临床微生物质谱鉴定技术及其应用初探
质谱技术及其在临床微生物鉴定中的应用
确 率 分 别 为 97.4%、79%和 78.6%。Seng等 也 报 道 了 对 MA『 DI—TOF MS和 Vitek2两 种 微 生 物 鉴 定 系 统 进 行 比 对 的 结 果 ,对 1660株 临 床 分 离 的 细 菌 进 行 检 测 ,其 中 的 95_4%被 MAI DI—TOF MS准确 鉴 定 。两 个 实 验 室 的研 究 表 明基 于 MALDI—TOF MS鉴 定 微 生 物 的 方 法 具 有 很 高 的准 确性。lJa Scola等建立 了基于 MALDI—TOF MS鉴定血培养 阳性 的致病菌方法。首先通过连续 离心 的方法获得血培养 阳性 培养瓶 中的致病菌 ,然后致病 菌被 甲酸水解后再经离 心处 理 ,所 得 上 清 进行 MALDI—TOF MS方 法 鉴 定 。用 此 方 法检测 了 562例血培养 阳性 的致病 菌 ,准确 鉴定率 达到 76%。Eigner等 应 用 MALDI—TOF MS的方 法 检 测 了 1 1 16株 从 实 验 室 分 离 的细 菌 和 108株来 自美 国 菌种 保 藏 中心 的 参 考 菌 株 。结 果显 示 准 确 鉴定 101株 参 考 菌株 和 1062株 实验 室 分 离的 细菌 : 2.2 ESI MS Xiang等 应 用 ESI串 联 质 谱 法 检 测 了 大 肠 杆 菌的裂解液 ,找出了菌种特征峰。Vaidyanathan等报告了不 经过分离直接分析完整细菌的 ESI MS方法 ,鉴定 了 2种大 肠杆 菌 、2种芽 胞 杆 菌 和 1种 侧 胞 短芽 胞杆 菌 共 5种 菌株 。 新 发 展 的 解 吸 电喷 雾 (desorption eleetrospray ionization,DE— sI)质 谱 法 通 过 电喷 雾 产 生 的 带 电 液滴 直 接 打 到 凝 聚 态 的 样 品表面 ,使吸附在表面的被分析物受到带 电离子的撞击 从表面解吸出来并被 电离 ,进入质 量分 析器被分析 。Song 等报道基于 DES1 MS的方法成功鉴定 了枯草芽孢杆菌 ,分 析 时 间 不 到 两 分钟 。
质谱技术在微生物鉴定和检测中的应用
《质谱技术在微生物鉴定和检测中的应用》摘要:质谱技术(Mass Spectrometry, MS)是一种根据离子产生的质量图谱来确定样品中分子组成的分析技术。
质谱法不仅可以对传统的目标分析物进行定性和定量分析,还可以用于细菌的快速准确鉴定。
基质辅助激光解吸电离飞行时间(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization-Time of Flight, MALDI-TOF)质谱仪由于能快速准确地鉴定革兰氏阴性菌和阳性菌的种类,因此是生物学中最常用的质谱仪之一。
质谱法鉴定微生物是以鉴定每个物种的特征光谱为基础的,然后与仪器内的大型数据库进行匹配。
本综述阐述了细菌鉴定面临的挑战和机遇,特别是在微生物学领域中使用MALDI-TOF MS来鉴定微生物和分析抗菌药敏感性。
关键词:质谱技术;MALDI-TOF;特征光谱;细菌鉴定;抗菌药敏感试验质谱(MS)法通过分析电离分子的质荷比(m/z)来对分子进行定性定量分析。
质谱仪扫描的特征图谱可以确定样品内不同分子的组成,并且能够直接分析任何可电离的生物分子。
FENN[1]和TANAKA[2]在MS的基础上,分别建立了电喷雾电离(Electrospray Ionization,ESI)技术和基质辅助激光解吸电离(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization,MALDI)技术。
MALDI最大的优势在于不需要复杂的预分析,就可以直接对样品与化学基质混合后产生的离子进行分析。
离子飞行时间(TOF)是指用探测器精确测量离子到达飞行管末端所花费的时间。
基质辅助激光解吸电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱技术是将MALDI技术和TOF技术整合在一起的一种技术。
自从关于MALDI-TOF技术的构想诞生以来,因其快速、高通量、低成本和高效的优点,该技术已经彻底改变了微生物实验室中鉴定微生物的方法。
