临床微生物学检验复习重点

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临床微生物学与检验重点

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微生物与检验重点1. 简述致病菌引起全身感染后,常见的几种类型?答:①毒血症②菌血症③败血症④内毒素血症⑤脓毒血症3. 试述构成细菌侵袭力的物质基础。

答:①荚膜②黏附素③侵袭性物质4. 简述病原菌感染机体后,机体如何发挥抗菌免疫功能?答:首先遇到机体的非特异性免疫包括皮肤与粘膜构成的屏障结构,血脑屏障,胎盘屏障及吞噬细胞对细菌的非特异性的吞噬和体液中杀菌抑菌物质对细菌的攻击。

7-10天后,机体产生特异的细胞免疫和体液免疫与非特异性免疫一起杀灭病原菌1. 简述细菌耐药性产生的主要机制。

答:①钝化酶的产生②药物作用靶位发生改变③胞壁通透性的改变和主动外排机制④抗菌药物的不合理使用形成了抗菌药物的选择压力,在这种压力的作用下,原来只占很少比例的耐药菌株被保留下来,并不断扩大。

1.举例说明细菌命名的原则。

答:细菌的命名一般采用国际上通用的拉丁文双命名法。

一个细菌种的学名由两个拉丁字组成,属名在前,用名词,首字母大写;种名在后,用形容词,首字母小写;两者均用斜体字。

中文译名种名在前,属名在后。

如Mycobaterium tuberculosis(结核分枝杆菌)。

属名亦可不将全文写出,只用第一个大写字母代表,如M. tuberculosis 2.如何确定从标本中分离的细菌为葡萄球菌?并确定其有无致病性。

答:①直接镜检,经革兰染色后镜检发现革兰染色阳性呈葡萄状排列的球菌,可初步报告疑为葡萄球菌,需进一步分离培养鉴定。

②分离培养:血培养需经增菌后转种血平板进一步鉴定,若无细菌生长,需连续观察7天,并以血平板确定有无细菌的生长。

脓液、尿道分泌物、脑脊液沉淀物可直接接种血平板,37℃过夜,可形成直径约2-3mm、产生不同色素的菌落。

金葡菌菌落周围有透明溶血环。

③试验鉴定:血浆凝固酶试验,甘露醇发酵试验,耐热核酸酶试验,肠毒素测定,SPA检测。

致病性葡萄球菌菌落周围有透明溶血环,血浆凝固酶试验阳性,甘露醇发酵试验阳性,耐热核酸酶试验阳性,SPA检测有A蛋白的存在。

临床微生物学检验复习资料总结

临床微生物学检验复习资料总结

临床微生物学检验显性感染(n):如果宿主的抗感染免疫力较弱,或侵入的病原体数量较多,毒力较强,机体的组织细胞受到不同程度的损害并出现一系列的临床症状和体征。

细菌大小以微米为测量单位。

鞭毛是细菌的运动器官。

培养基按用途分类:1.基础培养基。

2.营养培养基。

3.鉴别培养基。

4.选择培养基(n):在培养基中加入某些特殊化学物质,抑制某些细菌的生长而有助于需要的细菌种类的生长,使需要菌从混杂的微生物群体中分离出来。

细菌的遗传物质包括染色体和质粒,其化学组成为DNA,DNA籍其构成特定基因来传递遗传信息。

质粒(n):是染色体外的DNA,携带有编码某些遗传特性的基因,它能独立于染色体进行自我复制。

质粒的特性:不相容性;可转移性;自主复制质粒;质粒可自然丢失或用人工方法消除。

(P67)S-R变异(n):新从患者体内分离的沙门菌通常为光滑型,经人工培养后菌落呈粗糙型。

丝状菌(或称霉菌n):营养体呈多细胞类型的真菌是由菌丝和孢子交织组成。

细菌的科学命名:属名在前,是名词,首字母大写;种名在后,是形容词,无论是人名还是地名均小写,两者均用斜体表示。

中文译名则种名在前属名在后。

氧化-发酵试验(O-F):细菌在分解葡萄糖的过程中,必须以分子氧作为电子受体的称为氧化型;细菌在分解葡萄糖的过程中,可以进行无氧降解的称发酵型,此类细菌无论有氧或无氧均可以分解葡萄糖,通常为兼性厌氧菌;不分解葡萄糖的细菌称产碱型。

此试验用于细菌种属间的鉴别:肠杆菌科细菌为发酵型,非发酵菌通常为氧化型或产碱型。

此外,微球菌属可氧化葡萄糖,而葡萄球菌属则能发酵葡萄糖。

迟缓分解乳糖(n):只有β-半乳糖苷酶而缺乏半乳糖苷渗透酶(或是其活性很弱)的细菌,不能很快将乳糖运送到细菌细胞内,需要几天时间乳糖才能被分解。

氧化酶试验:氧化酶或称细胞色素氧化酶,是细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶。

作氧化酶试验时,此酶首先使细胞色素C氧化,然后氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化,产生颜色反应。

临床微生物学检验考试重点知识总结

临床微生物学检验考试重点知识总结

临床微生物学检验第一章微生物感染与宿主免疫根据微生物与人体的关系:有益微生物条件致病微生物病原微生物。

肠道中双歧杆菌最为典型P11 *1潜伏感染:若宿主与病原病体在相互作用过程中暂时处于平衡状态,病原体潜伏在病灶内或某些特殊组织内,一般不排除体外。

(如果宿主的抗感染免疫力减弱,或侵入的病原体数量增多,毒力较强,机体的组织细胞受到不同程度的损害并出现一系列临床症状和体征,则称为显性感染。

)病原微生物的传播V:空气传播飞沫传播接触传播共同媒介物传播虫媒传播多途径传播P21 2,(病原菌的毒力包括侵袭力和毒素。

)侵袭力:病原菌在宿主见传播侵袭定植并逃避免疫的能力,称为侵袭力。

由菌体表面结构和侵袭物质等构成P25 3、胞内菌感染免疫:胞内菌分专职和兼职,兼职胞内菌在宿主体内主要寄居在细胞内生长繁殖,但是亦可在细胞外没有无活细胞的环境生存繁殖。

(如结核分支杆菌麻风分枝杆菌)第二章细菌的基本形状P38 1、细菌大小以微米um为测量单位。

人肉眼的最小分辨率为0.2mm. 按其外形:球菌杆菌螺旋菌球形呈圆球形、近圆球形、矛头状和肾形P41 2 、鞭毛功能:1)动力:鞭毛是细菌的运动器官,(旋转运动是由基础小体的同心环旋转产生,推动力来自质子动能,即质子浓度梯度流动所释放的ATP。

鞭毛旋转方向决定运动类型,观察细菌动力用悬滴法或压滴法在显微镜下观察其运动,也可将细菌接种于半固体培养基观察动力)2)鉴别细菌;鞭毛及细,一般染色不能看见,常用特殊染色和镀银染色观察细菌有无鞭毛及鞭毛数量、分布,可用于鉴别细菌P42 3、性菌毛可也结合的方式在细菌之间传到DNA,导致细菌毒性及耐药性的变异6、糖萼功能 1)与细菌毒力有关:有糖萼的细菌表面光滑,不易被细菌细胞吞噬,消化,逃避免疫吞噬后的细菌可在机体组织细胞中生长繁殖引起感染。

2)细菌的鉴别和分形:夹馍物质具有特异性抗原,可作为细菌的鉴别和分形。

3)形成生物膜7、革兰阴性菌细胞壁特有组分-----磷壁酸8、芽孢功能:1)对热力、干燥、辐射、化学消毒具有强大抵抗力2)以是否能杀死芽孢作为物品消毒灭菌效果的判断指标,3)芽孢在菌体的位置和直径的大小随菌种的不同,这种形态特点有利于细菌的鉴别。

临床微生物学检验复习重点

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临床微生物学检验复习重点临床微生物学检验复习重点第一章生物安全和医院感染1.实验室生物安全保障:指单位和个人为防止病原体或毒素丢失、被盗、滥用、转移或有意释放而采取的安全措施。

2.医院感染(NI):在医疗机构中获得的感染。

包括外源性和内源性,外源性来自于另一感染者/环境内源性:患者,正常菌群迁徙至其他部位等导致病原体过度生长。

第二章临床微生物检验标本的采集1.标本的一般采集原则1.1早期采集病程早期、急性期或症状典型时,使用抗生素或其他抗菌药物之前。

1.2无菌采集:采集的标本应无外源性污染。

消毒,无菌容器。

1.3根据目的菌的特性用不同的方法采集1.4采集适量标本伤寒-1周:血液 2周:粪便和尿夜1.5安全采集2.厌氧菌:在有氧条件下不生长,在无氧条件下生长的细菌。

2.1厌氧菌感染的条件:组织缺氧或氧化还原电势降低→原因:局血障:血管损伤、肿瘤压迫、烧伤、动脉硬化、组织水肿、坏死、有异物等,刺伤,大面积外伤2.2厌氧菌感染的临床特征(1)分泌物具典型的腐臭,血性渗出物呈黑色。

在紫外线下可发红色荧光(产黑色素普氏菌或卟啉单胞菌感染)。

(2)感染组织局部有大量气体产生→皮下有捻发音时为产气荚膜梭菌。

(3)部位为黏膜附近(4)长期使用氨基糖苷类抗生素无效者,新近流产史,胃肠术后(5)深部外伤枪伤,咬伤后继发感染(6)分泌物经革兰染色后,有细菌,规培:阴性液体及半固体培养基深部生长第三章临床细菌学检验技术1.细菌形态学检查→显微镜检其菌体形态1.1涂片 1.2干燥 1.3固定1.4 染色:(1)初染:加草酸铵结晶紫一滴,约一分钟,水洗。

(2)媒染:滴加碘液冲去残水,并覆盖约一分钟,水洗。

(3)(3)脱色:将载玻片上的水甩净,并衬以白背景,用95%酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止,约20—30秒,立即用水冲净酒精。

