大鼠肝移植过程图 - 360文档中心

大鼠肝细胞微球皮下移植生成肝组织初探

大鼠肝细胞微球皮下移植生成肝组织初探张兰;李则学;刘海亮;李沛雨【摘要】目的探讨大鼠肝细胞微球皮下移植生成肝组织的可行性，为构建组织工程肝寻找新的方法。

方法新鲜分离的SD大鼠肝细胞接种在琼脂糖包被的培养皿上进行培养，待其形成肝细胞微球后采用直接注射方式植入大鼠腹股沟处皮下腔。

1 周后取腹股沟处组织，HE 染色法观察生成的肝组织形态。

结果体外培养3 d，肝细胞形成致密的肝细胞微球，直径大小在43 ～ 185 μm，HE 染色显示微球中的肝细胞保持天然肝细胞形态特征。

将其植入大鼠腹股沟处皮下腔1 周，HE 染色显示植入的肝细胞成活，并呈三维肝样组织团，肝细胞保持其特有形态特征：胞体为圆形，核大而圆，多为双核。

结论肝细胞微球皮下移植可形成肝组织，为组织工程肝的构建创建了新的方法。

【期刊名称】《解放军医学院学报》【年(卷),期】2014(035)005【总页数】3页(P493-495)【关键词】工程化肝组织;肝细胞微球;组织工程【作者】张兰;李则学;刘海亮;李沛雨【作者单位】解放军总医院普通外科研究所,北京100853;;;;【正文语种】中文【中图分类】R318.1对于先天性肝代谢紊乱及终末期肝病所致的急、慢性肝功能衰竭，肝移植是目前唯一有效的救治手段，但供体短缺严重制约该技术广泛应用[1-2]。

肝组织工程技术的发展为各种肝病治疗提供一种潜在方法[1-4]。

通过创建可植入工程化肝移植物体内再生工程化肝组织可为病损肝脏提供肝功能支持或直接对其进行修复[5-6]。

迄今为止已证实包括肝细胞/支架材料复合物、肝细胞片层等多种肝移植物体内植入后可再生有功能的工程化组织[7-12]。

肝细胞微球是肝细胞在非贴壁培养过程中相互聚集形成的三维类组织样细胞聚集体；体外研究表明肝细胞在形成微球后可更好的保持其活性和功能[13-15]，但尚未见将其用于体内构建组织工程肝的报道。

本研究旨在评价肝细胞微球皮下移植形成肝组织的可行性。

大鼠原位肝移植胆道并发症的原因分析

岭南现代临床外科２０年４０９月第９卷第２ＬｇａｏｅｌｉｕｇｙＡｒ，０９Ｖ１ｏ期ｉｎｎＭｄｍＣｉｃｉＳｒｒ，ｐｉ２０，ｏ９．ｎｎｓｎｅｌ．Ｎ２
１Ｏ９
・
论
著・
大鼠原位肝移植胆道并发症的原因分析
Ｔａ —ｈＬｎＨａ — ｎＬＬ— ｏｇ，ｕ —ａＹ肌一０，ａ —ｉｇ，ｎｎ，ｎｕ — ｉｎｚｕ，ｉｏｍｉｇ，ｖｉｈｎＸｕＪｎｙｏ，ｕｄＸｕＸｉｏｔｎＭｉＷａＹｎｌｅ，
ＤｐｒｅｔｆＨｅａｂｌｒｕｇｒＭｅｏｉｓｉｌｏｕＹｔｅＵｉｒｉ，ｕｎｚｏｅａｔｎｐｔｉａＳｒｅｍｏｏｉｙｙ，ｍｒｌＨｏｔＳｎａｓｎｎｖｓｙＧａｇｈｕａｐａｆ — ｅｔ
５１２００１
【ｂｔｃ】Ａｓａｔｒ
ＯｊｔｅＴｔｙｔａｓｆｉｒｃｍｌａｏｓａｄｅａｌｈｓｂｂｅｉｏｓｄｈｃｕｅｏｂｉｙｏｐｃｔｎ，ｎｓｂｓｔｌｃｖｕｅｓｌａｉｉｔｉａｅ
Ｍｅｈｄｔｏｓ１０ａｅｏｉｅｔｎｐａｔｔｎｗｅｅｃｓｓｆｌｒｒｓｌｎａｉｒ８ｖａｏ
套法” 行大鼠原位肝脏移植１０例，８即肝上下腔静脉（ｖ采用连续缝合法吻合，ｓｃ）门静脉（Ｖ）Ｐ以及肝
模型稳定后，供肝冷
胆管内支架管的
缺血时间为（０１１．）ｎ无肝期为（６０３１ｍｉ，体手术时间为（４４１．）ｎ术后胆道并５．－２０ｍｉ，＋１．＋．）ｎ受５．＋０６ｍｉ，发症的发生率为４％，０主要表现为肝脓肿、内外胆管扩张、肝胆泥形成等。结论选择以及手术技巧是影响大鼠肝移植术后胆道并发症发生发展的重要因素。