MALDI-TOF MS的主要优点之一是节省时间,因为细菌鉴定不再需要经过24~48 h,只需不到一小时即可完成。
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临床微生物质谱鉴定技术及 其应用初探
41、实际上,我们想要的不是针对犯 罪的法 律,而 是针对 疯狂的 法律。 ——马 克·吐温 42、法律的力量应当跟随着公民,就 像影子 跟随着 身体一 样。— —贝卡 利亚 43、法律和制度必须跟上人类思想进 步。— —杰弗 逊 44、人类受制于法律,法律受制于情 理。— —托·富 勒
微生物鉴定技术的研究与应用
微生物鉴定技术的研究与应用微生物是存在于环境中的一种生物,它们具有微小的体积、短得不能被肉眼观察的生命历程,但又是生态系统中不可或缺的组成部分。
微生物鉴定技术是通过一定的实验手段,对微生物进行种属鉴定和分类的一种技术。
它不仅是微生物学研究领域的重要组成部分,同时也被广泛应用于食品、医药、环保等多个领域。
微生物鉴定技术的研究在微生物鉴定技术的研究方面,核酸鉴定技术是当前的研究热点。
人们利用PCR技术对微生物种类进行鉴定和分类,从而得到更准确的种属信息。
PCR技术可以直接从微生物中提取DNA进行扩增,将扩增的产物进行测序,基于测序结果进行物种鉴定和分类。
此外,蛋白质组学也是微生物鉴定技术的主要研究方法之一。
通过质谱分析等手段,人们可以对微生物中的蛋白质进行鉴定与分类,为微生物研究提供了新的思路和方法。
另外,随着人们对微生物的深入研究,人们发现微生物种群结构对生态环境的影响非常显著。
为了研究微生物种群结构,人们沿用传统环境学方法,通过培养分离、形态学观察等手段,对微生物进行研究。
随着分子生物学技术的发展,人们将DNA芯片应用于微生物研究,大大提高了微生物分析的效率和准确率。
同时,人们也逐渐深入研究微生物间的交流和互作关系,发现微生物之间存在协同作用和“竞争”关系,这为微生物的资源利用和生态调控提供了新的解决思路和方法。
微生物鉴定技术的应用微生物鉴定技术的应用非常广泛,其中医药和食品工业是其中最为典型的领域。
在医药领域,微生物鉴定技术被广泛应用于细菌分离、组分分析、药物筛选等方面,有助于开发新型药物。
同时,微生物分类学还可以为感染性疾病的诊断和治疗提供更准确的依据。
此外,微生物鉴定技术在微生物药物研究、疫苗设计以及基因工程等方面也起到了重要作用。
在食品工业方面,微生物鉴定技术被广泛用于食品安全检测和质量控制。
食品中存在大量的微生物,其中一些可引起食品腐败和污染。
因此,食品生产企业需要对食品中的微生物进行检测,确保食品的安全性和质量。
质谱仪在微生物中的应用及标准化操作
质谱仪在微生物中的应用及标准化操作
质谱仪在微生物中的应用及标准化操作如下:
质谱仪在微生物鉴定中具有重要作用。
微生物鉴定是临床诊断的重要环节,传统的生化原理检测方法流程复杂且能鉴别的种类有限。
相比之下,质谱技术凭借高通量、快速性、准确性和特异性等优点,在微生物检验方面的应用越来越多。
在质谱技术应用过程中,微生物样本和基质置于靶板上,两者混合干燥后形成晶体。
当紫外激光脉冲作用于晶体时,基质受到激发从固相转为气相,微生物蛋白和基质分子从靶板表面被喷射出去(解吸),质子从基质转移到蛋白(电离),使带正电荷的气相蛋白在静电场高电压作用下加速进入飞行管。
进入飞行管后,离子就以一定的速度飞向离子检测器,该速度取决于它们的“质核比”。
低“质核比”的小离子先到达,随后是“质核比”稍高的大分子。
用离子检测器可以检测每个离子的飞行时间,“质核比”可以计算出来,进而产生质谱图。
质谱图上显示的“质核比”数值在x轴上,信号强度在y轴上,因此已知m/z的越高丰度的蛋白会在质谱图上产生越高的峰。
通过该微生物全部蛋白质所构成的图形与数据库进行比对,从而完成微生物的鉴定。
此外,基质分子所吸收的能量可以使结晶体出现电离反应,并生成不同质荷比的带电离子。
样品离子可以在加速电场的作用下获得相同功能,经由高压加速处理及聚焦处理以后,研究者可以在样品离子进入时间质谱分析器以后进行质量分析。
就质谱技术的实施情况而言,离子的质荷比与飞行时间的平方之间具有正比例关系,相关人员在绘制质量图谱以后请确定的特异性图谱的软件分析比较可以为目标微生物菌种及菌株的区分提供帮助。