(4)复染:用复红液染1—2分钟,水洗。

1.5镜检:干燥后,置油镜观察。

革兰氏阴性菌呈红色,革兰氏阳性菌呈紫色。

临床微生物学检验重点知识归纳

临床微生物学检验重点知识归纳

临床微生物学检验重点知识归纳
临床微生物学检验重点知识归纳:
1.细菌的基本结构有:细胞壁、细胞膜、细胞质、核质。

2.细菌的特殊结构:荚膜(抗吞噬作用)、菌毛(细菌的黏附器官)、鞭毛(细菌的运动器官)、芽胞(细菌在不良环境中的存活方式)。

3.肽聚糖:为革兰阳性菌和革兰阴性菌细胞壁的共同成分。

4.磷壁酸:为革兰阳性菌细胞壁特殊成分。

5.外膜层:为革兰阴性菌细胞壁特殊成分。

6.质粒:是细菌染色体外的遗传物质,存在于细胞中,是小的双股闭合环状DNA分子,可独立于染色体存在并复制,也可整合到染色体上。

7.细菌L型:是细胞壁缺陷型细菌。

8.细菌以“二分裂”方式繁殖。

9.细菌的生长曲线主要包括四期:延缓期、对数期(最佳研究时期)、稳定期、衰亡期。

10.细菌常见的遗传变异类型:
①转化(供体菌游离的DNA片段直接进入受体菌);
②接合(通过性菌毛互相连接,将遗传物质从供体菌转移给受体菌);
③转导(以温和噬菌体为载体,将遗传物质从供体菌转移给受体菌);
④S-R变异(细菌菌落由光滑型到粗糙型的变异)。

11.细菌非染色标本:检查细菌动力。

12.革兰染色:是细菌学中最经典、最常用的染色方法。

13.革兰染色步骤:初染(结晶紫)、媒染(碘液)、脱色(酒精)、复染(石炭酸复红)。

14.标本处理的一般原则:早期、无菌、适量、方法、安全。

15.培养基种类:基础培养基、选择培养基(SS培养基)、鉴别培养基(克氏双糖铁)、营养培养基(巧克力平板)、特殊培养基(细菌L型培养基)。

临床微生物检验复习整理

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第一章细菌检验的基本技术第一节细菌形态学检查第二节细菌的培养和分离技术1、可用哪些方法观察细菌的动力?有动力细菌的运动和布朗运动有何区别?1)不染色标本直接镜检(常用的方法:悬滴法和压滴法)。

2)鞭毛染色:具有鞭毛的细菌具有运动能力(硝酸银染色法)有动力:可见鞭毛;无动力:不见鞭毛。

3)半固体穿刺接种法有动力:可看到细菌自一处移至另一处,有明显的方向性位移。

无动力:细菌呈现布朗运动,只在原地颤动而无位置的改变。

2、用普通光学显微镜进行染色细菌形态学观察主要观察什么?染色标本的检查,主要观察细菌的染色性、形态、排列、大小、某些特殊结构等。

3、革兰染色法的影响因素。

①菌龄:选取对数生长期的细菌进行染色,可正确反映染色的结果,若菌体细胞未成熟或已老化,染色结果可能会出现完全相反的情况;②涂片质量:涂片太厚,菌体明显堆积在一起,不易脱色或脱色不完全,使革兰氏阴性菌成革兰氏阳性菌,革兰氏阴性菌残留大量结晶紫,经复染后难以观察到典型的蓝紫色。

③媒染时间:媒染时间过短,不利于初染液结晶紫与细胞之间的结合,因而可能造成阳性菌呈阴性结果;反之,媒染时间过长,容易使阴性菌呈假阳性。

媒染时间应控制在60s左右为宜。

④乙醇脱色时间:若脱色时间过长,革兰氏阳性菌也有可能被脱色,成为假阴性菌。

同样若脱色时间不足,革兰氏阴性菌细胞壁的部分类脂质未被乙醇溶解,使结晶紫—碘复合物不能被洗脱出来,成为假阳性菌4、平板分区划线的目的是什么?是细菌分离培养常用的一种方法。

其目的是使标本或培养物中混杂的多种不同细菌分散生长,形成单个菌落。

根据菌落的形态特征,挑选单个菌落进行纯培养,为进一步对目的菌进行研究和鉴定提供条件。

5、细菌培养的方法有哪些?1)需氧培养法2)二氧化碳培养法(5%--10%CO2)3)厌氧培养法4)微需氧培养法(5% O2、10%CO2、85%N2)6、何为“选择培养基”?培养基中加入抑制剂,抑制标本中杂菌生长,选择性让目的菌生长的培养基。

临床微生物检验考试复习重点知识总结

临床微生物检验考试复习重点知识总结

临床微生物检验细菌整理(球菌)临床微生物检验细菌整理(肠杆菌科)临床微生物检验细菌整理(肠杆菌科)临床微生物检验细菌整理(肠杆菌科)临床微生物检验细菌整理(不发酵革兰阴性杆菌)临床微生物检验细菌整理(苛氧菌)★定义:苛养菌是对营养要求高,培养条件苛刻,普通培养基上不生长或很难生长的一类细菌。

体外培养时需添加生长因子或其它营养成分,提供特殊的生长环境,需要长时间才能检测到生长,故又称“难培养的细菌”。

临床上常见的苛养菌:①球菌:肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。

②阴性杆菌:“HACEK”细菌群、军团菌属、布鲁菌属、鲍特菌属等。

“HACEK”细菌群由五个菌属组成:H →嗜血杆菌属A →凝聚杆菌属C →心杆菌属E →艾肯菌属K →金氏杆菌属临床微生物检验细菌整理(弧菌属)本属细菌的一些主要特点:①生化反应:OXI+(麦氏弧菌除外)、GLU(F)、O/129(S)②嗜盐性:钠离子可刺激细菌生长,除霍乱弧菌和拟态弧菌外,其它所有弧菌绝对需要钠离子,某些细菌无盐不生长。

③生长特性:BAP可出现各种溶血现象,肠道选择培养基上为糖不发酵菌落。

④选择培养基:TCBS琼脂和碱性蛋白胨琼脂。

分解蔗糖的菌种在TCBS琼脂形成黄色菌落,不分解者为绿色菌落;某些弧菌在此培养基上不生长。

临床微生物检验细菌整理(气单胞菌属和邻单胞菌属)临床微生物检验细菌整理(棒状杆菌属)临床微生物检验细菌整理(有芽孢需氧革兰阳性杆菌)临床微生物检验细菌整理(分枝杆菌属)★分枝杆菌属的形态特点:①菌体形态:为微弯曲或直的杆菌。

②细菌排列:单个、V、Y、T或条索状排列,有的堆积成球状。

③染色:革兰阳性菌,但不易着色,镜下可见“影子”细菌。

④形态异质性:菌种不同,形态有差异;不同生长环境同一菌株形态不同。

③严禁在涂抹标本的同时对载玻片进行加热④涂片应厚薄均匀,通过标本膜看报纸上5号字,字迹较模糊为适宜厚度。

⑤染液需覆盖痰膜,加热用微火至染液呈现蒸汽,离开火焰维持5分钟,及时补充染液,勿使染液干涸⑥细流水轻缓冲洗⑦染色后肉眼观察痰膜呈兰色,不得有红色斑块⑧痰膜脱落部分在10%以下⑨镜下视野背景清晰,抗酸菌呈红色,其它细菌和细胞呈蓝色⑩操作应在生物安全柜中进行。

临床微生物检验考试复习重点知识总结

临床微生物检验考试复习重点知识总结

绪论,1.细菌的发现者:安东尼·范·列文虎克,1665年,列文虎克研制出了第一台显微镜,1675年,通过显微镜看到了细菌。

法国的化学家、微生物学家巴斯德:“曲颈瓶实验”建立了病菌学说;创立了巴氏消毒法;研制了鸡霍乱杆菌、炭疽杆菌减毒菌苗、狂犬疫苗。

德国的细菌学家郭霍:发明了固体培养基,并创立了细菌染色法;创立了实验动物感染方法。

英国细菌学家亚历山大·弗莱明发现了青霉素2.微生物:是存在于自然界的一大群形体微小、结构简肉眼直接看不见,必须借助光学显微镜和电子显微镜放大数百至数万倍才能观察到的微小生物。

按照微生物的大小、结构和组成分类:原核细胞型微生物(细胞核无核膜、核仁,呈环状裸DNA结构,包括细菌、放线菌、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体)真核细胞型微生物(细胞核分化程度高,有核膜、核仁,细胞器完整,包括真菌和原虫)非细胞型微生物(仅有一种核酸类型,包括病毒、亚病毒、朊粒)根据微生物与人类的关系分类:正常菌群:定居在人类皮肤和黏膜上的各类微生物,在正常情况下无害,而且具有拮抗外来病原微生物和提供某些营养物的作用。

条件致病微生物:原属正常菌群中的细菌,由于机体抵抗力下降、寄居部位改变或寄居微生物丛平衡失调,能引起内源性感染。

病原微生物:指少数能引起人类和动、植物致病的微生物。

3.微生物学:是生物学的一个分支,它是研究微生物的类型、分布、形态结构、生命活动及规律、遗传、进化以及与人类、动物、植物等相互关系的一门学科。

随着其研究的深入,形成了很多分支学科。

4.医学微生物学:是研究与医学和疾病有关的病原微生物的生物学特性、致病性、免疫性以及特异性诊断和预防治疗措施的学科。

5.临床微生物学的性质和任务:1.研究感染性疾病的病原体特征2.提供快速而准确的病原学诊断3.指导临床合理使用抗菌药物4.对医院感染进行监控6.临床微生物检验的思路与原则:1.确保分析前质量2.全面了解机体的正常菌群3.保证检验过程中的质量4.采用三定一结合(定性、定量和定位,结合病情)5.重视和加强与临床的联系第一章1.生物安全:采用微生物学技术、安全设施、保护设备,防止实验室工作人员、环境及公众暴露于实验室中处理储存的已知或潜在的感染性微生物。