大鼠减体积肝移植术后早期死亡的原因分析

ａ．ＴｅｎＤｐｒｅｔｆＨｐｔｂｉｒｐｎｒｔｕｇｒ，ＧｎｅＡｉａｄＨｓｉｌＫｎｎｄａＣｌｇ，Ｋｎ１ｈ￡ｅａｔｎｅａｏ— ｉａｙ－ａｃａｉＳｒｅｍｏｌｅｃｙａｍｉｆｌｔｏｔｕｍｉＭｅｉｌｏｌｅｕ — ｉｅｐａｏｆｇｃｅ
ｏｓｕｔｎ（．％）ｇｓｅｂｌｍ（．％）ｌｅｄｓｎｔｎ（．％）ｎｕｏｏａ（．％）ｐｌｏａｎｅｔｎｂｔｃｏ２４ｒｉ，ａｍｏｓｉ１８，ｉｒｙｆｃｏ１８，ｐｅｍｔｒｖｕｉｈｘ１８，ｕｍｎｒｉｆｉｙｃｏ
（．％）ａｄｅｃｓｉｅａｉｇ（．％）ＣｎｌｓｎＴｅｃｍｏｅｔａｙｄａａｓｏｔｅｕｅ１２ｎｘｅｓｅｒｗｒｎ１２．ｏｃｉｈｏｍｎｓｅｒｅｔｃｕｅｆａｒｄｃｄ—ｓｅｌｅａｓｖｍｕｏｌｈｒｉｖｒｎ — ｚｉｔｒ
ｕｉｒｖｄｏｅａｉｎ，ａｄ１０ｒｃｉｅｍｐｏｅ．Ｒｅｕｔｎｍｐｏｅｐｒｔｏｎ（ｅｅｖｄｉｒｖｄ３ｓｌｓＴｎｙ— ｆｅｏ７ａｓｈｖｎｅｅｖｄｒｄｃｄ— ｓｚｉｅｗｅｔｉｆ１０ｒｔａｉｇｒｃｉｅｅｕｅｖｉｅｌｒｖ
布为：腹腔出血８只（．％）４７，肠梗阻４只（．％）气体栓塞３只（．％）２４，１８，肝功能不良３只（．％）１８，气胸３只

大鼠原位肝移植模型建立的技术要点

大鼠原位肝移植模型建立的技术要点目的探讨大鼠肝移植手术技巧与处理要点, 减少术后并发症，建立稳定的大鼠肝移植模型。

方法Wistar大鼠240只（供受体各120只）行二袖套法原位肝移植。

结果120例大鼠原位肝移植术后48小时存活率88.3 % ,1周存活率86.7%，建立了稳定的大鼠肝移植模型。

结论掌握技术要点与处理方法，是建立稳定的大鼠肝移植模型的保证。

Abstract：ObjectiveTo explore the surgical skills of Orthotopic Liver Transplantation in Rats and reduce the complications. MethodsOrthotopic Liver Transplantation was performed in 240 rats using two-cuff technique.ResultsThe survival rate for 48 hours was 88.3 %, the survival rate for one week was 86.7 %, and established stable liver transplantation model in rats. ConclusionMaster the surgical skills of Liver Transplantation in rats can improve achievement ratio and the steady livability of rats with orthotopic liver transplantation．Key words：Liver transplantation；Model；Rats大鼠原位肝移植是研究免疫耐受、免疫排斥、器官保存、肝脏缺血再灌注损伤等方面常用动物模型，1979年Kamada首次提出了二袖套法建立大鼠肝移植模型，简化了手术方式，提高了生存率[1]。

大鼠30％小体积肝移植模型两种切肝方法的比较

大鼠30％小体积肝移植模型两种切肝方法的比较宋军;丁志龙;徐为;李文美;李向农;王学浩【摘要】Objective To establish an effective and available 30% small-for-size rat liver transplantation model. Methods 30% small-for-size liver transplantation models were performed according to Kamada' s two-cuff method without arterial reconstruction. Male SD rats were divided into two groups; group A (n =40) , 30% liver transplantation using right lobe, caudate lobe and triangle lobe graft; group B (n =40) , 30% liver transplantation using a median lobe graft. Three-day survival and technical complications were compared between two groups. Results Compared to group B, the time for liver lobe reduction in the group A was shorter ( P < 0. 01) , and inferior vena cava stricture was fewer ( P < 0.05 ) . There was no significant difference in the three-day survival rate between two groups ( P > 0. 05 ). The incidence rate of liver cross-section bleeding, bile leakage and infection showed no significant differences. Conclusion Using improved method of lobe resection, a more viable and effective 30% small-for-size rat liver transplantation model with a right lobe, caudate lobe and triangle lobe graft can be established.%目的探讨建立理想的成功率较高的大鼠30％小体积肝移植模型的可靠方法.方法采用改良“二袖套法”非动脉化法建立大鼠30％小体积肝移植模型.实验组分为两组:A组,右叶+三角叶+尾状叶做供肝的30％小体积肝移植组,共40例；B组,中叶做供肝的30％小体积肝移植组,共40例.观察两组术后并发症和术后3d生存率.结果 A、B组切肝时间分别为(11±3)、( 14 ±3) min,P＜0.01；术后发生肝后下腔静脉狭窄分别有2例、8例,P＜0.05；术后3d生存率分别为53％(21/40)、40％(16/40),P＞0.05；断面出血、胆漏和感染的发生率两组无明显差异.结论通过技术改良,可以以右叶+三角叶+尾状叶为供肝建立稳定的大鼠30％小体积肝移植模型.【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2011(051)052【总页数】3页(P16-18)【关键词】肝移植;模型,动物;小体积;大鼠【作者】宋军;丁志龙;徐为;李文美;李向农;王学浩【作者单位】徐州医学院附属医院,江苏徐州221002;徐州医学院附属医院,江苏徐州221002;徐州医学院附属医院,江苏徐州221002;徐州医学院附属医院,江苏徐州221002;徐州医学院附属医院,江苏徐州221002;南京医科大学第一附属医院【正文语种】中文【中图分类】R657.3近年来，供肝短缺促使活体肝移植在临床上得到广泛的开展。

