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《免疫胶体金技术》课件
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实验仪器：离心机、电泳仪、显微 镜、移液器等
实验注意事项：避免污染、控制温 度、保持湿度等
实验步骤
准备实验材料： 制备胶体金溶 制备抗体溶液： 制备抗原溶液：
包括胶体金、 液：将胶体金 将抗体与缓冲 将抗原与缓冲
抗体、抗原、 与缓冲液混合， 液混合，搅拌 液混合，搅拌
缓冲液等
搅拌均匀
提高稳定性：通过优化实验条件、选择稳定的检测试剂等方法，提高检测结果的稳定性
提高自动化程度：通过开发自动化检测设备，提高检测效率和准确性
免疫胶体金技术的实验操作
实验准备
实验材料：胶体金、抗体、抗原、 缓冲液、洗涤液、显色剂等
实验步骤：样本处理、抗体孵育、 胶体金标记、洗涤、显色等
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云计算和大数据技术：实现 检测数据的实时分析和共享
检测灵敏度提升
技术进步：通过改进胶体金颗粒的制备工艺，提高检测灵敏度
应用领域：在生物医学、食品安全、环境监测等领域具有广泛应用前景
技术融合：与其他检测技术相结合，提高检测灵敏度和准确性
发展趋势：随着科技的发展，免疫胶体金技术的检测灵敏度将不断提高，应用范围也将不 断扩大。
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免疫胶体金技术
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单击输入目录标题 免疫胶体金技术概述 免疫胶体金技术的分类 免疫胶体金技术的优缺点 免疫胶体金技术的实验操作 免疫胶体金技术的应用实例
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免疫胶体金技术概述
定义和原理
免疫胶体金技术是一种基于免疫反应的检测技术 原理：利用抗原-抗体特异性结合，通过胶体金标记抗体，实现对目标抗原 的检测 特点：灵敏度高、特异性强、操作简便、快速
《胶体金检测技术》ppt幻灯片
培训资料
12
培训资料四、B-激动剂检测卡快速筛查尿样的方法介绍以盐酸克伦特罗胶体金快速检测卡为例一 .适用范围：主要用于定性检测，测定动物尿液，如猪尿、牛尿、羊尿等样品中盐酸克伦特罗的残留。整个检测过程只需要5~10分钟左右，灵敏度为3 ng/ml(3ppb) 。 也就是说当尿液中盐酸克伦特罗的残留大于或等于3 ng/ml 时，检测卡才 能检测到。
培训资料
23
培训资料六、发展方向(Developing)1.标记技术的探索顺磁粒子标记、量子点标记
免疫反应信号转化为电子信号模式
mndad/-CenjuyateSwhatratePeristaltiepurmP
2.生物传感器
wit.(b)(o)
oistansNc sbnste
培训资料
Sample Well
培训资料
20
培训资料五、常见问题及注意事项1.使用前将检测卡和待检样本恢复至室温2.保持干燥，避免受潮，打开包装请尽快使用试纸条中的NC膜受潮后，尿样在上面无法正常泳动，无法到达吸水纸的位置；胶金垫上的金标抗体受潮后会变性，从而失去原有的生理性功能，影响抗原抗体的选择性反应。因此，试纸条必须保持干燥，从包装袋中取出后要尽快使用。3.检测时，避免阳光直射和电风扇、空调的风直吹
免疫胶体金快速检测技术
农业部饲料质量监督检验测试中心(西安)
主要内容一、免疫胶体金技术的发展历史二、 胶体金检测卡的基本原理及构造三、 免疫胶体金层析法检测原理及应用四、S-激动剂检测卡快速筛查尿样的方法介绍五、 常见问题分析与注意事项六、 免疫胶体金技术的发展的方向
培训资料
2
培训资料一 、免疫胶体金技术的发展史1. 1939年(英，植物) Kausche 和Ruska 把烟草叶病毒吸附在金颗粒上，在电子显微镜下观察呈现高电子密度的细状颗粒，开启了免疫胶体金技术的研究。2. 1971年(美，微生物) Faulk 和Taylor 首先将兔抗沙门菌抗血清与胶体金颗粒结合，用直于检测沙门菌的表面抗原。3 . 1974年(奥) Romano 等将胶体金标记在马抗人IgG 上，实现了间接免疫金染色法。同年Bauer 等报道将胶体金标记在凝集素上的应用。
12
培训资料四、B-激动剂检测卡快速筛查尿样的方法介绍以盐酸克伦特罗胶体金快速检测卡为例一 .适用范围：主要用于定性检测，测定动物尿液，如猪尿、牛尿、羊尿等样品中盐酸克伦特罗的残留。整个检测过程只需要5~10分钟左右，灵敏度为3 ng/ml(3ppb) 。 也就是说当尿液中盐酸克伦特罗的残留大于或等于3 ng/ml 时，检测卡才 能检测到。
培训资料
23
培训资料六、发展方向(Developing)1.标记技术的探索顺磁粒子标记、量子点标记
免疫反应信号转化为电子信号模式
mndad/-CenjuyateSwhatratePeristaltiepurmP
2.生物传感器
wit.(b)(o)
oistansNc sbnste
培训资料
Sample Well
培训资料
20
培训资料五、常见问题及注意事项1.使用前将检测卡和待检样本恢复至室温2.保持干燥，避免受潮，打开包装请尽快使用试纸条中的NC膜受潮后，尿样在上面无法正常泳动，无法到达吸水纸的位置；胶金垫上的金标抗体受潮后会变性，从而失去原有的生理性功能，影响抗原抗体的选择性反应。因此，试纸条必须保持干燥，从包装袋中取出后要尽快使用。3.检测时，避免阳光直射和电风扇、空调的风直吹