微生物学检验重点知识总结

微生物学检验重点知识总结

微生物学检验重点知识总结微生物学是研究微生物的结构、生理、生化、生态以及与人类和环境的关系的一门学科。

在微生物学检验中,掌握以下重点知识是非常重要的。

1.微生物分类学:微生物可以分为原核生物和真核生物。

原核生物包括细菌和古细菌,真核生物包括真菌、原生动物和线虫等。

了解微生物的分类和命名体系,对于正确识别和鉴定微生物是至关重要的。

2.微生物培养技术:微生物的培养是检验微生物的基础。

掌握常见的微生物培养方法,如液体培养、平板培养和深层培养等,并了解培养基的配制和消毒操作的方法。

3.微生物的生长特性:微生物的生长特性包括生长曲线、生长速率、最适生长温度和最适生长pH等。

了解微生物的生长特性对于选择合适的培养条件和进行微生物检验是非常重要的。

4.微生物的鉴定方法:微生物的鉴定是微生物学检验的重点。

常见的微生物鉴定方法包括形态学观察、生理生化特性检测、免疫学检测和分子生物学检测等。

掌握常用的微生物鉴定方法和技术,可以准确快速地鉴定微生物。

5.微生物与人类健康的关系:微生物在人类健康中起着重要作用。

了解微生物对人类健康的影响,如微生物的致病机制、致病微生物的鉴定和抗微生物药物的应用等,有助于预防和治疗微生物引起的疾病。

6.微生物在环境中的作用:微生物在环境中起着重要的生态作用。

了解微生物在土壤、水体和大气中的功能和影响,对于环境保护和资源利用具有重要意义。

7.微生物学检验方法:微生物学检验方法包括微生物计数、微生物培养、抗微生物药敏试验、细菌鉴定和病毒检测等。

掌握常见的微生物学检验方法和技术,能够准确、快速地检测微生物。

8.检验结果的解读和分析:对于微生物学检验结果的解读和分析是非常重要的。

了解常见的微生物学检验参数和阈值,能够根据检验结果判断微生物的致病性和药物敏感性等。

总结起来,微生物学检验的重点知识包括微生物的分类和命名、微生物培养技术、微生物的生长特性、微生物的鉴定方法、微生物与人类健康的关系、微生物在环境中的作用、微生物学检验方法以及检验结果的解读和分析等。

临床微生物检验学考试复习知识重点资料

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第一章微生物感染与宿主免疫1.显性感染:如果宿主的抗感染免疫力较弱,或侵入的病原体数量较多、毒力较强,机体的组织细胞受到不同程度的损害并出现一系列的临床症状和体征,则称为显性感染。

2.病原菌的毒力包括侵袭力和毒素。

病原菌在宿主间传播、侵袭、定植并逃逸免疫的能力,称为侵袭力。

3.侵袭力【黏附:可由黏附素介导,革兰阴性菌为菌毛,革兰阳性菌为磷壁酸。

宿主黏膜上皮细胞表面的黏附素受体一般是糖蛋白或糖脂。

】第二章细菌的大小与形态1. 细菌的大小以微米(um)为测量单位。

2. 鞭毛功能动力,鞭毛是细菌的运动器官,呈现旋转运动是由基础小体的同心环旋转产生,推动力来自于质子动能,即质子浓度梯度流动所释放的ATP。

鞭毛旋转方向决定运动类型。

3. 观察细菌动力可用悬滴法或压滴法在显微镜下直接观察其运动,也可将细菌穿刺接种半固体培养基观察动力。

4.选择培养基:在培养基中加入某些特殊化学物质,抑制某些细菌生长而有助于需要的细菌种类生长,使需要菌从混杂的微生物群体中分离出来。

第三章细菌的遗传与变异1. 细菌的遗传物质包括染色体、质粒。

2. 质粒:是细菌染色体外的DNA,携带有编码某些遗传特性的基因,它能独立于染色体进行自我复制。

3. 质粒的特性:a.不相容性【是指相似的质粒在同一细胞中不能共存】b.可转移性【质粒的转移方式随不同质粒而不同,最重要的一种方式是有质粒编码的接合系统】c.自主复制质粒【利用宿主系统独立于染色体进行复制】d.质粒可自然丢失或用人工方法消除。

4. 培养特性变异新从患者体内分离的沙门菌通常为光滑型,经人工培养后菌落呈粗糙型,这种变异称S-R变异。

S-R变异常伴有抗原、毒力和某些生化特性的改变。

第四章病毒的基本性状1. 病毒的结构可分为基本结构和辅助结构。

病毒的基本结构包括核心、衣壳。

辅助结构是包膜(是包围在病毒核衣壳外面的双层膜结构),包膜对乙醚是敏感的,若呈阳性,则说明有乙醚存在。

第五章真菌的基本性状1.营养体呈单细胞类型的真菌又称酵母菌。

临床微生物检验知识点

临床微生物检验知识点

临床微生物检验知识点1.微生物学基础知识:了解细菌、真菌、病毒、寄生虫等病原微生物的基本特征,包括形态、生长要求、代谢特性等。

2.微生物的分离和培养:熟悉常规培养基的选择和制备,掌握不同微生物的适宜培养条件,如温度、pH值、氧气需求等。

3.微生物鉴定:根据微生物的形态和特性进行初步鉴定,如形态学特征、革兰氏染色、厌氧性检测等。

此外,还可以使用生物化学试纸、血清学试验、分子生物学等方法进行鉴定。

4.耐药性检测:对微生物进行药敏试验,了解其对各类抗生素、抗真菌药物、抗病毒药物的敏感性和耐药性。

这有助于临床医生选择合适的药物治疗感染。

6.检验流程和规范:了解微生物检验的标本采集、处理和保存的基本要求,掌握各类检验方法的操作步骤,遵守无菌操作规范,以保证检验结果的准确性和可靠性。

7.抗生素治疗和微生物学监测:了解抗生素的分类、作用机制和临床应用,以及微生物的产生耐药性的机制和监测方法。

合理应用抗生素,避免滥用和不当使用,是临床微生物检验的重要目标之一8.感染控制:了解医院感染控制的基本原则和措施,包括手卫生、环境清洁、消毒灭菌、隔离措施等。

临床微生物检验在感染控制中发挥着重要作用,通过对患者、环境和医务人员的监测,提供科学依据进行感染防控。

9.病原微生物的定量检测:对一些病原微生物,如HIV、肺结核菌等,需要进行定量检测。

这有助于预测疾病进展、评估治疗效果和制定治疗方案。

10.新技术和新方法的应用:随着科技的进步,临床微生物检验也不断发展,新的方法和技术被广泛应用,如实时荧光PCR、质谱技术、核酸杂交等。

了解这些新技术的原理和应用,可以提高检验的灵敏度和特异性。

总结起来,临床微生物检验的知识点涉及微生物学基础、分离培养、鉴定、药敏试验、诊断、标本采集处理、抗生素治疗和感染控制等方面。

掌握这些知识,可以提高临床微生物检验的准确性和可靠性,为临床医生提供更科学的诊断和治疗建议。

临床微生物学检验笔记

临床微生物学检验笔记

绪论【内容讲解】一、微生物概念:微生物是存在于自然界的一大群形体微小、结构简单、肉眼不能直接看到,必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百至数万倍才能看到的微小生物。

微生物与人类的关系(寄居人类)正常菌群:指定居在人类皮肤及与外界相通的腔道黏膜上的各类非致病微生物,非但无害,而且具有拮抗某些病原微生物和提供某些营养物的作用。

条件致病性微生物:原属正常菌群中的细菌,不会引起疾病,由于机体抵抗力下降、微生物寄居部位改变或菌群失调,此时该菌可致病。

临床上多引起内源性感染。

病原微生物:可引起人类和动、植物致病的微生物,影响人类健康与生命,是医学微生物中要研究的主体。

二、微生物学、医学微生物学和临床微生物学微生物学:生物学的一个重要分支。

医学微生物学:研究对人类致病的微生物及其生命活动规律,只涵盖了微生物学的很小一部分。

临床微生物学:属于医学微生物学的范畴。

侧重研究感染性疾病快速、准确的诊断病原体的策略与方法,为临床诊断提供依据。

临床微生物学的性质和任务临床微生物学:属于医学微生物学的范畴。

侧重研究感染性疾病快速、准确的病原学诊断的策略与方法,为临床诊断提供依据。

(一)临床微生物学的性质和任务1.研究感染性疾病的病原体特征2.提供快速、准确的病原学诊断3.指导临床合理使用抗菌药物4.对医院感染进行监控①病原学诊断;②药物敏感试验;③环境、器械等微生物学调查;④保证医院内消毒、灭菌质量;⑤细菌学分型试验和同源性分析;⑥对医院工作人员进行培训工作;⑦建立医院感染预防控制体系,落实相关制度和措施。

(二)临床微生物检验的思路与原则1.确保分析前质量临床标本可靠2.全面了解机体正常菌群3.保证检验质量、快速准确提供信息4.微生物学定性、定量和定位分析结合患者病情,并对分离菌进行定性、定量及定位分析,方可保证检验结果符合临床诊断5.加强与临床联系临床微生物学检验的现状、发展和展望(一)感染性疾病的现状1.易感人群不断增加2.新病原体不断出现、已控制的病原体死灰复燃3.感染因子在非感染性疾病中的作用越来越明显4.细菌耐药和医院感染的问题日趋严重(二)快速诊断方法的发展1.改变流程、缩短报告周期2.非培养快速鉴定(三)分子生物学技术飞速发展(四)计算机技术的发展(五)愿景和展望【例题】不属于原核细胞型的微生物是A.螺旋体B.放线菌C.病毒D.细菌E.立克次体[答疑编号502383010101]【正确答案】C【例题】正常情况下,机体有菌的部位是A.胃B.骨骼C.肌肉D.血液E.外耳道[答疑编号502383010102]【正确答案】E本章小结:一、微生物的概念和分类二、微生物与人类的关系三、临床微生物的思路和原则细菌的形态和结构●考点◇细菌的大小和形态◇细菌的基本结构◇细菌的特殊结构◇细菌L型【内容讲解】一、细菌的大小和形态大小:形体微小,通常以微米作为测量单位形态:◇球菌◇双球菌;链球菌;葡萄球菌;四联球菌和八叠球菌◇杆菌◇螺形菌◇弧菌;螺菌影响细菌形态的因素:①培养条件;②机体内生态环境;③环境中不利于细菌生长的物质。