谈一谈质谱技术在临床微生物检测中的应用
谈一谈质谱技术在临床微生物检测中的应用随着医疗技术水平的不断进步,临床检验中引入了越来越多的高新技术,质谱技术就是其中之一,其主要是一种对蛋白质进行分析的较为强大的工具,其存在高通量、快速准确、自动化、操作简便等优点,所以在临床的微生物检验中应用较为广泛,在鉴定病原体方面具有显著效果。
这一技术从出现到发展对传统检验模式进行了挑战,令检验的实效性和灵敏度得以提升。
因此,为帮助病人们进行了解,下面就来介绍一下质谱技术在临床微生物检测中的主要应用。
一、质谱技术的原理和优点质谱技术的主要工作原理是把基质和样品进行混合,而后将其点在相应的金属靶盘上,构成一个共结晶,而后将激光当做能量的来源对结晶体进行辐射,此时基质分子会对能量进行吸收,令样品开始吸附,而后发生电离反应,形成质荷比不同的带电离子。
而样品离子处于加速的电场下,可以产生相同的动能,而后经过高压的加速和聚焦,进入到飞行时间的质谱分析器中,完成质量分析的操作。
其中,飞行时间的平方和离子质荷比呈现正相关的关系,通过计算机的处理,可以形成质量图谱,经过相关的软件进行分析和比较,可以筛选以及确定特异性的图谱,进而鉴定或者区分菌株以及微生物。
现今的临床微生物实验中,在鉴定细菌方面大都依靠传统生化反应以及形态学技术等,在鉴定细菌方面也需首先进分离纯化,就算利用相关的自动化鉴定仪,也需保证时效性的要求,特别是在检测菌血症这类重症感染的过程中。
而质谱技术一般不要求样品纯度,所以样品检测过程中可以不进分离和纯化,可以进行直接的点样。
该方式的操作较为简便,还可不断扩展数据库,所以可准确且快速地完成检测,还可保证高通量。
二、质谱技术在临床微生物检测中的应用就现今的情况来看,质谱技术现已被广泛应用于临床微生物检测中,主要检测的菌种包括霉菌、酵母菌、分枝杆菌、厌氧菌、需氧菌、革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌等。
1、鉴定及分析细菌质谱技术可对多种细菌进行充分分析,其中,检测的样本既可为进分离培养的一些纯菌落,同样也可为原始的临床样本,其可以被直接用来检测。
浅谈微生物快速检验技术及临床应用
浅谈微生物快速检验技术及临床应用引言:微生物是指一类生物体,包括病原微生物和有益微生物。
对微生物进行快速检验,对于临床诊断和治疗具有重要意义。
本文将介绍不同的微生物快速检验技术,并探讨其在临床应用中的作用。
第一部分:传统微生物检验的局限性传统微生物检验技术通常需要培养微生物菌株,这个过程非常漫长而费时。
尽管传统培养方法仍然是微生物学的基础,但它们存在许多局限性。
首先,培养过程要求时间较长,无法及时提供结果。
其次,某些微生物可能无法在常规培养基上生长,导致假阴性结果。
不同的菌株也可能显示出不同的生长特性,增加了检测的困难。
第二部分:PCR技术在微生物快速检验中的应用聚合酶链反应(PCR)是一种广泛应用于微生物检验的技术。
PCR 技术能够快速扩增微生物DNA片段,从而使其检测变得更为敏感和准确。
此外,PCR技术还可以在非常短的时间内提供结果,这对于迅速确定感染病原体十分重要。
PCR技术的应用范围广泛,可以用于诊断各种感染疾病,如呼吸道感染、尿路感染和性传播疾病等。
第三部分:质谱技术在微生物快速检验中的应用质谱技术是一种基于微生物分子组成的快速检验技术。
通过质谱仪的扫描,可以得到微生物的质谱图谱。
这些图谱可以与数据库中的参考图谱进行比对,以确定微生物的种类和亚种。
质谱技术具有高度的特异性和准确性,能够在短时间内完成检测,并提供可靠的结果。
因此,质谱技术被广泛应用于微生物的鉴定和分类,对于临床感染的快速诊断具有重要意义。
第四部分:快速抗生素敏感性测试技术抗生素敏感性测试是临床微生物学中的重要环节。
传统的抗生素敏感性测试通常需要48小时以上才能得出结果。
然而,期间患者可能因感染加重而需要立即治疗。
因此,发展快速抗生素敏感性测试技术至关重要。
近年来,各种快速抗生素敏感性测试方法相继出现,如荧光型PCR、蛋白质芯片和电生理技术等。
这些新技术可以在短时间内测定微生物对抗生素的敏感性,为临床治疗提供及时指导。
结论:微生物快速检验技术在临床中的应用已经取得了显著进展。
质谱技术在微生物检测和鉴定中的应用