免疫胶体金快速检测技术
农业部饲料质量监督检验测试中心(西安)
主要内容一、免疫胶体金技术的发展历史二、 胶体金检测卡的基本原理及构造三、 免疫胶体金层析法检测原理及应用四、S-激动剂检测卡快速筛查尿样的方法介绍五、 常见问题分析与注意事项六、 免疫胶体金技术的发展的方向
培训资料
2
培训资料一 、免疫胶体金技术的发展史1. 1939年(英，植物) Kausche 和Ruska 把烟草叶病毒吸附在金颗粒上，在电子显微镜下观察呈现高电子密度的细状颗粒，开启了免疫胶体金技术的研究。2. 1971年(美，微生物) Faulk 和Taylor 首先将兔抗沙门菌抗血清与胶体金颗粒结合，用直于检测沙门菌的表面抗原。3 . 1974年(奥) Romano 等将胶体金标记在马抗人IgG 上，实现了间接免疫金染色法。同年Bauer 等报道将胶体金标记在凝集素上的应用。
《免疫胶体金技术》课件
该技术适用于现场快速检测和应急响 应，为及时诊断和治疗提供了有力支 持。
简便操作
免疫胶体金技术操作简便，不需要复 杂的仪器和设备，降低了对实验条件 和技术的要求。
VS
该技术适用于基层医疗机构、实验室 及家庭自测等多种场景，方便快捷， 易于推广应用。
稳定性好
免疫胶体金技术稳定性好，试剂有效期长，可长时间保存，保证了检测结果的稳定性和可靠性。
《免疫胶体金技术》PPT课件
目 录
• 免疫胶体金技术概述 • 免疫胶体金技术的制备 • 免疫胶体金技术的特点与优势 • 免疫胶体金技术的应用实例 • 免疫胶体金技术的挑战与前景
01
免疫胶体金技术概述
定义与原理
总结词
简述免疫胶体金技术的定义和基本原理。
详细描述
免疫胶体金技术是一种基于胶体金标记的免疫分析方法，利用胶体金作为示踪标记物，结合抗原抗体反应进行检 测和定量分析。其原理基于抗原抗体反应的特异性和胶体金的颜色变化，实现对目标物质的快速、灵敏和可视化 检测。
组装质控线
在硝酸纤维素膜上固定另一种 抗原或抗体，形成质控线。
组装试剂条
将硝酸纤维素膜、玻璃纤维纸 和吸水纸按顺序粘贴成试剂条
。
质量检测与控制
外观检查
观察试剂条是否平整、无破损、颜色均匀。
稳定性检测
在不同温度和湿度条件下存放试剂条，观察 其稳定性。
性能测试
通过与已知浓度的标准品进行对比，检测试 剂条的灵敏度和特异性。
历史与发展
总结词
概述免疫胶体金技术的发展历程和重要突破。
详细描述
免疫胶体金技术最早可追溯到20世纪70年代，随着科学家对胶体金和免疫学研究的深入，该技术逐渐 发展成熟。近年来，免疫胶体金技术不断取得突破，在临床诊断、生物安全检测、食品安全检测等领 域得到广泛应用。
简便操作
免疫胶体金技术操作简便，不需要复 杂的仪器和设备，降低了对实验条件 和技术的要求。
VS
该技术适用于基层医疗机构、实验室 及家庭自测等多种场景，方便快捷， 易于推广应用。
稳定性好
免疫胶体金技术稳定性好，试剂有效期长，可长时间保存，保证了检测结果的稳定性和可靠性。
《免疫胶体金技术》PPT课件
目 录
• 免疫胶体金技术概述 • 免疫胶体金技术的制备 • 免疫胶体金技术的特点与优势 • 免疫胶体金技术的应用实例 • 免疫胶体金技术的挑战与前景
01
免疫胶体金技术概述
定义与原理
总结词
简述免疫胶体金技术的定义和基本原理。
详细描述
免疫胶体金技术是一种基于胶体金标记的免疫分析方法，利用胶体金作为示踪标记物，结合抗原抗体反应进行检 测和定量分析。其原理基于抗原抗体反应的特异性和胶体金的颜色变化，实现对目标物质的快速、灵敏和可视化 检测。
组装质控线
在硝酸纤维素膜上固定另一种 抗原或抗体，形成质控线。
组装试剂条
将硝酸纤维素膜、玻璃纤维纸 和吸水纸按顺序粘贴成试剂条
。
质量检测与控制
外观检查
观察试剂条是否平整、无破损、颜色均匀。
稳定性检测
在不同温度和湿度条件下存放试剂条，观察 其稳定性。
性能测试
通过与已知浓度的标准品进行对比，检测试 剂条的灵敏度和特异性。
历史与发展
总结词
概述免疫胶体金技术的发展历程和重要突破。
详细描述
免疫胶体金技术最早可追溯到20世纪70年代，随着科学家对胶体金和免疫学研究的深入，该技术逐渐 发展成熟。近年来，免疫胶体金技术不断取得突破，在临床诊断、生物安全检测、食品安全检测等领 域得到广泛应用。
胶体金的制备及其应用PPT课件
胶体金用于电镜水平的研究，主要包括：①细胞悬液 或单层培养中细胞表面抗原的观察。②单层培养中细胞内 抗原的检测。③组织抗原的检测。
金标记在电镜水平的应用，主要方法包括： 包埋前染色、包埋后染色、免疫负染色、双标记 技术和原位杂交技术等。
实验证明，该法样本用量少、检测速度快、 对比明显、操作简单、敏感性和特异性高，既可 用于抗原检测，也可用于抗体检测，因此，可同 时适用于科研和诊断。
• 目前电镜水平的免疫金染色(IGS)，光镜水平的 免疫金银染色(IGSS)，以及肉眼水平的斑点免疫 金染色技术日益成为科学研究和临床诊断的有力 工具
免疫胶体金技术的基本原理
• 免疫金标记技术(Immunogold labelling techique) 主要利用了金颗粒具有高电子密度
的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑 褐色颗粒，当这些标记物在相应的配体处大量聚 集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，因而用于定 性或半定量的快速免疫检测方法中，这一反应也 可以通过银颗粒的沉积被放大，称之为免疫金银 染色。
