利用网络药理学方法研究热毒宁注射液抗流感病毒的分子作用机制

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热毒宁注射液的药理作用、临床应用及不良反应

热毒宁注射液的药理作用、临床应用及不良反应摘要】目的分别总结热毒宁注射液的药理作用、临床应用及不良反应。

方法随机抽取我院2015年4月至2016年4月接收的使用热毒宁注射液患者120例作为实验对象，观察及分析热毒宁注射液的药理作用、临床应用和不良反应。

结果通过观察对比，治疗有效率为118例(98.33%)，不良反应为4例(3.33%)，不良反应较低(P<0.05)，且为轻微不良反应。

结论对热毒宁注射液在临床应用中具有较高的疗效，且不良反应较小、轻微，其用药安全性可靠。

【关键词】热毒宁注射液；药理作用；临床应用；不良反应Abstract: Objective to summarize the pharmacological action, clinical application and adverse reactions of Reduning injection. Methods 120 patients received Reduning injection from April 2015 to April 2016 in our hospital were randomly selected as experimental objects, and the pharmacological effects, clinical application and adverse reactions of Reduning injection were observed and analyzed. Results the effective rate was 118 cases ( 98.33 % ), the adverse reactions were 4 cases ( 3.33 % ), the adverse reactions were low ( p < 0.05 ), and the adverse reactions were mild. Conclusion Reduning injection has a high curative effect in clinical application, and the adverse reactions are small and mild, and its medication safety is reliable.Key words：Reduning injection; Pharmacological action; Clinical application; Adverse reaction 热毒宁注射液属于国家二类新药中药合剂注射液，主要成份有青蒿、金银花、栀子，具有清热解毒、疏风解表、祛邪化痰之功效[1]，用于治疗上呼吸道感染、感冒、肺热、肺炎等流感性疾病。

热毒宁注射液的国内专利分析

热毒宁注射液的国内专利分析热毒宁注射液是一种用于治疗感染性疾病的抗生素药物，广泛用于临床治疗各种肺部感染、泌尿系统感染、皮肤软组织感染和外伤感染等疾病。

随着中国医药产业的发展，热毒宁注射液在国内市场上的需求量逐渐增加，因此该药物的生产商不断对其进行研发和改进，以满足市场需求。

在这一过程中，专利的认证和保护起着至关重要的作用，可以保障药物的生产商在市场上的竞争优势，促进医药产业的健康发展。

目前，热毒宁注射液在国内市场上已获得多项专利保护，这些专利不仅涵盖了热毒宁注射液的制备方法和配方，还涉及到其在临床治疗中的应用。

本文将对国内专利保护下的热毒宁注射液进行分析，并就其专利保护对于医药产业发展的意义进行探讨。

一、国内专利保护情况截至目前，热毒宁注射液在国内已获得多项发明专利和实用新型专利保护，涵盖了其在制备、配方和应用等方面的技术。

这些专利的取得不仅证明了热毒宁注射液在技术上的创新性和先进性，也为其生产商在市场上获得了一定的竞争优势。

就热毒宁注射液的制备方法而言，相关的发明专利主要涉及到其生产过程中的关键技术和工艺。

这些专利内容涵盖了热毒宁注射液的提取、纯化、制备工艺等方面的创新技术，保护了热毒宁注射液的生产工艺，防止了其他厂家通过仿制来侵权，保护了生产商的利益。

热毒宁注射液在临床应用方面也获得了相应的专利保护。

这些专利内容涵盖了热毒宁注射液在治疗特定疾病、临床应用方法、疗效评价等方面的技术创新，确保了热毒宁注射液在临床应用中的安全性和有效性。

二、专利保护对医药产业的意义专利保护对于医药产业的发展有着重要的意义。

专利保护可以鼓励医药企业在技术创新上进行更多的投入。

随着专利技术的保护，企业可以更加放心地进行长期的研发投入，因为他们知道，一旦技术取得突破，就能够在一定时期内独享市场，获得丰厚利润。

这种创新动力可以推动医药技术的不断进步，促进整个医药产业的发展。

专利保护可以提升医药企业在国际市场的竞争力。

在全球化的背景下，拥有核心专利技术的医药企业可以更好地抵御来自国际竞争对手的挑战，扩大自己在国际市场上的份额。

热毒宁注射液药理作用、临床应用及不良反应分析

热毒宁注射液药理作用、临床应用及不良反应分析作者：李祥岭房增龙段成伟郭延锋来源：《中国社区医师》2017年第27期摘要目的：探讨热毒宁注射液药理作用、临床应用及不良反应发生情况。

方法：收治以热毒宁注射液治疗的患者60例，回顾性分析其临床资料。

结果：急性上呼吸道感染、病毒性肺炎及轮状病毒性肠炎患者治疗有效率分别为93.9%、93.3%及91.7%，出现过敏1例，血尿1侧，皮肤和附件损害2例，不良反应发生率6.7%。

结论：热毒宁注射液具有较高的治疗总有效率，不良反应发生率低。

关键词热毒宁注射液；药理作用；临床应用；不良反应热毒宁注射液是临床常用的中药制剂，在治疗上呼吸道感染方面作用明显，该药在治疗上呼吸道感染导致的痰黄、咳嗽、头身痛、微恶风寒及高热等临床症状方面，作用尤其明显。

栀子、金银花及青蒿是热毒宁注射液的主要成分。

该品主要为静脉滴注给药，保存时应密封、避光。

热毒宁注射液的有效期为18个月。

近年来，在临床治疗中已广泛应用热毒宁注射液，为保证患者的用药安全，必须加强对热毒宁注射液的研究。

本文主要对热毒宁注射液药理作用、临床应用及不良反应发生情况进行探究，具体内容如下。

资料与方法2016年1月-2017年1月采用热毒宁注射液治疗患者60例，男27例，女33例；年龄15～75岁，平均（45±2.1）岁；疾病类型为急性上呼吸道感染33例，病毒性肺炎15例，轮状病毒性肠炎12例。

纳入标准：①所有患者均为我院使用热毒宁注射液治疗的患者；②所有患者均同意参加本研究。

排除标准：①脑血管、心血管疾病或癌症者；②不正常的肝功能和肾功能者；③对药物易产生过敏反应者。

治疗方法：用热毒宁注射液对所有患者进行静脉滴注治疗，将热毒宁注射液20 mL溶于0.9%氯化钠注射液250 mL中，待到溶液充分稀释后，对患者进行静脉滴注治疗。

热毒宁注射液滴速30～60滴/min，1次，d，3 d为1个疗程，持续治疗1个疗程。

观察项目和指标：观察患者治疗效果及不良反应发生情况。

热毒宁注射液药理作用与临床研究进展_孙兰

*基金项目：国家重大新药创制专项（2013ZX09402203）△通信作者·综述·热毒宁注射液（国药准字Z20050217）具有清热、疏风、解毒之功效。

用于外感风热所致感冒、咳嗽，症见高热、微恶风寒、头痛身痛、咳嗽、痰黄；也可用于上呼吸道感染、急性支气管炎见上述证候者。

现就其近10年来药理作用及临床应用研究进展综述如下。

1药理作用与机制研究1.1解热作用与机制王开富等［1］用细菌内毒素制作家兔发热模型，注射内毒素后家兔肛温明显上升。

结果显示，热毒宁注射液对白介素-1（IL-1）、白介素-6（IL-6）、内皮素-1（ET-1）、前列腺素E2（PGE2）均有明显抑制作用，解热机理可能与拮抗IL-1、ET-1、IL-6、PGE2等炎性介质、调节内源性致热源有密切关系。

唐陆平等［2］将LPS溶液经腹腔注射入大鼠体内，持续观察并记录大鼠体温变化，以动物体温与基础体温的差值（ΔT，℃）为观察指标，测定脑cAMP的含量及肺组织中髓过氧化物酶（MPO）活性。

结果表明，热毒宁注射液可以抑制脂多糖致热大鼠温度的升高，降低中枢下丘脑的cAMP含量及肺组织MPO含量。

推测解热机制可能是由于抑制了单核巨噬细胞的活化，下调内源性致热因子的释放，进而使cAMP水平降低，使体温降低。

1.2抗炎作用与机制刘红菊等［3］静脉注射内毒素（主要成分为脂多糖，LPS）建立急性肺损伤（ALI）模型，应用热毒宁注射液治疗后，不同时间点检测外周血及支气管肺泡灌洗液（BALF）内白介素-8，10（IL-8，IL-10），肿瘤坏死因子（TNF-α）的含量，并测定BALF 内磷脂酰胆碱（PC）的含量。

结果表明，热毒宁注射液对家兔ALI有一定的治疗作用，其可以抑制致炎因子活性，还可增加ALI家兔肺表面活性物质PC的含量。

范广民等［4］观察热毒宁注射液对哮喘大鼠肺组织肿瘤坏死因子受体相关因子（TRAF2）表达和病理改变的影响，结果表明，哮喘大鼠TRAF2的表达水平增强，其可能参与了哮喘的气道炎症过程。

网络药理学的研究方法与应用进展

网络药理学的研究方法与应用进展薛潇春;胡晋红【摘要】网络药理学是近年来研究较热的一门新兴的药理学分支学科。

以其“多基因，多靶点”的特点与复杂疾病的治疗理念相吻合。

区别于传统繁复的药理学实验方法，网络药理学以其独特的研究方法获取药物与靶点相关的信息，既节省时间又节省费用。

该文通过检索中国知网和PubM ed数据库，从网络构建、网络分析、实验验证3个方面介绍了网络药理学的研究方法，并阐述其应用进展，为深入研究药理学领域拓展新的思路。

%Recently ,network pharmacology was a pop emerging pharmacology branch .The theory of "multi-gene , multi-target"about network pharmacology was consistent with treatment of complex disease .Different from the traditional ex-perimental methods about pharmacology ,the research methods of network pharmacology uniquely obtain the information of drugs and relative targets with less time and less money .In this paper ,according to the searching of China Knowledge Re-source Integrated Database and PubMed ,three aspects about research methods of network pharmacology together with its ap-plications were introduced :network construction ,network analysis and experimental validation .The introductions of the meth-ods gave us a new vision in researching the field of pharmacology deeply .【期刊名称】《药学实践杂志》【年(卷),期】2015(000)005【总页数】5页(P401-405)【关键词】网络药理学;生物网络;网络构建;网络分析【作者】薛潇春;胡晋红【作者单位】第二军医大学附属长海医院药学部，上海 200433;第二军医大学附属长海医院药学部，上海 200433【正文语种】中文【中图分类】R96网络药理学（network pharmacology）的概念由英国药理学家Hopkins于2007年首次提出，并定义为一门以系统生物学和多向药理学为理论基础，利用生物分子网络分析方法，选取特定节点进行新药设计和靶点分析的药理学分支学科［1，2］。

热毒宁注射液的药理作用、临床应用及不良反应

热毒宁注射液的药理作用、临床应用及不良反应陈贵生【摘要】目的：探讨热毒宁注射液在临床应用中的药理作用、适应病症及不良反应。

方法收集2015年3月～2016年3月在我院收治的121名患者在使用热毒宁注射液进行治疗的临床疗效及不良反应情况，统计其药物使用性能。

结果通过对我院2015年3月～2016年3月在我院收治的121名患者治疗统计，在使用热毒宁治疗其适应症，总有效率可达到90%以上，同时，不良反应较少且较轻。

结论热毒宁在临床中具有较好疗效，可广泛应用，但针对其不良反应应采取有效措施控制，以扩大其应用范围。

%Objective To investigate the pharmacological effectsof reduning injection in clinical application,to adapt to the conditions and adverse reactions.MethodsCollected from March 2015 to March 2016 inour hospital,121 patients in the use of reduning injection treatment,the clinical curative effect and adverse reaction of the drug use performance of statistics.Results121 patients were treated in the use of reduning injection,the total effective rate can reach more than 90%,at the same time,the adverse reaction was less and less.ConclusionReduning injection has a good curative effect in clinic,can be widely used,but according to its adverse reactions should take effective measures to control,to expand its range of application.【期刊名称】《中国卫生标准管理》【年(卷),期】2016(007)015【总页数】2页(P141-142)【关键词】热毒宁;药理作用;临床医学;不良反应【作者】陈贵生【作者单位】高邮市人民医院设备科，江苏高邮 225600【正文语种】中文【中图分类】R243热毒宁注射液是采用当前先进生物提取技术从植物体中提取而成的中药注射液，该药物具有疏风、清热、解毒等功效，在当前临床上被广泛用于呼吸道感染、感冒、病毒性肠炎及肺炎等多种疾病的预防与治疗，临床疗效显著，药物不良反应少［1］。

热毒宁注射液辅助治疗流行性感冒论文

热毒宁注射液辅助治疗流行性感冒的临床效果观察【摘要】目的探讨和分析热毒宁注射液辅助治疗流行性感冒的临床效果。

方法选取我院2010年1月-9月收治的120例确诊为流行性感冒的患者，将其随机平均分为2组，即对照组60例和观察组60例，对照组采用磷酸奥司他韦（商品名：达菲，英文名：oseltamivir，上海罗氏制药有限公司生产）75mg，2次/d，共3d；治疗组在对照组的基础上，采用热毒宁注射液20ml（2支）加入0.9%生理盐水注射液250ml，静脉滴注，40-50滴/min，1次/d，3d为1个疗程。

