交叉配血实验笔记
实验一 血型鉴定与交叉配血-修改后
下周二（9月27日）第1-2节课进行本实验内容！！！实验一ABO血型鉴定【目的】掌握ABO血型签定的原理和方法。
【原理】血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。
在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。
A抗原加抗A抗体或B 抗原加抗B抗体，则产生凝集现象。
血型鉴定是将受试者的红细胞加入抗A抗体与抗B抗体中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原。
在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型。
【实验对象】人【实验器材和药品】采血针，玻片，牙签，抗A、B标准血清，生理盐水，75%酒精，棉球，碘酒，消毒注射器，小试管，记号笔。
【实验步骤与观察项目】玻片法(1) 取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用蜡笔标明A及B，并分别各滴入抗A、B抗体一滴。
(2) 细胞悬液制备从指尖或耳垂取血一滴（1滴约50ul），加入含1ml生理盐水的小试管内，混匀，即得约5％红细胞悬液。
采血时应注意先用75％酒精消毒指尖或耳垂。
（挤压→消毒→干棉球→穿刺→取血→制备悬液→消毒）(3) 用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血清相接触（抗体：悬液=1:1）,竹签两头分别混合，搅匀。
(4) 10~30min后观察结果如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。
先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。
(5) 判断血型根据被试者红细胞是否被抗A，B标准血清所凝集，判断其血型2、试管法首先，用与玻片法相同的方法采血，滴1~2滴血于盛有1 ml生理盐水的小试管中混匀，制成红细胞悬液(体积分数约5%)。
然后取小试管2支，分别标上A、B字样，各加入标准血清与受试者的红细胞悬液l~2滴，混匀后离心1min(1000r/min)，取出试管后轻弹管底，使沉淀物被弹起，在良好的光线下观察结果，轻弹管底时，若沉淀物成团漂起，表示发生凝集现象；若沉淀物的边缘呈烟雾状逐渐上升，最后试管内液体恢复红细胞悬液状态，则表示无凝集现象。
食品生物技术《实验二 血型鉴定及交叉配血试验》
实验二血型鉴定及交叉配血试验一、目的及要求二、1、了解血型鉴定的原理，掌握其鉴定方法；三、2、了解交叉配血的意义。
二、根本原理Landsteiner根据人类天然存在于红血细胞上凝集原与血清中凝集素的不同，将人类血型分为四个不同的类型，即A、B、AB 和O型，称作ABO血型系统。
A型血的人，其红血细胞上有抗原A，血清中有抗B抗体β〔β凝集索〕；B型血的人有抗原B 和抗A抗体α〔α凝集素〕；AB型血的人有抗原A和B，没有抗体；O型血的人没有抗原，而有抗体α和β。
据此，如分别将抗A和抗B血清与待测红细胞混合，那么抗A或／和抗B血清与红细胞外表上的相应抗原结合而引起红细胞的凝集，根据凝集反响的情况，便可知待检者的血型〔表2〕。
表2 用抗血清鉴定血型的结果与判定＋表示凝集；－表示不凝集。
下同。
假设将标准A型血清和标准B型血清与待测红细胞混合，标准血清中所含的β或α凝集素就与红细胞外表上的相应抗原结合，出现红细胞的凝集现象，据此，便可知待测红细胞的血型〔图3，表3〕。
表3 用标准血清鉴定血型的结果与判定由于人血清中可含有天然的抗A或抗B的抗体，如将携带某种血型抗原物质的红细胞输注到具有相应红细胞抗体的个体中，那么因抗原和抗体结合，在体内补体的参与下，发生溶血。
因此，为了防止因亚型或技术操作不当使血型鉴定发生过失而引起的输血反响或意外事故，输血前，必须作交叉配血试验，该试验是通过供血者血清与受血者红细胞以及供血者红细胞与受血者血清相互交叉混合，观察有无凝集或溶血现象，用以鉴定供血者与受血者之间血型是否相合。
血型鉴定和交叉配血试验均有玻片法和试管法两种，下面介绍血型鉴定玻片法和交叉配血试验的试管法。
三、器材〔一〕、材料和试剂诊断用人血型抗A血清、诊断用人血型抗B血清〔常在血清中参加不同颜色的染料以示区别，如A型红色，B型蓝色〕、生理盐水、供血者血清、受血者血清、供血者的2%红细胞悬液、受血者的2%红细胞悬液。
〔二〕、器具凹玻片或载玻片、小试管、尖嘴滴管、无菌刺血针、牙签、酒精棉球、无菌干棉球、试管架、显微镜、记号笔等。
交叉配血实验笔记
实验八交叉配血试验交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合，观察有无凝集现象（见图4-3-1-1）。
输血时，一般主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集；其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。
前者叫交叉配血试验的主侧（也叫直接配血），后者叫交叉配血的次侧（也叫间接配血）。
只有主侧和次侧均无凝集，称为“配血相合”，才能进行输血；如果主侧凝集，称为“配血不合”或“配血禁忌”，绝对不能输血；如果主侧不凝集，而次侧凝集，可以认为“基本相合”，但输血要特别谨慎，不宜过快过多，密切注视有无输血反应。
【实验目的】学习交叉配血的三种常用方法。
【实验对象】人体（学生自愿者）。
【实验器材和药品】1．仪器显微镜，离心机。
2．器械采血针，消毒注射器，双凹玻片，小试管，竹签，棉球，腊笔。
3．药品标准A 血清，标准B 血清，生理盐水，75％酒精，碘酒。
【实验步骤和观察指标】图4-3-1-1 交叉配血示意图（一）红细胞悬浮液的配制按需要型别，取全血1ml，加等渗盐水2 ～3ml，充分摇匀离心沉淀，弃去上清液，然后再加生理盐水2 ～3ml 按上述方法洗涤，共三次，取压积红细胞5 滴，加新鲜等渗盐水4 ml ，即成5 ％红细胞悬液。