主要内容
• 概述 • 免疫胶体金技术的基本原理 • 胶体金的特性 • 胶体金的制备方法 • 胶体金的鉴定和保存 • 免疫胶体金制备和保存 • 免疫胶体金应用
概述
• 胶体金溶液：胶体金溶液是指分散相粒子直径
在l—150 nm之间的金溶胶，属于多相不均匀体系， 颜色呈桔红色到紫红色。
• 1971年胶体金作为标记物开始用于免疫组织化 学,Faulk等应用电镜免疫胶体金染色法(IGS)观察 沙门氏菌,此后他们把胶体金与多种蛋白质结合；
下述标记步骤最为常见：
• ①用0.1mol/L K2CO3或0.1mol/L HCl调节金溶胶至所需pH( 标记ＳＰＡ时调到pH6.0)。
金标记在电镜水平的应用，主要方法包括： 包埋前染色、包埋后染色、免疫负染色、双标记 技术和原位杂交技术等。
实验证明，该法样本用量少、检测速度快、 对比明显、操作简单、敏感性和特异性高，既可 用于抗原检测，也可用于抗体检测，因此，可同 时适用于科研和诊断。
• 目前电镜水平的免疫金染色(IGS)，光镜水平的 免疫金银染色(IGSS)，以及肉眼水平的斑点免疫 金染色技术日益成为科学研究和临床诊断的有力 工具
免疫胶体金技术的基本原理
• 免疫金标记技术(Immunogold labelling techique) 主要利用了金颗粒具有高电子密度
的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑 褐色颗粒，当这些标记物在相应的配体处大量聚 集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，因而用于定 性或半定量的快速免疫检测方法中，这一反应也 可以通过银颗粒的沉积被放大，称之为免疫金银 染色。
主要内容
• 概述 • 免疫胶体金技术的基本原理 • 胶体金的特性 • 胶体金的制备方法 • 胶体金的鉴定和保存 • 免疫胶体金制备和保存 • 免疫胶体金应用
概述
• 胶体金溶液：胶体金溶液是指分散相粒子直径
在l—150 nm之间的金溶胶，属于多相不均匀体系， 颜色呈桔红色到紫红色。
• 1971年胶体金作为标记物开始用于免疫组织化 学,Faulk等应用电镜免疫胶体金染色法(IGS)观察 沙门氏菌,此后他们把胶体金与多种蛋白质结合；
下述标记步骤最为常见：
• ①用0.1mol/L K2CO3或0.1mol/L HCl调节金溶胶至所需pH( 标记ＳＰＡ时调到pH6.0)。
胶体金技术的应用及展望PPT课件
This paper mainly introduces the design of an intelligent temperature control system which realizes the function of temperature measurement and control by using single bus digital temperature sensor DS18B20 and single chip microcomputer. The core components of the system are AT89C51 m sensor.
肌梗死）. The determination assays for human myoglobin（肌红蛋白）,
cardiac troponin complex（肌钙蛋白复合物） and the MB isoform of the
enzyme creatine kinase are presented. Cyclic voltammetry measurements
机理
根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗 粒大小、形状及颜色反应，加上结合物的免疫和 生物学特性，因而使胶体金广泛地应用于免疫学 、组织学、病理学和细胞生物学等领域。
This paper mainly introduces the design of an intelligent temperature control system which realizes the function of temperature measurement and control by using single bus digital temperature sensor DS18B20 and single chip microcomputer. The core components of the system are AT89C51 m sensor.
胶体金培训44页PPT
3.胶体金检测卡的组成
3.1结构：主要由样品垫、金垫、硝酸纤维素膜（NC 膜），吸水垫4个部分组成，从下至上依次首尾互相衔 接，粘贴在PVC底板上。
3.胶体金检测卡的组成
3.2作用： ⑴样品垫：检测样本滴加位置，对检测样本具有一定的
过滤和缓冲作用，降低样本中离子强度或者酸碱度对 检测结果的干扰。
pH调至8.0 标记抗体
BSA或PEG
封闭
12000转/分
离心
复溶
封闭多余的游离胶体金， 稳定胶体金标记物 将胶体金标记物沉淀
将胶体金标记物重新溶解
3.胶体金检测卡的组成
（3）金垫制备 将标记好的金标复合物喷涂在玻璃纤维素膜上，在 干燥间或烘箱中37℃将其烘干。 （4）样品垫制备 将样品垫处理液浸涂在玻璃纤维素膜上，在干燥间 或烘箱中37℃将其烘干。
T:Clen-BSA Y2:羊抗鼠抗体