建立大鼠异位辅助性肝移植模型的研究

一
、
１材料：ｓｒ鼠，．Ｗｉａ大ｔ雄性，重２０４肝素生理盐水冲出肝内残留血液，体５ ℃ 纱可得到较好的灌注效果。
－
２０ｇ购于北京卫生部生物所实验动７（
布包裹，用。（）者手术：前处理待３受术
总管固定。游离肝下下腔静脉．右肾少静脉血栓的形成。左静脉。游离门静脉至肠系膜上静脉，引
一
显微手术器械购自上海手术器械厂，清
洁手术。
４供肝置入：供肝在置入过程中．．
３套管技术：断受者门静脉及肝．剪
物中心）每笼４只，意进食颗粒饲料，随
和饮水。术前禁食１，限饮水，２ｈ不门静
同供者。腹部正中切口，右侧腹壁自下下腔静脉应尽量保留血管壁，入门左插制拉钩横向拉开，位于肝下间隙内小静脉套管时，将应将胆总管置于其左侧，这肠提出腹腔，湿纱布包裹，置于左侧腹时便很少有可能扭曲门静脉。套管不仅放
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ＣｉＯｒｎＴａｓｌｔＪｌ０２Ｖ１３Ｎ．ｈＪｇｒｐｎ，ｕ２０．ｏ．．ｏ４ｎａｎａ２
・
２５・５
建立大鼠异位辅助性肝移植模型的研究

单人行大鼠原位肝移植手术难点及技巧的探讨

ｃｐｏｐｒｔｎｔｎｎｅａｉｔｍｅｗｅｅ（７２ ± １０）ｍｉＳ（６４土１１）ｍｉｅｔｒｏｅａｉｉａｄａｈｐｔｉｒ２．２ｏｍｅｅ．３ｎＶ２．７．６ｎ，（Ｏ５士３１）ｍｉＳ（８１ ± ５．８．ＯｎＶ４．８３７）ｍｉ，（１６．０ｎ１．Ｏ士０１）ｍｉＳ（１２士００）ｍｉ．Ｔｈｕｃｓｆｌｒｔ，ｏｅｗｅｋｓｒｉａａｅｏｅｍｏｔｕｖｖｌ．１ｎＶ１．８．８ｎｅｓｃｅｓｕａｅｎ－ｅｕｖｖｌｒｔ，ｎ－ｎｈｓｒｉａ
福建医药杂志２１００年６月第３２卷第３期
ＦｊｎＭｅ，Ｊｎ００ｕｉｄＪｕｅ２１，Ｖｏ３，Ｎｏａｌ２．
６３
单人行大鼠原位肝移植手术难点及技巧的探讨
福建医科大学第一临床医学院肝病中心（州３００）黄启明吴燕斌福５０５刘景丰邱明链
ｅａｉｇｄｆｉｕｔｓａｄｔｃｎｑｅ．ＭｅｈｄＡｏａｆ０ｄｌｌＤａｓｗｅｅａｏｔｄＴｈｄｌｓｅｔｂｉｈｄｗｉｅｒｔｎｉｆｌｅｎｅｈｉｕｓｃｉｔｏｓｔｔｌ０ａｕｔｍａｅＳｒｔｒｄｐｅ．ｅｍｏｅｏ２ｗａｓａｌｅｔｒ — ｓｈｆｒｄｔ — ｕｆｍｅｈｄｂｉｇｅｏｅａｏｎｏｂｅｏｅａｏｓＦｉｙｃｓｓｏａｒｈｔｐｃｌｅｒｎｐａｔｔｎｒｅ — ｏｍｅＷＯｃｆｔｏｙｓｎｌｐｒｔｒａｄｄｕｌｐｒｔｒ．ｆａｅｆｒｔｏｔｏｏｉｉｒｔａｓｌｎａｉｓｗｅｅｐｒｔｖｏｆｒｄｗｉｎｉｅｙａｈｇｏｐＲｅｕｔＩｉｇｅｏｅａｏｒｕｎｏｂｅｏｅａｏｓｇｏｐ，ｄｎｒｏｅａｉｎｔｍｅｒ — ｏｍｅｔｕａｄｄｅｅｅｃｒｕ．ｈｓｌｓｎｓｎｌｐｒｔｒｇｏｐａｄｄｕｌｐｒｔｒｒｕｏｏｐｒｔｉ，ｅｏ

