高考生物大二轮总复习 增分策略 专题十二 必考点29基因工程和细胞工程

6.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ) (1)单克隆抗体制备的操作流程是怎样的？ (2)单克隆抗体的特点是什么？有哪些应用？
栏目索引
核心提炼 题组突破 考点整合
夯实基础 突破要点 剖析题型 提炼方法
体系重建
1.理清基因工程3种操作工具的作用与特点
核心提炼
限制酶
DNA连接酶
载体
拼接DNA片段，
切割目的基因和
杂交技术(使用DNA探针)
(2)表达检测
转录检测： 分子杂交技术检测mRNA
翻译检测：用相应的抗体进行
抗原—抗体
杂交
(3)个体生物学水平鉴定：如对转基因作物进行抗虫或 抗病等的接种实验。
6.理清植物细胞工程两大技术
全能性
再愈 伤
分化 组 织
膜的流动性和 植物细胞全能性
杂 种 细 胞
7.理清动物细胞培养的成分、过程及相关酶
(4) 用 限 制 性 核 酸 内 切 酶 切 割 烟 草 花 叶 病 毒 的 核 酸 (2010·浙×江，2A)( ) (5)每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 (2011·浙江，6B)√( ) (6)自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整 合到细菌 DNA上，属于基因工程 (2010·大纲 全国Ⅱ， 5D)( × ) (7)转抗虫基因的植物，不会导致昆虫群体抗性基因频率 增加(2010·江苏，18B)×( )
用化RN学A 方法合成，不逆需转要录模酶板。
②人工合PC成R 法：以_____为模板，在__________作用下人
工合成。
3.牢记基因表达载体的构建 (1)基因表达载体的组成：目的基因＋启动子＋终 止子＋标记基因 ＋复制原点。 (2)启动子和终止子：启动子是RNA聚合酶 结 合 的 位点，启动转录；终止子是终止转录 的位点。
(3)基因表达载体的构建过程
同一种限制酶切割 DNA连接酶
4.将目的基因导入受体细胞
生物种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞
常用方法
农杆菌转化法、 基因枪法、花粉
_显__微__注__射_
技术
管通道法等
感受态细胞 法 (Ca2＋处理法)
受体细胞 体细胞
受精卵
原核细胞
5.理清目的基因的检测与鉴定
(1)导入检测： DNA分子
(8)重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧 核糖和磷酸交替连接(2013·安徽，6C)×( ) (9)应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中 目的基因的存在及其完全表达(2011·四川，5D)(× ) (10)动物的生长激素基因转入植物后不能表达 (2010·×江苏，18C)( )
携带目的基因进
作用
形成重组DNA
载体
入受体细胞
分子
作用 两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间 部位 形成的磷酸二酯键
(1)能在宿主细胞
(1)E·coliDNA连
内稳定存在并大
作用 (1)识别特定的核 接酶只能连接
量复制；
特 苷酸序列；
黏性末端；
(2)有一个至多个
点(条 (2)在特定位点上 (2)T4DNA连接 限制酶切割位点；
件) 切割DNA分子 酶能连接黏性
(3)具有特殊的标
末端和平末端
记基因
2.掌握获取目的基因的3种途径
(1) 直 接 分 离 ： 从 自 然 界 已 有 的 物 种 中 分基离因，文如库从
________
中获取。
(2)人工合成目的基因(常用方法如下较) 小
①DN化A合学成合仪成法：已知核苷酸序列的
基因，直接利用
2.(2015·重庆，6)下列有关人胰岛素基因表达载体的叙 述，正确的是( ) A.表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转
录获得 B.表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原
(起)点 C.借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛
选出来 D.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用
(1)培养基的特有成分：动物血清
。
(2)培养过程：原代培养、传代培养。
(3)制备悬液的酶：胰蛋白酶或胶原蛋白酶 。
8.完善下面克隆动物培育流程图
细胞质 核移植 细胞核
胚胎移植
9.把握动物细胞融合的原理、方法及应用
(1)原理：细胞膜的流动性 。 (2)促融方法：灭活的病毒、物理法、化学法。 (3)应用：制备单克隆抗体。
3.(2015·全国Ⅱ，40)已知生物体内有一种蛋白质(P)，该 蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。如果将P分子 中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨 酸，改变后的蛋白质(P1)不但保留P的功能，而且具有了酶 的催化活性。回答下列问题： (1)从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对 蛋白质的氨_基__酸__序__列__(_或__结__构__)_(_其__他__答__案__合__理__也__可__)__进行改造。 解析 对蛋白质的氨基酸序列(或结构)进行改造，可达到改 变蛋白质功能的目的。
10.理清单克隆抗体制备的过程

题组一 聚焦基因工程
题组突破
1.基因工程的相关判断 (1)携带链霉素抗性基因受体菌的筛选必须通过分子检 测(2014·天津，4A)×( ) (2)转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定必须通过分子检 测(2014·天津，4C)×( ) (3)一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核 苷酸序列(2007·全国Ⅱ，4A)(√ )
专题十二 现代生物科技专题
必考点29 基因工程和细胞工程
依纲排查
1.基因工程的诞生(Ⅰ) 基因工程的理论基础是什么？ 2.基因工程的原理、技术及应用(Ⅱ) (1)基因工程的操作工具是什么？有哪些特点？ (2)基因工程操作的“四步曲”分别是什么？ (3)基因工程在农业、医学等方面有哪些应用？
3.蛋白质工程(Ⅰ) (1)蛋白质工程操作的基本原理和设计思路是什么？ (2)蛋白质工程和基因工程的关系是什么？ 4.植物组织培养(Ⅱ) (1)植物组织培养的基本原理和一般操作流程是怎样的？ (2)植物组织培养有哪些应用？ 5.动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅰ) (1)动物细胞培养的基本操作过程和条件分别是什么？ (2)体细胞克隆的操作流程及应用是什么？
解析 人肝细胞不能合成胰岛素，则人肝细胞中不含有胰 岛素的mRNA，不能通过反转录获得人胰岛素基因，A错误； 表达载体的复制启动于复制起点，胰岛素基因的表达启动 于启动子，B错误； 抗生素抗性基因是标记基因，可用于筛选含胰岛素基因的 受体细胞，C正确； 启动子在转录过程中起作用，终止密码子在翻译过程中起 作用，D错误。 答案 C