实验四 孚尔根(FEULGEN)反应

四、实验方法
1．血涂片放入90％乙醇中固定1’30l’ink’ 2．放入70%酒精1’, 放入蒸溜水1’ 3．稀酸水解：1N HCl (室温) 1’
1N HCl 60℃水浴 8’ 1N HCl (室温) 1’ 蒸馏水 1’ 对照片以5%三氯醋酸90℃水浴l5’抽提核酸 后，再经稀酸水解。
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9．封片：中性树胶封片
10．贴标签，镜检
组织切片
鱼血涂片 95％乙醇固定 Feulgen反应 日期 姓名
五：实验结果
细胞核呈紫红色，细胞质呈浅绿色，对 照片只呈浅绿色。
六、作业
简述Feulgen反应的原理及关键步骤。
实验四 孚尔根 （Feulgen）反应
光镜标本制作
切片法： 取材 固定 切片 贴片
非切片法： 1. 涂片法 2. 磨片法 3. 分离法等
脱水 染色
透明 包埋 封片 观察
一、实验目的
了解DNA的显示原理并掌握其操作过程。
二、实验用品
1. 器材：显微镜、盖玻片、染色缸、眼科剪、解 剖刀、镊子、水浴锅
2. 试剂： 95％乙醇（固定液）、Schiff氏试剂、 1N盐酸、亚硫酸水、1%亮绿甲苯、酒精、中 性树胶
3. 材料：鸡血或鱼血涂片
三、实验原理
细胞中DNA经1N60℃盐酸水解后， DNA双螺旋结构中的嘌呤与脱氧核糖之间的 连接打开，并在脱氧核糖的一端形成潜在的 醛基。这些醛基与Schiff氏试剂作用，形成 紫红色的三苯甲烷衍生物。
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4．染色： Schiff氏试剂30’-40’
5．分色 ：亚硫酸水I、Ⅱ、Ⅲ 各 2’
流水洗 5’
蒸馏水洗 1’
6．复染 ：1% 亮绿 30～60”左右
蒸馏水洗 (两次)wenku.baidu.com2’
7．脱水：以70%酒精，80％酒精，95%酒 精，l00%酒精各2’
8．透明：1／2 100%酒精+1／2二甲苯，二 甲苯Ⅰ、Ⅱ，各5’