临床微生物学必背知识点

临床微生物学必背知识点

临床微生物学必背知识点一、知识概述《临床微生物学》①基本定义:临床微生物学就是研究那些和人体生病有关的微生物,像细菌啊、病毒啊、真菌还有寄生虫等等的一门学问。

简单说,就是搞清楚这些微生物在人得病的时候是咋回事,咋进去身体,又对身体做了啥坏事。

②重要程度:这在医学里可太重要了。

如果不懂得临床微生物学,医生就很难找到病因,就像在黑夜里瞎摸。

知道了是哪种微生物让人得病,才能对症下药。

比如说,肺炎可能是细菌感染,也可能是病毒感染,要是弄不清,治疗方法就可能选错。

③前置知识:得先有点生物学基础知识吧,知道细胞结构啊、新陈代谢这些基本内容。

就好比盖楼得先有地基,有这个基础才能更好地去理解微生物在人体里怎么生存繁殖。

④应用价值:在医院天天都用得着。

比如一个人发烧咳嗽,医生通过检验痰液里的微生物,就能判断是流感病毒还是肺炎链球菌引起的感染。

这样就能针对病情给病人合适的药,少走弯路,让病人好得快。

二、知识体系①知识图谱:临床微生物学就像一个大拼图,每一块拼图都是关于一种微生物或者一类和微生物有关的知识。

像细菌那一块儿,里面得包括细菌的长相、生存环境、怎么对人体使坏等等。

它处于医学知识体系里关于诊断和治疗疾病的核心部分。

②关联知识:和药理学联系紧密。

你知道是细菌感染了,这和用啥药杀菌、药物怎么在身体里对细菌起作用这些药理知识是分不开的。

还有病理学,微生物在身体里造成生病,怎么造成组织病变都是和病理学交叉的点。

③重难点分析:- 掌握难度:感觉比较难的是那些长得差不多的微生物的区分。

比如说葡萄球菌和链球菌,在显微镜下看起来就有点像,要想分清得仔细看形态还有它们的生化反应。

- 关键点:我觉得关键在于得记住每类微生物的独特之处,像病毒没有细胞结构这个就是它区别于细菌和真菌的超级大的特点。

④考点分析:- 在考试中的重要性:超级重要。

大部分医学院校的考试都会大量考这个内容,而且从平时的小测验到最后的结业考试都离不开。

- 考查方式:有考概念的,像让你解释啥叫细菌的耐药性。

临床微生物学检验备考复习要点

临床微生物学检验备考复习要点

抗酸菌—指一类经抗酸染色染成红色的细菌内基氏小体—狂犬病毒感染大脑海马回的神经细胞,在细胞浆中形成的嗜酸性包涵体。

HIV—人类获得性免疫缺陷综合征的病原体HBsAg—乙型肝炎的表面抗原包涵体—某些病毒感染细胞,在被感染细胞的细胞浆或细胞核内形成圆形或椭圆形的嗜酸性或嗜碱性的小体。

垂直传播—病毒由母体传至婴儿的方式。

水平传播—病毒在人群中个体与个体之间的传播。

干扰现象—两种病毒同时感染同一细胞时,发生一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象。

汹涌发酵现象—产气荚膜芽孢梭菌在牛乳培养基中短时间内分解乳量产生大量气体,使培养基溢出的现象。

非发酵菌—一群不利用或仅以氧化形式利用糖类的G-无芽孢杆菌病毒—一类个体微小,结构简单,专性细胞内寄生以复制的方式增殖的非细胞型微生物。

孢子—真菌的繁殖结构卫星现象—当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同培养时,由于后者能合成V因子释放于培养基中,故在金黄色葡萄球菌菌落周围,流感嗜血杆菌菌落较大,远离金黄色葡萄球菌菌落较小。

AIDS—获得性免疫缺陷综合征CPE—多数病毒在细胞内增殖,可引起细胞形态学改变,称为细胞病变效应。

CFU—经培养所得菌簇形成单位, 对可见的细菌数量进行测量的单位。

BCG—卡介苗,卡,介两氏把有毒的牛型结核杆菌在含有胆汁,马铃薯,甘油的培养基上长期人工培养,经13年,传230代,得到毒力减弱而抗原性稳定的菌株,用于结核病的预防。

支原体—是一类缺乏细胞壁,呈高度多形态,能通过过滤菌器,可人工培养的一类最小的元和细胞型微生物。

因其能形成丝状与分支状而称为支原体。

螺旋体—是一类细长,柔软,弯曲呈螺旋状,运动活泼的原核细胞型微生物,归广义的细菌,在生物学上的低位介于细菌和原虫之间。

干扰素—由病毒或其他干扰素诱生剂,作用于机体细胞可表现出抗病毒,抗肿瘤及免疫调节等生物活性。

O/F试验—根据细菌在分解葡萄糖的代谢过程中队氧分子需求的不同,可将待检菌分为两类,需要分子氧的氧化型和进行无氧酵解的发酵型。

临床微生物检验知识点

临床微生物检验知识点

临床微生物检验123、G+菌特有成分:磷壁酸(重要表面抗原,可用于细菌血清学分型)(外毒素)4、G-菌特有成分:外膜层(由脂多糖(内毒素)、脂质双层(磷脂)、脂蛋白)5、G H菌和G-菌细胞壁的共同成分是肽聚糖。

结构由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥(G- 菌无。

是溶菌酶、青霉素作用部位)6、细菌的主要遗传物质:核质(染色体)、质粒(存在于胞质,双链闭合环状DNA分子)、转位因子7、细菌特殊结构:荚膜(保护,致病,抗原性,鉴别)、芽胞、鞭毛(运动器官)、菌毛(普通菌毛一粘附,致病性;性菌毛一接合方式转移遗传物质)*将芽胞是否被杀死而作为判断灭菌效果的指标8、L型(细胞壁缺陷)菌落:①“油煎蛋”(荷包蛋)样菌落(典型L型细菌)。

②颗粒型菌落(简称G 型菌落)③丝状菌落(简称F型菌落)。

高渗环境生长。

(环丙沙星)9、自营菌:以无机物为原料;异营菌(腐生菌:以无生命的有机物质为营养物质;寄生菌:以宿主体内有机物为原料),所有致病菌都是异营菌。

10、细菌营养物质:水、碳源、氮源、无机盐类和生长因子。

11、细菌个体的生长繁殖方式:无性二分裂,在对数期以几何级数增长12、细菌分类(伯杰)等级依次为界、门、纲、目、科、属、种(最小分类单位)。

13、常用的细菌培养方法是:需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法;14、通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板,置于空气或含5%- 10%CO的气缸中培养,大部分细菌可于24〜48h生长良好。

15、血清学诊断时,一般要在病程早期和晚期分别采血清标本2〜3份检查,抗体效价呈4 倍或以上增长才有价值。

16、透射电子显微镜适于观察细菌内部的超微结构;扫描电子显微镜适于对细菌表面结构及附件的观察。

17、细菌染色的基本程序:涂片(干燥)T固定T初染T染色(媒染)T(脱色)T(复染,使脱色菌体着色)。

18、胃部细菌喜酸,肠道细菌喜碱19、SS琼脂有较强的抑菌力,用于志贺菌和沙门菌的分离。

微生物学检验重点知识归纳总结(超详细)(精华版)

微生物学检验重点知识归纳总结(超详细)(精华版)