结果（1）治疗组：痊愈56例（93.3%，56/60），好转4例（6.7%，4/60），整体有效率为100%；（2）对照组：痊愈41例（68.3%，41/60），好转6例（10.0%，6/60），无效13例（21.7%，13/60），整体有效率为78.3%；治疗组的痊愈率优于对照组（p＜0.05），且整体有效率显著高于对照组（p＜0.01）；2组患者均没有发现明显的不良反应。

结论热毒宁注射液辅助治疗流行性感冒的临床效果显著，并且作为一种纯中药制剂，几乎没有没有明显的不良反应，值得临床推广。

【关键词】流行性感冒热毒宁注射液磷酸奥司他韦（达菲）临床疗效中图分类号：r511.7文献标识码：a文章编号：1005-0515（2011）2-110-02流行性感冒（influenza，简称流感）是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病，发病率高，人群普遍易感，据统计，流感每年发病率达10%-30%[1]。

我院2010年1月-9月一共收治确诊为流行性感冒的患者120例，采用热毒宁注射液辅助治疗，临床疗效不俗，现在报告如下。

1 资料和方法1.1 一般资料我院2010年1月-9月一共收治确诊为流行性感冒的患者120例，将其随机平均分为2组，即对照组60例和观察组60例；治疗组男性32例，女性28例，年龄12-39岁，平均22.3岁，对照组男性31例，女性29例，年龄12-39岁，平均22.9岁。

热毒宁注射液在甲型流感中的临床应用

热毒宁注射液在甲型流感中的临床应用摘要：目的：2023年2-4月份甲型流感在达州市流行，为了更有效的治疗甲型流感、我们在抗流感病毒的基础上加用热毒宁注射液进行临床应用的研究，本项研究将对热毒宁注射液的临床疗效和不良反应发生情况进行分析。

方法：研究人员选取了在我院儿科接受治疗的甲型流感患儿98例，患儿接受治疗的时间是2023年2月至2023年4月，对甲流患儿给予奥司他韦、解热镇痛药的基础上，加用的热毒宁注射液和未加用热毒宁注射液的疗效进行相应的分析，并探究热毒宁注射液的不良反应、治疗效果等。

结果：热毒宁注射液治疗甲型流感有助于改善临床表现症状，起效快，疗效显著，安全性高，值得临床推广。

关键词：甲型流感，热毒宁注射液，抗病毒药物。

前言:2023年2-4月份甲型流感在达州市流行，有大规模爆发、我院儿科每天的甲型流感病人多。

为了提高我院儿科治疗甲型流感的有效率，我们儿科在患甲型流感的患儿中选用热毒宁注射液治疗进临床行对比分析。

以便选用更高效的药物治疗甲型流感，尽早控制患儿的病情、减少患儿痛苦。

结合国内外研究成果及我国既往流感诊疗经验，申报达州市通川区中医院后，进行了此项研究。

1.资料与方法1.1.病患资料2023年2-4月份甲型流感在达州市流行，为了提高我院儿科治疗甲型流感的有效率，我们儿科在患甲型流感的患儿中加用热毒宁注射液进临床行分析。

研究人员在我院就诊的甲型流感患儿中挑选出了98名（均大于3岁），将挑选的98名患儿作为本次研究目标，选取的患儿皆是2023年2月至2023年4月在本院接受的治疗。

对甲流患儿给予奥司他韦、解热镇痛药的基础上，根据是否实施热毒宁注射液患儿分为观察组和对照组各49例。

选取的98名患儿中包含男性50名，女性48名，其中年龄最大的患儿为13岁，年龄最小的患儿为3岁。

两组患者临床资料完整，性别、年龄等基本资料比较无显著差异(P〈0．05)，具有可对比性。

本研究经达州市通川区中医院伦理委员会批准，所有受试者（患儿家长）均签署知情同意书。

热毒宁注射液的药理作用、临床应用及不良反应分析

液治疗的患者８６ｑ，］进行研究分析，分析其疗效、药理作用和出现的不良反应。结果
本次研究选取患者中，
急性上呼吸道感染患者治疗总有效率为９８．４８％，病毒性肺炎患者治疗总有效率为９２．８６％，轮状病毒性肠炎患者治疗总有效率为８３＿３３％；不良反应发生率为４．６５％，过敏２例，血尿１例，皮肤和附件损害１例，但均没有出现过敏性休克和急性喉头水肿等严重不良反应。结论
ｔｏａｎａｌｙｚｅｉｔｓｃｌｉｎｉｃａｌｅｆｆｅｃｔｓ．ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｅｆｆｅｃｔｓｎｄａａｄｖｅｒｓｅｒｅａｃｉｏｔｎｓ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｉｓｓｔｕｄｙｓｅｌｅｃｔｅｄｐａｔｉｅｎｔｓ．也ｅｃｌｉｎｉｃａｌｔｏｔａｌｅｉｅｒｃｔｉｖｅｒａｔｅｗａｓ９８．４８％ｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｃｕｔｅｕｐｐｅｒｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ仃ａｃｔｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．ｖｉｒａｌｐｎｅｕｍｏｎｉａｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｃｌｉｎｉｃａｌｒｔｅａｔｍｅｎｔｔｈｅｔｏｔａｌｅｆｅｃｔｉｖｅｒａｔｅｗａｓ９２．８６％．ｒｏｔａｖｉｒｕｓｖｉｒａｌｅｎｔｅｒｉｔｉｓｐａｔｉｅｎｔｓｃｌｉｎｉｃａｌｔｏｔａｌ

热毒宁注射液药理作用、临床应用及不良反应

热毒宁注射液药理作用、临床应用及不良反应【摘要】目的：分析热毒宁注射液药理作用、临床应用及不良反应。

方法：收集我院自2016年2月-2017年3月收治的76例实施热毒宁注射液治疗的患者进行回顾性分析，以总结热毒宁注射液的疗效、药理作用及不良反应情况。

结果：58例急性上呼吸道感染患者的治疗总有效率为98.28%；12例病毒性肺炎患者的治疗总有效率为91.67%；6例轮状病毒性肠炎患者的治疗总有效率为83.33%；76例患者中，出现皮肤及附件损害1例、出现过敏2例、出现血尿1例，全部患者均未出现急性喉头水肿及过敏性休克等严重不良反应。

结论：热毒宁注射液具有疗效理想，不良反应小的特点，安全可靠，具有较高的推广价值。

【关键词】热毒宁注射液；药理作用；临床应用；不良反应【Abstract】 Objective：To analyze the pharmacological effects，clinical application and adverse reactions of heat poisoning injection. Methods：A retrospective analysis was conducted on 76 cases of patients treated with heat poisoning injection from February 2016 to March 2017 in order to summarize the curative effect，pharmacological effect and adverse reaction of heat poisoning injection. Results：The total effective rate was 98.28% in 58 patients with acute upper respiratory tract infection. The total effective rate was 91.67% in 12 patients with viral pneumonia and 83.33% in 6 patients with rotavirus enteritis. 76 cases of patients with skin and accessories damage in 1 case，2 cases of allergies，hematuria in 1 case，all patients were not acute laryngeal edema and anaphylactic shock and other serious adverse reactions. Conclusion：Hot poisoning injection has the advantages of good curative effect，small adverse reaction characteristics，safe and reliable，with high promotion value.【Key words】 heat poisoning injection；pharmacological effects；clinical application；adverse reactions热毒宁注射液配方中的主要成分为金银花、栀子、青蒿。

网络药理学在中药研究中的最新应用进展_李泮霖

·综述·网络药理学在中药研究中的最新应用进展李泮霖，苏薇薇*中山大学生命科学学院，广东省中药上市后质量与药效再评价工程技术研究中心，广东省植物资源重点实验室，广东广州 510275摘要：中药具有多成分、多靶点、系统调节的特点，与近年来发展起来的网络药理学核心思想不谋而合。

因此，将网络药理学引入中药的研究，有助于透彻了解中药治病的整体性和系统性。

从预测和辨识中药作用靶点及活性成分群、阐明作用机制、科学解释组方规律、发现新的适应症、发现新的活性化合物及与组学技术结合应用等几个方面，对网络药理学在中药研究中的最新进展进行综述，以期有更多的人了解和应用这一新技术。

关键词：网络药理学；中药；作用靶点；组方规律；组学技术中图分类号：R285 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2016)16 - 2938 - 05DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.16.028Recent progress in applying network pharmacology to research of Chinese materia medicaLI Pan-lin, SU Wei-weiGuangdong Engineering and Technology Research Center for Quality and Efficacy Re-evaluation of Post-marketed TCM;Guangdong Provincial Key Laboratory of Plant Resources; School of Life Sciences, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510275, ChinaAbstract: Chinese materia medica (CMM) has the multi-component, multi-target, and multi-pathway characteristics, which are coincided with the theory of network pharmacology. Therefore, applying network pharmacology to CMM researches will be helpful to explain the effects of CMM in the treatment of complex diseases holistically and systematically. In this paper, the recent progress in the applications of network pharmacology in CMM studies has been reviewed, including prediction and identification of targets and core bioactive components, clarification of the mechanism of action, explanation of the prescription composition rules, development of new indications, discovery of new active compounds and the combined application of network pharmacology and omics technologies, so as to accelerate the extensive applications of this new technology.Key words: network pharmacology; Chinese materia medica; targets; prescription rule; omics technology中药具有多成分、多靶点、调节方式多样的特点，蕴含了极大的信息量。

热毒宁注射液的药理作用、临床应用及不良反应

热毒宁注射液的药理作用、临床应用及不良反应张繁红【摘要】目的探索热毒宁注射液的药理作用、临床应用及不良反应.方法采集我院2015年1~10月收治的111例使用热毒宁注射液治疗的患者作为观察对象,全面分析该药的药理作用、临床应用效果及不良反应.结果从治疗总有效率来看,急性上呼吸道感染患者与病毒性肺炎患者差异无统计学意义(P>0.05),病毒性肺炎患者与轮状病毒性肠炎患者、急性上呼吸道感染与轮状病毒性肠炎患者差异有统计学意义(P<0.05).总的不良反应率仅为4.50%,且全是轻微不良反应.结论热毒宁注射液在临床应用上有显著的治疗效果,同时不良反应少.【期刊名称】《中国继续医学教育》【年(卷),期】2016(008)036【总页数】3页(P130-132)【关键词】热毒宁注射液;药理作用;临床应用;不良反应【作者】张繁红【作者单位】江苏省昆山市第二人民医院中心药房,江苏昆山 215300【正文语种】中文【中图分类】R285热毒宁注射液是一种国家二类的新型中药注射液，其主要成分为金银花、青蒿、栀子，它有清热、解毒、疏风等功效，在临床上主要用于感冒，上呼吸道感染，病毒性肺炎及肠炎的治疗[1]。

该药主要成分中，青蒿为君，性寒，味甘微辛，有清热凉血、解暑、除蒸、利尿等功效；金银花为臣，有清热解毒、消炎、杀菌、抗病原微生物、消肿、止痢等功效；栀子为佐药，有清热、解毒、凉血和清泄心、肺、胃和三焦之火等功效。

三种药物共同作用，可有效增强其药效[2]。

为了进一步明确热毒宁注射液的药理作用、临床应用效果及不良反应，我院进行了本研究，现将具体情况报道如下。

1.1 一般资料选取本院2015年1～10月收治的111例肺使用热毒宁注射液治疗的患者作为观察对象，其中男患61例，女患50例，年龄8～65岁，平均年龄（30.5±2.8）岁，急性上呼吸道感染56例，病毒性肺炎37例，轮状病毒性肠炎18例。

所有患者一般资料对比差异无统计学意义（P＞0.05）。

热毒宁注射液的药理作用及临床应用研究

热毒宁注射液的药理作用及临床应用研究摘要：目的：分析热毒宁注射液的药理作用、临床应用效果。

方法：用双盲法将2017.02月~2018.02月于本院就诊的上呼吸道感染等病人共200例分成100例/组。

利伟巴林注射液应用在对照组中，热毒宁注射液应用在观察组中。

对比两组疗效和不良反应。

结果：观察组总有效率（94.00%）更高，药物不良反应发生率（4.00%）更低（p值＜0.05）。

结论：热毒宁注射液药效好，安全性高，可治疗多种炎症、感染性疾病。

关键词：热毒宁注射液；临床应用；药理作用0引言热毒宁注射液属于中药制剂，主要成分包括青篙、栀子以及金银花，多用于治疗存在发热、咳嗽、疼痛等症状的疾病中[1]，应用范围广泛，需要深入探讨其药理作用和临床应用情况，以便进一步扩大使用范围，具体内容见正文描述。

1 资料及方法1.1 资料从在本院接受治疗的上呼吸道感染、病毒性肺炎、轮状病毒性肠炎病人中选出200例，就诊时间为2017.02月~2018.02月，采取双盲法分成2个研究小组。

