交叉配血实验(精)

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交叉配血实验
----转自枫桥夜泊的博客
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一、概述
交叉配血实验用于检测贫血的受血者和供血者之 间的血清型是否相容，用以预防受血动物输血后 发生输血反应。
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1．主测配血试验是检验受血者血清中是否有抗 供血犬的红细胞抗体，如果有则不能输血。 主测配血试验：受血者血清+供血者红细胞 2．副测配血试验是检验供血者血清中是否有抗 受血犬红细胞抗体，即使有也可以忽略，因为供 血者血液进入受血者体内后很快被稀释。 副测配血试验：供血者血清+受血者红细胞
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3.制备受血犬的血清: 取受血犬的全血2毫升，称重离心。1500转/分钟 ，离心5分钟。取上清液置于另一试管中，再称重 离心，同样1500转/分钟，离心5分钟。取上清液 于另一试管中备用，受血犬的血清即制备完成。 此时的血清因不含纤维蛋白，故可用于交叉配血 试验。
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二、交叉配血试验的具体操作方法
1.基本原理：用供血犬的红细胞泥与受血犬血清 相结合，借以判断其凝集情况。具体操作是取供 血犬的5%红细胞悬液与受血犬血清在主侧池反应 ；用供Baidu Nhomakorabea犬的血清与受血犬的5%红细胞悬液在次 侧池反应。（注意：在临床上，由于使用一次性 标准血袋的缘故，无法做次侧池凝集反应。因为 全血内已混合了抗凝剂。）
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3．多数犬不存在自然产生的抗体，因此从未输 过血的犬初次交叉配血试验显示相容性，但有一 定的过敏率。除非在特别紧急的情况下，能做交 叉配血试验的应该尽量做，以严格程序、确保受 血犬的安全，同时减少医患纠纷。 4．曾经有受血经历的犬，在第二次输血前，即 使用同一供血犬，也一定要做交叉配血试验。
4.凝集反应的判定： 取供血犬5%红细胞悬液0.2毫升，滴于载玻片正 中央。随后加入受血犬血清0.1毫升，用细大头针 搅拌10余圈，于20—25℃的室温下静置20—30分 钟。显微镜下观察凝集情况。
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正常情况下，红细胞遍布于整个视野，排列均匀 ，无结团、无凝集、无异常形态。此时可输血。 如发现有异常的红细胞，有结团、成串、混乱排 列等形态，应坚决不予输血，以免发生危险。
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5．猫能产生自然同种抗体，所以在猫输血前必 须做交叉配血试验。交叉配血试验还能鉴定猫的 血型，若主测配血试验不相合，受血猫可能为B 型血，供血猫为A型血。若副测配血试验不相合 ，受血猫可能为A型血，供血猫为B型血。如果 交叉配血试验相合，则供血猫和受血猫血型相同 。猫的血液最好在需要输血时，现采血现输血， 不要长期贮存。
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2.制作供血犬的5%红细胞悬液： ① 取供血犬的全血2毫升，加入0.2毫升抗凝剂（10% 枸橼酸钠与全血的比例为1：9），手弹试管，混合均 匀后置于天平上称重（使用同样的试管内加入生理盐 水直至平衡），后置于离心机内，1500转/分钟，离心5 分钟。取上清液（血浆）于另一试管中备用。（抗凝 剂也可以选用草酸盐。0.1毫升可抗凝2.5毫升全血。） ② 试管内剩余的红细胞加8-10倍生理盐水颠倒混匀称 重离心，再取上清液于另一试管中备用。如此洗涤三 次，分离后成分为红细胞泥。 ③ 取已分离成功的红细胞泥0.2毫升加生理盐水3.8毫升 ，颠倒混匀数次即为5%的红细胞悬液。
图：凝集现象，可见红细胞凝集（100倍和400倍）
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5.考虑到临床个别病例紧急，为了争取时间，缩 短交叉配血试验的过程，我们总结了一个简单易 行的办法：取供血犬5%红细胞悬液0.2毫升加入 受血犬血清0.1毫升，置于试管中，天平称平后， 离心机1500转/分钟，离心5分钟。肉眼观察，手 弹试管，注意有无红细胞结团现象即可。