绪论1. 微生物的定义与特点一,微生物的概念与特点; 微生物的分类;1. 微生物(microorganism )是一群个体微小,结构简洁,肉眼不能直接观察,必需借助于光学显微镜或电子显微镜放大数百倍至数万倍才能观看到的微小生物的总称;2. 微生物的特点个体微小,结构简洁比表面积大,吸取多,转化快繁衍快,代谢强适应强,易变异种类多,分布广1. 微生物类型依据微生物大小,结构和组成不同分为三类型2. 病原微生物的定义病原微生物:是指能引起动物,植物或人类产生疾病的微生物;3. 医学微生物学的进展简史;.微生物的发觉与讨论(1)列文虎克创造显微镜,最早观看到微生物;微生物学讨论的创始人:巴斯德,科赫,李斯特第一章第一节细菌的基本性状细菌的形状与结构1.细菌细胞壁的结构和功能,肽聚糖结构及其化学组成;革兰阳性与革兰阴性细菌细胞壁的主要区分(一)细胞壁化学组成与结构,革兰染色共有组分:肽聚糖特别组分:G+ 菌,G- 菌不同革兰阳性菌细胞壁特别组分:磷壁酸革兰阴性菌细胞壁特别组分:外膜革兰阴性菌细胞壁肽聚糖2.细胞壁的功能::聚糖骨架,四肽侧链(1)维护细菌固有形状和抗击低渗作用;(2)物质交换作用;(3)屏障作用;(4)免疫作用;(5)致病作用;(6)与细菌药物敏锐性有关;G+ 菌与G- 菌细胞壁结构比较. 细菌细胞膜的结构与真核细胞基本相同,. 细菌细胞膜可形成一种特有的结构,称2.细菌荚膜,鞭毛和菌毛的功能;荚膜:功能:由磷脂和多种蛋白质组成,中介体;但不含胆固醇;有抗吞噬和抗击杀菌物质的杀菌作用,增强细菌的侵袭力,构成细菌致病力的重要因素之一;②具有免疫原性;③鉴别细菌和血清学分型鞭毛:功能:细菌的运动器官菌毛一般菌毛:具有黏附性,与细菌致病性有关;性菌毛:与细菌的遗传变异相关3.芽胞结构特点,意义,与消毒灭菌的关系;细菌L 型的形状特点,检验要点;芽胞:某些细菌(主要为革兰阳性杆菌)在肯定条件下,细胞质浓缩脱水而形成一个折光性很强,具有多层膜状结构,通透性很低的圆形或卵圆形的小体;L 型细菌:细胞壁缺陷的细菌;常发生在作用于细胞壁的抗菌药物治疗过程中;依据细胞壁缺陷程度分:原生质体(完全失去细胞壁,见于原生质球(细胞壁部分缺损,见于G+菌,仅在高渗环境中存活)G-菌,在高渗或非高渗环境中均能存活)4.G+ 菌和G- 菌细胞壁结构的差异及其意义;其次节细菌的生理细菌的生长条件,生长周期及各期的特点;IMViC 试验的组成及机制;细菌分解及合成代谢产物的种类及意义;细菌的生长繁衍(一)细菌生长繁衍的条件1. 充分的养分物质2. 相宜的酸碱度3. 合适的温度4. 必要的气体环境包括:水,碳源,氮源,生长因子等;多为~;多数病原菌为35℃~37℃;O2 和CO 2;主要是按细菌对O2 的需要与否,将细菌分为:细菌生长繁衍的规律细菌的繁衍方式:无性二分裂;细菌的繁衍速度:大多数细菌20~30 分钟即可分裂一次;2.细菌的养分类型和养分机制,自氧菌与异氧菌的概念;3.细菌的生长曲线及其特点;(一)能量代谢细菌猎取能量的途径——生物氧化;细菌能量代谢的主要类型:(二)分解代谢检测细菌糖分解产物的常用试验:糖发酵试验,甲基红试验,VP 试验等;检测细菌蛋白质和氨基酸分解产物的常用试验:吲哚(靛基质)试验,硫化氢试验,苯丙氨酸脱氨酶试验等;其他检测细菌分解产物的常用试验:尿素分解试验,枸橼酸盐利用试验等;第三节细菌与环境1 正常菌群的概念和生理功能;条件致病菌的概念2.正常菌群的生理功能;条件致病菌的概念3.消毒,灭菌,无菌,无菌操作等概念;高温消毒灭菌法及其应用;二,细菌的掌握(一)基本概念:消毒杀死物体或介质中病原微生物的方法;灭菌杀灭物体或介质中所有微生物的方法;无菌无活菌存在的状态;无菌操作防止微生物进入机体或物体的操作技术;防腐防止或抑制细菌生长繁衍的方法;4.常用物理和化学消毒灭菌方法及其应用;噬菌体与宿主的相互关系;其次章真菌的基本性状真菌的概念真菌的分类真菌孢子与细菌芽胞的区分第三章病毒的基本性状病毒的大小病毒的结构病毒的增殖病毒的复制周期第四章微生物与感染细菌致病三大因素细菌内外毒素的区分毒血症,菌血症,败血症,脓毒血症的概念全身感染的类型其次篇第五章第一节微生物检验的基本技术细菌的检验技术细菌形状检验技术细菌染色的一般程序染色标本检查的一般程序革兰氏染色法,抗酸染色法的原理,方法; 2.革兰染色法【方法】其次节细菌的接种与培育技术调配—溶化—调Ph—过滤澄清—分装—灭菌—检定—储存细菌在各种培育基上的生长现象及观看要点;培育基的概念培育基的分类第三节细菌的生化鉴定技术糖( 醇,苷)类发酵试验,O/F 试验,MR 试验,VP 试验的原理,操作,结果判定要点及其应用;I 试验,C 试验,氧化酶,触酶,血浆凝固酶氢氧化钾拉丝试验及理,操作要领,观看结果要点及其应用;一,碳水化合物的代谢试验1,糖(醇,苷)类发酵试验KIA 和TSI 的试验原原理:多糖→单糖→丙酮酸→酸性产物→pH ↓ →呈酸性变色(或显现气泡2,O/F 试验(或产气)原理:依据细菌在分解葡萄糖的代谢过程中对氧分子需求的不同,将细菌分为氧化,发酵和产碱型三类3,甲基红试验原理:细菌发酵葡萄糖,产生丙酮酸,进一步分解生成大量混合酸,使培育pH 下降至以下,加入甲基红后,出现红色反应;为甲基红试验阳性;4,V-P 试验原理:细菌分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸脱羧生成乙酰甲基甲醇,在碱性环境中,乙酰甲基甲醇被氧化为二乙酰,二乙酰与胍基化合物结合,生成红色化合物,是为V-P 试验阳性;5,β-半乳糖苷酶试验(ONPG )原理:有的细菌可产生β -半乳糖苷酶,能分解邻硝基酚β-D 半乳糖苷(ONPG) 而生成黄色的邻硝基苯酚,该试验也称为ONPG 试验;6,七叶苷水解试验原理:某些细菌能分解七叶苷产生葡萄糖与七叶素,七叶素与培育基中的Fe2+结合后,形成黑色的化合物,使培育基变黑;二,蛋白质和氨基酸的代谢2,硫化氢试验硫化氢与培育基中的亚铁盐或铅盐结合生原理:细菌产生酶,分解含硫氨基酸生成硫化氢,成黑色化合物;3,尿素酶试验原理:细菌产生脲酶,水解尿素生成氨和二氧化碳,培育基呈碱性反应4,苯丙氨酸脱氨酶试验使苯丙氨酸脱氨形成苯丙酮酸,苯丙酮酸与三氯化铁作用,原理:细菌产生苯丙氨酸脱氨酶,形成绿色化合物三,碳源利用试验枸橼酸盐利用试验细菌在生长过程中分解枸橼酸原理:有的细菌能利用培育基中的枸橼酸盐作为唯独的碳源,盐产生碳酸盐,使培育基呈碱性反应四,酶类试验1,氧化酶(细胞色素氧化酶)试验,能将二甲基对苯二胺或四甲基对苯二胺氧原理:某些细菌具有氧化酶(细胞色素氧化酶)化生成红色的醌类化合物2,触酶试验继而形成氧分子显现原理:细菌产生的触酶(过氧化氢酶)能催化过氧化氢放出初生态氧,气泡;3,凝固酶试验(试管法)原理:金黄色葡萄球菌能产生凝固酶,使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性的纤维蛋白;4,凝固酶试验(玻片法)原理:金黄色葡萄球菌能产生凝固酶,使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性的纤维蛋白5,硝酸盐仍原试验原理:某些细菌能仍原培育基中的硝酸盐为亚硝酸盐,亚硝酸盐与醋酸作用,生成亚硝酸,亚硝酸与试剂中的对氨基苯磺酸作用生成重氮磺酸,再与α-萘胺结合,生成N- α-萘胺偶氮苯磺酸(红色化合物第六章真菌检验技术真菌感染性疾病的微生物学检查原就第七章病毒检验技术病毒标本的采集和运输留意事项;第八章细菌对抗菌药物敏锐试验药物敏锐试验的基本概念,常用方法抗菌药物敏锐试验方法纸片扩散法稀释法E-test 法需氧菌及兼性厌氧菌的药物敏锐试验告);(K-B 法和稀释法的原理,方法,结果判定及正确发报第三篇第十章常见微生物鉴定技术需氧和兼性厌氧球菌葡萄球菌,链球菌,肺炎链球菌,淋病奈瑟菌的主要形状特点,培育特性,分类依据及分类;病原性球菌标本采集种类,检验鉴定程序,鉴定要点,检验鉴定依据及报告要点;第十一章革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌第一节肠杆菌科概述肠杆菌科细菌:杆菌,多数有鞭毛,菌毛2.发酵葡萄糖,兼性厌氧3.氧化酶阴性4.仍原硝酸盐为亚硝酸盐5.触酶(+)肠道挑选性培育基:麦康凯琼脂,伊红美蓝琼脂,SS琼脂等肠杆菌科抗原:O抗原(菌体抗原),K 抗原(荚膜抗原),H抗原(鞭毛抗原)等肠杆菌科鉴定依据: 1.革兰染色2. 触媒,氧化酶,硝酸盐仍原3.KIA ,MIU ,IMViC , 其他生化反应4.血清玻片凝集(鉴定到种,型或血清型)IMViC 试验:吲哚(I ),甲基红(M),VP(V),枸橼酸盐利用(C)四种试验,常用于鉴定肠道杆菌;二,埃希菌属形状染色: 1. 短杆菌2. 革兰染色阴性3. 有鞭毛4. 有菌毛培育特性:符合肠杆菌特点EMB——紫黑色有金属光泽乳糖发酵菌落S-S ——桃红色乳糖发酵菌落生化反应:IMViC(++-- )大肠杆菌KIA:A A +-血清型表示法:O:K:HETEC肠毒素:耐热肠毒素(ST)o不耐热肠毒素(L T),65 C30min 被破坏引起腹泻的大肠埃希菌:肠产毒性大肠埃希菌ETEC肠致病性大肠埃希菌EPEC肠侵袭性大肠埃希菌EIEC肠出血性大肠埃希菌EHEC肠凝结性大肠埃希菌EAECEIEC 毒力测定试验:豚鼠眼结膜试验卫生学标准:每ml 饮水中细菌总数≤100 个,每1000ml 水中大肠杆菌菌群数≤ 3 个,每100 ml 瓶装汽水,果汁中,大肠杆菌菌群数≤三,沙门菌属5 个;对人类有致病性:肠热症;食物中毒;败血症-形状染色:G杆菌;周身鞭毛培育和生化反应:不分解乳糖分解葡萄糖;分解蛋白质,产生H2S伤寒沙门菌菌落特点(EMB,MA C):无色透亮菌落伤寒沙门菌菌落特点(SS):无色透亮或半透亮,中心黑色菌落伤寒沙门菌KIA:K A-+标本实行:第1-2W,血,骨髓;第2-3W,粪便,尿;全程取骨髓肥达反应: 用已知伤寒沙门菌O,H 和甲型副伤寒沙门菌和乙型副伤寒沙门菌H 抗原与病人血清做定量凝集试验,用以帮助诊断肠热症;TO≥1:80,TH≥1:160;PA,PB 均≥1:80 才有意义;动态观看:双份血清抗体四倍上升有诊断意义四,志贺菌属形状染色:符合肠杆菌特点,有菌毛,无鞭毛,无动力是本菌与其它肠道致病菌主要区分点培育特性:肠道鉴别培育基上的无色透亮,乳糖不发酵菌落抗原分类:依据O抗原分4 群,40 余型,我国常见 B 群A 群——痢疾志贺菌群——福氏志贺菌BC群——鲍氏志贺菌群——宋氏志贺菌D培育和生化反应:不分解乳糖分解葡萄糖菌落特点(EMB,MA C):无色透亮菌落KIA:K A--MIU:---外毒素: A 群(Ⅰ,Ⅱ型)产生志贺毒素(ST)有3 种生物活性1. 肠毒素:类似ETEC毒素,霍乱肠毒素作用——水样泻2. 细胞毒性:对人肝细胞,肠黏膜细胞有毒性,引起变性坏死3. 