种子活力的快速测定
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种子活力的测定
实验目的： 实验目的 • 掌握几种种子活力快速测定方法。
Ⅰ氯三苯基四氮唑法（TTC法） 氯三苯基四氮唑法（ 法
• 实验原理 • 凡命力的种子胚都有旺盛的代谢，许多生理活动过程中会 有氧化还原作用，能产生含氢的还原性物质如NADH2 或 NADPH2 ，这些物质可以还原渗入细胞中的TTC，使无色 的TTC变为红色的三苯基甲囋（TTF）。 • 器材与试剂 • 仪器：恒温箱、烧杯、培养皿、镊子、刀片、天平。 • 试剂：0.5%的TTC溶液（0.5gTTC溶于少于95%乙醇后用 蒸馏水稀释到100ml避光备用）。 • 材料：小麦种子
ห้องสมุดไป่ตู้
• 试验步骤： 试验步骤： • 1、浸种：同TTC法 • 2、显色：取吸胀的种子100粒，整齐的埋 于准备好的琼脂凝胶培养皿中，种子胚向 下相互远离，将培养皿置于30—35度恒温 箱中1h后，在蓝色背景下观察，胚周围有 黄色晕圈为活种子，没有则为死种子。 • 3、用沸水杀死的种子做同样处理，对比观 察。 • 4、计算活种子率。
Ⅱ溴麝香草酚蓝法（BTB法）
• 实验原理 实验原理： • 凡活种子都有呼吸作用，吸收空气中的O2， 放出CO2。后者溶于水后成为碳酸，然后分 解出H+和HCO3-，使种胚周围环境酸化，可 用溴麝香草酚蓝法来测定酸度的变化。 • 器材与试剂 • 仪器：恒温箱，天平，培养皿，烧杯，镊子， 漏斗，滤纸和琼脂。
• 试验步骤 • 1、浸种：将待测小麦种子在30-35度浸种 过夜以增强种胚的呼吸强度，使显色迅速。 • 2、显色：取吸胀的种子100粒，用刀片沿 种子胚中心线纵切两半，取其中一半放在 培养皿，加入0.5%TTC盖住种子，30度恒 温箱中培养30分钟，观察胚及胚乳着色情 况。凡着红色的种胚为活种子。 • 3、计算活种子的百分率。
Ⅲ 红墨水染色法
• 实验原理 • 凡活种子的原生质膜具有选择性吸收物质 的能力，死种子则没有此能力，燃料就可 进入死细胞内部而染色。 • 器材及试剂 • 恒温箱，烧杯，培养皿，漏斗，镊子，5% 红墨水，萌发的小麦种子。
• 实验步骤 • 1、浸种：同上。 • 2、染色：取吸胀的小麦种子100粒，沿胚中线切 开为两半，一半置于培养皿中，加入5%红墨水没 过种子，染色10—15分钟后，倒掉红墨水，用水 冲洗多次至冲洗无红色。检查胚和胚乳着色情况。 • 用沸水杀死的另一半种子作对照试验，与为杀死 的种子比较 胚及胚乳着色情况。 • 3、计算活种子率。 • 作业 比较三种方法的优缺点。
实验目的： 实验目的 • 掌握几种种子活力快速测定方法。
Ⅰ氯三苯基四氮唑法（TTC法） 氯三苯基四氮唑法（ 法
• 实验原理 • 凡命力的种子胚都有旺盛的代谢，许多生理活动过程中会 有氧化还原作用，能产生含氢的还原性物质如NADH2 或 NADPH2 ，这些物质可以还原渗入细胞中的TTC，使无色 的TTC变为红色的三苯基甲囋（TTF）。 • 器材与试剂 • 仪器：恒温箱、烧杯、培养皿、镊子、刀片、天平。 • 试剂：0.5%的TTC溶液（0.5gTTC溶于少于95%乙醇后用 蒸馏水稀释到100ml避光备用）。 • 材料：小麦种子
ห้องสมุดไป่ตู้
• 试验步骤： 试验步骤： • 1、浸种：同TTC法 • 2、显色：取吸胀的种子100粒，整齐的埋 于准备好的琼脂凝胶培养皿中，种子胚向 下相互远离，将培养皿置于30—35度恒温 箱中1h后，在蓝色背景下观察，胚周围有 黄色晕圈为活种子，没有则为死种子。 • 3、用沸水杀死的种子做同样处理，对比观 察。 • 4、计算活种子率。
Ⅱ溴麝香草酚蓝法（BTB法）
• 实验原理 实验原理： • 凡活种子都有呼吸作用，吸收空气中的O2， 放出CO2。后者溶于水后成为碳酸，然后分 解出H+和HCO3-，使种胚周围环境酸化，可 用溴麝香草酚蓝法来测定酸度的变化。 • 器材与试剂 • 仪器：恒温箱，天平，培养皿，烧杯，镊子， 漏斗，滤纸和琼脂。
• 试验步骤 • 1、浸种：将待测小麦种子在30-35度浸种 过夜以增强种胚的呼吸强度，使显色迅速。 • 2、显色：取吸胀的种子100粒，用刀片沿 种子胚中心线纵切两半，取其中一半放在 培养皿，加入0.5%TTC盖住种子，30度恒 温箱中培养30分钟，观察胚及胚乳着色情 况。凡着红色的种胚为活种子。 • 3、计算活种子的百分率。
Ⅲ 红墨水染色法
• 实验原理 • 凡活种子的原生质膜具有选择性吸收物质 的能力，死种子则没有此能力，燃料就可 进入死细胞内部而染色。 • 器材及试剂 • 恒温箱，烧杯，培养皿，漏斗，镊子，5% 红墨水，萌发的小麦种子。
• 实验步骤 • 1、浸种：同上。 • 2、染色：取吸胀的小麦种子100粒，沿胚中线切 开为两半，一半置于培养皿中，加入5%红墨水没 过种子，染色10—15分钟后，倒掉红墨水，用水 冲洗多次至冲洗无红色。检查胚和胚乳着色情况。 • 用沸水杀死的另一半种子作对照试验，与为杀死 的种子比较 胚及胚乳着色情况。 • 3、计算活种子率。 • 作业 比较三种方法的优缺点。