大鼠原位肝移植模型的研究进展

症等几个方面仍需要进行大量的研究，稳定的动物实验模型的建立就故
显得至关重要，是研究这些问题的有效途径Ｌ。与其他实验动物相比，２］大鼠具有解剖结构类似于人类，易饲养，殖较快，于观察等优点，容繁便故大鼠肝移植模型是目前基础与临床中最常用的动物模型。大鼠肝移植术式模型大体的分型有大鼠原位肝移植；鼠异位肝移植；鼠慢性大大排斥反应的建立；他的模型（体积式、助性原位部分、心跳供体其减辅无等）３。本文仅对大鼠的原位肝移植实验研究的进展作一综述Ｌ］１大鼠模型的优点基础和临床的肝移植模型主要以鼠为造模对象，鼠原位肝移植模大型是目前最常用的动物模型。ＲＯＴＭ主要有以下优点：与较大的实Ｌ ① 验动物（、）比，管肝移植实验在技术上更容易实施，得益于显狗猪相尽但微外科的发展，助手术显微镜的放大，借使用精细的显微手术器械及缝合材料（管）对细小的组织进行精细手术，ＲＴＭ的建立成为可套，使ＯＬ能［。②有大批基因型明确的纯系大鼠供我们选择，近交系动物、Ｉ］如封闭群和杂交群等。③单克隆抗体可以特异和灵敏的鉴定大鼠在免疫排斥异以及免疫耐受方面起重要作用的淋巴细胞，们目前对大鼠的免疫人分子的认识越来越多。④ 大鼠繁殖快（娠期和哺乳期较短）成本低、妊、易于饲养、有较强的抗病能力，人的解剖结构类似。⑤ 建立的模型具和具有良好的重复性，济性，经并发症与大动物肝脏移植基本相同。２大鼠的麻醉动物模型的建立是在动物的麻醉状态下进行的，模型的建立过程在中，凡是能影响麻醉效果的因素都会对模型的存活率和成功率造成影响Ｉ。由于每种动物对不同麻醉药的反应，ｓ］以及不同剂量的维持效果不同，故在动物的麻醉过程中，应选择对动物机体影响较小、作用持续时间短，而且对实验结果影响小的的麻醉剂，而达到维持稳定的麻醉效果。从大鼠原位肝移植模型，麻醉用药的选择及麻醉深度的掌握是保证手术顺利进行的关键之一，时也是减少大鼠术中及围手术期死亡率的关键因同素之一。目前用于大鼠肝移植模型手术的麻醉药物种类较多，要有乙主醚、氯胺酮和戊巴比妥等，种麻醉药有各自的优缺点和应用范围Ｌ。每６Ｊ２１麻醉药的使用情况：鼠肝移植模型建立过程中，．大目前主要使用乙醚和氯胺酮两种麻醉剂。乙醚采用吸人式给药，由于其对呼吸道的刺激作用，造成呼吸困难甚至窒息，会因此在给药前，行肌注阿托品的要预处理Ｌ。氯胺酮，７Ｊ化学名是２（一氯苯基）一２一２甲胺基一环己酮盐酸盐，Ｄｍｉ９５年引入临床后，自ｏｎ１６ｏ至今仍是非巴比妥类静脉麻醉药镇痛效果唯一确定的麻醉药［巴比妥类麻醉药目前仍在大鼠肝移植模型的建立中使用。因其比较大的肝脏毒性，严重影响肝脏的功能和但会实验结果，故很少使用。彭勇［等在用改进的二袖套法制作大鼠模型的。］过程中，大鼠随机分为对照组、醚组、氯胺酮组、合氯醛组巴将乙水戊比妥组，观察每种麻醉剂的麻醉过程、大鼠生理和肝功能的影响以及对无肝期开始后的死亡率，出各种麻醉对肝移植大鼠均有明显影响，得但乙醚具有对生理、功影响小，肝期开始后死亡率低的优点，可作为肝无故制作大鼠原位肝移植模型的首选麻醉方法。国内外许多文献报导，氯胺酮在大鼠肝移植中的麻醉多见于供体，受体多用乙醚。就其原因，而是由于大鼠肝移植要经历无肝期这一特殊过程，肝 ��

大鼠30%小体积肝移植模型两种切肝方法的比较

（ｆｌｔｏｉｌｆＸｚｏｄｃｌｏｅｅＸｚｏ２０２Ｐ．Ｃｉａ１ＡｉｅＨｓｔｕｈｕＭｅｉｌｇ，ｕｈｕ２１０，．Ｒｈｎ）ｉａｄｐａｏａＣｌ
Ａｓａｔｂｔｃ：０ｂｅｔｅＴｓｂｉｎｅｅｔｅａｄａａａｌ３％ｓｌｆｒｉａｌｅｔｎｐｎａｏｏｅ．ｒｊｃｉｏｅｔｌｈａｆｃｖｎｖｉｂｅ０ｖａｓｆｉｌｍａ — —ｚｒｔｉｒｒｓｌｔｔｎｍｄ１ｌｏｓｅｖａａｉ
ｌｅｃｕａｂｄｔａｇｂｒｆｇｏｐＢ（４）３％ｌｅａｓｌｔｔｎｕｉｇａｍｄａｂｒｔｈｅ— ｏ，ａｄｔｌｅｎｌｌｅａ；ｒｕｎ＝０，０ｂｅｏａｒｎｉｅｏｇｔｉｒｒｎｐａａｏｓｅｉｌｅｇａ．Ｔｒｖｔｎｉｎｎｏｆｅ
山东医药２１年第５卷第５０１１２期
大鼠３％小体积肝移植模型两种切肝０方法的比较
宋军。丁志龙徐，，为李文美李向农王学浩，，，
（１徐州医学院附属医院，苏徐州２１０；Ｉ江２０２２南京医科大学第一附属医院）
ｃｏｓｓｃｉｎｂｅｄｎ，ｂｌｅｋｇｎｎｅｔｎｓｏｄｎｉｎｆａｔｄｆｒｎｅ．ＣｏｃｕｉｎＵｉｇｉｒｖｄｍｅｈｄｒｓ —ｅｔｌｅｉｇｉｌａａｅａｄｉｆｃｉｈｗｅｏｓｇｉｃｎｉｅｅｃｓｏｅｏｉｆｎｌｓｏｓｎｍｐｏｅｔｏｏｂｅｅｔｎｒｉｂｅａｄｅｅｔｅ３％ｓｌｆｒｓｚａｉｅａｓｌｎａｉｎｍｏｅｉｇｔｌｂ．ｃｕａｅｆｌｅｒｓｃｉ，ａｍｏｅｖａｌｎｆｃｉ０ｏｏｖｍａ１ —ｉｅｒｔｖｒｔｎｐａｔｔｄｌｗｔａｒｈｏｅａｄｔ．ｏｌｒｏｈｉ