预先在硝酸纤维素膜上的检测线（T）和质控线（C） 分别包被上盐酸克伦特罗抗原（Clen-BSA）和羊抗 鼠二抗，将胶体金标记克伦特罗免疫鼠抗体并固着在 玻璃纤维上制成金垫，组装成试纸条。将检测的尿样 滴加在样品垫上，当尿样中盐酸克伦罗达到一定的浓 度时，即于固着在载体上的胶体金标记抗体结合，从 而阻止其与固着在检测线（T）的抗原结合，无法在 检测区形成紫红色条带。若尿样中不含盐酸克伦特罗 （Clen)或其代谢物时，胶体金标记抗体与检测区的 抗原结合，在检测线（T）形成紫红色条带。样品和 金标记复合物继续往上移动，在质控线（C）上与包 被的羊抗鼠二抗结合，在质控线（C）上形成一条紫 红色条带，证明本检测卡有效。无论尿样中是否含有 盐酸克伦特罗（Clen)在质控线（C）均应出现一条 紫红色条带。
⑵金垫：将胶体金标记抗体通过干燥固定在玻璃纤维素 膜上，是追踪抗体与抗原的反应。
胶体金组研发思路(ppt)
胶体金制备方法简介
化学还原法
01
通过还原剂将金离子还原成金原子，形成胶体金颗粒。常用的
还原剂包括柠檬酸三钠、硼氢化钠等。
光化学法
02
利用光照激发金离子产生自由基，进而形成胶体金颗粒。该方
法制备的胶体金颗粒尺寸均匀，但设备成本较高。
微波辅助法
03
利用微波加热快速制备胶体金，具有反应速度快、颗粒均匀等
胶体金分类
根据金纳米颗粒的大小和形状，胶体 金可分为球形、棒状、星形等不同类 型。
胶体金物理化学性质
光学性质
胶体金具有独特的表面等离子体 共振吸收带，呈现出鲜艳的颜色，
且颜色随颗粒大小变化而变化。
电学性质
胶体金具有良好的导电性和电化学 稳定性，可用于制备电子器件和传 感器。
催化性质
胶体金具有较高的催化活性，可用 于催化氧化、还原和偶联等反应。
建立完善的反馈机制
及时收集研发过程中的问题和建议，对研发流程进行持续优化和改进。
鼓励创新思维和技术更新
鼓励团队成员提出新的想法和技术方案，不断推动胶体金组研发水平的提升。
05 数据分析与成果展示
实验数据收集整理方法
原始数据记录
确保实验数据的准确性和 可追溯性，详细记录实验 条件、操作步骤和原始数 据。
研发经验
在相关领域有一定的研发经验 ，了解行业发展趋势和前沿技 术。
创新能力
具备较强的创新意识和解决问题 的能力，能够针对研发过程中遇 到的问题提出有效的解决方案。
团队协作能力
具备良好的团队协作精神和沟 通能力，能够与团队成员共同 协作，推进研发项目的进展。
团队内部职责划分
项目负责人
负责整个研发项目的规划、实施和监 控，确保项目按照计划推进并达成预 期目标。
胶体金介绍ppt课件-PPT课件
3、PVC板 PVC板是用来承载膜、金子、 辅料等成分的底板，它是试纸 条的骨架。 PVC板的标准：板上的粘性 要适中；板的长度要合乎规格； 板的硬度也要达到一定的标准。
评价一个试剂的标准
评价一个试剂好坏的标准有： 1、灵敏度 2、特异性 3、背景 4、吸样和上样 5、和对照试剂比较 6、市场反馈 7、检验机构的评价
结果判读
怀孕
与常规诊断方法相比
优点 快速：全部检测过程仅需 3-10分钟。 简便：不需其它任何仪器设备，操作也极其简单，无需专 业人员，携带方便，可随时随地进行。 廉价：单个测试条成本极低 可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，可立 刻拿到结果，不必等待。 稳定性好：金标试剂稳定，可长期保存。 检测标本种类多：既可用于查血，又可用于检尿或唾液， 因而适合各种检查 缺点 定量问题 灵敏度问题
试纸条组成结构
胶体金垫 样品垫 控制线（C线） 吸水滤纸
PVC底板
层析方向 测试线 （T线）
NC膜（硝酸纤维素膜）
胶体金层析法一般原理介绍
（双抗体夹心）
（以HCG检测为例）
视频
早早孕产品形式
图片
形式
试纸条
卡型
笔型
电子验孕笔
价格
最经济
3-5元
5-10元
>$5.0
（国外价格）
使用方法
1.试纸：将试纸条标： “MAX”一端浸入尿液，尿液液面请勿 超过标志线，待尿液爬至观察区后取出试纸条平放。3-5分钟 观察结果，10分钟后无效。 2.用吸管吸取尿液，加入4滴到检测卡的加样孔中，3-5分钟观察 结果，10分钟后无效。 3.将尿液滴加到试纸上或直接淋在检测笔的吸尿棒上，尿液爬上 后平放，10分钟观察。
胶体金组研发思路(ppt)
确定研发周期和预算
根据市场需求和产品定位，确定胶体 金组研发的应用领域，如医学诊断、 环境监测、食品安全等领域。
根据研发目标和性能指标，制定合理 的研发计划，明确各阶段的任务和时 间节点，确保研发进度和质量。
设定性能指标
根据应用领域和市场需求，设定胶体 金组的性能指标，如灵敏度、特异性、 稳定性等，确保产品能够满足实际需 求。
广泛应用
随着人们对胶体金组认识的加深和需求的增加，未来胶体金组有望在 医疗、环保、食品等领域得到广泛应用。
06
结论
胶体金组研发的重要性和意义
胶体金组技术是现代生物技术领 域的重要分支，其研发对于推动 生命科学、医学、农业等领域的
发展具有重要意义。
胶体金组技术能够实现快速、准 确、灵敏的检测，对于疾病诊断、 食品安全、环境监测等领域具有
广泛的应用前景。
胶体金组技术的研发有助于提升 国家科技实力和创新能力，为经 济发展和社会进步提供强有力的
支撑。
对未来胶体金组研发的建议与期望
加强基础研究
加大对胶体金组技术的基础研 究力度，探索新的应用领域和 场景，提高技术的稳定性和可
靠性。
促进产学研合作
加强企业、高校和研究机构的 合作，推动科技成果的转化和 应用，形成产业集聚和竞争优 势。