（二）交叉配血基本原理见图4-3-1-1 示。
盐水介质交叉配血试验实验原理天然IGM 类血型抗体与对应的红细胞抗原在室温下盐水介质中发生凝集现象。
可以检查供、受者血清中是否存在破坏对方RBC的IgM 抗体（ABO 血型中抗A 抗B 抗体以IgM 抗体为主）。
实验步骤取二试管，分别注明“主”、“次”字样，主侧滴入供血者红细胞悬液一滴和受血者血清一滴；次则滴入受血者红细胞悬液一滴和供血者血清一滴。
混匀后1000rpm 离心1min，取出观察结果。
如两侧均无凝集现象，可多量输血；如主侧无凝集而次侧有凝集只可考虑少量输血；如主侧凝集则不能输血。
低离子聚凝胺介质交叉配血试验实验原理红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，形成 Zeta 电位，Zeta 电位决定红细胞之间的排斥作用。
交叉配血实验报告心得体会
交叉配血实验报告心得体会
1. 交叉配血实验报告是血液学中非常重要的一项测试，对了解血型的配对方式和判断血型的兼容性非常有帮助。
2. 交叉配血实验报告可以直观地展示不同血型间是否存在凝集反应，为输血操作提供重要依据。
3. 实验报告中的结果直接反映了被测血样与配对血型之间的相容性，为血液安全提供了保障。
4. 交叉配血实验报告需要专业人员进行解读和分析，确保结果的准确性和可靠性。
5. 实验报告中的数据分析与结果解读需要结合患者的具体情况进行评估，以确定最佳的输血方案。
6. 通过分析交叉配血实验报告，可以及时发现可能存在的输血风险，防止输血不良反应的发生。
7. 交叉配血实验报告对于怀孕妇女的输血安全至关重要，可以为孕妇和胎儿的健康提供保障。
8. 实验报告中的结果还可以辅助判定患者的免疫状况，进一步指导治疗方案的制定。
9. 通过分析实验报告，可以及时调整输血剂量和输血速度，提高输血的效果和安全性。
10. 交叉配血实验报告的准确性和及时性对于急需输血的患者尤为重要，可以快速确定合适的供血者和匹配的血型。
11. 实验报告还包含了对交叉配血反应的观察和研究结果，可以为血液相关疾病的研究提供有力的参考。
12. 交叉配血实验报告的编写和解读要严格遵循相关的规范和流程，确保结果的科学性和临床应用的可靠性。
ABO血型鉴定和交叉配血虚拟实验笔记
ABO血型鉴定和交叉配血虚拟实验笔记实验主编：王启辉，广西医科大学试验一：ABO血型鉴定（正向定型——破片法）任务一5分请选择制备红细胞悬液需要的物品（多选）答案 A含生理盐水小试管 E75%酒精 F无菌采血针 H消毒棉签 L试管架（个器材均已一次性使用为佳，做到一人一针，一人一吸管、一人一试管，不能混用避免造成交叉污染和感染，使用过的物品均应放入污物桶，不得在采血部位采血。
）任务二：1、选择需要消毒材料（5分）采血之前请选择需要消毒的对象（多选）答案 A指端 B生理盐水小试管 C采血针 D棉球/棉签（采血时，要防止才学部位被感染，因此需对采血部位和所用器材进行消毒处理。
）1、消毒（5分）请选择消毒剂（可多选）答案只有一个B 75%酒精（生理盐水不含杀菌成分，稀释红细胞使用：75%酒精是常用的外用消毒剂：308%枸橼酸钠是抗凝剂：95%酒精能将细菌表面的蛋白质膜迅速凝固进而阻止酒精进入细菌体内。
，不能很好地杀死细菌）请选择采血端：无名指请选择消毒器材：75%酒精消毒棉签（指端、采血针务必做好消毒准备，消毒部位婴自然风干后在采血，血液很容易凝集成滴，便于采血）请进行采血部位消毒，采血针取血（无菌采血针），含有生理盐水小试管任务三：1无菌采血针菜血 7.5分生理盐水小试管2止血 2.5分点击消毒棉签任务四选择进行血型鉴定需要的材料答案 B红细胞悬液 C 抗a血清 D抗b血清 G牙签 I吸管 J记号笔 K载玻片（所用玻片、吸管等必须洁净，因为污染后可产生假凝集）任务五滴加血型鉴定抗血清（点击顺序）1、载玻片2、记号笔3、抗a血清4、抗b血清5、红细胞悬液6、吸管7、牙签选择最佳的能准确判定血型的观察结果时间B、5-10分钟任务七观察结果结果顺序：（1）A凝集、B不凝集（2）A型（3）B型（4）A B型（5）O型（6）A型任务九：血型判定：四次查看完成实验→跳转实验二交叉配血试验 01制备02交叉03观察判定01（一）制备红细胞悬液和分离血清1.实验前准备——任务一：选择制备红细胞悬液和分离血清需要的物品（多选）答案 A无菌注射器 E消毒棉签 F生理盐水 H碘酒 L记号笔（实验用具严格消毒，请勿污染：试管、滴管必须清洁干燥：红细胞悬液及血清须新鲜，避免发生溶血、）选择需要消毒材料（可多选）答案：A前臂 B抗凝血小试管 C静脉采血针 D棉球/棉签（采血时，要防止采血部位被感染，因此需对采血部位和所用器材进行消毒处理。
交叉配血实验结果与输血原则
交叉配血实验结果与输血原则
交叉配血实验：
1、定义：交叉配血实验是明确根据受者血液和输血血液抗体量及类型，以选择最佳输血血液的实验。
2、目的：主要目的是为了避免输入了含有抗原血清的血液，对受者多重血小板减少症（HDN）造成影响。
3、特点：它不同于普通的输血检测，它能够进行血小板减少症抗体和血液细胞抗体的快速确定性测定，通过检测输血血液中的抗原。
这样才能确保输入安全及有效地输血血液。
4、步骤：首先，从库中搜集血液。
接着将受者的血液和输血血液作特异性抗体定性分析，由医生根据病人的自身体质及输血血液的抗原情况决定是否该自体输血或交叉配血。
输血原则：
1、有针对性：输血须有针对性，根据病情判断需要选择合适的血液而非随意转给某个病人。
2、安全性：输血安全对于病人来说极为重要，受血者血液类型及抗原配置至关重要，一旦输错血液会很危险。
3、有序性：实施输血时，要确保有序地安排配血，避免病人之间相互干扰，而导致输入受血人员无法使用。
4、必要性：发生输血必须仔细思考，考虑是否有必要实施输血，输血之前对病情应有充分的认识。
5、比例性：输血量根据受血者具体情况而定，不能盲目增加或减少输血量，输血比例也要根据受血者实际情况进行调整。