小鼠移植肝内白介素-6对移植肝功能恢复的影响

图一，肝移植物功能恢复过程图解肝脏再生的转录调控正常肝细胞处于静息期，具有潜在再生的能力。

在切除、缺血再灌注及肝移植的条件下，表现再生活性。

处于静止期的肝细胞，立即转向快速增殖，在２４—４８小时内启动第一轮的ＤＮＡ合成过程“４、“’。

在肝脏再生的复杂过程中，肝脏始终保持其它的功能相对稳定。

这其中当然有特殊类型的细胞和机制参与，目前尚未清楚上述问题的机制。

研究认为，细胞因子在再生早期转录因子的激活中起重要的作用。

参予的细胞因子有ＩＬ—ｌ、ＩＬ一６，ＴＮＦ—ｎ；转录因子有核因子。

Ｂ和信号转导，转录因子激活剂３（ＳＴＡＴ３）等““”’。

缺乏ＴＮＦ受体ｌ的转基因小鼠表现出明显的肝细胞复制缺陷，在肝切除后无明显的Ｎ卜。

Ｂ和ＳＴＡＴ３的ＤＮＡ激活的迹象“”。

在ＩＬ一６缺陷型的转基因小鼠的肝切除模型中ＳＴＡＴ３的ＤＮＡ结合活性消失，ＤＮＡ复制的现象非常迟缓“５“’。

再生过程调控系统相当复杂，需要多种转录因子和基因产物的相互作用和准确协调。

细胞因子表达、转录因子激活在炎症反应早期出现的细胞因子，ＴＮＦ—ｎ，ＩＬ－６等，也出现在大鼠肝移植模型的早期损伤修复中。

因此这些细胞因子有双重的作用，既参予炎症反应，又参加再生反应。

应用大鼠肝移植模型，发现转录因子的激活和细胞因子ＩＬ－６、ＴＮＦ—Ｑ与冷缺血时间明显相关。

随冷缺血时间延长，ＩＬ一６、ＴＮＦ—ｎ的表达增强，持续表达至再灌注后７２小时””。

其它参予的成分有ＮＦ。

Ｂ，Ｃ－ｊｕｎ，Ｎ一末端激酶（ＪＮＫ）””。

以前认为ＳＴＡＴ３参予细胞循环的激活，是否参予移植后的修复过中山大学博士学位论文：小鼠移植肝内白介素一６对移植肝功能恢复的影响正文复过程受多种因素影响。

移植物局部损伤和炎症也可引起更严重的免疫反应。

大鼠的肝移植模型证实移植后缺血再灌注损伤、免疫反应、组织修复过程相图二，肝脏的冷却血损伤和免疫反应互影响。

“３”，见图二。

另外观察到ＭＨＣ—ＩＩ类抗原，共刺激分子Ｂ７的表达增强””。

大鼠原代肝细胞的标记和移植方法

大鼠原代肝细胞的标记和移植方法杨军英;王建设;刘慧兵;李涛;刘芳【摘要】The optimum concentration of CM-DiI incubated with primary hepatocyte of rat , optimum transplant volume and route of labeled primary hepatocyte are studied . The rat hepatocytes are isolated and purified by collagenase and density gradient centrifugation , and labeled with different concentration of CM-DiI , and then transplanted on rat which are previously suffered 2/3 partial hepatectomy 0 h by liver portal vein and tail vein , respectively . The livers are removed after transplanting hepatocyte 36 h , frozen section and paraffin section are prepared and analyzed by immunohistochemistry and fluorescence observation , respectively . The results show that hepatocyte can be labeled to 95% after incubating with CM-DiI 4 μmol・mL - 1 for 5 min , labeled hepatocytes which are observed on frozen section transplanted by 0.8 mL per keilogram remnant liver weight are more than that of 0.2 ,0.4 and 0.6 mL (P < 0.01) , and labeled hepatocytes transplanted by liver portal vein aremore than that of tail vein ( P < 0.01 ) . Hepatocytes incubated with CM-DiI 4 μmol・mL - 1 for 5 min can be labeled to 95% , and 0.8 mL labeled hepatocytes per keilogram remnant liver weight transplanted by liver portal vein can get preferable label and transplantation efficiency .%探讨CM-DiI 标记大鼠原代肝细胞的最佳浓度、细胞的移植量和移植途径．采用原位胶原酶灌注和密度梯度离心法分离、纯化大鼠肝细胞，用不同浓度 CM-DiI 进行标记，筛选出 CM-DiI 的最佳标记浓度，分别从门静脉、尾静脉移植到2/3肝切除0 h大鼠，对细胞移植36 h 后的肝组织石蜡切片和冰冻切片分别进行免疫组织化学分析和荧光观察．结果显示，4μmol・mL -1浓度的CM-DiI 和肝细胞孵育5 min ，细胞标记率高达95％．每克大鼠残肝移植0.8 mL的细胞悬液（107个・mL -1）和0.2，0.4，0.6 mL 移植后检测到的标记细胞数目相比有显著性差异（P＜0.01），经肝门静脉移植后可以检测到的标记细胞数比尾静脉多（P＜0.01）．CM-DiI 标记大鼠原代肝细胞的最佳浓度为4μmol・mL -1，标记细胞的最佳移植量为每克大鼠残肝移植0.8 mL 的细胞悬液（107个・mL -1）、最佳移植途径为经肝门静脉移植．【期刊名称】《西北师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2014(000)004【总页数】5页(P79-83)【关键词】大鼠;原代肝细胞;细胞移植;标记率;移植途径【作者】杨军英;王建设;刘慧兵;李涛;刘芳【作者单位】河南师范大学体育学院，河南新乡 453007; 河南师范大学省部共建细胞分化调控重点实验室，河南新乡 453007;河南师范大学体育学院，河南新乡 453007;河南师范大学省部共建细胞分化调控重点实验室，河南新乡 453007;河南师范大学省部共建细胞分化调控重点实验室，河南新乡 453007;河南师范大学省部共建细胞分化调控重点实验室，河南新乡 453007【正文语种】中文【中图分类】Q2-33细胞治疗在修复肝损伤、促进肝再生、改善肝功能的作用已经在体外研究和动物实验中得到越来越多令人欣喜的结果，但其作用机制、临床疗效还需要深入研究[1,2].