观察组（男：女=52：48）--年龄区间：4-72（43.26±12.20）岁；疾病类型：42例上呼吸道感染、30例病毒性肺炎、28例轮状病毒性肠炎。

对照组（男：女=50：50）--年龄区间：5-74（43.31±12.15）岁；疾病类型：44例上呼吸道感染、29例病毒性肺炎、27例轮状病毒性肠炎。

2组病人的基础资料不具有统计学意义，与对比要求相符。

1.2 方法[对照组]：利巴韦林注射液静脉滴注，疗程为五天，儿童每天一次，每次10mg/kg-15mg/kg，成人每天两次，每次0.5g/kg。

[观察组]：静脉滴注热毒宁注射液与250ml生理盐水的混合药液，每天一次，儿童每次0.5ml/kg-0.6ml/kg，成人20ml/kg，疗程为五天。

1.3 观察项目对比两组总有效率（A概率+B概率）[2]。

各症状经治疗后完全消失--A（治愈标准）；症状经治疗后有所缓解--B（有效标准）；治疗后症状仍然存在甚至加重--C（无效标准）。

热毒宁注射液药理作用、临床应用及不良反应分析

１．２治疗方法：热毒宁注射液０．６ｍｌ／ｋｇ，加入生理盐水注射液静
脉滴注，并给与辅助对症治疗，５ｄ为１个疗程，１个疗程后对症状进行评价。
患者症状与体征改善明显，不良反应减少。避免了长期使用抗生素带来的副作用。⑤ 流行性Ｉ－＿呼吸道感染是呼吸系统最常见的疾
急性上呼吸道感染１５３例，患病毒性肺炎３２例，患轮状病毒性肠炎ｌ５例。将患者用药前症状进行记录，与用药后症状进行比较。
３．２临床应用：热毒宁注射液临床应用范围广泛。① 上呼吸道感染患者使用热毒宁注射液能明显降低患者体温，改善症状与体征明显，起效快。② 支气管炎患者静脉点滴或是雾化吸入热毒宁注射液均能取得较好疗效，患者咳嗽等症状改善明显。③ 小ＪＬｕＨ结合膜热和小儿疱疹性咽峡炎是ｓＪ＇，Ｊｋｌ￣床常见病，热毒宁注射液
肺损伤、急性脑出血及，＇ＩＪＬ手足口病等，也取得较好疗效。
２．１患者的治疗情况：１个疗程后对２００例患者以疗效评定标准
评价后的治疗情况见表１。
３．３不良反应：① ３味中药中主要成分中有些属于过敏原，应用
３．１药理作用：青蒿具有抗菌、镇痛及提高免疫力等作用：金