交叉配血实验的实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解交叉配血实验的基本原理和操作方法。
2. 掌握交叉配血实验在临床输血中的应用和意义。
3. 培养实验操作技能，提高实验观察和分析能力。
二、实验原理交叉配血实验是输血前相容性检测的重要环节，目的是检查受血者和供血者血液中是否含有不相配合的抗原、抗体成分，以避免输血不良反应和输血性溶血反应的发生。
交叉配血实验包括主侧配血和次侧配血。
主侧配血：将受血者血清与供血者红细胞混合，观察有无凝集现象，以发现受血者血清中是否含有与供血者红细胞起反应的抗体。
次侧配血：将供血者血清与受血者红细胞混合，观察有无凝集现象，以发现供血者血清中是否有与受血者红细胞引起反应的抗体。
三、实验材料1. 受血者血液样本：A型Rh阳性2. 供血者血液样本：A型Rh阳性3. 抗凝剂：EDTA-K24. 配血试剂：凝聚胺试剂、生理盐水、抗A、抗B试剂5. 仪器：离心机、移液器、显微镜等四、实验步骤1. 准备工作：将受血者和供血者的血液样本分别采集，加入抗凝剂，离心分离血清和红细胞。
2. 主侧配血：a. 将受血者血清与供血者红细胞各取适量，分别加入试管中。
b. 加入凝聚胺试剂，混匀，室温下放置15分钟。
c. 观察有无凝集现象。
3. 次侧配血：a. 将供血者血清与受血者红细胞各取适量，分别加入试管中。
b. 加入凝聚胺试剂，混匀，室温下放置15分钟。
c. 观察有无凝集现象。
4. 结果判断：a. 主侧配血和次侧配血均无凝集现象，表示配血相合。
b. 主侧配血或次侧配血有凝集现象，表示配血不合。
五、实验结果受血者和供血者的血液样本经过交叉配血实验后，主侧配血和次侧配血均无凝集现象，表示配血相合。
六、实验分析本次交叉配血实验结果显示，受血者和供血者的血液样本配血相合，说明两者在ABO血型和Rh血型方面没有不相配合的抗原、抗体成分。
这为临床输血提供了重要依据，有助于保证输血安全。
七、实验结论1. 交叉配血实验是输血前相容性检测的重要环节，对于保证输血安全具有重要意义。
交叉配血实验报告单
交叉配血实验报告单一、实验目的：1.了解和掌握交叉配血的基本原理和操作方法；2.熟悉观察和分析实验结果；3.探究血型遗传规律。
二、实验原理：人体血液中存在着不同的血型，主要有A型、B型、AB型和O型。
血型的遗传是由血液中的凝集素基因决定的，凝集素基因的表现形式分别为A、B和O。
在交叉配血实验中，根据不同的血型特征和血凝素的作用原理，可以确定一个人的血型和他的血型遗传模式。
三、实验材料与仪器：1.蒸馏水；2.新鲜献血者的血液样本；3.试管架、试管；4.洗涤缓冲液；5.抗凝剂；6.A、B、O三种抗体；7.洗涤试剂；8.结果分析卡。
四、实验步骤：1.准备工作：（1）将实验器材进行清洗消毒，避免交叉污染。
（2）准备所需血液样本，保证新鲜血液的取样。
一般来说，抽血容器中应当加入抗凝剂以防止凝固。
2.血型鉴定：（1）取三个试管，分别加入A、B、O和A、B两种抗体溶液。
标记为试管A、B和C。
（2）将待测血液样本分别滴入试管A、B和C中，注意将每个试管中的血液样本和抗体充分混合，避免产生假象。
（3）观察各试管中是否出现凝集反应，根据凝集的情况判断血型。
3.交叉配血：（1）取两个试管，分别加入A、B抗体溶液和B、A抗原溶液。
标记为试管1和试管2（2）将两个试管中的溶液充分混合。
（3）观察混合试管中是否会出现凝集反应，根据凝集的情况判断血型。
五、实验结果及分析：根据观察实验结果，我们可以得到交叉配血实验结果表格如下：原始血型，试管A，试管B，试管C，试管1，试管2----，----，----，----，----，----A型，凝集+，无凝集，凝集+，凝集+，凝集+B型，无凝集，凝集+，凝集+，凝集+，凝集+AB型，凝集+，凝集+，凝集+，凝集+，凝集+O型，凝集+，凝集+，凝集+，无凝集，无凝集根据以上的实验结果，可以得到以下结论：1.不同血型的血液样本与相应的抗体溶液混合时，如果出现凝集反应，则可以确定该血型。
2.A型和B型血液样本对应的是A抗体和B抗体，因此在与相应抗原溶液混合时会出现凝集反应。
交叉配血实验笔记
实验八交叉配血试验交叉配血就是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合,观察有无凝集现象(见图4-3-1-1)。
输血时,一般主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集;其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。
前者叫交叉配血试验的主侧(也叫直接配血),后者叫交叉配血的次侧(也叫间接配血)。
只有主侧与次侧均无凝集,称为“配血相合”,才能进行输血;如果主侧凝集,称为“配血不合”或“配血禁忌”,绝对不能输血;如果主侧不凝集,而次侧凝集,可以认为“基本相合”,但输血要特别谨慎,不宜过快过多,密切注视有无输血反应。
【实验目的】学习交叉配血的三种常用方法。
【实验对象】人体(学生自愿者)。
【实验器材与药品】1.仪器显微镜,离心机。
2.器械采血针,消毒注射器,双凹玻片,小试管,竹签,棉球,腊笔。
3.药品标准A血清,标准B血清,生理盐水,75％酒精,碘酒。
【实验步骤与观察指标】图4-3-1-1 交叉配血示意图(一)红细胞悬浮液的配制按需要型别,取全血1ml,加等渗盐水2 ～3ml,充分摇匀离心沉淀,弃去上清液,然后再加生理盐水2 ～3ml按上述方法洗涤,共三次,取压积红细胞5 滴,加新鲜等渗盐水4 ml ,即成5 ％红细胞悬液。
(二)交叉配血基本原理见图4-3-1-1示。
盐水介质交叉配血试验实验原理天然IGM类血型抗体与对应的红细胞抗原在室温下盐水介质中发生凝集现象。
可以检查供、受者血清中就是否存在破坏对方RBC 的IgM抗体(ABO血型中抗A抗B抗体以IgM抗体为主)。
实验步骤取二试管,分别注明“主”、“次”字样,主侧滴入供血者红细胞悬液一滴与受血者血清一滴;次则滴入受血者红细胞悬液一滴与供血者血清一滴。
混匀后1000rpm离心1min,取出观察结果。