2020年11月 第21期影像学及诊断检验质谱技术在微生物检测和鉴定中的应用左瑞菊沧州市人民医院,河北 沧州 061000【摘要】随着医学技术的蓬勃发展,质谱技术在医学中的应用越加广泛,质谱技术能够通过样品中离子产生的质量图谱对于其分子构成进行分析,广泛用于临床中细菌的快速鉴定中。
在生物学中常用MALDI-TOF质谱仪对于革兰氏阴性菌种与阳性菌种进行鉴定,通过质谱法对于微生物进行鉴定是基于不同物种不同的特征光谱来进行区别的。
本文通过对近年来相关文献的查阅,介绍了临床基于该技术的应用与样品的制备,简述了微生物检测分类,分析了该技术进行微生物检测的局限性,阐述了在细菌鉴定方面所可能遇见的挑战与应用情况,并就其日后的发展进行展望。
【关键词】质谱技术;质量图谱;细菌鉴定;特征光谱[中图分类号]Q93-331; O657.63 [文献标识码]A [文章编号]2096-5249(2020)21-0180-02质谱法是通过对于电离分子质荷比进行分析从而对于分子进行定性定量分析的一种方法,其有事在于能够通过特征图谱对于样品分子组成进行确定的同时,直接分析其可电离生物分子[1]。
在此检测方法的基础上还发展出现了ESI技术与MALDI技术,MALDI技术能够减去复杂的预分析,直接对于检测物的产生离子进行分析,而TOF则是采用探测器将离子到达飞行官末端的花费时间进行测量,两种技术的的整合使用早就了质谱检验技术的基础,随着此种技术的临床广泛应用,微生物实验室中对于微生物的检验鉴定方法发生了翻天覆地的变化,该技术能够优先增加检验的效率,单次检验60min内即可完成,对于临床疾病的判断具有重要意义[2]。
1 质谱检测法的原理和发展质谱技术是一种新型的致病菌检测方法。
其原理是质谱仪离子源通过辐照或者电离效应给予了检测目标物质以较高的能量,目标物吸收能量后被激发,在激发过程中吸收高能的物质会产生强烈的离子化效能[3]。
带电离子发生离子化后被载气带入质谱仪,通过电压的作用加速飞行,因为各个离子间具有不同的质荷比,因此会按照质量数的大小被分离。
质谱技术在临床微生物检测中如何应用
质谱技术在临床微生物检测中如何应用近年来,我国各种感染性疾病的发病率不断上升,老龄化人口比例的加重、抗生素使用的广泛、不正确的个人习惯等,导致感染性病原菌的种类呈现出复杂多变的特点,病菌的耐药性也在不断变化,感染性疾病的防治难度更高。
而加强临床微生物检测工作,能够更好的对各种致病的细菌和真菌等进行鉴别分析,以便于采取更好的措施对患者进行治疗。
但传统的生化检验工作受到很多因素的影响,耗时较长、准确性相对较低,已经不能满足当前的临床需求。
而质谱技术的应用,则很好的解决了这个问题。
那么,什么是质谱技术?质谱技术有什么用?咱们下面就来看一看。
1、什么是质谱技术?质谱技术是临床微生物检验中应用较为广泛也较为强大的高新技术,主要应用于对蛋白质进行分析。
在使用质谱技术的过程中,需要先将样品和基质进行混合,混合均匀后点在金属靶盘上形成结晶,对结晶使用激光进行辐射,其中的基质分子会将激光能量吸入,让样品在吸附后发生电离反应,出现不同质荷比的带电离子。
加速的电场会对样品离子的功能性进行激发,再经过高压状态的处理后进入质谱分析器,在计算机技术的处理下形成图谱,便于对微生物和菌株进行区分。
在当前的临床检验工作中,对于细菌等方面的鉴定主要是根据形态学技术标准或传统的生化反应进行的,在进行细菌鉴定的过程中,对于样品的纯度和时效性等都有较高的要求,而质谱技术对此却没有严格的要求,且检查的通量高、操作简便、检验用时低,在临床上有较高的应用价值。
2、质谱技术在临床微生物检测中如何应用?其实在现在的临床微生物检验过程中,质谱技术的应用非常普遍,而其检验的菌种类主要包括厌氧菌、霉菌、酵母菌、分歧杆菌、革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌等。
(1)使用质谱技术对细菌进行鉴定和分析质谱技术对于很多细菌都能够进行充分的分析,其中所使用的样本可以是原始的样本,也可以是培养出的菌群或纯菌落等,都能直接拿来测量,且在这些常见菌的鉴别中有很高的准确性,因此适用范围也较广。
临床生化检测中质谱技术的运用
临床生化检测中质谱技术的运用摘要:质谱技术是一种测量分子质荷比的分析法,具有高灵敏度、高通量、样品用量少等优势,在临床生化检测中获得了广泛应用。
质谱技术作为临床检验的新型工具,在医学检查具有良好的发展前景。