神经毒性:损耗动物神经系统(麻痹,死亡)快速诊断:荧光菌球试验;协同凝集试验六,变形杆菌属形状染色:有周鞭毛培育特性:扩散生长,有迁徙生长现象;在培育基中(含5%琼脂)加入%石炭酸就形成单个菌落;肠道挑选性培育基上形成无色透亮菌落变形杆菌KIA:K A+ +MIU:+ +/- +八,耶尔森菌属历史:三次世界性大流行,是我国重点监控的自然疫源性传染病;—形状染色:G 球杆菌,两极浓染培育特性:一般培育基,生长缓慢,24-48h ,R 型“破草帽”状菌落菌落特点(EMB,MA C):无色透亮菌落甲类烈性传染病:鼠疫(黑死病)常见临床类型:腺鼠疫,败血型鼠疫,肺鼠疫标本采集:临床标本(淋巴结穿刺液,血液或痰标本);非临床标本(尸检取病变组织,鼠标本应严格消毒体表,再进行采集)其次节弧菌科一群菌体短小,弯曲成弧形或直杆状的革兰阴性细菌;具有一端单一鞭毛,运动快速;弧菌科细菌广泛分布于自然界,以水中最为多见弧菌属(一)霍乱弧菌霍乱弧菌的疫源地:印度恒河三角洲(O1群,古典生物型);印尼苏拉威西岛(O1群,埃托生物型);孟加拉湾(O139 群)已发生七次世界性的霍乱大流行:均由霍乱弧菌的O1群引起,前六次为霍乱弧菌的古典生物型,第七次为埃尔托生物型形状:新从患者标本中分别出的细菌革兰染色阴性,弧形或逗点状;在患者“米泔水”样便中,可呈头尾相接的“鱼群”样排列;菌体一端有鞭毛,悬滴观看时呈“穿梭”样运动培育特性:养分要求不高,故用Ph8.4-9.2 碱性培育基;分别(挑选)能在无盐培育基中生长(区分其它弧菌);在的碱性胨水中经35℃4~6h 增菌后可在液体表面大量繁衍形成菌膜抗击力:较弱;水源性传播,水性爆发;怕酸,正常胃酸4min霍乱肠毒素(C T):最猛烈的致泻毒素吐泻期:猛烈吐泻,米泔样免疫力:病人愈后可获得坚固免疫O1 群霍乱弧菌的O 抗原:由A,B,C 三种抗缘由子组成;通过不同组合可形成三个型别:由AB组成小川型,AC组成稻叶型,ABC组成彦岛型常用的挑选性培育基:1. 硫代硫酸盐- 枸橼酸盐- 胆盐- 蔗糖(TCBS) 琼脂平板:霍乱弧菌发酵蔗糖产酸,菌落呈黄色2.4 号琼脂,庆大霉素琼脂:生长并将培育基中的碲离子仍原成元素碲, 形成灰褐色菌落中心3. 能在无盐培育基上生长古典生物型和埃尔托生物型的区分试验:羊红细胞溶血;鸡红细胞凝集;V-P 试验;多粘菌素 B 敏锐试验;Ⅳ组噬菌体裂解;Ⅴ组噬菌体裂解标本采集和运输:在发病早期,尽量在使用抗菌药物之前采集标本;取患者“米泔水”样便,亦可实行呕吐物或尸体肠内容物,或实行肛门拭子;标本应防止接触消毒液;实行的标本最好就地接种碱性胨水增菌;不能准时接种者可用棉签挑取标本或将肛门拭子直接插入卡-布运输培育基中动力和制动试验:直接取“米泔水”样便,制成悬滴( 或压滴) 标本后,在暗视野或相差显微镜下直接观看呈穿梭样运动的细菌;同法重新制备另一标本涂片,在悬液中加入 1 滴不含防腐剂的霍乱多价诊断血清( 效价≥1:64) ,可见最初呈穿梭状运动的细菌停止运动并发生凝集,就为制动试验阳性快速诊断:将标本接种于含有霍乱弧菌荧光抗体的碱性蛋白胨水中,经37℃4~6h,如有霍乱弧菌,在荧光显微镜下可见发荧光的菌球;本法适用于做大量标本的初筛SPA协同凝集试验:以霍乱弧菌IgG 型抗体与SPA阳性葡萄球菌结合作为试剂,与米泔水样便或增菌液作玻片凝集,立刻显现明显凝集者(+++)为阳性粘丝试验:将%去氧胆酸钠水溶液于霍乱弧菌混匀制成深厚菌液,1min 内悬液由混变清,并变得粘稠,以接种环挑取时可以拉出丝来(二)副溶血性弧菌具有嗜盐性形状:革兰阴性杆菌,有鞭毛(极单毛)培育特性:在无盐培育基上不能生长,最适合生长的氯化钠浓度为 3.5%,超过8%不能生长TCBS琼脂平板: 蔗糖不发酵而呈蓝绿色菌落第三节非发酵革兰阴性杆菌非发酵革兰阴性杆菌:一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧,无芽胞的革兰阴性杆菌一,假单胞菌属铜绿假单胞菌所致疾病:条件致病菌;医院感染的重要病原菌;大面积烧伤创面感染的重要病原菌生物学特性:革兰阴性,长短不一,单鞭毛,氧化酶阳性生长温度:25~42℃分别培育与鉴定: 1. 血平板上毛玻璃样,金属光泽,生姜味2. 可产生多种色素:荧光素与绿脓素血琼脂平板:透亮溶血环O/F 试验:氧化型第四节其他革兰阴性苛氧菌一,嗜血杆菌属流感嗜血杆菌所致疾病:原发化脓性感染及继发性感染,包括脑膜炎,鼻咽炎,关节炎,心包炎,鼻窦炎及中耳炎等生物学特性:革兰阴性短小球杆菌分别培育:需要X,V 因子;养分要求高,血琼脂平板培育基,巧克力琼脂培育基菌落特点:巧克力琼脂培育基, 小,无色透亮菌落卫星现象:当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌一起培育时,靠近葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较大,远离葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较小四,布鲁菌属传染源:病兽,以羊,牛,猪多见传播途径:病兽的组织,尿,乳液等通过人体的皮肤,呼吸道,消化道进入人体易感人群:发病以青壮年为主,从事兽医,皮毛加工,屠宰的工人发病率较高临床表现:长期发热,多汗;关节疼痛及全身乏力,疼痛微生物特性:革兰阴性短小球杆菌培育特性:需氧菌,养分要求较高;生长缓慢(5~7 天)第十二章革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌革兰阳性无芽胞杆菌白喉棒状杆菌+形状与染色: G瘦长微弯的杆菌;一端或两端膨大呈棒状;常排列呈V,L,X 等文字形;异染颗粒——形状上的鉴别特点培育特性:养分要求高,吕氏血清斜面或鸡蛋斜面亚碲酸钾BAP:挑选鉴别培育基,黑色菌落——鉴别依据毒力试验: 1. 体外法:琼脂平板毒力试验(Elek 平板毒力测定);SPA协同凝集试验;对流电泳2. 体内法:用豚鼠作毒素革兰阳性需氧芽胞杆菌属- 抗毒素中和试验其次节炭疽芽胞杆菌临床意义:炭疽是人兽共患的急性传染病,皮肤炭疽,肠炭疽,肺炭疽等炭疽毒素:爱护性抗原,致死因子,水肿因子传染源:患病食草动物及其制品或被污染物传播途径: 1. 接触——皮肤炭疽食用——肠炭疽2.吸入——肺炭疽3.+形状染色: 致病菌中最大的G杆菌;两端平切,竹节状;有毒株可有明显荚膜芽胞: 1. 椭圆形,小于菌体,位于菌体中心2. 多在有氧条件下形成,25~30℃,在培育基中,土壤内,动物尸体解剖后暴露在空气中,都易形成芽胞3. 在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞,尸体严禁解剖培育特性: 1. 一般培育基上卷发状菌落:12~15h 不溶血,18~24h 稍微溶血3. 肉汤:絮状沉淀生长4. 明胶:37℃18~24h 表面液化成漏斗状,由于细菌沿穿刺线向四周扩散形成倒松树状;5.NaHC O3BAP:有毒株-- 黏液型菌落,挑取时呈粘丝状( 鉴别要点)无毒株—粗糙型菌落抗原构造: 1. 菌体多糖抗原:与毒力无关,耐热,耐腐败,长时间煮沸仍能与特异性抗体发生环状沉淀反应(Ascoli 热沉淀反应),特异性不高,可作追溯性诊断2. 荚膜多肽抗原:荚膜肿胀试验,对本菌鉴定有意义标本的采集与处理: 死于败血症的动物,严禁宰杀和解剖,可消毒皮肤后割取耳朵,舌尖采集少量血液串珠试验: 炭疽芽胞杆菌在每毫升含有0.05-0.5U 青霉素的培育基中,可发生形状变异,形成大而匀称的圆球状并相连如串珠状第十三章分枝杆菌属分枝杆菌是一类瘦长略带弯曲的杆菌,含有分枝菌酸,有分枝生长的趋势而得名;具有抗酸性,故又称抗酸杆菌;结核分枝杆菌所致疾病:通过呼吸道,消化道和损耗的皮肤等多途径感染机体,引起多种脏器的结核病,其中以肺结核为多见致病物质:荚膜,脂质和蛋白质等菌体成分免疫性:有菌免疫或称传染性免疫,细胞免疫在抗感染免疫中起重要作用微生物特性: 1. 分枝状,略带弯曲的抗酸杆菌,抗酸性染色法染色后结核分枝杆菌呈红色,背景呈蓝色2. 专性需氧,养分要求较高,最适生长温度为35℃,生长缓慢, 2 ~5w 才显现肉眼可见的如菜花样粗糙型菌落;结核菌素试验:纯蛋白衍生物(PPD),注入皮内后如受试者已感染结核,就结核菌素与致敏淋巴细胞特异性结合,形成迟发型超敏反应性炎症机体抗结核免疫特点:传染,免疫,超敏反应共存第十四章厌氧性细菌破伤风梭菌,产气荚膜梭菌,肉毒梭菌的形状特点,培育特性;厌氧性细菌的检验鉴定要点和报告方式;第十五章螺旋体,支原体,衣原体,立克次体第一节螺旋体螺旋体:是一种瘦长,松软,螺旋状,运动活泼的原核细胞型微生物钩端螺旋体所致疾病:钩端螺旋体病传染源与储存宿主: 自然疫源性疾病,鼠类和猪为主要储存宿主传播途径:间接接触传播(接触被含菌尿液污染的水源),血液传播,垂直传播生物学特性: 1. 螺旋一端或两端呈钩状2. 有两根周浆鞭毛,运动活泼-3. G,但不易着色,镀银染色成棕褐色梅毒螺旋体所致疾病:梅毒1. 先天性:母体通过胎盘传给胎儿2. 获得性:性传播获得性梅毒临床分期:分为三期1. Ⅰ期(初期)梅毒:感染后 3 周左右局部显现无痛性硬下疳,感染性极强;2. Ⅱ期梅毒:发生于硬下疳显现后2~8 周,全身皮肤,粘膜常有梅毒疹,全身淋巴结肿大3. Ⅲ期(晚期)梅毒:发生感染 2 年后,病变可波及全身组织和器官;基本损害为慢性肉芽肿;病损内螺旋体少但破坏性大-生物学特性:G,但不易着色,镀银染色呈棕褐色;对青霉素,四环素,红霉素等抗生素敏感微生物学检查:标本:Ⅰ,Ⅱ期梅毒取下疳渗出液,梅毒疹渗液或淋巴结穿刺液;先天性梅毒取脐血其次节支原体支原体:是一类没有细胞壁,形状上呈多样性,可通过细菌滤器,能在无生命培育基中生长-的最小的原核细胞型微生物;因其生长后能形成分枝长丝,故命名为支原体;G,但不易着色,Giemsa 染色呈淡紫色;油煎蛋样的菌落所致疾病:支原体肺炎冷凝集试验: 肺炎支原体感染后,患者血清中显现冷凝集素,能在0-4 ℃条件下凝集人红细胞(37℃时却无此效应);此凝集试验为非特异性的,是肺炎支原体感染的帮助诊断试验衣原体:是一类专性活细胞内寄生,具有特殊发育周期,且能通过细菌滤器的,介于立克次体与病毒之间的原核细胞型微生物第一胜利分别鉴定出沙眼衣原体:我国学者汤飞凡于1956 年能引起人类疾病的衣原体:主要有沙眼衣原体和肺炎衣原体-立克次体:是一类专性活细胞内寄生的G原核细胞型微生物,是引起斑疹伤寒,恙虫Q病,热等传染病的病原体;与节肢动物关系亲密,大多是人畜共患病的病原体反应(外斐反应):大部分立克次体与一般变形杆菌某些菌株(X19,X k,X2)的Weil-Felix菌体抗原有共同的抗原成分,故可用这些变形杆菌的菌体抗原与不同稀释度的患者血清做凝集反应,诊断立克次体病;第十六章常见真菌1.真菌的概念,生物学性状;真菌感染性疾病的微生物学检查原就;皮肤癣真菌,白假丝酵母菌,新生隐球菌的形状特点及微生物学检验;2.真菌感染性疾病的微生物学检查原就;皮肤癣真菌,白假丝酵母菌,新生隐球菌的形状特征及微生物学检验;第十七章常见病毒第一节呼吸道病毒1.正粘病毒(流感病毒)的结构,型别,抗原变异与流行的关系;微生物学检验;2.正粘病毒(流感病毒)的型别,抗原变异与流行的关系;其次节肝炎病毒1. HAV ,HBV ,HCV ,HDV ,HEV 五型肝炎病毒的生物学特性,微生物学检验;2.乙肝五项的结果分析及临床意义第三节逆转录病毒HIV 的微生物学检验;1. HIV 的生物学特性,致病性,免疫性与防治原就;2.HIV 的生物学特性;第四节其他病毒1.流行性乙型脑炎病毒,出血热病毒,狂犬病毒,疱疹病毒,人乳头瘤病毒的生物学特性及致病性;以上病毒的微生物学检验;2.流行性乙型脑炎病毒,出血热病毒,狂犬病毒,疱疹病毒,人乳头瘤病毒的生物学特性及致病性;第五节肠道病毒1.肠道病毒的共性,种类;2.脊髓灰质炎病毒的生物学特性,致病性与微生物学检验;第十八章临床常见标本的细菌学检验1.临床常见标本采集及运输,检验程序,报告方式,血液标本的细菌学检验,痰液标本的细菌学检验,脑脊液标本的细菌学检验;2.粪便标本的细菌学检验,尿液标本的细菌学检验,脓标本的细菌学检验;。