如两侧均无凝集现象,可多量输血;如主侧无凝集而次侧有凝集只可考虑少量输血;如主侧凝集则不能输血。
低离子聚凝胺介质交叉配血试验实验原理红细胞表面带有大量的负电荷,以避免其产生自发性聚集,当红细胞悬浮在电解质时,阳离子会被红细胞的负电荷所吸引,形成Zeta电位,Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。
宠物疾病诊疗-交叉配血(凝集)试验
操作步骤
➢ 1.取试管2支作好标记，分别由受血动物和供血动物的颈 静脉各采血5～10 ml，于室温下静置或离心析出血清备 用。
急需时可用血浆代替血清。即先在试 管内加入4％枸橼酸钠溶液0.5ml或1.0 ml， 再采血4.5ml或9.0 ml，离心取上层血浆备 用。
➢ 2.另取加抗凝剂的试管2支并标记，分别采取供血动物和 受血动物血液各1～2 ml，震摇，离心沉淀(或自然沉降)， 弃掉上层血浆；
➢ 4.注意事项 ✓ 试验时室温以15～18℃最为适宜； ✓ 温度过低(8℃以下)可出现假凝集； ✓ 温度过高( 24℃以上)也会使凝集受到影响以致不
出现凝集现象。 ✓ 观察结果的时间不要超过30 min，否则由于血清蒸
发而发生假凝集现象。
结果判定
➢1.肉眼观察载玻片上主、次侧的液体均匀红染，无细胞 凝集现象；显微镜下观察红细胞呈单个存在。表示配血 相合，可以输血。
不 凝 集
➢2.肉眼观察载玻片上主、次侧或主侧红细胞凝集呈沙粒 状团块，液体透明；显微镜下观察红细胞堆积一起，分 不清界限，表示配血不相合，不能输血。
凝 集
➢3.如果主侧不凝集而次侧凝集时，除非在紧 急情况下，最好还是不要输血。
即使输血，输血速度也不能太快，且要密切 观察动物反应，如发生输血反应，应立即停止 输血。
➢ 取其压积红细胞2滴，各加生理盐水适量，用吸管混合，离 心并弃去上清液后，再加生理盐水2 ml混悬，即成红细胞悬 液。
➢ 3.取清洁、干燥载玻片2张，于一载玻片上加受血动物血清( 或血ห้องสมุดไป่ตู้)2滴，再加供血动物红细胞悬液2滴(主侧)； 于另一载玻片上加供血动物血清(或血浆)2滴，再加受血 动物红细胞悬液2滴(次侧)。 分别用火柴梗轻轻混匀，置室温下经1 5～30 min观察 结果。
血型及交叉配血实训报告
一、实训目的通过本次实训，了解和掌握血型鉴定的基本原理和方法，熟悉交叉配血的操作步骤和注意事项，提高对输血安全性的认识。
二、实训时间2023年11月15日三、实训地点XX医学院检验科实验室四、实训人员XXX、XXX、XXX五、实训材料1. 血液样本：A型、B型、AB型、O型2. 试剂：抗A、抗B、抗D标准血清，生理盐水，玻片，竹签等3. 仪器：显微镜，离心机等六、实训内容1. 血型鉴定（1）操作步骤1）取玻片一张，用蜡笔将其分为三等份，分别标记为A、B、D。
2）分别加入抗A、抗B、抗D标准血清。
3）分别滴入待测血液样本。
4）用洁净竹签将试剂和血液充分混匀。
5）轻轻连续倾斜转动玻片25分钟，观察并记录。
（2）结果分析根据红细胞凝聚类型，可鉴别出A型、B型、AB型、O型。
2. 交叉配血（1）操作步骤1）取玻片一张，分为三等份，分别标记为主侧、次侧、对照。
2）主侧：分别滴入献血者红细胞和受血者血清。
3）次侧：分别滴入受血者红细胞和献血者血清。
4）对照：分别滴入生理盐水和抗A、抗B、抗D标准血清。
5）轻轻连续倾斜转动玻片25分钟，观察并记录。
（2）结果分析1）主侧、次侧均无红细胞凝聚，为配血相合。
2）主侧或次侧有红细胞凝聚，为配血不合。
七、实训结果1. 血型鉴定结果（1）待测样本1：A型（2）待测样本2：B型（3）待测样本3：AB型（4）待测样本4：O型2. 交叉配血结果（1）献血者A型，受血者B型：配血不合（2）献血者B型，受血者A型：配血不合（3）献血者AB型，受血者O型：配血相合（4）献血者O型，受血者AB型：配血相合八、实训总结1. 血型鉴定和交叉配血是输血安全的重要保障，必须严格按照操作规程进行。
2. 实训过程中，应注意观察红细胞凝聚情况，确保配血准确性。
3. 交叉配血实验结果对输血安全至关重要，必须严格执行。
4. 通过本次实训，加深了对血型鉴定和交叉配血的理解，提高了操作技能。
九、实训建议1. 增加实训次数，提高操作熟练度。
(五)、血型、交叉配血 解析
凝胶卡式检测法的工作原理
• 将红细胞悬液和血清加在凝胶上部反应，离心后观察 • 凝集的红细胞，被阻挡在微柱中凝胶的上部或中央， 证明发生凝集反应，判断凝集反应阳性 • 游离的红细胞，挤过装有过滤介质的微柱到达底部， 证明未发生凝集，判断凝集反应阴性
试剂器材
• 1：试剂 生理盐水 • 2：器材 试管，试管架、记号笔、一次性 塑料吸管，玻片、离心机，显微镜， • 3：标本 患者、献血员静脉血
酶技术
• 利用木瓜酶或菠萝酶破坏红细胞表面唾液酸，使红细 胞失去电荷，缩小细胞间距离 • 同时改变红细胞膜表面结构，使某些隐蔽的抗原暴露， 从而增强凝集反应 • 主要用于一些不完全中产生大量正电荷中和红 细胞表面的负电荷，减少红细胞间排斥，形成可逆凝 集，加入解聚液仅可使非特异性聚集分散，而发生抗 原抗体特异性反应凝集不会散开。
操作步骤
1：患者标本准备 分离血清，标记为PS（patient serum） 配制5％患者红细胞生理盐水悬液，标记 为PC（patient cell） ２：献血员标本准备
– – 分离血清，标记为DS（donor serum） 配制5％献血员红细胞生理盐水悬液，标记 为DC（donor cell）
交叉配血
• 反定型
用已知标准A，B，O型红细胞分别与 被检血清反应，若出现凝集，证明被检血 清中存在与该红细胞抗原相对应的抗体。 根据血清中存在的血型抗体和Landsteiner 定律判断和鉴定被检者血型。
试剂器材
• 试剂
– 标准抗A、抗B血型定型试剂 – 5%（体积比）A，B，Ｏ型标准红细胞生理盐 水悬液。 – 生理盐水
• 1. 取两支试管，分别标明主，次，即主侧 配血管和次侧配血管。 • 2.在主侧配血管中加PS 1滴，ＤＣ１滴， • 3.在次侧配血管中加DS 1滴，ＰＣ１滴， • 4.混匀，1000r/min离心1min。 • 5.观察结果 先观察试管上层液有无溶血， 再斜持试管轻轻摇动，观察管底反应物有 无凝集，重悬液在低倍镜下观察有无红细 胞凝集。