关键词:质谱技术;临床检验;应用分析1质谱技术综述质谱(mass spectrometry,MS)技术是一种测量分子质荷比(m/z)的分析法,其作用原理是:电离分子使其形成带电离子,再根据离子质荷比的大小次序排列形成图数据[1]。
质谱仪的核心部件是电子源、质量分析器,能够检测各种离子的峰强度,进而进行物质分析。
在电离技术不断发生的过程中,生物质谱得到了广泛应用。
当前,应用于生命科学领域研究中的质谱仪多由多种质量分析器串联而成,能够实现各种检测功能,并提供离子破裂的特征峰,具有较高的特异性与准确度。
2质谱技术在医学领域中的应用质谱成像(MSI)是一种新型的成像技术,可直接从生物组织切片表层中获取蛋白质或小分子代谢物的空间分布信息,当前被广泛应用于蛋白质组、脂组以及药物代谢等领域的研究中,具有高空间分辨率、高灵敏度、检测范围宽、样品处理简单等优势[2]。
气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术,在医学领域研究中可用以对药物及其代谢产物、天然产物化学成分、残留物、生物大分子等的分析,在临床诊断中具有一定的指导意义。
电喷雾电离质谱(ESI)是一种“软”电离技术,值产生分子离子峰,是测定生物大分子的最佳方法,具有较高的灵敏度,几乎不会产生碎片峰,质荷比值较低。
基质辅助激光解吸电离质谱(MALDI-MS)离子源可电离相对分子质量为100~1000 000的生物分子,通过高压电与短激光脉冲作用,让基质晶体生化,使基质与样本分子气化进入质谱仪的气相,其最突出的特点是准分子离子化很强、对样本中杂质的耐受量很大,可直接分析蛋白质酶解后产生的多肽混合物。
同位素稀释质谱(ED-ID-MS)既有质谱分析的高度特异性,也有同位素稀释的高度精密性,能为临床检验中标准物质的研究提供有效的技术保障,是临床检验的参考方法的首选。
质谱技术在临床微生物检验中的应用
真菌毒素检测
某些真菌可以产生毒素,质谱技术可 以检测这些毒素的成分和含量,有助 于评估真菌毒素对人体的危害。
04
质谱技术在临床微生物检验中的挑战与展望
标准化和规范化问题
缺乏统一的质谱技术标准和操作规范:不同实验室之间的结 果可比性差,影响临床诊断和治疗。
需建立标准化的实验流程和质控体系:确保实验结果的准确 性和可靠性。
80%
细菌分型与溯源
质谱技术可以对同种细菌的不同 菌株进行分型,有助于追踪感染 源和传播途径,控制疫情的扩散 。
质谱技术在病毒鉴定中的应用
病毒种属鉴定
通过对病毒的蛋白质组进行分 析,质谱技术可以快速鉴定病 毒的种属,有助于病毒性疾病 的诊断。
病毒变异分析
质谱技术可以检测病毒基因的 突变,从而分析病毒的变异情 况,为抗病毒药物的研发和疫 苗的研制提供依据。
03
质谱技术在临床微生物检验中的应用实例
质谱技术在细菌鉴定中的应用
80%
鉴定细菌种类
质谱技术通过对细菌的肽指纹图 谱进行分析,可以快速准确地鉴 定出细菌的种类,为临床诊断和 治疗提供依据。
ห้องสมุดไป่ตู้
100%
耐药性分析
质谱技术可以检测细菌的耐药性 相关蛋白,从而判断细菌对抗生 素的耐药性,有助于指导临床合 理用药。
临床应用的适应症和样本类型
需要进一步明确质谱技术在不同适应症和样本类型中的应用范围和优势。
未来发展方向和前景
加强基础研究和临床应用研究
01
深入研究和探索质谱技术在临床微生物检验中的潜力和应用前
景。
促进多学科交叉合作
02
加强与临床医学、药学、生物信息学等学科的交叉合作,共同
质谱技术在微生物鉴定和生物医学中应用PPT课件
目
CONTENCT
录
• 质谱技术概述 • 质谱技术在微生物鉴定中的应用 • 质谱技术在生物医学中的应用 • 质谱技术的前景与挑战
01
质谱技术概述
质谱技术的原理
离子化
通过物理或化学方法将样品分子转化为带电离子。
质量分析
利用电场或磁场将离子按质量大小进行分离。
100%
心血管疾病标志物检测
通过质谱技术检测心血管疾病相 关标志物,如心肌肌钙蛋白、B 型钠尿肽等,有助于心血管疾病 的预警和诊断。
80%
感染性疾病标志物检测
质谱技术也可用于检测感染性疾 病相关标志物,如C反应蛋白、降 钙素原等,有助于感染性疾病的 诊断和病情监测。
药物代谢和药效研究
药物代谢研究