热毒宁注射液治疗新型冠状病毒肺炎的活性成分与潜在作用机制初探

新冠肺炎专栏热毒宁注射液治疗新型冠状病毒肺炎的活性成分与潜在作用机制初探陈元堃，曾奥，罗振辉，何树苗，李春梅，卢群（广东药科大学生命科学与生物制药学院，广东广州５１０００６）摘要：目的利用网络药理学及分子对接方法探索热毒宁注射液治疗新型冠状病毒肺炎（ＣＯＶＩＤ⁃１９）的活性化合物与潜在作用机制㊂方法通过中药系统药理学数据库及在线分析平台（ＴＣＭＳＰ）收集热毒宁注射液中金银花㊁栀子㊁青蒿的主要化学成分及作用靶点；利用ＧｅｎｅＣａｒｄｓ数据库收集ＣＯＶＩＤ⁃１９的预测靶点；应用Ｃｙｔｏｓｃａｐｅ＿ｖ３．７．２构建出热毒宁注射液中药物⁃主要化合物⁃作用靶点的关系网络；使用ＳＴＲＩＮＧ来构建蛋白⁃蛋白相互作用网络图以及选出核心的靶点；用ＤＡＶＩＤ进行ＧＯ与ＫＥＧＧ的富集分析，并利用Ｒ语言进行可视化；运用相关的分子对接软件对热毒宁注射液中的核心成分与抗ＣＯＶＩＤ⁃１９的相关靶点作对接㊂结果从热毒宁注射液中筛选出５０种活性成分２３１个作用靶点，与ＣＯＶＩＤ⁃１９重合的靶点有４３个；共得到１２５条ＧＯ富集结果及１０４条ＫＥＧＧ富集结果，主要涉及炎症㊁细菌感染㊁病毒感染等；分子对接结果表明芹菜素㊁木犀草素㊁槲皮素㊁山奈酚等核心成分与推荐的抗ＣＯＶＩＤ⁃１９药物亲和力相近㊂结论芹菜素与木犀草素的亲和力最强，热毒宁注射液防治ＣＯＶＩＤ⁃１９的潜在作用机制可能与调节免疫㊁抗病毒㊁抑菌等方面有关系㊂关键词：热毒宁注射液；新型冠状病毒肺炎；作用机制；网络药理学；分子对接中图分类号：Ｒ２８５．５㊀文献标志码：Ａ㊀文章编号：２０９６⁃３６５３（２０２０）０３⁃０３８１⁃０７ＤＯＩ：１０．１６８０９／ｊ．ｃｎｋｉ．２０９６－３６５３．２０２００４０８０２收稿日期：２０２０⁃０４⁃０８基金项目：国家自然科学基金资助项目（８１５０３２８２）；广东省科技计划项目（２０１４Ａ０２０２１２３０９）作者简介：陈元堃（１９９６），女，２０１８级在读硕士研究生，Ｅｍａｉｌ：６４９８０６２３３＠ｑｑ．ｃｏｍ通信作者：卢群（１９７５），女，博士，教授，主要从事天然活性物质作用机制研究，Ｅｍａｉｌ：ｌｕｑｕｎ２＠１２６．ｃｏｍ㊂ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓａｎｄｐｏｔｅｎｔｉａｌｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＲｅｄｕｎｉｎｇｉｎｊｅｃｔｉｏｎｉｎｔｒｅａｔｉｎｇｎｏｖｅｌｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｐｎｅｕｍｏｎｉａＣＨＥＮＹｕａｎｋｕｎ，ＺＥＮＧＡｏ，ＬＵＯＺｈｅｎｈｕｉ，ＨＥＳｈｕｍｉａｏ，ＬＩＣｈｕｎｍｅｉ，ＬＵＱｕｎ∗（ＳｃｈｏｏｌｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓａｎｄＢｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｓ，ＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０００６，Ｃｈｉｎａ）∗ＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒＥｍａｉｌ：ｌｕｑｕｎ２＠１２６．ｃｏｍＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓａｎｄｐｏｔｅｎｔｉａｌｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＲｅｄｕｎｉｎｇｉｎｊｅｃｔｉｏｎｉｎｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｎｏｖｅｌｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｐｎｅｕｍｏｎｉａＣＯＶＩＤ⁃１９ｂｙｎｅｔｗｏｒｋｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙａｎｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｄｏｃｋｉｎｇ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅｍａｉｎｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓａｎｄａｃｔｉｏｎｔａｒｇｅｔｓｏｆＬｏｎｉｃｅｒａｊａｐｏｎｉｃａＧａｒｄｅｎｉａｊａｓｍｉｎｏｉｄｅｓＥｌｌｉｓａｎｄＡｒｔｅｍｉｓｉａｃａｒｖｉｆｏｌｉａｉｎＲｅｄｕｎｉｎｇｉｎｊｅｃｔｉｏｎｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄｂｙｔｈｅｄａｔａｂａｓｅｏｆＴａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＳｙｓｔｅｍｓＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙＡｎａｌｙｓｉｓＰｌａｔｆｏｒｍＴＣＭＳＰ．ＴｈｅｐｒｅｄｉｃｔｅｄｔａｒｇｅｔｓｏｆＣＯＶＩＤ⁃１９ｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｔｈｒｏｕｇｈＧｅｎｅＣａｒｄｓｄａｔａｂａｓｅ．Ｔｈｅｎｅｔｗｏｒｋｏｆｄｒｕｇ⁃ｍａｉｎｃｏｍｐｏｕｎｄ⁃ａｃｔｉｏｎｔａｒｇｅｔｉｎＲｅｄｕｎｉｎｇｉｎｊｅｃｔｉｏｎｗａｓｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄｂｙＣｙｔｏｓｃａｐｅ＿ｖ３．７．２．Ｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎ⁃ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｎｅｔｗｏｒｋｗａｓｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄｂｙＳＴＲＩＮＧａｎｄｔｈｅｃｏｒｅｔａｒｇｅｔｗａｓｓｅｌｅｃｔｅｄ．ＥｎｒｉｃｈｍｅｎｔａｎａｌｙｓｉｓｏｆＧＯａｎｄＫＥＧＧｂｙＤａｖｉｄａｎｄｖｉｓｕａｌｉｚｅｄｂｙＲｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇｌａｎｇｕａｇｅ．ＴｈｅｃｏｒｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆＲｅｄｕｎｉｎｇｉｎｊｅｃｔｉｏｎｗｅｒｅｄｏｃｋｅｄｗｉｔｈｔｈｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｔａｒｇｅｔｏｆＣＯＶＩＤ⁃１９ｂｙｍｏｌｅｃｕｌａｒｄｏｃｋｉｎｇｓｏｆｔｗａｒｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ５０ａｃｔｉｖｅｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓａｎｄ２３１ｔａｒｇｅｔｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍＲｅｄｕｎｉｎｇｉｎｊｅｃｔｉｏｎａｎｄ４３ｃｏｍｍｏｎｔａｒｇｅｔｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈＣＯＶＩＤ⁃１９．Ａｔｏｔａｌｏｆ１２５ＧＯｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔｒｅｓｕｌｔｓａｎｄ１０４ＫＥＧＧｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｉｎｃｌｕｄｉｎｇｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ㊀广东药科大学学报㊀ＪｏｕｒｎａｌｏｆＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ㊀Ｊｕｎ．２０２０，３６（３）ｂａｃｔｅｒｉａｌｉｎｆｅｃｔｉｏｎａｎｄｖｉｒｕｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．ＭｏｌｅｃｕｌａｒｄｏｃｋｉｎｇｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｃｏｒｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆＡｐｉｇｅｎｉｎＬｕｔｅｏｌｉｎＱｕｅｒｃｅｔｉｎａｎｄＫａｅｍｐｆｅｒｏｌｗｅｒｅｃｌｏｓｅｔｏｔｈｅｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄｄｒｕｇｆｏｒＣＯＶＩＤ⁃１９．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＡｐｉｇｅｎｉｎａｎｄｌｕｔｅｏｌｉｎｈａｖｅｔｈｅｓｔｒｏｎｇｅｓｔａｆｆｉｎｉｔｙ．ＴｈｅｐｏｔｅｎｔｉａｌｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＲｅｄｕｎｉｎｇｉｎｊｅｃｔｉｏｎｉｎｔｈｅｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆＣＯＶＩＤ⁃１９ｍａｙｂｅｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｉｍｍｕｎｉｔｙａｎｔｉｖｉｒｕｓａｎｄａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ．ＫｅｙｗｏｒｄｓＲｅｄｕｎｉｎｇｉｎｊｅｃｔｉｏｎｎｏｖｅｌｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｐｎｅｕｍｏｎｉａｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｃｔｉｏｎｎｅｔｗｏｒｋｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙｍｏｌｅｃｕｌａｒｄｏｃｋｉｎｇ㊀㊀新型冠状病毒（ＳＡＲＳ⁃ＣｏＶ⁃２）具传染性强㊁传播迅速㊁各类人群均易感等特点，其传播的途径主要包括了飞沫㊁接触㊁粪口等［１］㊂轻度感染患者表现为发热㊁干咳及乏力等症状，而重度患者可出现严重的急性呼吸衰竭㊁脓毒症㊁肾衰甚至死亡等［２⁃３］㊂到目前为止仍无治疗ＣＯＶＩＤ⁃１９的特效方法，主要采用中西医临床对症治疗的方式来应对［４⁃５］㊂在疫情防治中中医的整体观及辨证论治特点优势十分显著，在国家健康委办公厅印发的‘新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第６版）“中，就包含了热毒宁注射液［６］㊂热毒宁注射液主要由栀子㊁金银花㊁青蒿等三味中药组成，多应用在外感风热所引起的上呼吸道感染㊁咳嗽㊁微恶风寒㊁感冒等［７］，对多种病毒具有抑制作用，如肺内鼠巨细胞病毒㊁ＣＶＡ１６㊁甲型ＨＩＮ１等［８］；相关机构药效筛选后初步发现热毒宁㊁金振口服液等中成药在体外具有抑制ＳＡＲＳ⁃ＣｏＶ⁃２的作用㊂本研究利用网络药理学的方法筛选出热毒宁注射液中的核心成分，并通过分析软件进一步探讨其与受体的分子对接结果和信号通路等，从而对治疗ＣＯＶＩＤ⁃１９的作用机制进行预测，为传统中医药治疗ＣＯＶＩＤ⁃１９提供理论基础㊂１㊀材料与方法１．１㊀热毒宁中主要中药成分的获取及筛选通过中药系统药理学数据库及在线分析平台（ｈｔｔｐ：／／ｔｃｍｓｐｗ．ｃｏｍ／ｔｃｍｓｐ．ｐｈｐ，ＴＣＭＳＰ）收集青蒿㊁金银花㊁栀子的主要活性成分㊂口服生物利用度（ＯＢ）为药物的吸收㊁分布㊁代谢及排泄中的重要药代学参数之一，主要指口服药物中的有效成分和活性基等进入人体循环并被吸收的速度及程度，而ＯＢ值越高则代表此药物的生物活性㊁类药性（ＤＬ）越佳［９⁃１０］㊂故本文以ＯＢȡ３０％㊁ＤＬȡ０．１８作为筛选条件来筛选出候选的活性成分㊂１．２㊀预测ＣＯＶＩＤ⁃１９相关靶点将ｎｏｖｅｌｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｐｎｅｕｍｏｎｉａ作为检索关键词，选择Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ物种，通过ＧｅｎｅＣａｒｄｓ数据库获得与ＣＯＶＩＤ⁃１９相关的基因㊂１．