目前，大多研究采用间充质干细胞、IPS细胞等诱导成 hepotocyte-like cell 治疗肝脏疾病[3,4]，但其在体内是否可以维持内环境稳定，不会诱发肿瘤需要长期试验来证实.肝脏具有极强的再生能力.当受到急性损伤时，残余肝脏细胞能够迅速增生恢复至原肝重，维持正常的肝脏生理功能[5].因此，肝细胞是肝脏的主要结构和功能细胞，也是肝损伤修复的第一道屏障[6]，是肝脏疾病治疗的重要细胞[7,8].本研究采用大鼠2/3肝切除模型，用荧光染料CM-DiI标记，对再生肝细胞的体外标记、移植途径和体内分布进行检测，为肝细胞的细胞治疗和体内分化研究提供实验基础.1 材料与方法1.1 实验动物及模型制备成年健康 SD 大鼠由河南师范大学实验动物中心提供.体重(220±20)g，饲养温度(21±2)℃，相对湿度60%±10%，光照时间12 h(8：00～20：00)，自由饮水、摄食.大鼠用乙醚麻醉、酒精消毒后，按文献[9]方法切除大鼠的肝脏左叶和中叶，制备2/3肝切除大鼠模型.本实验均在无菌条件下进行.1.2 仪器和试剂荧光显微镜、冰冻切片机、切片机、低温离心机等.Percoll(Pharmacia公司)，羊抗鼠 ALB 单克隆抗体(Santa公司)，兔抗鼠G6P 单克隆抗体、鼠抗羊 IgG 试剂盒、鼠抗兔 IgG 试剂盒(博士德公司)，碱性磷酸酶标记山羊抗兔二抗、碱性磷酸酶标记兔抗山羊二抗(北京中杉公司)，CellTrackerTM CM-DiI(Invitrogen公司)，Ⅳ 型胶原酶(Collage nase Type Ⅳ，Sigma 公司)，其他化学药品均为分析纯.1.3 肝细胞分离水合氯醛麻醉正常大鼠，腹部用酒精消毒，采用原位胶原酶灌注和密度梯度离心法，参照文献方法[10]，分离获得肝脏细胞悬液.将肝脏细胞悬液和60% Perco11在4℃、200 g密度梯度离心15 min，收集中间层细胞(即肝细胞).台盼蓝染色，镜检细胞形态和活性.当细胞收率≥90%，细胞活性≥96%，红细胞数量≤0.1%时，视为合格样品.1.4 细胞免疫化学分离纯化的肝细胞悬液用4%多聚甲醛固定30 min后涂片，参照细胞免疫化学方法，DAB染色，检测ALB和G6P的表达.1.5 肝细胞标记将分离纯化的肝细胞悬液调整密度至1×106 mL-1，分别用 CM-DiI(二甲基亚砜事先溶解好，浓度为1 mg·mL-1) 1～5 μL·mL-1 5个梯度标记细胞，37 ℃分别孵育2,5,10 和 15 min，随后将细胞置于4 ℃ 下 5 min 以终止反应，用4 ℃预冷的D-PBS溶液50 g洗涤3次，去除残余标记液.取10 μL细胞悬液滴片，荧光显微镜下检测标记率.1.6 细胞移植按每克大鼠残肝移植0.2,0.4,0.6,0.8和1.0 mL的细胞液，以1 mL·min-1的速度，用0.7 mm直径针头的注射器，将标记好的细胞悬液(1×107 mL-1)分别从尾静脉和门静脉移植入2/3肝切除0 h的大鼠.对照组注入等量PBS.1.7 细胞示踪于细胞移植后36 h处死大鼠，摘取肝脏，制备6 μm冰冻切片，荧光显微镜观察移植肝细胞在肝脏内的分布情况；用10%福尔马林溶液固定肝脏，制备石蜡切片.按照免疫组织化学方法，DAB显色，镜检ALB 的表达.1.8 统计学分析数据处理采用 SPSS 15.0 软件，实验结果数值采用t检验.P<0.05即为有统计学意义.2 结果2.1 再生肝细胞的形态学特征通过两步法原位灌流消化获得肝细胞的活性高达95%以上，细胞分散较好，轮廓清晰，大小均一，折光性强，胞质清亮，核大而圆，核仁清晰，有双核细胞.肝细胞纯度较高，G6P和ALB阳性细胞率均在95%以上(图1).2.2 CM-DiI标记细胞的最佳浓度和时间分离纯化的1×106 mL-1的肝细胞和CM-DiI储备液在37 ℃条件孵育.CM-DiI在2～4 μL·mL-1浓度范围内，标记率随浓度增加而升高，4 μL·mL-1浓度时标记率达95%以上.各实验组间差异显著(P<0.01).孵育 5 min标记率和细胞活性最好，随着孵育时间延长,细胞活性降低(图 2,3).图1 原代肝细胞 ALB(A)和G6P(B)的表达(×200)Fig 1 Expression of ALB(A) and G6P(B) in primary hepatocyte(×200)A～E分别为CM-DiI 1，2,3,4，5 μL·mL-1标记的肝细胞(A～E: Hepatocyte labeled by 1,2,3,4,5 μL·mL-1 CM-DiI,respectively)图2 不同浓度CM-DiI标记原代肝细胞(×200)Fig 2 Primary hepatocyte labeled by different concentration CM-DiI(×200)图3 冰冻切片检测到的标记细胞和移植细胞数量的关系Fig 3 The relationship between labeled hepatocyte observed on frozen section and the numbersof transplanted hepatocyte2.3 肝细胞移植的最佳量细胞移植后 36 h，受体动物肝脏的连续冰冻切片结果显示(图4)，移植细胞量少时，在组织切片中基本看不到，可以追踪到的细胞数目随着移植细胞数量的增加而增加.1×107mL-1密度的标记细胞按0.8 mL·g-1残肝移植检测效果最好，和0.2,0.4,0.6和1.0 mL·g-1残肝的细胞移植量相比具有显著性差异(P<0.01)，和1.0 mL·g-1残肝的细胞移植量相比没有显著性差异.2.4 移植途径细胞移植后36 h受体动物肝脏的连续冰冻切片的免疫组化和荧光结果显示(图5)，经肝门静脉和尾静脉两种方式移植，在肝组织内均可检测到移植细胞.相同密度和数量的肝细胞，经肝门静脉移植检测到的标记细胞明显多于尾静脉移植(P<0.01). 图4 冰冻切片检测到的标记细胞和移植途径的关系Fig 4 The relationship between labeled hepatocyte observed by IHC and transplantation route2.5 受体肝的组织学检测细胞移植后36 h受体动物肝脏组织学结果显示(图5)，肝细胞轮廓清晰，胞质均匀，可见部分双核细胞，细胞核呈圆形或椭圆形，个体较大，易于辨别.个别移植细胞在受体肝脏中可以表达ALB.3 讨论目前治疗肝癌或终末期肝病的理想方案是肝移植，但是供肝严重不足和免疫排斥阻碍了其广泛应用.