微生物检验重点知识点总结

微生物检验重点知识点总结

微生物检验重点知识点总结微生物检验是临床生物化学检验中的一个重要分支,其主要目的是检测病原微生物的存在和种类,以帮助临床诊断和治疗。

微生物检验涉及到多种技术和方法,包括细菌培养、抗生素敏感性测试、真菌检测等。

在本文中,我们将对微生物检验的重点知识点进行总结,包括微生物培养、菌种鉴定、抗生素敏感性测试等方面。

一、微生物培养1. 细菌培养条件:细菌培养需要适宜的温度、pH值和营养物质。

一般来说,大多数细菌在37摄氏度下生长最适宜,pH值维持在7左右,而营养物质主要包括碳源、氮源和无机盐等。

2. 培养基的选择:根据不同的细菌种类和要求,可以选择不同种类的培养基。

常用的培养基包括营养琼脂、大肠杆菌培养基、葡萄球菌培养基等。

3. 培养方法:常用的细菌培养方法包括平板法、液体培养法和混悬液培养法。

其中,平板法是将含有琼脂的培养基均匀涂抹在培养皿上,使其凝固后可以在上面观察细菌的生长情况。

4. 培养时间:一般来说,细菌培养需要一定的时间来观察其生长情况。

常见的培养时间包括24小时、48小时和72小时等。

二、菌种鉴定1. 形态学鉴定:观察细菌的形态特征,包括细胞形状、大小、颜色等。

常用的方法包括显微镜下观察和染色法。

2. 生理生化鉴定:通过细菌的生理和生化特性来鉴定其种类,包括对碳水化合物的利用、氧气需求、氧化酶活性等。

3. 分子生物学鉴定:采用PCR技术和分子生物学方法对细菌的基因进行检测和分析,以确定其种属和亲缘关系。

三、抗生素敏感性测试1. 纸片扩散法:将含有不同抗生素的纸片放置在琼脂培养基表面,观察其抑菌圈的形成情况,以确定细菌的抗生素敏感性。

2. 微量稀释法:将一定浓度的抗生素溶液与不同浓度的细菌混合,通过改变抗生素浓度来确定最小抑菌浓度,从而确定其抗生素敏感性。

3. 自动化敏感性测试:通过自动化设备和方法对大量细菌菌株进行抗生素敏感性测试,提高测试效率和准确度。

以上是微生物检验的一些重点知识点总结,通过对微生物培养、菌种鉴定、抗生素敏感性测试等方面的了解,可以更好地开展微生物检验工作,为临床诊断和治疗提供有力的支持。

临床微生物学检验备考复习要点.doc

临床微生物学检验备考复习要点.doc

抗酸菌一指一类经抗酸染色染成红色的细菌内基氏小体一狂犬病毒感染大脑海马回的神经细胞,在细胞浆中形成的嗜酸性包涵体。

HIV—人类获得性免疫缺陷综合征的病原体HBsAg一乙型肝炎的表面抗原包涵体一某些病毒感染细胞,在被感染细胞的细胞浆或细胞核内形成圆形或椭圆形的嗜酸性或嗜碱性的小体。

垂直传播一病毒由母体传至婴儿的方式。

水平传播一病毒在人群屮个体与个体Z间的传播。

干扰现象一两种病毒同时感染同一细胞时,发生一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象。

汹涌发酵现象一产气荚膜芽抱梭菌在牛乳培养基中短吋间内分解乳量产生大非发酵群不利用或仅以氧化形式利用糖类的G-无芽抱杆菌量气休,使培养基溢出的现象。

病毒---- 类个体微小,结构简单,专性细胞内寄生以复制的方式增殖的非细胞型微生物。

砲子一真菌的繁殖结构卫星现象一当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同培养时,由于后者能合成V因子释放于培养基中,故在金黄色葡萄球菌菌落周围,流感嗜血杆菌菌落较大,远离金黄色葡萄球菌菌落较小。

AIDS—获得性免疫缺陷综合征CPE—多数病毒在细胞内增殖,可引起细胞形态学改变,称为细胞病变效应。

CFU—经培养所得菌簇形成单位,对可见的细菌数量进行测量的单位。

BCG—卡介苗,卡,介两氏把有毒的牛型结核杆菌在含有胆汁,马铃薯,甘油的培养基上长期人工培养,经13年,传230代,得到毒力减弱而抗原性稳定的菌株,用于结核病的预防。

支原体一是一类缺乏细胞壁,呈高度多形态,能通过过滤菌器,可人工培养的一类最小的元和细胞型微生物。

因其能形成丝状与分支状而称为支原体。

螺旋体一是一类细长,柔软,弯曲呈螺旋状,运动活泼的原核细胞型微生物,归广义的细菌,在生物学上的低位介于细菌和原虫之间。

干扰素一由病毒或其他干扰素诱生剂,作用于机体细胞可表现出抗病毒,抗肿瘤及免疫调节等生物活性。

0/F试验一根据细菌在分解葡萄糖的代谢过程中队氧分子需求的不同,可将待检菌分为两类,需要分子氧的氧化型和进行无氧酵解的发酵型。

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临床微生物学检验复习重点第一章生物安全和医院感染1.实验室生物安全保障:指单位和个人为防止病原体或毒素丢失、被盗、滥用、转移或有意释放而采取的安全措施。

2.医院感染(NI):在医疗机构中获得的感染。

包括外源性和内源性,外源性来自于另一感染者/环境内源性:患者,正常菌群迁徙至其他部位等导致病原体过度生长。

第二章临床微生物检验标本的采集1.标本的一般采集原则1.1早期采集病程早期、急性期或症状典型时,使用抗生素或其他抗菌药物之前。

1.2无菌采集:采集的标本应无外源性污染。

消毒,无菌容器。

1.3根据目的菌的特性用不同的方法采集1.4采集适量标本伤寒-1周:血液 2周:粪便和尿夜1.5安全采集2.厌氧菌:在有氧条件下不生长,在无氧条件下生长的细菌。

2.1厌氧菌感染的条件:组织缺氧或氧化还原电势降低→原因:局血障:血管损伤、肿瘤压迫、烧伤、动脉硬化、组织水肿、坏死、有异物等,刺伤,大面积外伤2.2厌氧菌感染的临床特征(1)分泌物具典型的腐臭,血性渗出物呈黑色。

在紫外线下可发红色荧光(产黑色素普氏菌或卟啉单胞菌感染)。

(2)感染组织局部有大量气体产生→皮下有捻发音时为产气荚膜梭菌。

(3)部位为黏膜附近(4)长期使用氨基糖苷类抗生素无效者,新近流产史,胃肠术后(5)深部外伤枪伤,咬伤后继发感染(6)分泌物经革兰染色后,有细菌,规培:阴性液体及半固体培养基深部生长第三章临床细菌学检验技术1.细菌形态学检查→显微镜检其菌体形态1.1涂片 1.2干燥 1.3固定1.4 染色:(1)初染:加草酸铵结晶紫一滴,约一分钟,水洗。

(2)媒染:滴加碘液冲去残水,并覆盖约一分钟,水洗。

(3)(3)脱色:将载玻片上的水甩净,并衬以白背景,用95%酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止,约20—30秒,立即用水冲净酒精。