３㊀潜在靶点的预测及筛选重合靶点通过ＴＣＭＳＰ平台检索获得青蒿㊁金银花㊁栀子的靶蛋白，并利用Ｐｅｒｌ脚本筛选出候选活性成分的靶蛋白，剔除没有对应活性成分的靶蛋白，并将靶蛋白标准化建立数据集㊂通过Ｒ语言将上文获得的ＣＯＶＩＤ⁃１９相关的靶点与药物候选靶点取交集用于以下的分析㊂将获得的交集部分以及中药㊁候选活性成分整合为ｎｅｔｗｏｒｋ㊁ｎｏｄｅ文件，将其导入Ｃｙｔｏｓｃａｐｅ＿ｖ３．７．２中构建药物⁃活性成分⁃交集靶点的网络图㊂１．４㊀蛋白互作网络的构建与分析对获得的疾病与药物的共同靶点导入ＳＴＲＩＮＧ进行分析，物种选择Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ，将置信度＞０．７作为筛选指标㊂将获得的结果导入Ｃｙｔｏｓｃａｐｅ＿ｖ３．７．２进行蛋白⁃蛋白（ＰＰＩ）互作模型的建立，并使用其中的分析工具（Ｎｅｔｗｏｒｋａｎａｌｙｚｅｒ）及插件（ＭＣＯＤＥ）分析ＰＰＩ网络㊂１．５㊀ＫＥＧＧ和ＧＯ富集分析利用ＤＡＶＩＤ平台进行ＧＯ及ＫＥＧＧ的富集分析，分析靶点涉及的基因功能及相应的信号通路，以Ｐ＜０．０５为筛选指标，并利用Ｒ语言将其可视化㊂１．６㊀分子对接从ＰＤＢ数据库中下载目标蛋白的ＰＤＢ文件，并用ＤｉｓｃｏｖｅｒｙＳｔｕｄｉｏ４．５Ｃｌｉｅｎｔ对目标蛋白进行删除水㊁加氢㊁确定对接位点等操作㊂利用ＣｈｅｍＢｉｏＤｒａｗＵｌｔｒａ１４．０㊁ＣｈｅｍＢｉｏ３ＤＵｌｔｒａ１４．０画出关键化合物的化学结构，并将其转化为ｐｂｄｑｔ格式㊂利用ｖｉｎａ完成受体与配体的对接［１１］，结合能若小于０表明受体与配体能够自发的结合，当前筛选活性靶点还没有统一的标准，故依据文献报道本文将结合能ɤ５作为筛选热毒宁注射液治疗ＣＯＶＩＤ⁃１９的活性成分［１２⁃１３］㊂２㊀结果２．１㊀收集、筛选热毒宁注射液活性成分及ＣＯＶＩＤ⁃１９潜在靶点㊀㊀通过ＴＣＭＳＰ数据库检索收集到青蒿１２６个成２８３广东药科大学学报㊀第３６卷㊀分，栀子９８个成分，金银花２３６个成分㊂对得到的各中药中化学成分依据ＯＢȡ３０％㊁ＤＬȡ０．１８进行筛选，并剔除没有靶蛋白的化学成分，共得到５０个有效的化学成分㊂在这些活性成分中，有的同时存在于３种中药中，如β⁃谷甾醇（ｂｅｔａ⁃ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ）㊁豆甾醇（Ｓｔｉｇｍａｓｔｅｒｏｌ）㊁槲皮素（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）等（见图１）㊂同时，通过Ｇｅｎｅｃａｒｄｓ收集到ＣＯＶＩＤ⁃１９相关靶点共２５１个㊂图１㊀热毒宁注射液中药物⁃活性成分网络图Ｆｉｇｕｒｅ１㊀Ｄｒｕｇ⁃ａｃｔｉｖｅｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｎｅｔｗｏｒｋｏｆＲｅｄｕｎｉｎｇｉｎｊｅｃｔｉｏｎ２．２㊀热毒宁注射液治疗ＣＯＶＩＤ⁃１９的潜在靶点利用ＴＣＭＳＰ数据库收集得到金银花㊁青蒿㊁栀子中５０个化学成分的对应靶点共２３１个㊂在药物对靶点中，存在多个药物共同拥有多个靶点的情况；以及在药物活性成分对应的靶点中，存在一个活性成分对应多个靶点及多个活性成分对应一个靶点的情况㊂利用Ｐｅｒｌ脚本取热毒宁注射液中活性成分对应靶点与ＣＯＶＩＤ⁃１９相关靶点的交集之后，共得到４３个热毒宁治疗ＣＯＶＩＤ⁃１９的潜在靶点㊂２．３㊀构建及分析药物⁃活性成分⁃靶点网络利用Ｃｙｔｏｓｃａｐｅ＿ｖ３．７．２构建药物⁃活性成分⁃作用靶点网络，见图２㊂网络中有７０个节点及１６１条边，节点为活性成分及治疗靶点基因，边为它们之间相互作用的关系㊂从图２中可以发现一个活性成分对多个靶点起作用，且还存在多个活性成分对一个靶点有作用，这就体现了热毒宁注射液多成分㊁多靶点相互协同治疗ＣＯＶＩＤ⁃１９的特点㊂２．４㊀蛋白互作网络的构建与分析通过ＳＴＲＩＮＧ构建的蛋白质之间的相互作用关系网络见图３㊂此网络图中有４３个节点与４５９条边，图中节点越大表明其度值越大，边越粗表明其评分越高及关系越密切，颜色的深浅与度值及介值呈正相关的关系㊂在ＰＰＩ网络图拓扑属性分析后得出，ＩＬ⁃６㊁ＣＡＳＰ３等度值大于平均节点度值，确定为这一网络的核心靶点，之后利用ＭＣＯＤＥ分析得到２个具有显著性的子模块㊂模块１评分为２０．０００，包括２２个节点与２１０条边，以上提到的核心靶点都包含在内；模块２评分为４．３３３，包括７个节点与１３条边㊂见图３㊂注：绿色⁃金银花；紫色⁃青蒿；黄色⁃栀子；多药物⁃红色；蓝色⁃基因㊂图２㊀热毒宁注射液药物⁃活性成分⁃靶点网络Ｆｉｇｕｒｅ２㊀Ｄｒｕｇ⁃ａｃｔｉｖｅｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ⁃ｔａｒｇｅｔｎｅｔｗｏｒｋｏｆＲｅｄｕｎｉｎｇｉｎｊｅｃｔｉｏｎ２．５㊀ＧＯ富集分析ＧＯ富集分析后共得到１２５个富集的结果㊂其中生物过程（ＢＰ）有９５个，主要涉及有ＲＮＡ聚合酶Ⅱ启动子对转录的正向调控（ｐｏｓｉｔｉｖｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆｒｏｍｒｎａｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｉｉｐｒｏｍｏｔｅｒ）㊁免疫反应（ｉｍｍｕｎｅｒｅｓｐｏｎｓｅ）㊁炎症反应（ｉｎｆｌａｍｍｔｏｒｙｒｅｓｐｏｎｓｅ）等方面㊂细胞成分（ＣＣ）有１２个，主要涉及有细胞核（ｎｕｃｌｅｕｓ）㊁胞液（ｃｙｔｏｓｏｌ）等㊂分子功能（ＭＦ）有１５个，主要涉及到蛋白质同源二聚化活性（ｐｒｏｔｅｉｎｈｏｍｏｄｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎａｃｔｉｖｉｔｙ）㊁细胞因子活性（ｃｙｔｏｋｉｎｅａｃｔｉｖｉｔｙ）等㊂本文选出ＢＰ㊁ＣＣ㊁ＭＦ的前１０项富集结果做图４㊂２．６㊀ＫＥＧＧ富集分析ＫＥＧＧ富集分析后，得到１０４条富集结果，包括信号转导通路（ＴＮＦｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ㊁ＰＩ３Ｋ⁃Ａｋｔｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ㊁ＭＡＰＫｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ㊁ＨＩＦ⁃１ｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ）㊁毒感染相关通路（ＩｎｆｌｕｅｎｚａＡ㊁３８３第３期㊀陈元堃，等．热毒宁注射液治疗新型冠状病毒肺炎的活性成分与潜在作用机制初探ＨＴＬＶ⁃Ｉｉｎｆｅｃｔｉｏｎ㊁Ｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）㊁肿瘤相关通路（Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃｃａｎｃｅｒ㊁Ｓｍａｌｌｃｅｌｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ）等，说明热毒宁注射液可能通过以上通路对ＣＯＶＩＤ⁃１９有作用㊂本文选出ＫＥＧＧ的前１０项富集结果作图５㊂２．７㊀分子对接目前，多数研究认为配体与受体在结合构象稳定的情况下能量越低就表明此受体与配体发生作用的可能越大㊂通过对接后发现，芹菜素㊁木犀草素与ＳＡＲＳ⁃ＣｏＶ⁃２３ＣＬ水解酶结合的能量最低，分别为－３２．２１７ｋＪ／ｍｏｌ㊁－３０．９６２ｋＪ／ｍｏｌ㊂此次研究中的主要成分与ＳＡＲＳ⁃ＣｏＶ⁃２３ＣＬ水解酶的结合能都远远小于－５ｋＪ／ｍｏｌ，与目前报道中具有抗ＣＯＶＩＤ⁃１９作用的化学药物瑞德西韦㊁利托那韦等相似，具体见表１㊂以上结果表明热毒宁注射液中的主要成分与ＳＡＲＳ⁃ＣｏＶ⁃２３ＣＬ水解酶的结合形成的构象能量极低㊁结构较稳定㊁活性高，具体对接情况见图６㊂模块1模块2图３㊀蛋白互作网络Ｆｉｇｕｒｅ３㊀Ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｎｅｔｗｏｒｋ图４㊀ＧＯ富集结果Ｆｉｇｕｒｅ４㊀ＧＯｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔｒｅｓｕｌｔｓ４８３广东药科大学学报㊀第３６卷㊀图５㊀ＫＥＧＧ富集结果Ｆｉｇｕｒｅ５㊀ＫＥＧＧｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔｒｅｓｕｌｔｓ３㊀讨论本研究筛选出热毒宁注射液中符合标准的成分有５０个，对应的靶点有２３１个，与ＣＯＶＩＤ⁃１９重合的有４３个，表明了热毒宁注射液通过多成分㊁多靶点的方式来防治ＣＯＶＩＤ⁃１９㊂从药物⁃活性成分⁃靶点网络中发现，涉及靶点最多的化合物均属于黄酮类化合物，主要为芹菜素（Ａｐｉｇｅｎｉｎ）㊁槲皮素（Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）㊁木犀草素（Ｌｕｔｅｏｌｉｎ），且这３种化合物度值均较大，表明其可能为发挥防治作用的主要化合物㊂多项研究指出，表１㊀热毒宁注射液关键成分与抗ＣＯＶＩＤ⁃１９化学药物与ＳＡＲＳ⁃ＣｏＶ⁃２３ＣＬ水解酶的结合能Ｔａｂｌｅ１㊀ＢｉｎｄｉｎｇｅｎｅｒｇｙｏｆｋｅｙｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｉｎＲｅｄｕｎｉｎｇｉｎｊｅｃｔｉｏｎａｎｄａｎｔｉ⁃ＣＯＶＩＤ⁃１９ｃｈｅｍｉｃａｌｄｒｕｇｗｉｔｈＳＡＲＳ⁃ＣｏＶ⁃２３ＣＬｈｙｄｒｏｌａｓｅＮＯ化合物化学式相对分子质量ＣＡＳＳＡＲＳ⁃ＣｏＶ⁃２结合能／（ｋＪ㊃ｍｏｌ－１）１芹菜素Ｃ１５Ｈ１０Ｏ５２７０．２４５２０－３６－５３ＣＬ水解酶－３２．２１７２木犀草素Ｃ１５Ｈ１０Ｏ６２８６．２４４９１－７０－３３ＣＬ水解酶－３０．９６２３槲皮素Ｃ１５Ｈ１４Ｏ９３３８．２７６１５１－２５－３３ＣＬ水解酶－３０．５４３４山奈酚Ｃ１５Ｈ１０Ｏ６２８６．２４５２０－１８－３３ＣＬ水解酶－３０．５４３５异鼠李素Ｃ１６Ｈ１２Ｏ７３１６．２６４８０－１９－３３ＣＬ水解酶－３０．５４３６马钱苷酸Ｃ１６Ｈ２４Ｏ１０３７６．３６２２２５５－４０－９３ＣＬ水解酶－２９．７０６７豆甾醇Ｃ２９Ｈ４８Ｏ４１２．６９８３－４８－７３ＣＬ水解酶－２８．９００８β⁃谷甾醇Ｃ２９Ｈ５０Ｏ４１４．７１８３－４６－５３ＣＬ水解酶－２７．２１６９瑞德西韦Ｃ２７Ｈ３５Ｎ６Ｏ８Ｐ６０２．５８１８０９２４９－３７－３３ＣＬ水解酶－３２．６３５１０利托那韦Ｃ３７Ｈ４８Ｎ６Ｏ５Ｓ２７２０．９６１５５２１３－６７－５３ＣＬ水解酶－３１．７９８１１洛匹那韦Ｃ３７Ｈ４８Ｎ４Ｏ５６２８．８１９２７２５－１７－０３ＣＬ水解酶－３０．９６２１２硝唑尼特Ｃ１２Ｈ９Ｎ３Ｏ５Ｓ３０７．２８５５９８１－０９－４３ＣＬ水解酶－２７．１９６１３利巴韦林Ｃ８Ｈ１２Ｎ４Ｏ５２４４．２３６７９１－０４－５３ＣＬ水解酶－２５．１０４１４氯喹Ｃ１８Ｈ２６ＣｌＮ３３１９．８７１９８５１３ＣＬ水解酶－２４．２６７芹菜素-S A R S -C o V -23C L 水解酶芹菜素-A C E 2木犀草素-S A R S -C o V -23C L 水解酶木犀草素-A C E 2图６㊀ＳＡＲＳ⁃ＣｏＶ⁃２３ＣＬ以及ＡＣＥ２与芹菜素和木犀草素分子对接情况Ｆｉｇｕｒｅ６㊀ＳＡＲＳ⁃ＣｏＶ⁃２３ＣＬｈｙｄｒｏｌａｓｅａｎｄＡＣＥ２ｄｏｃｋｉｎｇｗｉｔｈＡｐｉｇｅｎｉｎａｎｄＬｕｔｅｏｌｉｎ５８３第３期㊀陈元堃，等．热毒宁注射液治疗新型冠状病毒肺炎的活性成分与潜在作用机制初探黄酮类化合物对柯萨奇病毒㊁流感病毒及乙肝病毒在内的多种病毒具有较强的抵抗作用［１４］㊂芹菜素是一种潜力极大的天然化合物，其具有抗炎㊁抗癌㊁抗菌及抗病毒等多种功效［１５］，对口蹄疫病毒有较强的抑制作用，且可阻碍病毒的翻译活动［１６］㊂木犀草素因结构中含５⁃ＯＨ等，故表现出优越的抗病毒效果，如其对ＨＩＶ⁃１中的蛋白酶及整合酶有较强的抑制作用，还具有抗肿瘤㊁抗炎镇痛㊁抗菌㊁调节免疫系统的作用［１７］㊂此外，槲皮素是一种明星化合物，近几年来对其研究较多［１８］㊂槲皮素可通过阻碍病毒受体复合物进入机体细胞内，阻断病毒的生活周期，最后导致其死亡［１９］㊂ＬＥＥ等［２０］指出，槲皮素可通过抑制ＴＬＲ⁃３的表达来影响炎症转录因子，从而起到抗ＨＳＶ⁃１的效果㊂综上所述，热毒宁注射液中主要化合物均具较强的抑制病毒作用，进一步证明了热毒注射液的抗病毒功效㊂在ＰＰＩ网络图中，度值大于节点平均度值的靶点有ＩＬ⁃６㊁ＣＡＳＰ３㊁ＭＡＰＫ８㊁ＭＡＰＫ１等㊂ＩＬ⁃６为机体内参与信息传递及调节激活免疫细胞的一种细胞因子，ＩＬ⁃６的表达失调会导致多种疾病的发生［２１］㊂程林等［２２］发现，在ＨＩＶ患者体内ｓＰＤ⁃１的过表达可能与ＨＩＶ⁃１诱导ＩＬ⁃６分泌有关，从而使患者免疫系统清除ＨＩＶ⁃１这一活动受到阻碍㊂昌仲勇等［２３］发现联合血清ＩＬ⁃６㊁ｈｓ⁃ＣＲＰ㊁ＰＣＴ检查对ＣＯＶＩＤ⁃１９患者的预后及死亡风险具有很好的判断作用㊂ＣＡＳＰ３为多条凋亡途径下游的共同效应成分，在多种细胞的凋亡中处于核心地位，被认为是执行死亡的蛋白酶㊂药物可通过影响ＣＡＳＰ３从而起到抗病毒㊁抗肿瘤等作用［２４］㊂刘晓婷等［２５］发现黄芩苷可通过影响ＣＡＳＰ３与ＣＡＳＰ８的表达来改善流感病毒诱导细胞凋亡的情况㊂ＭＡＰＫ８㊁ＭＡＰＫ１均属于丝裂原活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）家族里的成员，其可在多种环境应激中被激活，如ＤＮＡ损伤㊁氧化应激㊁病毒感染㊁癌症等［２６］㊂ＭＩＺＵＴＡＮＩ等［２７］发现在ＳＡＲＳ⁃ＣｏＶ感染的细胞中Ｐ３８ＭＡＰＫ㊁ＭＡＰＫＡＰＫ⁃２㊁ＨＳＰ⁃２７㊁ＣＲＥＢ㊁ｅＩＦ４Ｅ的下游靶点均可被磷酸化，同时在其他冠状病毒的感染中ＭＡＰＫ家族成员也可被激活㊂ＧＯ与ＫＥＧＧ的富集结果主要涉及细菌感染㊁病毒感染㊁肿瘤等方面，说明热毒宁注射液中的多种活性组分可能通过对ＣＯＶＩＤ⁃１９中失衡的通路进行协同调控，从而起到防治的作用㊂陈跃宣等［２８］利用热毒宁联合阿奇霉素治疗支原体肺炎的患者时发现，两者联合治疗时疗效好且可使患者血清中的促炎因子㊁抗炎因子及细胞的免疫指标得到改善㊂赵志勇等［２９］得出用热毒宁与大剂量的丙种球蛋白来联合治疗患儿的急性重症病毒性肺炎的疗效好㊁安全性高㊁预后佳，且较以往的病程大大缩短㊂本研究得出结果进一步证实了热毒宁注射液在肺部疾病中的疗效㊂从分子对接的结果可知，芹菜素㊁木犀草素㊁槲皮素㊁山奈酚等与目前临床上推荐的对ＣＯＶＩＤ⁃１９有效的化学药物的结合能相近㊂有研究提出，ＳＡＲＳ⁃ＣｏＶ⁃２及ＳＡＲＳ⁃ＣｏＶ表达的Ｓ蛋白与机体中的血管紧张素转化酶（ＡＣＥ２）结合后可使病毒入侵，从而进一步导致疾病的发生㊂因此，本研究将热毒宁注射液中的主要成分（芹菜素㊁木犀草素）与ＡＣＥ２来进行分子对接㊂对接后发现芹菜素㊁木犀草素与ＡＣＥ２的结合能均小于－５，分别为２４．