原代肝细胞的移植避免了干细胞和iPSCs细胞的潜在危险，实现了一个供肝用于多个受体，具有费用低，可重复移植、创伤小等优点[11]，既是终末期肝病和肝移植之间的桥梁，又可以作为基因治疗的载体，纠正遗传代谢性肝病的代谢紊乱.A.HE染色；B和D.荧光显微镜下观察到的标记细胞；C.ALB表达.箭头指的是受体肝内表达ALB的移植细胞(A.HE staining；B and beled hepatocyte observed by fluorescence observation microscope;C.Expression ofALB.Arrow indicated transplatated hepatocyte which expressed ALB inreceiver liver).图5 受体肝组织的组织形态学检测Fig 5 Morphology observation in receiver liver肝细胞移植常采用门静脉肝内移植、尾静脉移植、穿刺脾实质内移植、经肝动脉肝内移植以及腹腔内大小网膜腔内移植或皮下注射等途径[12,13].静脉内输注的细胞会回归到肝脏，是一种简便而又安全的输注途径.部分肝切除后，肝再生被启动，细胞增殖、分化相关的一些生长因子、细胞因子等通过激活细胞信号通路[10]，为移植细胞提供良好的再生环境，可促进移植细胞的存活、驻留、增殖和分化.我们采用部分肝切除模型大鼠作为受体，采取门静脉和尾静脉两种方式植入原代肝细胞，通过荧光追踪，发现相同密度和数量的肝细胞，经肝门静脉移植后可以检测到较多的标记细胞.CM-DiI是一种细胞膜标记染料，水溶性好，标记细胞形态良好，对细胞无毒，稳定长效，其荧光不受醛类固定剂影响，能有效用于体外诱导分化和移植细胞在活体组织中的迁移及分化研究.但CM-DiI标记基本都是用于干细胞研究，对于原代细胞的标记未见报道.研究发现，移植细胞数量级不得超过 107 个，移植量在 0.5～3.0 mL范围内.移植细胞的数量增加1倍，门脉高压引起的右心房压力升高，并发症如呼吸暂停或死亡明显增多[13].本研究中，把分离纯化的肝细胞移植到2/3肝切除大鼠，通过细胞移植后36 h受体动物肝脏的连续冰冻切片和石蜡切片的观察，发现4 μmol·mL-1浓度的CM-DiI和肝细胞孵育5 min，按每克大鼠残肝0.8 mL 的细胞悬液(107个·mL-1)移植，可以达到最好的标记效率和移植效果.把分离纯化的肝细胞移植到再生肝后，细胞散在分布于肝内，细胞结构完整，部分标记细胞嵌入肝板，具有肝细胞形态，极个别移植细胞能够表达ALB，具有肝细胞的功能.肝细胞移植后是否驻留、分化等有待于进一步探讨与研究.参考文献:[1]ANSBORO S，GREISER U，BARRY F，et al.Strategies for improved targeting of therapeutic cells:implications for tissue repair[J].Eur Cell Mater，2012，23：310-318.[2]STREETZ K L.Liver cell transplantation models for experimental clinical research:Prometheus in a different light[J].Dtsch Med Wochenschr，2013，138(16)：852-854.[3]MEIER R P，MÜLLER Y D，MOREL P，et al.Transplantation of mesenchymal stem cells for the treatment of liver diseases，is there enough evidence[J].Stem Cell Res，2013，11(3)：1348-1364.[4]YU Y，FISHER J E，LILLEGARD J B，et al.Cell therapies for liver diseases[J].Liver Transpl，2012，18(1)：9-21.[5]FAUSTO N，CAMPBELL J S，RIEHLE K J.Liver regeneration[J].Hepatology，2006，43(2 suppl 1):45-53.[6]RIEHLE K J，DAN Y Y，CAMPBELL J S，et al.New concepts in liver regeneration[J].J Gastroenterol Hepatol，2011，26：203-212.[7]RODRIGUES D，REVERBEL D A,SILVEIRA T，et al.Freshly isolated hepatocyte transplantation in acetaminophen-induced hepatotoxicity model in rats[J].Arq Gastroenterol，2012，49(4)：291-295.[8]KROHN N，KAPOOR S，ENAMI Y，et al.Hepatocyte transplantation-induced liver inflammation is driven by cytokines-chemokines associated with neutrophils and Kupffer cells[J].Gastroenterology，2009，136(5)：1806-1817.[9]HIGGINS G M,ANDERSON R M.Experimental pathology of theliver:restoration of the liver of the white rat following partial surgicalremoval[J].Arch Pathol，1931，12(2):186-202.[10]徐存拴，章静波.大鼠肝再生的功能基因组学研究：上册[M].北京：高等教育出版社，2009：1-2.[11]PIETROSI G，VIZZINI G B，GRUTTADAURIA S，et al.Clinical applications of hepatocyte transplantation [J].World J Gastroenterol，2009，15(17)：2074-2077.[12]冯渊，李德卫，杨均均.经大鼠脾动脉行肝细胞移植建立动物模型[J].复旦大学学报:医学版，2012，39(6)：653-657.[13]向贤宏，陈伟，陈柳琴，等.不同途径肝细胞移植对肝硬化大鼠模型肝脏血流灌注的影响[J].中山大学学报:医学科学版，2012,33(3)：357-360.。