(4)复染:用复红液染1—2分钟,水洗。

1.5镜检:干燥后,置油镜观察。

革兰氏阴性菌呈红色,革兰氏阳性菌呈紫色。

固定的目的①杀死微生物,固定其细胞结构;②保证菌体能牢固地粘附在载玻片上,以免水洗时被水冲掉;③改变菌体对染料的通透性,一般死细胞原生质容易着色。

实验原理细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异,主要是肽聚糖层厚度和结构决定的。

经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物,乙醇能使它溶解,所以染色的前二步结果是一样的,但在G+细胞中,乙醇还能使厚的肽聚糖层脱水,导致孔隙变小,由于结晶紫和碘的复合物分子太大,不能通过细胞壁,保持着紫色。

在Gˉ细胞中,乙醇处理不但破坏了胞壁外膜,还可能损伤肽聚糖层和细胞质膜,于是被乙醇溶解的结晶紫和碘的复合物从细胞中渗漏出来,当再用衬托的染色液复染时,显现红色。

红色染料虽然也能进入已染成紫色的G+细胞,但被紫色盖没,红色显示不出来2.细菌分离培养及鉴定→培养基培养,生化反应鉴定3.细菌的非培养→免疫学检测分子生物学检测毒性检测动物实验第四章细菌的耐药性检测1.抗菌药物敏感试验的意义(AST):(1)可预测抗菌治疗的的效果(2)指导抗菌药物的临床应用(3)发现或提示细菌耐药机制的存在(4)监测细菌耐药性2.敏感(s):所分离菌株能被测试药物使用推荐剂量时在感染部位通常可达到的抗菌药物浓度所抑制。

3.耐药(R):指所分离菌株不被测试药物常规剂量可达到的药物浓度所抑制。

4.中介(I):抗菌药物在生理浓集的部位具有临床效力,还包括一个缓冲区,以避免微小的、不能控制的技术因素造成重大的结果解释错误。

5.纸片扩散法(M-H培养基、琼脂厚度:4mm)原理:纸片扩散法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上,纸片中的药物在琼脂中扩散,随着扩散距离的增加抗菌药物的浓度呈对数减少,从而在纸片的周围形成一种浓度梯度。

在药物扩散的同时,纸片周围抑菌浓度范围内的测试菌不能生长,而抑菌浓度范围外的菌株则继续生长,从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈。

不同抗菌药物抑菌圈的直径因受药物在琼脂中的扩散速率的影响而可能不同,抑菌圈的大小可反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关,即抑菌圈越大,MIC越小方法:(1)接种:用无菌棉拭子蘸取菌液,均匀涂布(2)贴抗菌药物纸片:无菌镊子各纸片中心相距>24mm,纸片-平板边缘>15mm(3)孵育35℃16-18h结果判读和报告量取抑菌圈直径,根据CLSI标准,判断“敏感”、“耐药”、“中介”6.微量肉汤稀释法1.2.1.抗菌药物和培养基制备同常量肉汤稀释法。

1.2.2.MIC板制备无菌操作,将倍比稀释后不同浓度的抗菌药物溶液分别加到灭菌的96孔聚苯乙烯板中,第1至第11孔加药液,每孔10μl,第12孔不加药作为生长对照,冰冻干燥后密封,-20℃以下保存备用。

1.2.3.接种物制备(步骤)将用生长法或直接菌悬液法制备的浓度相当于0.5麦氏比浊标准的菌悬液,经M-H肉汤1∶1000稀释后,向每孔中加100μl,密封后置35℃普通空气孵箱中,孵育16~20h判断结果。

此时,第1孔至第11孔药物浓度分别为128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125μg/ml。

1.2.4.结果判断以在小孔内完全抑制细菌生长的最低药物浓度为MIC。

当阳性对照孔(即不含抗生素)内细菌明显长试验才有意义。

当在微量肉汤稀释法出现单一的跳孔时,应记录抑制细菌生长的最高药物浓度。

如出现多处跳孔,则不应报告结果,需重复试验。

通常对革兰阴性杆菌而言,微量肉汤稀释法测得的MIC与常量肉汤稀释法测得的结果相同或低一个稀释度(1孔或2倍)。

7.细菌的耐药机制1.产生灭活抗生素的各种酶(水解酶,钝化酶,修饰酶)【专一性】2.改变药物作用靶位【专一性】3.细胞膜透性下降(细菌生物被膜的形成和通道蛋白的丢失)【无专一性】4.细菌主动外排系统的过度表达【无专一性】第七章球菌需氧或兼性厌氧:葡萄球菌、肠球菌、链球菌等G+专性厌氧:消化球菌科球菌需氧或兼性厌氧:奈瑟菌属、莫拉菌G-专性厌氧:韦荣球菌科一、葡萄球菌:存在于皮肤粘膜上(白色、金黄色、柠檬色)1.G+2.葡萄球菌无鞭毛,无芽孢,体外培养时一般不形成荚膜。

3.在血琼脂平板上,有的菌株菌落周围形成明显的全透明溶血环(β溶血),溶血菌株大多有致病性。

4.致病物质:凝固酶、耐药核酸酶、透明质酸酶、磷脂酶、葡萄球菌溶素、杀白细胞素、肠毒素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1凝固酶有两种:游离凝固酶-血浆凝固;结合凝固酶-细菌凝聚。

导致β溶血的是α溶素。

表皮剥脱毒素可引起SSSS,又称剥脱性皮炎。

5.所致疾病:(1)菌群失调性假膜性肠炎:长期使用广谱抗生素。

(2)皮肤化脓性感染:毛囊炎、疖、痈、伤口化脓、脓肿(3)器官化脓性感染:气管炎、肺炎、心包炎、心内膜炎(4)食物中毒(呕吐)、毒性休克(猩红热)、烫伤样皮肤综合征(婴幼儿、免疫力低下)、(5)医院感染6.葡萄球菌A蛋白(SPA):菌细胞壁的一种表面蛋白。

7.金黄色葡萄球菌:血琼脂-透明溶血环,10%-15%NaCl生长,甘露醇高盐平板上为黄色菌落、耐干燥,抵抗力强,测定macA可快速检出。

生化反应:触酶阳性、动力阴性、凝固酶阳性、耐热核酸酶试验阳性、肠毒素试验(幼猫:呕吐腹泻/死亡)阳性8.标本采集:化脓性病灶采取脓汁、渗出液;疑为败血症采取血液;脑膜炎采取脑脊液;食物中毒则分别采集剩余食物、病人呕吐物和粪便等。

9.致病性葡萄球菌的鉴定主要根据产生凝固酶和耐热核酸酶,产生金黄色色素,有溶血性。

发酵甘露醇等作为参考指标。

二、链球菌属基本知识点:1.G+2.根据溶血现象分类:甲型溶血性链球菌菌落周围有1~2mm宽的半透明的草绿色溶血环,称甲型溶血或α溶血,这类菌也称草绿色链球菌。

α溶血环中的红细胞并未完全溶解。

这类链球菌多为条件致病菌。

乙型溶血性链球菌菌落周围有2~4mm宽、界限分明、完全透明的无色溶血环,称乙型溶血或β溶血,β溶血环中的红细胞完全溶解,这类菌也称溶血性链球菌。

这类链球菌致病力强。

丙型链球菌不溶血,不致病。

3.青霉素是链球菌感染的首选药。

4.致病物质:链球菌溶素、致热外毒素、透明质酸酶、M蛋白、链激酶、链道酶、F蛋白。

链球菌溶素有两种:O(SLO)和S(SLS)。

致热外毒素也称红疹毒素或猩红热毒素,是人类猩红热的主要毒性物质。

5.所致疾病:A群链球菌可分成侵袭性、毒素性、变态反应侵袭性:蜂窝组织炎、菌血症、急性淋巴管炎(菌血症、脑膜炎无乳链球菌)草绿色链球菌是人体口腔、消化道、女性生殖道的正常菌群,可引起:亚急性细菌性心内膜炎毒素性:猩红热变态反应:风湿热、急性肾小球肾炎、6.基本特征:肺炎链球菌:矛尖状7.培养特性:肺炎链球菌和草绿色链球菌需要CO2,营养要求高,加血液或血清血平板:灰白色,透明,表面光滑,小菌落牛型链球菌:无溶血性环,呈灰色菌落。

液体培养基表现为絮状和颗粒沉淀。

肺炎链球菌因荚膜多糖使菌落呈黏液状,因产生自溶酶,在平板上培养48小时后出现中心凹陷的“脐窝”状菌落----自溶产生8.标本采集:咽拭子、痰液、脓汁、血液9.分离培养:α溶血:菌落周围的部分红细胞被破坏,呈草绿色溶血环。

β溶血:菌落周围红细胞完全溶解,呈现一个清楚透明溶血环。

与B群抗血清凝集的菌株可直接确认为无乳链球菌。

10.CAMP试验:侮辱链球菌能产生CAMP因子,可促进金黄色葡萄球菌溶血能力,产生显著的协同溶血作用,作为无乳链球菌的初步鉴定实验。

三肠球菌属1.引起肠道外感染(最常见:粪肠球菌)2.致病因素:表面粘附素、炎症调节因子、毒素3.致病类型:泌尿系统感染、心内膜炎、腹膜炎、牙髓疾病4.基本特性:含6.55NaCl肉汤中生长,40%胆汁培养基中分解七叶苷。

10℃、35℃、45℃生长,部分在含有兔血,马血和人血平板上出现β溶血,羊血不出现。

5.生化反应:触酶阴性、胆汁七叶苷、PYR阳性四、奈瑟菌属:1.脑膜炎奈瑟菌:G-,多位于中性粒细胞内,巧克力(色)培养基,主要致病物质是内毒素,是流脑的病原菌。

乙脑(流线性乙型脑炎)和流脑(流行性脑脊髓炎)的区别:乙脑是由乙脑病毒引起的,此种病毒通过蚊虫先在牲(如幼猪、马、牛等)中传播,而后再传播给人。

流脑是脑膜炎双球菌引起的,是由带菌者或病人经呼吸道飞沫传染。

乙脑流行有严格的季节性,大都在夏季和初秋。

流脑流行每于冬末开始,春节盛行,到初夏就明显下降,季节性不如乙脑严格。

两种病发病开始都有发热、头疼、恶心呕吐,典型病人可以有嗜睡、抽搐、昏迷等,但乙脑病人没有菌血症期,不会出现皮肤淤点,也少有很快出现休克者。

重症的病人都会发生颅内压增高的种种危险症状,但乙脑病程进展不象流脑那么迅速。

恢复期常在口、鼻周围起疱疹,而乙脑病程约经2周方进入恢复期,甚至在发病6个月后仍遗留神经、精神方面的症状。

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