２６７ｋＪ／ｍｏｌ㊁２３．８４９ｋＪ／ｍｏｌ㊂综上所述，研究中结合网络药理学与分子对接的方法对热毒宁注射液抗ＣＯＶＩＤ⁃１９的化学成分㊁靶点㊁作用机制以及主要成分与ＳＡＲＳ⁃ＣｏＶ⁃２水解酶和ＡＣＥ２的结合能作出了初步的预测，为日后的抗新型肺炎药物的研发提供了一个思路㊂但本研究还存在有一定的局限性，如数据库不完整㊁忽略了中药中成分的含量㊁在机体内其他药代动力学的作用等㊂对于以上存在的这些问题，后期可通过进行药效和临床治疗效果的探究，更深入地验证，为新药物的研发提供新思路及方向㊂参考文献：［１］ＳＨＡＨＳＳ．Ａｃｏｍｍｅｎｔａｒｙｏｎ＂ＷｏｒｌｄＨｅａｌｔｈＯｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ㊀ｄｅｃｌａｒｅｓｇｌｏｂａｌｅｍｅｒｇｅｎｃｙ：ａｒｅｖｉｅｗｏｆｔｈｅ２０１９ｎｏｖｅｌｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ（ＣＯＶＩＤ⁃１９）＂［Ｊ］．ＩｎｔＪＳｕｒｇ，２０２０，７６：１２８⁃１２９．［２］滕俊，姜云宁，柴欣楼，等．中西医结合治疗新型冠状病毒肺炎研究进展［Ｊ／ＯＬ］．中医学报：１⁃１３［２０２０⁃０３⁃０６］．ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／４１．１４１１．Ｒ．２０２００３０５．０７３７．００２．ｈｔｍｌ．［３］李天志，徐国纲．新型冠状病毒肺炎诊治研究进展［Ｊ／ＯＬ］．解放军医学杂志：１⁃９［２０２０⁃０３⁃０７］．ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．Ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／１１．１０５６．Ｒ．２０２００３０６．１４３２．００２．ｈｔｍｌ．［４］王薇，王玉伟，马爽，等．各省中医治疗策略及中医治疗参与率与新型冠状病毒肺炎治愈效果初探［Ｊ／ＯＬ］．世界中医药：１⁃１４［２０２０⁃０３⁃０７］．ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／１１．５５２９．Ｒ．２０２００３０６．１３４５．００４．ｈｔｍｌ．［５］任建坤，赖俊宇，马文辉．新型冠状病毒肺炎的中医特点及临证思路［Ｊ／ＯＬ］．中医临床研究：１⁃３［２０２０⁃０３⁃０７］．ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／１１．５８９５．Ｒ．２０２００３０５．１２３１．００４．ｈｔｍｌ．［６］国家卫生健康委员会．新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第六版）［Ｊ］．天津中医药，２０２０，３７（３）：２４２⁃２４６．６８３广东药科大学学报㊀第３６卷㊀［７］熊微，冉京燕，谢雪佳，等．治疗新型冠状病毒肺炎中成药的药理作用与临床应用［Ｊ／ＯＬ］．医药导报：１⁃２６［２０２０⁃０３⁃０６］．ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／４２．１２９３．ｒ．２０２００２２６．１８１５．００２．ｈｔｍｌ．［８］李思聪，冯祥，毕磊，等．新型冠状病毒肺炎诊疗方案中成药选用分析与药理研究进展［Ｊ／ＯＬ］．中药材：１⁃１０［２０２０⁃０３⁃０６］．ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／４４．１２８６．ｒ．２０２００３０２．１３５９．００５．ｈｔｍｌ．［９］ＡＨＭＥＤＳＳ．Ｓｙｓｔｅｍｓｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｐｐｒｏａｃｈｏｆｍｏｌｅｃｕｌａｒｄｅｓｃｒｉｐｔｏｒｓｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ：ｏｐｔｉｍａｌｄｅｓｃｒｉｐｔｏｒｓｆｏｒｏｒａｌｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＰＬｏＳＯｎｅ，２０１２，７（７）：ｅ４０６５４．［１０］ＵＲＳＵＯ，ＲＡＹＡＮＡ，ＧＯＬＤＢＬＵＭＡ，ｅｔａｌ．Ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇｄｒｕｇ⁃ｌｉｋｅｎｅｓｓ［Ｊ］．ＷｉｒｅｓＣｏｍｐｕｔＭｏｌＳｃｉ，２０１１，１（５）：７６０⁃７８１．［１１］ＴＲＯＴＴＯ．ＡｕｔｏＤｏｃｋＶｉｎａ：ｉｍｐｒｏｖｉｎｇｔｈｅｓｐｅｅｄａｎｄａｃｃｕｒａｃｙｏｆｄｏｃｋｉｎｇｗｉｔｈａｎｅｗｓｃｏｒｉｎｇｆｕｎｃｔｉｏｎ，ｅｆｆｉｃｉｅｎｔｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ，ａｎｄｍｕｌｔｉｔｈｒｅａｄｉｎｇ［Ｊ］．ＪＣｏｍｐｕｔＣｈｅｍ，２０１０，３１（２）：４５５⁃４６１．［１２］徐森楠，庄莉，翟园园，等．基于网络药理学研究二至丸防治骨质疏松症的物质基础与作用机制［Ｊ］．中国药学杂志，２０１８，５３（２２）：１９１３⁃１９２０．［１３］宗阳，董宏利，陈婷，等．基于网络药理学黄芩⁃黄连药对治疗２型糖尿病作用机制探讨［Ｊ］．中草药，２０１９，５０（４）：８８８⁃８９４．［１４］赵薪苑，陈婧，方建国，等．中药和天然药物中黄酮抗病毒活性及其机制研究进展［Ｊ］．医药导报，２０１８，３７（４）：４１０⁃４１５．［１５］郭霜，张晚霞，余薇．芹菜素药理作用的研究进展［Ｊ］．湖北科技学院学报（医学版），２０１６，３０（３）：２７３⁃２７６．［１６］ＱＩＡＮＳｕｈｏｎｇ，ＦＡＮＷｅｎｃｈｕｎ，ＱＩＡＮＰｉｎｇ，ｅｔａｌ．ＡｐｉｇｅｎｉｎｒｅｓｔｒｉｃｔｓＦＭＤＶｉｎｆｅｃｔｉｏｎａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｓｖｉｒａｌＩＲＥＳｄｒｉｖｅｎｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ］．Ｖｉｒｕｓｅｓ，２０１５，７（４）：１６１３⁃１６２６．［１７］赵长祺，郭志义．木犀草素的药理作用研究进展［Ｊ］．承德医学院学报，２０１５，３２（２）：１４８⁃１５０．［１８］马纳，李亚静，范吉平．槲皮素药理作用研究进展［Ｊ］．辽宁中医药大学学报，２０１８，２０（８）：２２１⁃２２４．［１９］ＷＵＳｈｅｎｇｎａｎ，ＣＨＩＡＮＧＨｕａｎｇｔｉｎｇ，ＳＨＥＮＡｉｙｕ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ㊀ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｑｕｅｒｃｅｔｉｎ，ａｎａｔｕｒａｌｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｉｃｆｌａｖｏｎｏｉｄ，ｏｎＬ⁃ｔｙｐｅｃａｌｃｉｕｍｃｕｒｒｅｎｔｉｎｐｉｔｕｉｔａｒｙｔｕｍｏｒ（ＧＨ３）ｃｅｌｌｓａｎｄｎｅｕｒｏｎａｌＮＧ１０８⁃１５ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＪＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌ，２００３，１９５（２）：２９８⁃３０８．［２０］ＬＥＥＳ，ＬＥＥＨＨ，ＳＨＩＮＹＳ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅａｎｔｉ⁃ＨＳＶ⁃１ｅｆｆｅｃｔｏｆ㊀ｑｕｅｒｃｅｔｉｎｉｓｄｅｐｅｎｄｅｎｔｏｎｔｈｅｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＴＬＲ⁃３ｉｎＲａｗ２６４７ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＡｒｃｈＰｈａｒｍＲｅｓ，２０１７，４０（５）：６２３⁃６３０．［２１］ＪＯＮＥＳＳＡ．ＲｅｃｅｎｔｉｎｓｉｇｈｔｓｉｎｔｏｔａｒｇｅｔｉｎｇｔｈｅＩＬ⁃６ｃｙｔｏｋｉｎｅｆａｍｉｌｙｉｎｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｄｉｓｅａｓｅｓａｎｄｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．ＮａｔＲｅｖＩｍｍｕｎｏｌ，２０１８，１８（１２）：７７３⁃７８９．［２２］程林，李迎飞，陈伟梅，等．ＨＩＶ⁃１感染通过诱导ＩＬ⁃６促进可溶性ＰＤ⁃１的表达［Ｊ］．中国艾滋病性病，２０１９，２５（３）：２３１⁃２３５．［２３］昌仲勇，杨为斌，王强，等．血清ｈｓ⁃ＣＲＰ㊁ＩＬ⁃６㊁ＰＣＴ对新型冠状病毒肺炎患者的诊断及预后评估的临床意义［Ｊ］．现代药物与临床，２０２０，３５（３）：４１７⁃４２０．［２４］ＬＩＮＢｏ，ＺＨＵＭｉｎｇｙｕｅ，ＷＡＮＧＷｅｎｔｉｎｇ，ｅｔａｌ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｂａｓｉｓｆｏｒａｌｐｈａｆｅｔｏｐｒｏｔｅｉｎ⁃ｍｅｄｉａｔｅｄｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｃａｓｐａｓｅ⁃３ａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＩｎｔＪＣａｎｃｅｒ，２０１７，１４１（７）：１４１３⁃１４２１．［２５］刘晓婷，张沂，顾立刚，等．流感病毒Ｈ１Ｎ１感染Ａ５４９细胞诱导凋亡及黄芩苷干预作用的研究［Ｊ］．中国药理学通报，２０１５，３１（７）：９３６⁃９３９．［２６］ＧＵＯＹａｎｊｕｎ，ＰＡＮＷｅｉｗｅｉ，ＬＬＵＳｈｅｎｇｂｉｎｇ，ｅｔａｌ．ＥＲＫ／ＭＡＰＫｓｉｇｎａｌｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙａｎｄｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ［Ｊ］．ＥｘｐＴｈｅｒＭｅｄ，２０２０，１９（３）：１９９７⁃２００７．［２７］ＭＩＺＵＴＡＮＩＴ，ＦＵＫＵＳＨＩＳ，ＳＡＪＩＯＭ，ｅｔａｌ．Ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｏｆ㊀ｐ３８ＭＡＰＫａｎｄｉｔｓｄｏｗｎｓｔｒｅａｍｔａｒｇｅｔｓｉｎＳＡＲＳｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ⁃ｉｎｆｅｃｔｅｄｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎ，２００４，３１９（４）：１２２８⁃１２３４．［２８］陈跃宣，马洪梅．热毒宁联合阿奇霉素对支原体肺炎患儿抗炎㊁促炎因子及免疫功能的影响［Ｊ］．海南医学院学报，２０１４，２０（１２）：１７０２⁃１７０４．［２９］赵志勇，韩晶，李贤伟，等．热毒宁注射液联合大剂量丙种球蛋白治疗小儿急性重症病毒性肺炎疗效观察［Ｊ］．现代中西医结合杂志，２０１６，２５（２９）：３２６４⁃３２６６．（责任编辑：幸建华）７８３第３期㊀陈元堃，等．热毒宁注射液治疗新型冠状病毒肺炎的活性成分与潜在作用机制初探。