质谱技术可以用于研究药物的代谢过程,了解药物在体内的代谢 途径和代谢产物,有助于药物的研发和优化。
专业技术要求高
质谱技术需要专业技术人员进行操作和维护,限制了其在 一些缺乏专业人才的领域中的应用。可通过加强技术培训 和推广,提高技术人员的专业水平。
质谱技术在生物医学中的前景展望
疾病标志物发现与鉴定
利用质谱技术对生物标志物进 行检测和鉴定,有助于疾病的 早期发现和治疗方案的制定。
药物代谢和药效研究
质谱技术可以检测微生物的表面蛋白和分泌蛋白, 这些蛋白具有很高的物种特异性,因此可以用于微 生物种类的鉴定。
质谱技术还可以结合其他技术,如色谱和质谱联用 技术,对微生物的代谢产物进行分析,进一步验证 微生物的种类。
微生物的基因组分析
质谱技术可以用于分析微生物 的全基因组,通过检测基因组 中的蛋白质表达情况,可以了 解微生物的生长和代谢状态。
质谱技术在临床微生物实验室的应用进展
质谱技术在临床微生物实验室的应用进展韩志勇;刘媛媛【摘要】基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization-time of flight-mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术是一项能够分析多种组分(如蛋白质、脂类、脂多糖等)的技术,其以操作简便、自动化、快速和高通量的优点成为临床微生物检验的新方法。
MALDI-TOF-MS技术在细菌、真菌和厌氧菌鉴定中较其他常用微生物检验方法的准确率高,且均可鉴定到种。
但在亲缘关系较近的链球菌属和嗜麦芽窄食单胞菌中的鉴定准确性较低,仍需进一步探索研究。
MALDI-TOF-MS技术对金黄色葡萄球菌、产碳青霉烯酶细菌和鲍曼不动杆菌等的耐药性筛查具有较高的准确率,但对肠杆菌科耐药性的检测效果较差,仍需深入研究。
随着细菌数据库及标准菌株图谱的完善,MALDI-TOF-MS技术必将在微生物鉴定、分型和耐药监测等方面发挥更大作用。
【期刊名称】《实用检验医师杂志》【年(卷),期】2015(000)003【总页数】5页(P182-186)【关键词】基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱;细菌;真菌;厌氧菌;耐药性;菌种【作者】韩志勇;刘媛媛【作者单位】300280 天津市,天津海滨人民医院检验科;300280 天津市,天津海滨人民医院检验科【正文语种】中文目前,在医院临床微生物实验室鉴定细菌主要依赖于传统的生物化学反应、分子生物学和形态学等方法,培养分纯出单个细菌菌落的鉴定耗时长,即使使用自动化细菌鉴定仪器,在时间上还是不能满足临床对检测结果时效性的要求;而基于分子生物学方法进行微生物鉴定大大地提高了灵敏度和时效性,但对工作人员技术要求高,检测成本高,只能针对某些特定菌株,还是难以满足临床常规要求。
自80年代初,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization-time of flight-mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术就已经成为一个用于研究与分析蛋白质特征的有利工具,以其操作简便、自动化、快速、高通量等优势受到青睐,并开始应用于医院微生物实验室,成为了一种新的微生物鉴定方法。
质谱技术在临床微生物检验中的应用
质谱技术在临床微生物检 验中的优势与挑战
章节副标题
质谱技术的优势
高灵敏度:能够检测低浓度的微生物提高检测的准确性。 快速:能够在短时间内完成微生物的鉴定提高检测效率。 特异性高:能够针对不同种类的微生物进行特异性检测减少假阳性的可能性。 自动化程度高:可以自动化完成检测过程减少人为误差和操作时间。
添加项标题
自动化与智能化:研发自动化、智能化的质谱分析系统减少人为 误差提高检测效率和准确性。
添加项标题
多组学分析:结合其他组学技术对临床微生物进行多维度、全方 位的分析为临床诊断和治疗提供更全面的信息。
添加项标题
个性化医疗:根据个体差异制定个性化的质谱检测方案提高疾病 预防和治疗的精准度。
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质分析
农业领域:用 于农产品质量 检测、农药残 留分析和转基
因作物研究