交叉配血的实训报告
一、实训目的通过本次交叉配血实训，掌握交叉配血的基本原理和操作步骤，提高对血型鉴定和血型不合反应的认识，确保临床输血安全，为患者提供高质量的医疗服务。
二、实训环境实验室：干净、整洁、通风良好，配备有显微镜、离心机、血型鉴定试剂、交叉配血试管等设备。
三、实训原理交叉配血试验是一种检测受血者与供血者之间是否存在血型不合反应的方法。
主要包括两个步骤：主侧配血和次侧配血。
主侧配血是将受血者血清与供血者红细胞混合，观察是否发生凝集反应；次侧配血是将供血者血清与受血者红细胞混合，观察是否发生凝集反应。
若主侧和次侧均无凝集反应，则表示血型相合，可以输血；若主侧无凝集反应，次侧有凝集反应，则表示血型不合，输血可能导致溶血反应；若主侧和次侧均有凝集反应，则表示血型完全不合，禁止输血。
四、实训过程1. 准备工作（1）取受血者和供血者的血液各2ml，分别注入两个清洁干燥的试管中。
（2）按常规方法分离血清，同时留数滴滴加于含少量生理盐水的小试管内，制成5%的红细胞生理盐水悬液。
（3）分别标明供血者与受血者的血液管、血清管、红细胞悬液管的姓名。
2. 主侧配血（1）取清洁试管2支，标明主侧和次侧。
（2）主侧：受血者血清1滴加供血者红细胞悬液1滴。
（3）次侧：供血者血清1滴加受血者红细胞悬液1滴。
（4）分别混匀，低速离心约2分钟，轻轻摇匀，观察结果。
3. 次侧配血（1）取玻片或瓷板1张，注明主侧和次侧。
（2）主侧：受血者血清2滴加供血者红细胞悬液1滴。
（3）次侧：供血者血清2滴加受血者红细胞悬液1滴。
（4）混匀15分钟后观察结果。
4. 结果判定（1）同型配血：主侧、次侧均无凝集反应，表示无配血禁忌，可以输血。
（2）异型配血：主侧无凝集反应，次侧有凝集反应，无溶血，可以输给少量。
（3）异型配血：主侧和次侧均有凝集反应，禁止输血。
五、实训结果本次交叉配血实训中，受血者和供血者的血型均为A型，主侧和次侧均无凝集反应，表示血型相合，可以输血。
ABO血型鉴定和交叉配血虚拟实验笔记
ABO血型鉴定和交叉配血虚拟实验笔记实验主编：王启辉，广西医科大学试验一：ABO血型鉴定（正向定型——破片法）任务一5 分请选择制备红细胞悬液需要的物品（多选）答案A 含生理盐水小试管E75%酒精F 无菌采血针H 消毒棉签L 试管架（个器材均已一次性使用为佳，做到一人一针，一人一吸管、一人一试管，不能混用避免造成交叉污染和感染，使用过的物品均应放入污物桶，不得在采血部位采血。
）任务二：1、选择需要消毒材料（5 分）采血之前请选择需要消毒的对象（多选）答案A 指端B 生理盐水小试管C 采血针D 棉球/ 棉签（采血时，要防止才学部位被感染，因此需对采血部位和所用器材进行消毒处理。
）1、消毒（5 分）请选择消毒剂（可多选）答案只有一个B 75%酒精（生理盐水不含杀菌成分，稀释红细胞使用：75%酒精是常用的外用消毒剂：308%枸橼酸钠是抗凝剂：95%酒精能将细菌表面的蛋白质膜迅速凝固进而阻止酒精进入细菌体内。
，不能很好地杀死细菌）请选择采血端：无名指请选择消毒器材：75%酒精消毒棉签（指端、采血针务必做好消毒准备，消毒部位婴自然风干后在采血，血液很容易凝集成滴，便于采血）请进行采血部位消毒，采血针取血（无菌采血针），含有生理盐水小试管任务三：1 无菌采血针菜血7.5 分生理盐水小试管2 止血2.5 分点击消毒棉签任务四选择进行血型鉴定需要的材料答案B 红细胞悬液C 抗a血清D 抗b血清G 牙签I 吸管J 记号笔K 载玻片（所用玻片、吸管等必须洁净，因为污染后可产生假凝集）任务五滴加血型鉴定抗血清（点击顺序）1、载玻片2、记号笔3、抗a血清4、抗b血清5 、红细胞悬液6、吸管7 、牙签选择最佳的能准确判定血型的观察结果时间B、5-10 分钟任务七观察结果结果顺序：（1）A凝集、B不凝集（2）A型（3）B型（4）AB型（5）O型（6）A型任务九：血型判定：四次查看完成实验→跳转实验二交叉配血试验01 制备02 交叉03 观察判定01（一）制备红细胞悬液和分离血清1. 实验前准备——任务一：选择制备红细胞悬液和分离血清需要的物品（多选）答案A 无菌注射器E 消毒棉签F 生理盐水H 碘酒L 记号笔（实验用具严格消毒，请勿污染：试管、滴管必须清洁干燥：红细胞悬液及血清须新鲜，避免发生溶血、）选择需要消毒材料（可多选）答案：A前臂B 抗凝血小试管C 静脉采血针D棉球/棉签（采血时，要防止采血部位被感染，因此需对采血部位和所用器材进行消毒处理。
交叉配血实验笔记
真验八接叉配血考查之阳早格格创做接叉配血是将受血者的白细胞与血浑分别共供血者的血浑与白细胞混同，瞅察有无凝集局面（睹图4-3-1-1）.输血时，普遍主要思量供血者的白细胞没有要被受血者的血浑所凝集；其次才思量受血者的白细胞没有被供血者的血浑所凝集.前者喊接叉配血考查的主侧（也喊间接配血），后者喊接叉配血的次侧（也喊间接配血）.惟有主侧战次侧均无凝集，称为“配血相合”，才搞举止输血；如果主侧凝集，称为“配血分歧”或者“配血禁忌”，千万于没有克没有及输血；如果主侧没有凝集，而次侧凝集，不妨认为“基本相合”，但是输血要特地审慎，没有宜过快过多，稀切注视有无输血反应.【真验手段】教习接叉配血的三种时常使用要领.【真验对于象】人体（教死志愿者）.【真验器材战药品】1．仪器隐微镜，离心机.2．器械采血针，消毒注射器，单凸玻片，小试管，竹签，棉球，腊笔.3．药品尺度A血浑，尺度B血浑，死理盐火，75％酒粗，碘酒.【真验步调战瞅察指标】图4-3-1-1 接叉配血示企图（一）白细胞悬浮液的配造按需要型别，与齐血1ml，加等渗盐火2 ～3ml，充分摇匀离心重淀，弃去上浑液，而后再加死理盐火2 ～3ml按上述要领洗涤，共三次，与压积白细胞5 滴，加新陈等渗盐火4 ml ，即成5 ％白细胞悬液.（二）接叉配血基根源基本理睹图4-3-1-1示.盐火介量接叉配血考查真验本理天然IGM类血型抗体与对于应的白细胞抗本正在室温下盐火介量中爆收凝集局面.