利用网络药理学方法研究热毒宁注射液抗流感病毒的分子作用机制

利用网络药理学方法研究热毒宁注射液抗流感病毒的分子作用机制张新庄1萧伟2,*徐筱杰3,*王振中2曹亮2孙兰2(1南京中医药大学药学院,南京210046;2康缘药业中药制药新技术国家重点实验室,江苏连云港222002;3北京大学化学与分子工程学院,北京100871)摘要:采用分子对接、网络分析预测热毒宁注射液抗流感病毒的分子作用机制,并通过已建立的体外流感病毒神经氨酸酶筛选模型对网络预测结果验证.结果表明,热毒宁注射液所含化合物在化学空间上具有类药性质;网络分析揭示出热毒宁注射液是通过与流感病毒吸附、脱壳、复制以及释放等环节的多个蛋白相互作用发挥抗流感病毒作用的;对于预测的15个活性分子而言,实验结果初步证实,对A 型流感病毒,木犀草素呈现较强的抑制作用,槲皮素则呈现较弱的抑制作用,这也初步证实了预测结果.关键词:网络药理学;热毒宁;流感病毒;中药;神经氨酸酶中图分类号:O641Study on Mechanism of the Reduning Injection on the Influenza VirusUsing Network Pharmacology MethodZHANG Xin-Zhuang 1XIAO Wei 2,*XU Xiao-Jie 3,*WANG Zhen-Zhong 2CAO Liang 2SUN Lan 2(1College of Pharmacy,Nanjing University of Chinese Medicine,Nanjing 210046,P .R.China ;2National Key Laboratory of Pharmaceutical New Technology for Chinese Medicine,Kanion Pharmaceutical Corporation,Lianyungang 222002,Jiangsu Province,P .R.China ;3College of Chemistry and Molecular Engineering,Peking University,Beijing 100871,P .R.China )Abstract:The mechanisms of the Reduning injection on the influenza virus were studied by computer methods at the molecular level,including docking and network analysis.A neuraminidase (NA)activity assay was used to verify the predicted results in vitro .Results show that most of the compounds in the Reduning injection exhibit good drug-like properties.The mechanism of the Reduning injection may be that it affects viral entry,RNA synthesis,or viral release,which limits influenza virus replication.Potential active molecules of the Reduning injection were found by analyzing the network parameters of compound-target interaction networks.The experimental results suggest that of the potential active molecules,luteolin displayed significant inhibitory activity toward the influenza A virus,while quercetin proved less effective,which supports the predicted results.Key Words:Network pharmacology;Reduning;Influenza virus;Traditional Chinese medicine;Neuraminidase[Article]doi:10.3866/PKU.WHXB201304171物理化学学报(Wuli Huaxue Xuebao )Acta Phys.-Chim.Sin .2013,29(7),1415-1420July R eceived:February 22,2013;Revised:April 17,2013;Published on Web:April 17,2013.∗Corresponding authors.XIAO Wei,Email:xw_kanion@;Tel:+86-518-85521956.XU Xiao-Jie,Email:xiaojxu@;Tel:+86-10-62757456.The project was supported by the “Innovative Drug Development ”Key Project of the Ministry of Science and Technology of China (2011ZX09304).国家科技部“重大新药创制”项目(2011ZX09304)资助ⒸEditorial office of Acta Physico-Chimica Sinica1引言流感是常见的急性呼吸道感染疾病,其主要病原体为流感病毒,属于正粘病毒科的含包膜的RNA病毒.由于其基因的高突变性以及人体对新病毒株缺乏免疫性,每年爆发的流感病毒会造成平均2-4万人死亡,并给社会带来严重的经济负担.1,2虽然现1415Vol.29 Acta Phys.-Chim.Sin.2013有的药物有生物疫苗、神经氨酸酶抑制剂(oseltami-vir和zanamivir)、M2离子通道抑制剂(金刚烷胺类)等可以预防和治疗流感病毒感染,3,4但由于流感病毒高抗原漂移性,这些针对单靶点的抗流感药物都面临着耐药性和滞后性的问题.中药,作为治疗流感症状(咳嗽、咽喉痛、头痛、流鼻涕、发烧等)的另一种治疗手段已受到研究者的广泛关注,5其中江苏康缘药业于2005年研发的用于治疗上呼吸道感染的热毒宁注射液呈现出良好的市场前景.前期的化学成分和药理作用研究表明,主要含有环烯醚萜类、黄酮类和有机酚酸类,对流感病毒呈现一定抑制作用,6但其多成分、多靶点以及多途径的作用机制使得其抗流感病毒作用机制研究面临一定的挑战.最近几年,作为基于生物信息学和系统生物学的方法,网络药理学被应用到生命科学的多个领域,如新药靶的识别、先导化合物的发现、作用机制的研究、药物临床前疗效和安全性评估等,7-11其中以分子对接、药-靶网构建以及网络特征分析为基础的多靶点整体调控的思维方法正逐渐被用于预测中药主要活性成分群和潜在靶标群,阐述中药作用机制.8,12-16这种基于系统思维的研究方法更符合中医药的思维模式:调控失衡的生物系统(疾病)恢复到固有平衡.因此,本文尝试用网络药理学方法对热毒宁注射液抗流感病毒的分子作用机制进行研究,进而为后续的临床使用提供理论支撑.2实验方法2.1分子数据集的收集和处理从SciFinder数据库收集热毒宁注射液中78个小分子化合物(见Supporting Information)的分子结构,导入Cerius2(4.10版)软件加氢后,选用CHARMm力场进行构象优化,优化时能量阈值设定为1×10-3J·mol-1,然后再将优化后的分子结构导入Discovery Studio(2.5版)中的general purpose模块来计算相关描述符.此外,根据流感病毒在宿主体内的复制过程以及药物治疗方法,选择了11个比较重要的靶蛋白(表1),并按照分辨率不高于0.25nm原则从RCSB 的PDB库17中下载含有原配体的靶蛋白非模建的晶体结构,导入Discovery studio2.5中的Clean protein 和Forcefiled中的CHARMm力场进一步对这些靶蛋白进行修饰、加氢以及自动分配原子类型和部分电荷,并根据靶蛋白复合物中配体的中心点坐标确定结合的活性位点.2.2分子对接与打分将处理过的靶蛋白和化合物分别导入Auto Dock4.0进行半柔性对接计算.对接时,对于每个化合物采用拉马克遗传算法(LGA)进行构象采样,具体参数设置如下:以蛋白-配体复合物中配体分子的坐标为盒子中心,格点数为4nm×4nm×4nm,格点间隔为0.0375nm,初始种群数为150,随机选取起始构象和取向,平移步长为0.2nm,旋转步长为50°,突变率为0.02,交叉率为0.8,局部搜索频率为0.06,其余均为默认设置.2.3分子靶蛋白作用网络的构建根据分子对接计算结果,以靶蛋白复合物中的原配体对接分数为阈值,打分高于此阈值的小分子即认为具有活性,再从中抽取较高得分(score≥5)的分子与靶蛋白导入Cytoscape2.8.1网络分析软件,18构建热毒宁注射液分子与靶蛋白作用网络(见图1),其中分子、靶蛋白用节点(node)表示,边(edge)表示分子与靶蛋白间的相互关系,某个分子与某个靶蛋表1与流感病毒复制相关的蛋白Table1Proteins related to the replication of influenzaProteinHANA(flu A)NA(flu B)PB2M2NPRdRpOMP decarboxylase IMP dehydrogenase2 IMP dehydrogenase1 SAHFull namehemagglutinininfluenza A virus neuraminidaseinfluenza B virus neuraminidasepolymerase basic protein2influenza A virus M2proteinnucleoproteinRNA polymeraseorotidine5ʹ-monophosphate decarboxylaseinosine-5ʹ-monophosphate dehydrogenase2inosine-5ʹ-monophosphate dehydrogenase1human S-adenosylhomocysteine hydrolasePDB code3EYM1XOE1NSD2VQZ2RLF3RO53HW41EIX1NF71JCN1LI41416张新庄等:利用网络药理学方法研究热毒宁注射液抗流感病毒的分子作用机制No.7白存在相互作用,则它们就会通过edge 连接起来.之后进一步通过Cytoscape 软件中的network analyzer 插件分析网络特征:网络度(degree)、介数(between-ness)、网络密度(network density)、最短路径等,预测热毒宁注射液可能的活性分子群、潜在靶蛋白等.2.4抗流感病毒活性的测定化合物的细胞毒性测定:取培养至80%-90%密度的Madin-Darby canine kidney (MDCK)细胞,0.25%胰酶消化后,用含10%胎牛血清(FBS)的Dul-becco ʹs modified Eagle medium (DMEM)调整细胞密度为1.5×105mL -1,每孔接种100µL 细胞悬液于96孔板上,CO 2培养箱中培养24h 后,弃上清,加150µL 不同浓度的含药细胞维持液(药物从500µmol ·mL -1起连续5倍梯度稀释6个梯度),CO 2培养箱中培养72h,倒置显微镜下观察药细胞病变效应(CPE),再每孔加入25µL alamarBlue ®液(Invitro-gen),继续孵育2h,用M2e 酶标仪于激发光570nm,发射光595nm 处荧光检测alamarBlue ®的还原情况,并以F (样品组)/F (正常对照组)的比值作为细胞存活率(F 为荧光强度),计算药物对细胞的半数毒性浓度(CC 50).抗流感病毒活性测定:19取培养至80%-90%密度的MDCK 细胞,0.25%胰酶消化,再用含10%FBS 的DMEM 调整细胞密度为1.5×105mL -1,接种于96孔板中,每孔接种100µL 细胞悬液,CO 2培养箱中培养24h 后,弃上清,加入流感病毒(A/PR/8/34H1N1)液,CO 2细胞培养箱中孵育1h 后,弃上清,PBS 洗涤后,加入150µL 不同浓度的含药细胞维持液(药物从100µmol ·mL -1起连续5倍稀释6个梯度),继续培养48h 后,倒置显微镜下观察细胞病变效应(CPE).然后取上清40µL 加入到含20µL 底物(60µmol ·mL -1MUNANA)MES 溶液的96孔黑色微量板中,CO 2细胞培养箱孵育60min,再加入100µL 终止液(0.014µmol ·mL -1KOH 的83%乙醇溶液),在激发波长为355nm,发射波长485nm 处测定各孔的荧光强度.设正常对照孔,病毒感染对照孔(酶活对照孔).计算不同浓度的化合物对流感病毒的抑制率.阳性对照药为利巴韦林.I nhibition rate =æèçöø÷1-F sample -F blank enzyme blank ×100%采用Origin 8.0软件分别预测药物的CC 50和对病毒的半数抑制量(EC 50),并进一步计算出化合物的选择指数(SI).(此部分的验证实验是委托中国科学院武汉病毒所完成测试,进一步的重复验证实验仍在开展过程中.)3结果与讨论3.1化学成分分子描述符的分析从表2中各分子描述符的平均值及其中位数可以看出,热毒宁注射液中大部分分子都没有违反Lipinski 的“rule of 5”规则,20表明其具有较好的类药性;而从分子极性表面积(PSA)(平均值为1.3202(≤1.4nm 2))和可旋转键数(rotatable bonds)(平均值为4.68(≤7),中位数为5)来看,热毒宁注射液中的分子图1热毒宁注射液所含化合物-靶蛋白(D-T)的作用网络Fig.1Compounds in Reduning injection-target protein (D-T)networkThe circles represent the molecules of Reduning injection,and the diamonds represent target proteins related on the replication of influenzavirus.1417Vol.29Acta Phys.-Chim.Sin.2013大多都具有较好的生物利用度(≥20%).213.2分子-靶蛋白网络特征分析网络分析既可以提供生物网络的一般特征,同时也能计算具体节点的拓扑学特征,进而有助于从复杂关系中获得潜在的生物信息.22对分子-靶标网络的总体特征分析表明(见表3),热毒宁注射液中既存在一个分子与多个靶蛋白存在较强相互作用,同时也存在不同分子作用同一个靶蛋白的现象,显示了热毒宁注射液的多活性化合物多靶点作用特点,也正符合了中药作用的特点.节点的网络度(degree)和介数(betweenness)常用于网络特征分析以评估生物网络中的药靶,23,24故又对D-T 网络中各分子与靶蛋白的作用情况做了进一步分析,部分重要节点的网络特征值见表4.从D-T 网络各节点的介数、网络度来看,热毒宁注射液抗流感病毒机制之一可能是其15个活性分子分别与流感病毒的吸附、脱壳、复制和释放等多个环节相互作用,从而降低流感病毒载量.而从化合物的网络特征分析来看,luteolin 对HA 、NA (flu A)、IMP dehydrogenase 1、IMP dehydrogenase 2、SAH 蛋白有很强的相互作用,而artemisinin 与HA 、M 2、NP 、RdRp 、IMP dehydrogenase 1蛋白存在较强的相互作用;且它们也具有较高的介数,所以推测其可能是热毒宁注射液抗流感病毒的活性成分.此外,quer-cetin 虽有高的网络度,但其介数比较低,故其对流感病毒的抑制作用可能会较弱.3.3抗流感病毒测定结果表2热毒宁注射液中78个分子的主要分子描述符Table 2Key molecular descriptors of 78compounds inReduning injectionDescriptor MWNum.of H-bond acceptors Num.of H-bond donors VmNum.of rotatable bonds PSA AlogPNum_RingsRule of 5violationsMean 343.088.034.30216.444.68132.020.212.421.15Min 138.121081.2909.23-3.8100Max 696.651710436.6316265.523.0553Median 354.3195223.635149.64-0.1021Network D-TAverage degree3.714Average shortest path3.234Network density0.045Network centralization0.275Network heterogeneity1.017表3D-T 网络总体特征Table 3Topological features of the D-T networkNodeHAIMP dehydrogenase 1IMP dehydrogenase 2RdRpOMP decarboxylase M 2NA (flu A)PB 2NPBetweenness 0.3160.3100.0980.2620.1510.1880.2120.0770.077Degree 554433222Node luteolin artemisinin quercetin cynarosideBetweenness 0.3880.5800.0530.222Degree 5533表4热毒宁注射液中D-T 网络中部分节点的网络特征分析Table 4Network features of part nodes in the D-T network in Reduning injection图2热毒宁注射液中部分化合物体外抗流感病毒活性Fig.2In vitro anti-influenza viral activity of part of compounds in Reduninginjection张新庄等:利用网络药理学方法研究热毒宁注射液抗流感病毒的分子作用机制No.7生物网络分析表明,多数情况下,疾病的产生是由于多个蛋白的“扰动”而不是单个靶蛋白的“修饰”,故对网络药理学预测结果的实验验证需要通过整体行为来进行评估.25,26在对预测出的15个活性分子的体外细胞实验结果表明高网络度和高介数木犀草素(luteolin)呈现较强的抑制A型流感病毒活性(CC50=701.219µmol·mL-1,EC50=28.44µmol·mL-1, SI=24.66)、槲皮素(quercelin)(高网络度和低介数)呈现一定的抑制病毒活性(EC50=91.284µmol·mL-1, SI>5.48)(见图2).4结论通过对分子-靶标的网络特征分析发现热毒宁注射液中的多数分子具有多靶点特性,并根据靶蛋白的网络特征预测其抗流感病毒的分子作用机制为通过HA、NA、M2、RdRp等蛋白,从而影响病毒的吸附、脱壳、复制以及释放等.根据预测出的15个活性分子,通过体外细胞实验对网络预测进行了验证,结果表明,对于A型流感病毒,木犀草素呈现较强的抑制作用,而预测结果表明木犀草素与HA、NA以及病毒复制时的酶都有较强的作用,且在整个网络的信息流中处于重要的地位,这也比较符合实验结果.网络药理学研究方法作为中药研究的一种新思路,虽存在不少有待解决的问题,但其借助网络分析预测出中药基于信号通路模式的作用机制,并通过对信号通路终端因子和关键靶蛋白实验验证来阐明中药作用机制,26,27从而来大大减少实验工作量,同时也从新的层面为中药赋予新的科学内涵.Supporting Information:The chemical information of chemical molecules in Reduning injection and the biological test results of some compounds have been included.This infor-mation is available free of charge via the internet at http://www. 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Phys.-Chim.Sin.2013doi:10.1021/tx200211v(22)Berger,S.I.;Iyengar,R.Bioinformatics2009,25(19),2466.doi:10.1093/bioinformatics/btp465(23)Hwang,W.C.;Zhang,A.;Ramanathan,M.Clin.Pharmacol.Ther.2008,84(5),563.doi:10.1038/clpt.2008.129(24)Zhu,M.;Gao,L.;Li,X.;Liu,Z.;Xu,C.;Yan,Y.;Walker,E.;Jiang,W.;Su,B.;Chen,X.;Lin,H.J.Drug Target.2009,17(7),524.doi:10.1080/10611860903046610(25)Hopkins,A.L.Nat.Chem.Biol.2008,4(11),682.doi:10.1038/nchembio.118(26)Pujol,A.;Mosca,R.;Farrés,J.;Aloy,P.Trends Pharmacol.Sci.2010,31(3),115.doi:10.1016/j.tips.2009.11.006(27)Dai,W.;Chen,J.X.;Lu,P.;Gao,B.Y.;Chen,L.;Liu,X.;Song,L.J.;Xu,Y.H.;Chen,D.;Yang,P.Y.;Yang,J.H.;Huang,Q.L.Molecular BioSystems2013,9(3),375.doi:10.1039/c2mb25372k1420Supplementary Information for Acta Phys. -Chim. Sin. 2013, 29 (7): 1415-1420 doi: 10.3866/PKU.WHXB201304171利用网络药理学方法研究热毒宁注射液抗流感病毒的分子作用机制张新庄1萧伟2,*徐筱杰3,*王振中2曹亮2孙兰2 (1南京中医药大学药学院, 南京 210046; 2康缘药业中药制药新技术国家重点实验室, 江苏连云港222002; 3北京大学化学与分子工程学院, 北京 100871)Study on Mechanism of the Reduning Injection on the Influenza Virus Using Network Pharmacology Method ZHANG Xin-Zhuang1 XIAO Wei2,* XU Xiao-Jie3,* WANG Zhen-Zhong2CAO Liang2 SUN Lan2(1College of Pharmacy, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210046, P. R. China; 2National Key Laboratory of Pharmaceutical New Technology for Chinese Medicine, Kanion Pharmaceutical Corporation, Lianyungang 222002, Jiangsu Province, P. R. China; 3College of Chemistry and Molecular Engineering, PekingUniversity, Beijing 100871, P. R. China)∗Corresponding authors. XIAOWei, Email: xw_kanion@; Tel: +86-518-85521956. XU Xiao-Jie, Email: xiaojxu@; Tel: +86-10-62757456.Table S1 78 molecules contained in Reduning injection[a] Chemical_Nameindex CAS_NO. UNPD_IDProtocatechuicacid1 99-50-3 UNPD60430scopoletine2 92-61-5 UNPD123796coumarin3 91-64-5 UNPD21132acid4 906-33-2 UNPD129293neochlorogenicKryptochlorogensaeure5 17608-52-5 UNPD84139Cryptochlorogensaeure6 6049-17-8 UNPD69393acid4-O-trans-caffeoylquininc7 82638-23-1 UNPD626623alpha,5alpha-dihydroxy-4alpha-O-caffeoyl 8 82638-22-0 UNPD164733quinic acidacid4-O-caffeoylquinic9 905-99-7 UNPD49725(3R)-()-Linalool10 78-70-6 UNPD106513(3S)-()-Linalool11 126-90-9 UNPD139439acid12 77-92-9 UNPD145647citric13 76-22-2 UNPD59933 Camphoracid14 69-72-7 UNPD59192 salicylic15 6902-77-8 UNPD70448 Genipin16 63968-64-9 UNPD189689Artemisinacid17 62218-53-5 UNPD24300 Picrocrocinic18 62218-53-5 UNPD125855O-beta-D-Glucopyranoside-4-Hydroxy-2,6,6-trimethyl-1-cyclohexenecarboxylic acid 19 60077-47-6 UNPD86130 7-epi-vogeloside7alpha-methoxysweroside20 118627-52-4 UNPD181272Vogeloside21 60077-47-6 UNPD13695522 58822-47-2 UNPD26834 SecoxyloganinketoneArtemisia23 546-49-6 UNPD10203524 5373-11-5 UNPD51223 CynarosideLuteolin25 491-70-3 UNPD149880Hyperoside26 482-36-0 UNPD12716827 480-19-3 UNPD60650 IsorhamnetinCasticine28 479-91-4 UNPD18635329 470-82-6 UNPD63596 Cineoleacid30 331-39-5 UNPD133665Caffeicacid31 327-97-9 UNPD106185chlorogenicScoparin32 301-16-6 UNPD13056333 29307-60-6 UNPD31542 Genipin-1beta-D-gentiobiosidgenipin-1-beta-gentiobioside34 29307-60-6 UNPD158162tetraacetate35 27856-66-2 UNPD197203secologaninO',O',O',O'-tetraacetylsecologanin36 27856-66-2 UNPD197202geniposidicacid37 27741-01-1 UNPD162860acidgeniposidic38 27741-01-1 UNPD155880Geniposidinsaeure39 27741-01-1 UNPD10658340 25694-72-8 UNPD29278 Veronicastroside41 25694-72-8 UNPD12881 luteolin7-O-beta-D-neohesperidosideGeniposide42 24512-63-8 UNPD120048acid 43 16758-05-7 UNPD18949 3,5-di-O-trans-caffeoylquininc44 89919-61-9 UNPD101522 isochlorogenic acid A45 2450-53-5 UNPD138107 3,5-dicaffeoyl quinic acidSecologansaeure46 22864-93-3 UNPD138269alcohol47 21149-19-9 UNPD49553 SantolinaEupatin48 19587-65-6 UNPD13532249 1632-73-1 UNPD26605 (-)-beta-fenchol50 470-08-6 UNPD22238 (+)-beta-Fenchol51 4695-62-9 UNPD30210 (-)-alpha-fenchol52 2217-02-9 UNPD7069 (+)-alpha-FencholRutin53 153-18-4 UNPD150726Chrysosplenol-D54 14965-20-9 UNPD186030acid3,4-dicaffeoyl-quinic55 14534-61-3 UNPD192822acid56 17912-89-9 UNPD13564 4,5-di-O-caffeoylquinic57 14259-55-3 UNPD93830 10-Deacetylasperulosidinsaeure58 18842-99-4 UNPD24222 Scandosideacidasperulosidic59 18842-99-4 UNPD163595desacetylacidDecetylasperulosidic60 14259-55-3 UNPD14747161 117-39-5 UNPD49205 Quercetinegentiobiosidegenipin6''-p-coumaroyl62 114653-46-2 UNPD125055acid(Z)-ferulic63 1014-83-1 UNPD142498acid64 537-98-4 UNPD12047 (E)-ferulic3-O-methyl caffeic acid65 1135-24-6 UNPD168255Geraniol66 106-24-1 UNPD17163467 118627-52-4 UNPD123 7-epi-vogeloside4-O-caffeoylquinate68 123372-74-7 UNPD128 Methyl69 29708-87-0 UNPD1210 Methyl5-O-caffeoylquinateC70 2450-53-5 UNPD1212 Isochlorogenicacid3,5-di-O-caffeoylquinate71 879293-21-7 UNPD1213 Methyl72 114637-83-1 UNPD1214 4,5-di-O-caffeoylquinate73 471271-55-3 UNPD1218 (E)-aldosecologaninUNPD1219 6’’-O-trans-sinapoylgenipin gentiobioside74 1174662-63-575 82474-97-3 UNPD1224 (Z)-aldosecologanin76 1782-55-4 UNPD1225 3-(3,4-dihydroxy-5-methoxyphenyl)-Cinnamic acid3,4-di-O-caffeoylquinateUNPD1229 Methyl77 1340540-40-478 123150-12-9 UNPD1230 5H,8H-Pyrano[4,3-d]thiazolo[3,2-a]pyridine-3-carboxylic acid[a] UNPD: universal natural product database, which is constructed by Xiao-Jie Xu professor et al.Table S2 The predicted CC50, EC50, SI of the compounds in Reduning injection compound CC 50 EC 50 SI compound CC 50 EC 50 SI luteolin 701.219 28.44 24.66crytochlorogenic acid - ND NDquercetin - 91.284 >5.48hyperoside - ND NDgenipin - 104.355>4.79cynaroside - ND ND Isochlorogenic acid B-113.143>4.42caffeic acid-NDNDscopoletin - ND NDNeochlorogenic acid- ND NDgeniposide - ND ND chlorogenic acid - ND ND isorhamnetin - ND ND rutin - ND ND Isochlorogenic acid A-NDNDcitric acid-NDNDcoumarin - ND ND artemisinin - ND ND camphor - ND ND linalol - ND ND geniposide acid - ND ND artenisia ketone - ND ND protocatechuic acid - ND ND secoxyloganin -NDNDSalicylic acid - ND ND ferulic acid-NDNDGenipin1-gentiobioside- ND ND“-”-no significant cytotoxicity(CC 50>>100µmol.L -1). “ND”-not determined antiviral activity.neochlorogenic acidP e r c e n t a g e （%）cryptochlorogenic acidP e r c e n t a g e （%）isochlorogenic acid AP e r c e n t a g e （%）caffeic acidP e r c e n t a g e （%）chlorogenic acidP e r c e n t a g e （%）secoxyloganinP e r c e n t a g e （%）geniposideP e r c e n t a g e （%）genipin 1-gentiobiosideP e r c e n t a g e （%）geniposide acidP e r c e n t a g e （%）cynarosideP e r c e n t a g e （%）scopoletinP e r c e n t a g e （%）salicylic acidP e r c e n t a g e （%）isorhamnetinP e r c e n t a g e （%）coumarinP e r c e n t a g e （%）camphorP e r c e n t a g e （%）protocatechuic acidP e r c e n t a g e （%）ferulic acidP e r c e n t a g e （%）hyperosideP e r c e n t a g e （%）rutinP e r c e n t a g e （%）citric acidP e r c e n t a g e （%）artemisininP e r c e n t a g e （%）linalolP e r c e n t a g e （%）artenisia ketoneP e r c e n t a g e （%）Fig.S1 The dose-response curve of compounds in Reduning injection。