胶体金技术的基本原理基于抗原抗体 反应，通过将抗原或抗体固定在层析 材料上，当待测样本中含有相应的抗 体或抗原时，会与固定在层析材料上 的抗原或抗体发生结合，形成复合物 ，该复合物会随着层析材料移动并富 集在预设的位置，通过肉眼观察或仪 器检测即可判断待测样本是否含有目 标物质。
胶体金技术的特点与优势
关键技术
胶体金标记技术、特异性结合、信号放大技术
免疫胶体金技术(转)PPT课件
前景展望
1 2 3
不断改进技术
随着科学技术的不断发展，免疫胶体金技术将不 断改进和完善，提高检测的灵敏度和特异性。
拓展应用领域
免疫胶体金技术的应用领域将不断拓展，不仅限 于医学诊断，还可应用于食品安全、环境监测等 领域。
实现自动化和智能化
未来免疫胶体金技术将与自动化、智能化技术相 结合，提高检测的效率和准确性，为临床诊断和 科学研究提供更好的服务。
用。
04
免疫胶体金技术具有操作简便、特异性高、稳定性好 等优点，但也存在一些限制，如检测灵敏度相对较低， 对某些低浓度目标物质检测效果不佳。
对未来研究的建议
01
深入研究免疫胶体金技 术的反应机制和影响因 素，为优化技术提供理 论支持。
02
探索新型的标记物和信 号放大策略，提高检测 灵敏度和特异性。
成熟发展
90年代至今，免疫胶体金 技术不断优化，应用范围 逐渐扩大。
02
免疫胶体金技术的制备方法
胶体金的制备
制备原理
利用氯金酸的水溶液在碱性条件下加热产生聚合物颗粒，通过控制反应条件如 温度、pH值和反应时间，可控制胶体金的粒径大小。
制备步骤
将氯金酸水溶液加热至沸腾，加入氢氧化钠调节pH值至碱性，继续加热至溶液 变为橙红色，冷却后即可获得胶体金溶液。
免疫抗原的制备
抗原选择
选择具有特异性识别能力的抗原，如抗体、多肽等，确保与 目标分子有高亲和性。
抗原制备
将抗原与载体蛋白结合，形成抗原-载体蛋白复合
结合原理
利用抗原-抗体之间的特异性结合反应，将免疫抗原与胶体金结合，形成胶体金 标记的免疫复合物。
结合方法
免疫胶体金技术(转)ppt课 件
• 免疫胶体金技术概述 • 免疫胶体金技术的制备方法 • 免疫胶体金技术的应用实例 • 免疫胶体金技术的优缺点及前景展望 • 结论
胶体金技术简介 ppt课件
稳定性好：金标试剂稳定，可长期室温保存
检测标本种类多：既可用于测血清/血浆/全血，又可用于测 尿或唾液,或处理后的组织等固体样品
6
免疫层析法应用领域
类别 人类医学
农牧业 环境 食品安全
应用领域
检测的物质
各级医院,血站,CDC,防 疫站,诊断中心；家庭
自检；商检系统；边检 口岸；公安系统.
女性妊娠（hCG,LH等)
传染病（乙肝五项、艾滋,、梅毒、流感等） 肿瘤标志物（AFP、、粪便血红蛋白等）
心梗系列(肌钙蛋白、肌红蛋白、肌酸激酶）
毒品（吗啡,K粉,摇头丸,冰毒等）
畜牧兽医站, 商检系统, 传染病（禽流感、兽瘟疫等）
边检口岸,农牧类院系
和研究所
病毒（烟草花叶病毒、犬细小病毒等）
环保监测部门,研究机 有害物质超标 构
喷点法与浸泡法的比较 (AJQ3000喷头)
1.释放快慢 2.液体量不同，干燥快慢，边缘
效应 3.生产方便性
20
样品垫
材料选择
各成分的作用 1.缓冲溶液的作用 (PH) 2.盐的作用 3.大分子蛋白BSA\PVP 4.表面活性剂 Tween-20,TritonX-100
21
吸水纸
吸水效率 进口与国产纸的差异
一步法
固相系统,常温保存
开发周期长,使用方便
20-40nm 胶体金 大孔径膜 侧向流动
免疫渗滤法
多步法
液体/固相系统 液体需要冷冻保存 开发周期短,使用不方便
10-15nm 胶体金 小孔径膜 竖向流动
4
免疫层析法技术优势:简单/现场/快速
1.打开包装取出试纸条 2.直接插入待测样品中 3. 目测读出结果（3-10分钟内）
免疫胶体金PPT课件
免疫胶体金技术的应用领域
医学诊断
食品安全
用于检测各种疾病相关 的抗原、抗体，如HIV、
肝炎、癌症等。
用于检测食品中的有害 物质和添加剂，保障食
品安全。
环境监测
用于检测水体、土壤等 环境中的有害物质，保
护环境健康。
生物科学研究
用于研究生物分子相互 作用、细胞信号转导等
生物学过程。
02
免疫胶体金技术的原理
结果判断主观
02
该技术结果判断需要人工进行，不同操作者判断标准可能存在
差异，导致结果不一致。
适用范围有限
03
免疫胶体金技术主要适用于定性检测，对于定量检测和结构分
析等方面存在局限性。
改进方向
提高特异性
通过改进抗体和抗原的纯化技术、优化标记物和检测条件等手段， 提高免疫胶体金技术的特异性。
实现自动化
特点
高灵敏度、高特异性、操作简便 、结果直观等。
免疫胶体金技术的发展历程
01
02
03
起源
20世纪70年代，英国科学 家利用胶体金标记技术制 备出了第一个单克隆抗体。
发展
随着技术的不断完善，免 疫胶体金技术在医学、生 物学等领域得到了广泛应 用。
最新进展
近年来，纳米胶体金标记 技术的研究取得了重要突 破，提高了检测的灵敏度 和特异性。
抗体与抗原的结合
将抗体与抗原混合，使其在一定 条件下结合。
洗涤
去除未结合的抗原和抗体，提高 实验的特异性。
胶体金的标记
胶体金的制备
通过还原剂的作用将金离子还原成胶体金颗粒。
胶体金的标记
将已制备好的胶体金与已结合的抗体结合，形成 金标抗体复合物。
胶体金 ppt课件
(三) 技术要点
• 1.试剂盒组成 ①滴金反应板 (图20-1)胶体 金免疫渗滤试验中主要试剂成分之一， 由塑料小盒、吸水垫料和点加了抗原或 抗体的醋酸纤维素膜片三部分组成。② 胶体金标记物 ③洗涤液 。
2.操作要点
• 2.操作要点 ①将反应板平放于实验台面上，于 小孔内滴加含待测抗原标本1-2滴，待完全渗 入；②于小孔内滴加胶体金标记抗体试剂1-2 滴，待完全渗入；