不妨查看供、受者血浑中是可存留损害对于圆RBC的IgM抗体（ABO血型中抗A抗B抗体以IgM抗体为主）.真验步调与二试管，分别证明“主”、“次”字样，主侧滴进供血者白细胞悬液一滴战受血者血浑一滴；次则滴进受血者白细胞悬液一滴战供血者血浑一滴.混匀后1000rpm离心1min，与出瞅察截止.如二侧均无凝集局面，可多量输血；如主侧无凝集而次侧有凝集只可思量少量输血；如主侧凝集则没有克没有及输血.矮离子散凝胺介量接叉配血考查真验本理白细胞表面戴有洪量的背电荷，以预防其爆收自收性汇集，当白细胞悬浮正在电解量时，阳离子会被白细胞的背电荷所吸引，产死Zeta电位，Zeta电位决断白细胞之间的排斥效率.凝结胺技能最先利用矮离子溶液（LIM)，落矮介量的离子强度，缩小白细胞周围的阳离子云，以促进白细胞战血浑（血浆）中的抗体分离. 其后，加进凝结胺溶液，它是一种下价阳离子多散物、肝素中战剂，溶解后能爆收很多正电荷，不妨中战白细胞表面戴有的背电荷，使白细胞Zeta电位落矮，收缩白细胞之间的距离，使白细胞爆收非特同性的凝结.末尾，加进悬浮液,悬浮液具备中战凝结胺阳离子的效率，使平常的白细胞非特同性凝结集启，考查截止为阳性；但是如果白细胞被相映的抗体致敏，则会被凝结胺凝结，凝集便没有会集启，考查截止为阳性.真验步调1 与试管二收，标主次侧，主侧管加病人血浑（血浆）2滴，加供血者3%~5%白细胞悬液（洗涤或者没有洗涤均可）1滴，次侧管反之.2各加ml,混同匀称后，再各加凝结胺溶液2滴，并混同匀称.3用离心机1000转/min离心1min，而后把上浑液倒掉，没有要沥搞，让管底残留约0.1ml液体.4沉沉摇动试管，目测白细胞有无凝集，如无凝集，则必须要重搞.5末尾加进重新悬浮液2滴，沉沉摇动试管混同并共时瞅察截止.如果正在60秒内凝集集启，代表是由凝结胺引起的非特同性汇集，配血截止相合；如凝集没有集启，则为白细胞抗本抗体分离的特同性反应，配血截止没有相合.如反应可疑，可进一步倒正在玻片上用隐微镜瞅察.微柱凝胶介量接叉配血考查真验本理利用抗本抗体特同性反应的效率→通过离心技能→利用凝胶的微孔过滤效率，将爆收凝集反应的RBC阻滞于凝胶之内，而已凝集的单个RBC则脱过微孔疏通至柱底→进而区别有无凝集.真验步调睹PPT所述.截止判决肉眼间接瞅察.（三）真验注意事项1.器材、试剂、反应温度、离心、标本等注意事项共ABO 血型审定.2.血浑劣于血浆；没有必溶血标本；配血后，标本置冰箱内保存起码7天 .3.RBC要用死理盐火洗搞洁.4.溶血局面，真量是阳性截止，为配血分歧.5.ABO血型系统共型而没有容，应最先排除ABO血型审定是可有误.6.盐火介量法仅能检测IgM型RBC血型抗体，没有克没有及检测IgG型RBC抗体.凝结胺法不妨查看出IgG型的血型抗体7.临床输血举止接叉配血考查时，应当最先举止盐火介量法考查，再举止散凝胺介量法考查.8. 散凝胺介量法考查尽量瞅察截止(＜3min)9.散凝胺溶液必须保存正在深色塑料瓶中.10. 散凝胺介量法考查中逢到用含肝素的血标本，要多加散凝胺.【思索题】1.正在无尺度血浑情况下已如某人为A或者B型，是可用其血去查看已知血型？怎么样做？2.接叉配血时为何主侧没有凝集而次侧凝集时，不妨少量输血？还需注意些什么？3.白细胞凝固、凝集、汇集三者有何分歧？。
交叉配血试验参考模板范本
患
者
主
献
侧
次 侧
室温放置 1 分钟
主次侧均 加聚凝胺
血
者
聚凝胺(Polybrene)配血方法
阳 性
离
主次侧均
心 聚凝胺引起 红细胞非特
加重悬液 看结果
阴 性
异性凝集
– 菠萝酶，无花果酶，木瓜酶 抗球蛋白介质配血
– 经典方法，加LISS（低离子介质溶液）的方法 聚凝胺介质配血 凝胶方法配血
盐水介质配血方法
患
者
阳
主
性
侧 离心
次 看结果
献
侧
阴
血
性
者
抗球蛋白配血方法
患
者
37 ℃
主
侧
献
次 侧
37℃ 水浴30分钟
三洗
血
者
抗球蛋白方法配血方法
阳
加
性
抗 球 蛋
离心 看结果
交叉配血的目的
交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受 血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要 目的是为了防止输血后产生溶血性反应。
尽可能确保对人和一个病人来说，输了供血者的血 不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持 最长的存活时间。
交叉配血试验方法
盐水介质配血 酶介质配血
交叉配血试验
交叉配血试验的内容
患
• 主侧配血
者
用患者血清与供
主
者红细胞进行试验
侧
次
• 次测配血
献
侧
供血者血清与患者红细胞进行试验血来自者交叉配血的要求
主侧配血要求：
– 绝对不可以有凝集或溶
凝
血现象。
集
次测配血要求：
交叉配血试验(二)
交叉配血试验（二）一、项目名称：交叉配血试验方法：改良聚凝胺试验二、操作步骤：1.取2支试管，标明主、次侧。
2.主侧管加入患者血清（或血浆）1滴，再加入用LIM溶液配制的2%左右献血者红细胞悬液2-3滴，混匀。
3.次侧管加入献血者血清（或血浆）1滴，再加入用LIM溶液配制的2%左右患者红细胞悬液2-3滴，混匀。
4.3400RPM（1000G）离心15秒，看结果并记录。
5.若（3）结果为阴性，则加POLYBRENE试剂1滴，摇匀。
6.400PRM(1000G)离心15秒~1分钟，轻摇观察由POLYBRENE引起的红细胞菲特异性凝集，若未见红细胞凝集则需要做。
7.加入1滴重悬液轻摇看结果，由POLYBRENE引起的红细胞菲特异性凝集应在1分钟内完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会完全散开。
三、结果判断：阴性结果：红细胞迅速散开，并在1分钟内完全散开。
阳性结果：红细胞不迅速散开，弱凝集可能在30分钟内明显减弱或消失，因此以立刻看结果为准。
质控试验：可以用阳性对照试剂代替待检血清按同样步骤进行质控试验，结果应为“1+”的弱凝集。
四、病人准备、标本要求：要求抽静脉血，并保证不能溶血。