热毒宁注射液的药理作用及抗病毒作用

热毒宁注射液的药理作用及抗病毒作用
胡玥
【期刊名称】《临床合理用药杂志》
【年(卷),期】2016(0)7
【摘要】热毒宁注射液是由青蒿、金银花、栀子等组成的现代中药制剂,是国家二类新药,具有清热、解毒、疏风功效。

临床主要用于治疗外感风热所致上呼吸道感染、急性支气管炎。

然而,其临床用途远不止于此,笔者现在对热毒宁注射液的临床
应用情况综述如下。

1热毒宁注射液的成分及药理作用中药学理论认为,青蒿性寒,
味苦,归肝、胆、肾经,具有清热、祛暑、除蒸和截疟等作用;金银花性寒,味甘,归肺、心、胃经,具有清热解毒、凉散风热的功效;栀子性寒,味苦,归心、肺、
【总页数】3页(P174-176)
【作者】胡玥
【作者单位】广州医科大学
【正文语种】中文
【中图分类】R285
【相关文献】
1.热毒宁注射液药理作用、临床应用及不良反应分析
2.热毒宁注射液药理作用、临床应用及不良反应探析
3.热毒宁注射液的药理作用、临床应用及不良反应
4.热毒
宁注射液药理作用、临床应用及不良反应发生情况分析5.热毒宁注射液不同给药
途径对幼龄小鼠副流感病毒肺炎的药理作用
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热毒宁注射液与帕拉米韦联合治疗甲型H1N1流感临床疗效观察

热毒宁注射液与帕拉米韦联合治疗甲型H1N1流感临床疗效观察【摘要】目的：评估甲型H1N1流感患者实施热毒宁注射液与帕拉米韦联合治疗的应用价值。

方法：研究人员选取了我院接受治疗的甲型H1N1流感患者30例，此次研究时间是2023年3月至9月期间，将其随机分为试验组以及常规组，各15例，常规组运用帕拉米韦治疗，试验组患者选择热毒宁注射液与帕拉米韦联合治疗，针对试验组与常规组的临床症状改善时长、治疗前后血常规指标、炎性因子指标、药物不良反应情况实施组间对照。

结果：（1）试验组甲型H1N1流感患者发热症状、头痛症状、流涕症状、肌痛症状、鼻塞症状、咳嗽症状改善时长短于常规组患者，期间校验值显示为P值＜0.05，结果充分证实组间差异存在。

（2）甲型H1N1流感患者治疗前后白细胞计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、血红蛋白、血小板计数指标对比结果显示为P值＞0.05，不具备显著的二组差异性。

（3）甲型H1N1流感患者治疗前炎性因子指标对比结果显示为P值＞0.05，不具备显著的二组差异性。

试验组甲型H1N1流感患者治疗后白介素6与C反应蛋白指标低于常规组患者，期间校验值显示为P值＜0.05，结果充分证实组间差异存在。

（4）试验组（20.00%）、常规组（13.33%）的甲型H1N1流感患者恶心、腹痛、呕吐、头晕等药物不良反应发生率结果呈现为P>0.05，不具有显著差异。

结论：甲型H1N1流感患者行热毒宁注射液与帕拉米韦联合治疗效果确切，可缩短患者临床症状改善时长，降低其炎性因子，对其血常规及不良反应的影响较小。

【关键词】甲型H1N1流感；热毒宁注射液；帕拉米韦Clinical efficacy of combined treatment of influenza A (H1N1) with feverfew injection and paramivirWu YunqiuSuqian First People's Hospital, Suqian, Jiangsu 223800, China[Abstract] Objective: to evaluate the application value of implementing the combination treatment of feverfew injection and paramivir in patients with influenza A (H1N1). Methods: Theresearchers selected 30 cases of influenza A (H1N1) patients treatedin our hospital from March to September 2023, and randomly pided them into the experimental group and the conventional group, each with 15 cases, the conventional group was treated with pallamivir, and the experimental group was treated with the combination of feverfewinjection and pallamivir, and inter-group controls were implementedfor the clinical symptom improvement time, before and after treatmentof the experimental and conventional groups. Intergroup control was carried out for the duration of clinical symptom improvement, before and after treatment of the test group and the conventional group,blood routine indexes, inflammatory factor indexes, and adverse drug reactions. Results: (1) The duration of improvement of fever, headache, runny nose, myalgia, nasal congestion, and cough in the experimental group was shorter than that in the conventional group, and the P-value of the experimental group was <0.05, which fully confirmed the difference between the groups. (2) Influenza A (H1N1) patients before and after treatment, white blood cell count, neutrophil count, lymphocyte count, hemoglobin, platelet count index comparison results show that P value > 0.05, does not have a significant difference between the two groups. (3) Comparison results of pre-treatment inflammatory factor indexes in patients with influenza A (H1N1) showed that the P value was >0.05, and there was no significant difference between the two groups. Interleukin 6 and C-reactive protein indexesof influenza A (H1N1) patients in the experimental group aftertreatment were lower than those of patients in the conventional group, and the calibration value during the period showed that the P valuewas <0.05, and the results sufficiently confirmed the existence ofdifferences between the groups. (4) The results of the incidence of adverse drug reactions such as nausea, abdominal pain, vomiting, dizziness, etc. in patients with influenza A (H1N1) in theexperimental group (20.00%) and the conventional group (13.33%) were presented as P>0.05, which was not a significant difference. CONCLUSION: The effect of the combined treatment of febrile toxin injection and paramivir in patients with influenza A (H1N1) is precise, which can shorten the duration of improvement of patients' clinical symptoms, reduce their inflammatory factors, and have less impact on their blood counts and adverse reactions.[Keywords] Influenza A (H1N1); Feverfew Injection; Paramivir甲型H1N1流感是由于患者感染甲型H1N1流感病毒导致的疾病，疾病发生初期通常与普通流感具有相似性，而且该疾病具有传播性，患者发病后通常会存在机体高热，咽喉疼痛，肌肉酸痛等症状，影响患者身体健康，降低患者生活质量[1-2]。

基于网络药理学及分子对接探讨热毒宁保肝作用机制

基于网络药理学及分子对接探讨热毒宁保肝作用机制
柯佳群;余雪纯;赵梅玉;熊印华
【期刊名称】《江西科技师范大学学报》
【年(卷),期】2022()6
【摘要】本文利用网络药理学和分子对接技术分析了热毒宁的保肝作用机制。

筛选得到热毒宁50个有效成分,109个保肝作用潜在靶点。

分子对接结果显示热毒宁的关键成分与保肝作用关键靶点具有较好的亲和力。

热毒宁可能通过调控细胞凋亡和转录等生物过程,参与脂质和动脉粥样硬化、化学致癌受体活化、前列腺癌、流体剪切应力和动脉粥样硬化、乙型肝炎、AGE-RAGE信号通路等发挥保肝作用。

热毒宁保肝作用体现了复方多成分、多靶点和多途径的特点,为深入研究热毒宁保肝作用机制提供了新的线索。

【总页数】7页(P82-88)
【作者】柯佳群;余雪纯;赵梅玉;熊印华
【作者单位】江西科技师范大学药学院
【正文语种】中文
【中图分类】R285
【相关文献】
1.基于网络药理学与分子对接技术探讨益肝草凉茶解酒保肝的作用机制
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