• （2）胶体金的颜色和光吸收性：对同一
种物质的水溶胶金颗粒来说，粒子大小 不同，颜色亦不同，胶体金颗粒在5～ 20nm之间，吸收波长520nm，呈葡萄酒 红色，20～40nm之间吸收波长530nm， 液体为深红色，60nm的金溶液主要吸收 波长600nm，金溶液呈兰紫色，若离心
去掉较大的金颗胶体金的制备并不难，但要制好高质量的胶体金 却也并非易事。因此对每次制好的胶体金应加以 检定，主要检查指标有颗粒大小，粒径的均一程 度及有无凝集颗粒等。在日光下仔细观察比较胶 体金的颜色，可以粗略估计制得的金颗粒的大小。 当然也可用分光光度计扫描λmax来估计金颗粒的 粒径。制备的胶体金最好作电镜观察，并选一些 代表性的作显微摄影，可以比较精确地测定胶体 金的平均粒径。 良好的胶体金应该是清亮透明的， 若制备的胶体金混浊或液体表面有漂浮物，提示 此次制备的胶体金有较多的凝集颗粒。
最常用的制备方法为柠檬酸盐还原法。
①先配制HAuC14水溶液，加热至沸。②搅动下准 确加入一定量的柠檬酸三钠 （Na3C6H5O7·2H2O）水溶液。③继续加热煮 沸一定时间。此时可观察到淡黄色的氯金酸水溶 液在柠檬酸钠加入后很快变灰色，续而转成黑色， 随后逐渐稳定成红色。全过程约2～3min。④冷 却至室温后用蒸馏水恢复至原体积。通过改变柠 檬酸三钠的用量可以制得不同大小的胶体金颗粒
胶体金技术简介 ppt课件
80年代：第一代产品，免疫渗滤法 (Flow Through)
90年代：第二代产品，免疫层析法 （Lateral Flow）,女性妊娠 HCG
21世纪：快速诊断方法适应市场需要， 胶体金技术进入快速发展期，成为IVD 的热点（传染病、毒品、食品安全、畜 牧兽医等领域）
3
两种技术的比较
免疫层析法
胶体金技术简介
BioDot中国
胶体金技术的起源
1971年,Faulk 和Taytor在做免疫金电镜 实验时引入
胶体金：是一种分散相颗粒在1～ 100nm之间的分散体系，外观透明不浑 浊，在普通显微镜下看不见；颜色为红 色,指示剂
胶体金复合物（conjugate）:与抗体连接
2
胶体金技术的发展
（以小分子吗啡检测为例）
11
免疫层析法检测原理分类介绍 （间接法，标记proteinA）
（以HIV抗体检测为例）
12
免疫层析法检测原理分类介绍 （双抗原夹心法，标记抗原）
同上，测抗体
13
技术流程
Materials Reagents Processes
Sample Pad
Conjugate Pad
25
注意事项
试剂原料耗材的批号控制，确保来源可靠有保障 设置关键控制点，确保流程无差错 仪器定期维护校准 研发时即考虑一定生产量的工艺问题，避免上量后不匹配 均一性，稳定性
26
胶体金技术在中国的发展---回顾
1995年：国内基本空白，没有研发，1-2家生产单位仅是大包装分切 1997年：杭州艾康起步，依靠美国技术转让快速发展为国内第一品牌，
22
粘性底板
原理作用 供应商的选择 对NC膜的影响
23
干燥方法
90年代：第二代产品，免疫层析法 （Lateral Flow）,女性妊娠 HCG
21世纪：快速诊断方法适应市场需要， 胶体金技术进入快速发展期，成为IVD 的热点（传染病、毒品、食品安全、畜 牧兽医等领域）
3
两种技术的比较
免疫层析法
胶体金技术简介
BioDot中国
胶体金技术的起源
1971年,Faulk 和Taytor在做免疫金电镜 实验时引入
胶体金：是一种分散相颗粒在1～ 100nm之间的分散体系，外观透明不浑 浊，在普通显微镜下看不见；颜色为红 色,指示剂
胶体金复合物（conjugate）:与抗体连接
2
胶体金技术的发展
（以小分子吗啡检测为例）
11
免疫层析法检测原理分类介绍 （间接法，标记proteinA）
（以HIV抗体检测为例）
12
免疫层析法检测原理分类介绍 （双抗原夹心法，标记抗原）
同上，测抗体
13
技术流程
Materials Reagents Processes
Sample Pad
Conjugate Pad
25
注意事项
试剂原料耗材的批号控制，确保来源可靠有保障 设置关键控制点，确保流程无差错 仪器定期维护校准 研发时即考虑一定生产量的工艺问题，避免上量后不匹配 均一性，稳定性
26
胶体金技术在中国的发展---回顾
1995年：国内基本空白，没有研发，1-2家生产单位仅是大包装分切 1997年：杭州艾康起步，依靠美国技术转让快速发展为国内第一品牌，
22
粘性底板
原理作用 供应商的选择 对NC膜的影响
23
干燥方法
胶体金免疫荧光课件
胶体金免疫荧光课件内容
技术原理讲解
胶体金免疫荧光技术原理：利用胶体金颗粒与抗体结合，形成胶体金标记抗体，用于检测抗原。
胶体金免疫荧光技术特点：灵敏度高、特异性强、操作简便、快速、无放射性污染。
胶体金免疫荧光技术应用：广泛应用于医学、生物学、环境科学等领域。
胶体金免疫荧光技术局限性：胶体金颗粒易聚集，影响检测效果；需要特殊仪器设备，成本较高。
实验操作演示
准备实验材料：胶体金、抗体、荧光染料等
01
实验步骤：样品处理、抗体孵育、胶体金标记、荧光检测等
02
注意事项：操作规范、避免污染、控制温度等
03
结果分析：荧光信号强弱、颜色变化等
04
实验结果：阳性、阴性、弱阳性等
05
实验结论：实验结果与预期相符，实验成功。
06
案例分析与讨论
01
案例背景：某医院使用胶体金免疫荧光法进行检测
02
检测方法：胶体金免疫荧光法原理、操作步骤、注意事项
03
结果分析：检测结果解读、阳性、阴性、临界值判断
04
