酶学总结-xyj
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陈清西酶学考试试题选集
一、名词解释(二十六选五,每个两分)
1)全酶: 由酶蛋白和辅助因子结合形成的复合物称为全酶。
2)辅助因子:属于结合蛋白质的酶是由蛋白质部分和非蛋白质部分组成的,非蛋白质部分称为酶的辅助因子。
3)辅基:与酶蛋白结合紧密,不能通过透析或超滤方法将其除去的辅助因子。Eg:羧肽酶A(Zn2+)
4)辅酶:与酶蛋白结合疏松,用透析或超滤方法可将其与酶蛋白分开的辅助因子。Eg:羧化酶(TPP)
5)底物载体substrate carriers:某些非蛋白质化合物,其不是酶的一个组成部分,但却是酶催化作用所必需的,在
催化反应中起了携带电子、质子和功能基团的作用,因此这类物质通常被称为底物载体或辅底物。Eg:NAD+。
6)酶蛋白:属于结合蛋白质的酶是由蛋白质部分和非蛋白质部分组成的,纯蛋白质部分称为酶蛋白。
7)酶的专一性:酶对底物的选择性称为酶的专一性。一般可分为,绝对特异性,相对特异性和立体异构特异性。
8)反应专一性:一类酶只能催化一类反应。
9)底物专一性:一类酶只能作用于一类底物。
10)初速度:在反应初始的一段时间内,产物生成量与酶反应时间成正比,这时的速度为初速度。(一般也以底物浓
度变化在起始浓度的5%以下的速度作为初速度的近似值。)
11)酶活力单位:在最适条件下,每分钟催化1μmmol底物转化为产物所需的酶量为一个酶活性单位,亦称国际
单位。
12)酶活力及比活力:酶活力是指酶催化一定化学反应的能力,亦即酶活性。(其大小可以用在一定条件下所催化
的某一化学反应的速度来表示。)比活力:每毫克蛋白所含的酶活力单位,用U/mg表示。
13)酶的克分子活力
14)酶催化反应的动力学模型及动力学方程:a.也称为动力学机理,是描述酶怎样与其底物和产物结合而形成中间
物的方程式。b.依据动力学模型,推导出的能够表示反应速度与底物浓度的方程式。
15)Haldane关系式:
16)酶的失活作用与抑制作用:a. 凡可使酶蛋白变性而引起酶活力丧失的作用称为酶的失活作用。b. 由于酶的必
需基团化学性质的改变,但酶未变性,而引起酶活力的降低或丧失称为酶的抑制作用。
17)可逆抑制与不可逆抑制:a.抑制剂与酶分子以非共价键结合而引起酶活力降低或丧失,但这种抑制可用物理方
法除去抑制剂后被解除,使酶分子重新获得活性。b.抑制剂与酶分子上的某些必须基团一共价键的方式结合,引起了酶活力的丧失,这种抑制不能通过物理方法除去抑制剂而恢复。
18)Ks型与Kcat型抑制剂:a.此类抑制剂是根据底物的化学结构设计的,具有底物类似的结构,可以和相应的酶结
合,同时还带有一个活泼的化学基团,能与酶分子中的必需基团反应,进行化学修饰,从而抑制酶活性。
b. 此类抑制剂是根据酶催化过程设计的,它不但具有天然底物类似的结构,且本身也是酶的底物,能与酶结合
发生类似于底物的变化,但抑制剂还有一个潜伏的基团,当酶对它进行催化反应时,该潜伏基团被暴露或活化,并作用于酶活性中心的必需基团或酶的辅基,使酶不可逆失活。这类抑制剂的专一性极高,有人将之称为自杀性底物。
19)酶的稳定状态中间物和过渡状态复合物
20)序列机理与乒乓机理
21)Random Bi Ter mechanism
22)Bi Uni Uni ping pong mechanism
23)酶原与酶原的激活:a.无活性的酶的前身物质称为酶原。b.酶原受某种因素作用后,转变成具有活性的酶的过
程叫酶原的激活。
24)酶的活性中心与酶活性必需基团:a.酶分子中的必需基团在空间结构中彼此靠近,形成一个能与底物特异性结
合并催化底物转化为产物的特定空间区域。这一区域称为酶的活性中心。b.与酶活性密切相关的基团称为必需基团。
25)酶作用的“诱导契合”与“底物形变”:
26)酶作用的“邻近效应”与“定向效应”:
二、简答题(五个,每个八分)及计算题(未知)
1.酶分为哪六大类?说明各大类酶的作用特点。
1)氧化还原酶类oxide-reductases:催化氧化还原反应,主要包括脱氢酶和氧化酶。Eg:乳酸脱氢酶催化乳酸的
脱氢反应。
2)转移酶类transferases:催化基团转移反应,即将一个底物分子的基团或原子转移到另一个底物的分子上。
Eg:谷丙转氨酶催化氨基转移反应。
3)水解酶类hydrolases:催化底物的加水分解反应。主要包括淀粉酶、蛋白酶、核酸酶及酯酶等。Eg:脂肪酶
催化的脂的水解反应。
4)裂解酶类lyases:催化从底物分子中移去一个基团或原子形成双键的反应及其逆反应。主要包括醛缩酶、水
化酶及脱氨酶等。Eg:延胡索酸水合酶催化的反应。
5)异构酶类isomerases:催化各种同分异构体的相互转化,即底物分子内基团或原子的重排过程。Eg:6-磷酸
葡萄糖异构酶催化的反应。
6)合成酶类ligases:又称连接酶,能够催化C-C、C-O、C-N以及C-S键的形成反应。这类反应必须与ATP分解
反应相互偶联。Eg:丙酮酸羧化酶催化的反应。
2.假设混合液中有五种酶,E1,E2,E3,E4,E5,其分子量及值分别如下情况:
(1):51234
(2):35124
(3):12453
附:
凝胶过滤柱层析:分子筛作用。Sephadex G、Sepharose B、Bio-Gel P。
离子交换柱层析:a.阳离子交换剂:CM-cellulose、P-Cellulose、SM-cellulose、SE-cellulose。b.阴离子交换剂:DEAE-cellulose、PAB-cellulose、GE-cellulose。c. pH>pI,带负电;pH 离子交换凝胶过滤柱层析:DEAE-Sephadex、CM-Sephadex。 3.何谓酶的活力和比活力?其大小说明什么问题? 酶的活力:酶催化一定化学反应的能力。 值大小,表示在一定条件下所催化的某一化学反应速度。活力越大,反应速度越快。 比活力:每毫克蛋白所含的酶活力单位。 值大小,可用来比较每单位重量酶蛋白的催化能力,比活力越高,说明酶的纯度越高。 4.假设提取液中含有三种酶,其性质如下,请设计实验方案来分离纯化这三种酶。