) Nla的重组蛋白酶，此蛋白酶被用来切除纯化后融合蛋白的亲和标签。TEV蛋白酶具有很强的位点特异性，能够识别EXXYXQ(G/S)的七氨基酸序列(Glu-Asn-Leu- Tyr-Phe- Gln-Gly)，最普通的是ENLYFQG，其切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸或丝氨酸之间。该酶在PH 5.5-8.5和4-30℃的广泛范围内皆有活性，使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而修改。该酶带有His-sumo Tag经6×His标签纯化，剪切反应完毕后可通过Ni-NTA （产品货号：PAN001）去除。本蛋白酶来源于大肠杆菌重组表达。

酶活性单位定义

在1X TEV Buffer (50 mM Tris-HCl, pH8.0, 0.5 mMEDTA, 1mM DTT) 中，30℃条件下反应 1 小时，能够切割3 µg 的反应底物达 85%以上所需的酶量定义为一个活性单位。

产品溶液组分

推荐反应体系

不同温度下的参考反应时间：

1.4℃反应 16 小时

2.20℃反应 6 小时

3.30℃反应 2 小时

活性测试

待测融合蛋白100µg，加入TEV protease 2µl，4℃反应 16 小时，取酶切前后样品SDS-PAGE检测，如右图所示 >90% 融合蛋白被切割。

储存条件

长期储存于-80℃，可保存 2 年；或小量分装后保存于-20℃，可保存6 个月，避免反复冻融。10X TEV Buffer 置于-20℃保存。

包装规格

货号规格

RPP002-100 100 U

RPP002-500 500 U

RPP002-2000 2000 U