质谱技术在临床微生物检 验中的应用
章节副标题
微生物的鉴定
质谱技术可以 快速准确地鉴 定临床微生物
样本
质谱技术可以 检测微生物的
耐药性
质谱技术可以 检测微生物的
基因突变
质谱技术可以 检测微生物的
毒力因子
微生物的耐药性分析
质谱技术可以快速准确地鉴定微生物种类为耐药性分析提供可靠依据。 通过质谱技术可以检测微生物对不同药物的敏感性为临床用药提供指导。 质谱技术可以检测微生物的基因突变研究耐药性的产生机制和传播途径。 质谱技术可以监测微生物的耐药性变化为临床治疗提供及时调整方案。
微生物的溯源与分型
质谱技术可以对微生物进行快速准确的溯源确定其来源和传播途径。 质谱技术可以对微生物进行分型有助于发现新的病原体和变异株。 质谱技术可以用于监测微生物耐药性的变化指导临床用药和治疗方案。 质谱技术可以应用于临床诊断和治疗过程中提高微生物感染性疾病的防控效果。
探秘微生物的秘密武器——质谱鉴定技术
探秘微生物的秘密武器——质谱鉴定技术摘要:随着科学技术的不断进步,质谱鉴定技术被广泛应用于微生物领域,帮助人们更好地了解微生物的身份和功能。
本文将深入探讨质谱鉴定技术在微生物领域中的应用,揭示微生物的秘密武器。
关键词:微生物;质谱鉴定技术;代谢;特点一、引言细菌、真菌和病毒等微生物,是我们周围广泛存在的微小生命体。
它们既可以对人类健康产生重要的影响,也能在工农业、食品安全等领域扮演关键角色。
二、质谱鉴定技术的特点质谱鉴定技术作为一种基于质量-电荷比(m/z)的分析方法,已经在科学研究和应用领域中展现出其极高的价值和广泛的应用。
该技术通过将待测样品中的化合物分子进行分离和离子化,然后根据其质量和电荷比来进行检测和鉴定。
其一,质谱鉴定技术具有高灵敏度的特点。
它能够对微量的化合物进行检测和分析,甚至能够检测到仅有几个分子的存在。
这使得质谱鉴定技术在微生物领域中的应用具有重要意义,因为微生物中的活性物质往往以微量形式存在,而传统的分析方法很难对其进行有效的检测和分析。
其二,质谱鉴定技术具有高分辨率的特点。
它能够精确地分辨出不同化合物之间微小的质量差异,并提供详细的质谱图谱信息。
这对于微生物领域的研究非常重要,因为微生物中存在着众多类似结构的化合物,它们的质谱图谱往往非常相似。
通过高分辨率的质谱鉴定技术,科学家们能够准确地区分这些化合物并确定其结构,为微生物代谢和功能研究提供有力支持。
其三,质谱鉴定技术还具有快速分析的特点。
相比传统的分析方法,它能够在较短的时间内完成样品的检测和分析过程。
这对于微生物领域中需要大量样品分析的情况非常重要,能够提高实验的效率和准确性。
三、质谱鉴定技术在微生物领域的应用在微生物学领域,质谱鉴定技术已经成为了研究微生物的重要工具。
第一,质谱鉴定技术能够用于微生物的分子鉴定和分类。
传统的微生物学方法主要依靠生物学和生化特性对微生物进行分类,但这种方法具有耗时、依赖培养和较低的准确性的局限性。
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Impact of Rapid Organism Identification via Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Combined With Antimicrobial Stewardship Team Intervention in Adult Patients With Bacteremia and Candidemia 届由质谱快速分析及快速药敏介入临床抗生素管理小组执行成人病患菌血症及霉菌血症 的影响
难鉴定菌的检测准确度和速度将大大提高。
少见菌往往有其独特的药物选择,比如布鲁菌属首
选四环素类、奴卡菌首选复方新诺明等等。
克柔假丝酵母菌对氟康唑天然耐药,热带假丝酵母
菌对唑类药物的耐药性也有上升。
产单核李斯特菌4度可生长,易污染食物和乳制品,对人类可引起原发性脑膜炎、 脑炎、败血症。 对儿科常用药物头孢菌素天然耐药,对氨苄西林敏感。 因此,实验室一旦发现疑似产单核李斯特菌可能,就要快速给予临床相关信息。 梅里埃细菌鉴定药敏分析仪 VITEK 2 COMPACT 质谱鉴定 给出两个鉴定选项(产单核、无害李斯特菌), 需要补充CAMP试验结果(24小时孵育) 直接给出99.9%的鉴定结果 ——产单核李斯特菌