五、注意事项：1.配制LIM红细胞悬液：取抗凝或不抗凝的血样标本的浓缩红细胞可直接加LIM配制悬液，若红细胞含有较多血清或血浆，则需要用LIM洗涤细胞一次。
红细胞悬液浓度为2%，该悬液可替代盐水红细胞使用。
2.血清量应严格按照操作方法，多加血清会提高离子强度，降低致敏效果。
3.使用肝素抗凝的血浆配血需要多加一滴POLYBRENE试剂，以中和肝素。
设计实验：多人次盐水交叉配血试验
凝
集
交叉配血的目的
交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受 血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要 目的是为了防止输血后产生溶血性反应。
尽可能确保对人和一个病人来说，输了供血者的血 不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持 最长的存活时间。
交叉配血试验方法
盐水介质配血 酶介质配血
操作步骤: 取试管若干如附表排列
先纵向依次加人P、Dl、D 2、D 3 、D4 . 血清 一滴
再横向依次加人P、D1 、D 2、 D 3 、D4 2 % 红细胞悬液一滴, 按常规试管法观察结果. 主侧、 次侧、相互反应一目了然. 其中p p、D 1D1、 D 2D 2、D 3D 3 、D4D4 ; 为自身对照。
– 菠萝酶，无花果酶，木瓜酶 抗球蛋白介质配血
– 经典方法，加LISS（低离子介质溶液）的方法 聚凝胺介质配血 凝胶方法配血
盐水介质配血方法
患
者
阳
主
性
侧 离心
次 看结果
献
验安排
在短时间内输人多个献血员血液的病 人. 这样的交叉, 不仅存在着主侧和次侧
交叉, 还存在着每个献血员之间的交叉。
方阵排列
混匀，1000转/分，然后观察结果。
报告方式：
交叉配合试验（**法） 受血者***（*）型血清+***（*）型红细胞不凝集，无溶
血。 受血者***红细胞+***血清不凝集。无溶血
结果判断：
同型配血，主侧、次侧均不凝集，表示无配血禁忌， 可以输血；异型配血时，主侧无凝集，无溶血，次侧 凝集，但效价<1：64，无溶血，可以输给少量，如次 侧不凝集时，应追查原因。
交叉配血试验
交叉配血凝集实验报告
一、实验目的1. 熟悉交叉配血凝集实验的操作步骤；2. 掌握交叉配血凝集实验的原理；3. 了解交叉配血凝集实验在临床输血中的应用。
二、实验原理交叉配血凝集实验是检验受血者与供血者之间是否存在血型不兼容的抗原-抗体反应。
该实验分为主侧和次侧，主侧为受血者血清与供血者红细胞混合，次侧为供血者血清与受血者红细胞混合。
若主侧或次侧出现凝集现象，则表明受血者与供血者之间存在血型不兼容，输血时应慎重。
三、实验材料1. 受血者血清和红细胞；2. 供血者血清和红细胞；3. 显微镜、离心机、采血针、消毒注射器、双凹玻片、小试管、竹签、棉球、腊笔；4. 生理盐水、75%酒精、碘酒、标准A血清、标准B血清。
四、实验步骤1. 红细胞悬浮液的配制按需取受血者和供血者的全血1ml，加入等渗盐水2-3ml，充分摇匀，离心沉淀，弃去上清液，再加入生理盐水2-3ml，按上述方法洗涤，共三次。
取压积红细胞5滴，加入新鲜等渗盐水4ml，即成5%红细胞悬液。
2. 主侧实验将受血者血清0.5ml加入小试管中，再加入供血者红细胞悬液0.25ml，充分混合，置于37℃水浴箱中孵育30分钟。
3. 次侧实验将供血者血清0.5ml加入小试管中，再加入受血者红细胞悬液0.25ml，充分混合，置于37℃水浴箱中孵育30分钟。
4. 观察结果取出小试管，用离心机离心，观察上清液是否出现凝集现象。
五、实验结果与分析1. 主侧实验：若上清液出现凝集现象，表明受血者血清中含有针对供血者红细胞的抗体，存在血型不兼容，输血时应慎重。
2. 次侧实验：若上清液出现凝集现象，表明供血者血清中含有针对受血者红细胞的抗体，存在血型不兼容，输血时应慎重。
六、实验结论通过交叉配血凝集实验，可以判断受血者与供血者之间是否存在血型不兼容，为临床输血提供依据。
若主侧和次侧实验均未出现凝集现象，则表明受血者与供血者之间不存在血型不兼容，可以进行输血。
七、实验讨论1. 交叉配血凝集实验是输血前的重要步骤，有助于预防输血反应的发生。
交叉配血实验笔记
实验八交叉配血试验交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合，观察有无凝集现象（见图4-3-1-1）。
输血时，一般主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集；其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。
前者叫交叉配血试验的主侧（也叫直接配血），后者叫交叉配血的次侧（也叫间接配血）。
只有主侧和次侧均无凝集，称为“配血相合”，才能进行输血；如果主侧凝集，称为“配血不合”或“配血禁忌”，绝对不能输血；如果主侧不凝集，而次侧凝集，可以认为“基本相合”，但输血要特别谨慎，不宜过快过多，密切注视有无输血反应。
【实验目的】学习交叉配血的三种常用方法。
【实验对象】人体（学生自愿者）。
【实验器材和药品】1．仪器显微镜，离心机。
2．器械采血针，消毒注射器，双凹玻片，小试管，竹签，棉球，腊笔。
3．药品标准A 血清，标准B 血清，生理盐水，75％酒精，碘酒。
实验步骤和观察指标】红细胞红细胞血清血?I图4-3-1-1交叉配血示意图（一）红细胞悬浮液的配制按需要型别，取全血Iml ,加等渗盐水2〜3ml ,充分摇匀离心沉淀，弃去上清液，然后再加生理盐水2〜3ml按上述方法洗涤，共三次，取压积红细胞5滴，加新鲜等渗盐水4 ml ,即成5 %红细胞悬液。
（二）交叉配血基本原理见图4-3-1-1示。
盐水介质交叉配血试验实验原理天然IGM类血型抗体与对应的红细胞抗原在室温下盐水介质中发生凝集现象。
可以检查供、受者血清中是否存在破坏对方RBC的IgM抗体（ABo血型中抗A抗B抗体以IgM抗体为主）。