讨论：胶体金免疫荧光法优缺点、与其他检测方法的比较、临床应用建议
胶体金免疫荧光技术的发展趋势
新技术应用
胶体金免疫荧光技术在生物医学领域的应用
01
胶体金免疫荧光技术在环境监测中的应用
03
胶体金免疫荧光技术在食品安全检测中的应用
02
快速简便：胶体金免疫荧光技术操作简便，检测速度快，适合现场检测。
稳定性好：胶体金免疫荧光技术稳定性好，不易受环境因素的影响，检测结果可靠。
04
应用领域
医学诊断：用于检测病原体、肿瘤标志物等
生物技术：用于基因检测、蛋白质分析等
技术原理讲解
胶体金免疫荧光技术原理：利用胶体金颗粒与抗体结合，形成胶体金标记抗体，用于检测抗原。
胶体金免疫荧光技术特点：灵敏度高、特异性强、操作简便、快速、无放射性污染。
胶体金免疫荧光技术应用：广泛应用于医学、生物学、环境科学等领域。
胶体金免疫荧光技术局限性：胶体金颗粒易聚集，影响检测效果；需要特殊仪器设备，成本较高。
实验操作演示
准备实验材料：胶体金、抗体、荧光染料等
01
实验步骤：样品处理、抗体孵育、胶体金标记、荧光检测等
02
注意事项：操作规范、避免污染、控制温度等
03
结果分析：荧光信号强弱、颜色变化等
04
实验结果：阳性、阴性、弱阳性等
05
实验结论：实验结果与预期相符，实验成功。
06
案例分析与讨论
01
案例背景：某医院使用胶体金免疫荧光法进行检测
02
检测方法：胶体金免疫荧光法原理、操作步骤、注意事项
03
结果分析：检测结果解读、阳性、阴性、临界值判断
04
讨论：胶体金免疫荧光法优缺点、与其他检测方法的比较、临床应用建议
胶体金免疫荧光技术的发展趋势
新技术应用
胶体金免疫荧光技术在生物医学领域的应用
01
胶体金免疫荧光技术在环境监测中的应用
03
胶体金免疫荧光技术在食品安全检测中的应用
02
快速简便：胶体金免疫荧光技术操作简便，检测速度快，适合现场检测。
稳定性好：胶体金免疫荧光技术稳定性好，不易受环境因素的影响，检测结果可靠。
04
应用领域
医学诊断：用于检测病原体、肿瘤标志物等
生物技术：用于基因检测、蛋白质分析等
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体金标记物结合，捕获目 标蛋白，结合膜上T线材 料，从而显示出检测结果。
2、涂布材料
①涂金子的材料一般是玻纤 和无纺布
②涂布的方法一般有两种：
一是用喷膜机把金子喷在 玻纤上；二是手工涂布。
其他原材料的介绍
1、箭头胶 箭头胶是常用的一种原材料，它
的作用是将辅料垫、金子垫和膜 紧密的贴在一起，同时也起到操 作标示的作用。
胶体金介绍ppt课件
胶体金原理及其产品介绍
与常规诊断方法相比
优点 快速：全部检测过程仅需 3-10分钟。
缺点 定量问题
简便：不需其它任何仪器设备，操作也极其简单，无需专 灵敏度问题 业人员，携带方便，可随时随地进行。
廉价：单个测试条成本极低
可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，可立 刻拿到结果，不必等待。
毒品（吗啡,K粉,摇头丸,冰毒等）
畜牧兽医站, 商检系统,边 检口岸,农牧类院系和研究
所
其他（疟疾） 传染病（禽流感,兽瘟疫等）
病毒（烟草花叶病毒、犬细小病毒等）
环保监测部门,研究机构 有害物质超标
食品安全检测中心,各监管 农兽药残留（磺胺类、瘦肉精等）,大肠杆菌,黄曲霉素 部门
免疫层析法的临床应用
2、吸水纸
①吸水纸是产生装配在试纸条的上端， 它的作用有：产生吸力，引导层析过 程的进行；可用作手柄。
②吸水纸的标准：吸水性能强；厚薄适 中；吸水后不会过度膨胀；易贴彩胶， 吸水后彩胶也不易脱落；
3、PVC板
PVC板是用来承载膜、金子、 辅料等成分的底板，它是试纸 条的骨架。
PVC板的标准：板上的粘性 要适中；板的长度要合乎规格； 板的硬度也要达到一定的标准。
评价一个试剂的标准
评价一个试剂好坏的标准有： 1、灵敏度 2、特异性 3、背景 4、吸样和上样 5、和对照试剂比较 6、市场反馈 7、检验机构的评价
评价指标
▪ 灵敏度：试剂具有检测出最低量被检物的能力。 灵敏度是诊断试剂的首要质量指标。
▪ 特异性：试剂正确检定不存在的被检物质的能力（即 无假阳性）。
▪ 临床应用范围
检测的物质
检测感染性疾病抗原 HBsAg、HbeAg、疟原虫抗原、大
肠埃希菌抗原等
检测抗体
TB-Ab、Hp-Ab、HBsAb、HIV-Ab、
抗登革热抗体等
检测蛋白质AFP、癌胚抗源自、肌红蛋白、肌钙蛋白、尿微量白蛋白、粪便血红
蛋白等
检测激素
hCG，LH 、FSH（促卵泡生成素）
TSH（促甲状腺激素） 检测药物
▪ 精密度：重复测定值之间的符合程度，批内CV（变 异系数）值应小于15%。
▪ 稳定性：试剂在规定条件下能储存的时间。
发展方向
形式创新
显示窗口的设计、显示结果显示设计 吸水棒吸水后会改变颜色
技术创新
结束语
谢谢大家聆听！！！
26
▪ 2、包被材料 将抗原或抗体通过喷膜机喷到 硝酸纤维膜上的过程叫包被过程。
3、喷膜机 喷膜机是将包被液包被到膜上
面的机器。 影响产品质量和实验效果的参
数有： ①喷膜速度 ②喷膜参数 ③灌注量 ④线条间隔和位置
金子垫的介绍
1、标记材料 将胶体金和标记材料结
合起来的过程叫标记。 标记材料的作用是和胶
稳定性好：金标试剂稳定，可长期保存。
检测标本种类多：既可用于查血，又可用于检尿或唾液， 因而适合各种检查
技术应用
类别 人类医学
农牧业 环境 食品安全
应用领域
检测的物质
各级医院,血站,CDC,防疫 站,诊断中心；家庭自检；
商检系统；边检口岸；公 安系统.