2-5天 2-5天
第一天
第二天
第三-四天
常规微生物检验遇到的困惑:
★呼吸道、肠道标本的细菌种类繁多,常规的鉴定成本高或者操作麻烦, 容易漏掉或者忽视某些细菌。 ★厌氧菌、弯曲菌、分枝杆菌和真菌:培养的难点,鉴定的死角,技术上
不好掌握或者成本高、时间长,难以实施。
★血培养的分级报告制度:存在很多变数,使得初次报告的结果可靠性 得 不到临床的认可。(比如:直接革兰染色涂片,初步能估计细菌大类,
鉴定/药敏最终报告时间提早 29小时; 84hr vs 55.9hr 有效用药时间提早十个小时: 30.1hr vs 20.4 hr 正确使用广效抗生素选择提早43小时 ; 90.3hr vs 47.3 hr 501位临床病患中, 快速报告族群30天内死亡率减少6.6% 脓毒症复发率减少3.9% ; 5.9% vs 2.0%
时间(包括操作)
20min 24~48 h
成本
20元 50元
质谱作为一项细菌鉴定领域的革新技术,与 现有传统的鉴定诊断技术相比,具有操作简单、 快速、通量高、灵敏度高、准确度好、试剂耗品 非常经济等优势。
质谱鉴定技术的临床价值
缩短了常规微生物培养鉴定时间。运用质谱
检测技术则可缩短至少1天的鉴定时间,为临 床救治危急重症患者赢得更多时间。而有研 究证实,在重症监护室(ICU)临床治疗中, 抗生素如果晚一小时准确治疗,病人存活率 下降8%。
微小单胞菌
质谱鉴定技术的临床价值
对少见菌、厌氧菌、部分真菌、奴卡菌等非常
难鉴定菌的检测准确度和速度将大大提高。
少见菌往往有其独特的药物选择,比如布鲁菌属首
选四环素类、奴卡菌首选复方新诺明等等。
克柔假丝酵母菌对氟康唑天然耐药,热带假丝酵母
菌对唑类药物的耐药性也有上升。
质谱鉴定技术的临床价值
检验科微生物室(内线1055)
检验科 微生物室
现代感染性疾病和临床微生物检测现状
耐药 菌株 增多 人员 少、 鉴定 速度 较慢 疑难 菌株 增多
现代感 染性疾 病新特 点
感染 菌种 类增 多
条件致 病菌增 多
临床微生物当前现状ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
病原 需氧菌 生长时间 24h 报告时间 3-4个工作日 5-7个工作日
厌氧菌
酵母菌 丝状真菌
48h
MALDI-TOF MS蛋白质指纹特征
不同菌种的蛋白指纹图谱
Pantoea agglomerans
成团泛菌
Acinetobacter lwoffi
洛菲不动杆菌 洋葱伯克氏菌
4000
m/z
8000
Burkholderia cepacia Raoultella ornithinolytica
鸟氨酸拉乌尔菌
Staphylococcus aureus
金黄色葡萄球菌 大肠埃希菌
Escherichia coli
4000
m/z
8000
梅里埃VITEK MS的数据库包含IVD1046种菌和RUO1500种菌的图谱。
质谱检测流程
挑取部分菌 落点样至靶 板
加基质液
MALDI TOF 检测
生成图谱
搜库鉴定
准确度
MALDI-TOF技术 常规方法 >90% >80%
但是无法确切到种。比如:L型菌无法确定其革兰染色性。)
操作方便的,成本便宜的。 不仅是实验室要求的,更是临床迫切需要的。
临床微生物实验室自动化
MALDITOF
革命性
将实验室人员从一些技
术要求较低的、能由仪 器完成的工作中解脱出 来,提高标本处理效率, 缩短报告时间。
基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱 (MALDI-TOF MS)
择 使血培养的分级报告更准确 临床医师可根据以往的耐药监测结果进行用药选
MALDI-TOF MS对血培养阳性样本的直接检测
优点:快速。
缺点:操作麻烦,且抽滤容易产生气溶胶,污染环境。不易于在临床推广。
鉴定的缺陷:多种菌感染不能鉴定,或者鉴定有误,链球菌等难于区分的菌 是最大的问题。
感谢聆听!
快速鉴定质谱结合药敏报告减少鉴定时间并帮助临床执行最合适抗生素用药
30 天内死亡率减少6.6%;ICU 住院天数减少6.6天; 对症用药时间缩短10 个小时 Clinical Infectious Diseases 2013;57(9):1237–
质谱鉴定技术的临床价值
对少见菌、厌氧菌、部分真菌、奴卡菌等非常