实验步骤取二试管，分别注明“主”、“次”字样，主侧滴入供血者红细胞悬液一滴和受血者血清一滴；次则滴入受血者红细胞悬液一滴和供血者血清一滴。
混匀后100OrPm离心Imin，取出观察结果。
如两侧均无凝集现象，可多量输血；如主侧无凝集而次侧有凝集只可考虑少量输血；如主侧凝集则不能输血。
低离子聚凝胺介质交叉配血试验实验原理红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，形成Zeta 电位，Zeta 电位决定红细胞之间的排斥作用。
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实验八交叉配血试验
交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合，观察有无凝集现象（见图4-3-1-1）。
输血时，一般主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集；其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。
前者叫交叉配血试验的主侧（也叫直接配血），后者叫交叉配血的次侧（也叫间接配血）。
只有主侧和次侧均无凝集，称为“配血相合”，才能进行输血；如果主侧凝集，称为“配血不合”或“配血禁忌”，绝对不能输血；如果主侧不凝集，而次侧凝集，可以认为“基本相合”，但输血要特别谨慎，不宜过快过多，密切注视有无输血反应。
【实验目的】学习交叉配血的三种常用方法。
【实验对象】人体（学生自愿者）。
【实验器材和药品】
1．仪器显微镜，离心机。
2．器械采血针，消毒注射器，双凹玻片，小试管，竹签，棉球，腊笔。
3．药品标准A血清，标准B血清，生理盐水，75％酒精，碘酒。
【实验步骤和观察指标】
图4-3-1-1 交叉配血示意图
（一）红细胞悬浮液的配制
按需要型别，取全血1ml，加等渗盐水2 ～3ml，充分摇匀离心沉淀，弃去上清液，然后再加生理盐水2 ～3ml按上述方法洗涤，共三次，取压积红细胞5 滴，加新鲜等渗盐水4 ml ，即成5 ％红细胞悬液。
（二）交叉配血基本原理见图4-3-1-1示。
盐水介质交叉配血试验
实验原理
天然IGM类血型抗体与对应的红细胞抗原在室温下盐水介质中
发生凝集现象。
可以检查供、受者血清中是否存在破坏对方RBC的IgM抗体（ABO血型中抗A抗B抗体以IgM抗体为主）。
实验步骤
取二试管，分别注明“主”、“次”字样，主侧滴入供血者红细胞悬液一滴和受血者血清一滴；次则滴入受血者红细胞悬液一滴和供血者血清一滴。
混匀后1000rpm离心1min，取出观察结果。
如两侧均无凝集现象，可多量输血；如主侧无凝集而次侧有凝集只可考虑少量输血；如主侧凝集则不能输血。
低离子聚凝胺介质交叉配血试验
实验原理
红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，形成Zeta 电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。
凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM)，降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。
其后，加入凝聚胺溶液，它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。
最后，加入悬浮液,悬浮液具有中和凝聚胺阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。
实验步骤
1 取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2滴，加供血
者3%~5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1滴，次侧管反之。
2各加LIM0.6ml,混合均匀后，再各加凝聚胺溶液2滴，并混合均匀。
3用离心机1000转/min离心1min，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。
4轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须要重做。
5最后加入重新悬浮液 2滴，轻轻摇动试管混合并同时观察结果。
如果在60秒内凝集散开，代表是由凝聚胺引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。
如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。
微柱凝胶介质交叉配血试验
实验原理
利用抗原抗体特异性反应的作用→通过离心技术→利用凝胶的微孔过滤作用，将发生凝集反应的RBC阻滞于凝胶之内，而未凝集的单个RBC则穿过微孔运动至柱底→从而区分有无凝集。
实验步骤
见PPT所述。
结果判定肉眼直接观察。
（三）实验注意事项
1.器材、试剂、反应温度、离心、标本等注意事项同ABO血型鉴定。
2.血清优于血浆；不用溶血标本；配血后，标本置冰箱内保存至少7天。
3.RBC要用生理盐水洗干净。
4.溶血现象，实质是阳性结果，为配血不合。
5.ABO血型系统同型而不容，应首先排除ABO血型鉴定是否有误。
6.盐水介质法仅能检测IgM型RBC血型抗体，不能检测IgG型RBC 抗体。
凝聚胺法可以检查出IgG型的血型抗体
7.临床输血进行交叉配血试验时，应当首先进行盐水介质法试验，
再进行聚凝胺介质法试验。
8. 聚凝胺介质法试验尽快观察结果(＜3min)
9.聚凝胺溶液必须保存在深色塑料瓶中。
10. 聚凝胺介质法试验中遇到用含肝素的血标本，要多加聚凝胺。
【思考题】
1.在无标准血清情况下已如某人为A或B型，能否用其血去检查未知血型？如何作？
2.交叉配血时为何主侧不凝集而次侧凝集时，可以少量输血？还需注意些什么？
3.红细胞凝固、凝集、聚集三者有何不同？。