传染病（乙肝五项,HCV,HIV, SARS等） 标志物（AFP、肌钙蛋白、粪便血红蛋白等） 女性妊娠（hCG(早孕),LH,FSH)
毒品类，
如吗啡、可卡因、鸦片、大麻、
安非他命及摇头丸等
Technology 技术
项目开发技术路线图
抗体的制备 抗体膜的制备
胶体金标记 技术的研究
胶体金的制备 胶体金标记物的制备
固相膜筛选
装配 胶体金标记物吸附在玻纤上
试纸板的生产 切割
固相技术 的选择优化
组装、包装
膜的介绍
▪ 1、硝酸纤维素膜 在检测线和对照线条带区域固 定抗体
2、涂布材料
①涂金子的材料一般是玻纤 和无纺布
②涂布的方法一般有两种：
一是用喷膜机把金子喷在 玻纤上；二是手工涂布。
其他原材料的介绍
1、箭头胶 箭头胶是常用的一种原材料，它
的作用是将辅料垫、金子垫和膜 紧密的贴在一起，同时也起到操 作标示的作用。
胶体金介绍ppt课件
胶体金原理及其产品介绍
与常规诊断方法相比
优点 快速：全部检测过程仅需 3-10分钟。
缺点 定量问题
简便：不需其它任何仪器设备，操作也极其简单，无需专 灵敏度问题 业人员，携带方便，可随时随地进行。
廉价：单个测试条成本极低
可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，可立 刻拿到结果，不必等待。
毒品（吗啡,K粉,摇头丸,冰毒等）
畜牧兽医站, 商检系统,边 检口岸,农牧类院系和研究
所
其他（疟疾） 传染病（禽流感,兽瘟疫等）
病毒（烟草花叶病毒、犬细小病毒等）
环保监测部门,研究机构 有害物质超标
食品安全检测中心,各监管 农兽药残留（磺胺类、瘦肉精等）,大肠杆菌,黄曲霉素 部门
免疫层析法的临床应用
2、吸水纸
①吸水纸是产生装配在试纸条的上端， 它的作用有：产生吸力，引导层析过 程的进行；可用作手柄。
②吸水纸的标准：吸水性能强；厚薄适 中；吸水后不会过度膨胀；易贴彩胶， 吸水后彩胶也不易脱落；
3、PVC板
PVC板是用来承载膜、金子、 辅料等成分的底板，它是试纸 条的骨架。
PVC板的标准：板上的粘性 要适中；板的长度要合乎规格； 板的硬度也要达到一定的标准。
评价一个试剂的标准
评价一个试剂好坏的标准有： 1、灵敏度 2、特异性 3、背景 4、吸样和上样 5、和对照试剂比较 6、市场反馈 7、检验机构的评价
评价指标
▪ 灵敏度：试剂具有检测出最低量被检物的能力。 灵敏度是诊断试剂的首要质量指标。
▪ 特异性：试剂正确检定不存在的被检物质的能力（即 无假阳性）。
▪ 临床应用范围
检测的物质
检测感染性疾病抗原 HBsAg、HbeAg、疟原虫抗原、大
肠埃希菌抗原等
检测抗体
TB-Ab、Hp-Ab、HBsAb、HIV-Ab、
抗登革热抗体等
检测蛋白质AFP、癌胚抗源自、肌红蛋白、肌钙蛋白、尿微量白蛋白、粪便血红
蛋白等
检测激素
hCG，LH 、FSH（促卵泡生成素）
TSH（促甲状腺激素） 检测药物
▪ 精密度：重复测定值之间的符合程度，批内CV（变 异系数）值应小于15%。
▪ 稳定性：试剂在规定条件下能储存的时间。
发展方向
形式创新
显示窗口的设计、显示结果显示设计 吸水棒吸水后会改变颜色
技术创新
结束语
谢谢大家聆听！！！
26
▪ 2、包被材料 将抗原或抗体通过喷膜机喷到 硝酸纤维膜上的过程叫包被过程。
3、喷膜机 喷膜机是将包被液包被到膜上
面的机器。 影响产品质量和实验效果的参
数有： ①喷膜速度 ②喷膜参数 ③灌注量 ④线条间隔和位置
金子垫的介绍
1、标记材料 将胶体金和标记材料结
合起来的过程叫标记。 标记材料的作用是和胶
稳定性好：金标试剂稳定，可长期保存。
检测标本种类多：既可用于查血，又可用于检尿或唾液， 因而适合各种检查
技术应用
类别 人类医学
农牧业 环境 食品安全
应用领域
检测的物质
各级医院,血站,CDC,防疫 站,诊断中心；家庭自检；
商检系统；边检口岸；公 安系统.
传染病（乙肝五项,HCV,HIV, SARS等） 标志物（AFP、肌钙蛋白、粪便血红蛋白等） 女性妊娠（hCG(早孕),LH,FSH)
毒品类，
如吗啡、可卡因、鸦片、大麻、
安非他命及摇头丸等
Technology 技术
项目开发技术路线图
抗体的制备 抗体膜的制备
胶体金标记 技术的研究
胶体金的制备 胶体金标记物的制备
固相膜筛选
装配 胶体金标记物吸附在玻纤上
试纸板的生产 切割
固相技术 的选择优化
组装、包装
膜的介绍
▪ 1、硝酸纤维素膜 在检测线和对照线条带区域固 定抗体