大鼠原位肝移植模型制作的体会

［键词］肝移植；物模型；鼠关动大［图分类号］Ｒ５．中６７３［献标识码］Ｂ文［章编号］１７－１６２００－０００文６１２（０８）ｌ０２－２０
ＴｈｅＥｘｒｅｅｏｔｔｐｃＬｉｅａｓｌｎａｉｎｉｔｐｅｉｎｃｆＯｒｈｏｏｉｖｒＴｒｎｐａｔｔｏｎＲａｓ
大鼠原位肝移植模型制作的体会
栗彦琪张，或
０００；．３０１２山西省人民医院，山西太原００１）３０２（．１山西医科大学，山西太原
［摘
要］目的：讨 “ 袖套法” 大鼠原位肝移植模型制作失败的原因及其预防措施。方法：０７年４月至探二行２０
机制等方面常用的动物模型 ¨ 。大鼠繁殖快、本成
Ｌａｑ，ＺＩＹｎｉＨＡＮｕＧＹ
（．ｈｎｉＭｅｉｌＵｗｎｔ，Ｔｉａ３０１ｈｎｉＣｉ；．ｈｎｉＰｉｉｌＰｏｌ’ ｏｉｌａｕｎ１Ｓａｘｄｃｎｅｉａｙａｙｎ０００，Ｓａｘ，ｈｎ２ＳａｘｒｎａｅｐｅＳＨｓｔ，Ｔｉａｕａｖｃｐａｙ
维普资讯
山职互压掌陀亏揠２００８年２月第ｌ卷第１８期
ＪｕｒａｆＳｍｔｉＭｅｉａＣｌｇｏｎｉｕｎｕａｉｎＶｏ．１Ｎｏ１Ｆｂ２０ｏｎｌｏｈｘｄｃｌｏｌｅｆｒＣｏｔｉｇＥｄｃｔｅｎｏ１８．ｅ．０８

大鼠原位肝移植模型的手术改进及体会

６周，窦道形成后再拔除。待
术后早期胆道出血与手术过程中操作不当密切相关，主要表现为Ｔ管内引流出血性胆汁。腹腔镜
下胆总管切开取石的方法有２种：、道镜网篮取１胆石，、２经剑突下切口用开腹取石钳取石。有文献报道在开腹手术时若使用取石钳盲目取石，道黏膜胆均有不同程度的损伤和出血Ｊ。在腹腔镜下用取石钳取石时由于患者处于所腹状态下，手术的操作
段，］术后早期虽仍有较高并发症，但其并发症主
要与术者的镜下操作技术密切相关，相信随着腹腔
镜操作技巧的提高，耐心细致地处理好手术的每一环节，其早期并发症一定会明显下降。
参考文献：
［］王育生，１郭献庭，增辉．徐腹腔镜胆总管探查术并发症的防治体会［］中国内镜杂志，０４１（）：１—３Ｊ．２０，０６２．［］郭建平，长年，２许张金燕．维胆道镜在胆管结石症术中的应纤用［］山西医科大学学报，９９３（Ｊ．１９，０增刊）１９—２．：１０
置。引流管口一定要放置在小网膜孔靠近胆总管切口的下方，沿右肝脏面靠近后腹膜处低位从腹腔内
管在腹腔内按常规长度留置，手术结束时，气腹关闭，腹腔内空问变小，而此时Ｔ管已在腹壁固定，造成腹腔内Ｔ管行径过长，曲，Ｔ管引流不畅，扭使因此，以后笔者在进行此项手术时，匀在手术结束时外拉Ｔ管３ｃｍ左右后再固定，无Ｔ管扭曲现象。再腹腔镜下胆总管切开取石，Ｔ管引流术与传统

大鼠肝脏移植模型制作

大鼠肝脏移植模型制作大鼠原位肝移植是研究器官保存、肝脏缺血再灌注损伤、免疫抑制剂、移植排斥反应以及免疫耐受机理等方面常用的动物模型。

最初由Lee在1973年报道，经过许多学者的改进，其手术基本稳定，根据肝上下腔静脉吻合方式，大鼠原位肝移植可分为“二袖套法”和“三袖套法”，下面简单的将大鼠肝脏移植的模型制作介绍一下。

一、手术器械显微外科手术器械包，手术显微镜1台，自制S拉钩（用橡皮筋一端带弯成S形大头针）4个，眼科剪1把，其它外科器械若干及纱布、棉球、棉片和橡皮条等。

二、供、受者大鼠的选择根据不同的研究目的选择不同的动物品系，在同种移植模型中，一般采用两种纯系健康大鼠，如Lewis大鼠，Brown Norway 大鼠（BN），DA大鼠等，国内应用Wistar，SD大鼠也比较多。

如果是异种移植可以选用豚鼠－大鼠，仓鼠－大鼠等不同品系的动物。

三、术前准备供、受者术前禁食14h，自由饮水，采用乙醚吸入麻醉麻醉的方法，提高手术的安全性，受者术前肌肉注射阿托品0.03mg，防治分泌物阻塞呼吸道。

四、供者手术麻醉成功后，经阴茎背静脉注射50U/ml肝素稀释液3.0ml，使供者全身肝素化。

十字切口入腹，经腹主动脉穿刺灌洗供肝；灌洗前，剪开膈肌，阻断腹主动脉，离断胸腔段肝上下腔静脉，灌洗至流出液澄清为止，约需灌洗液20～30ml。

游离肝下下腔静脉，分离结扎离断右肾静脉和右肾上腺静脉，自肠系膜上静脉置管，缓慢注入20ml含肝素的林格氏液，于右肾静脉下方离断肝下下腔静脉，剪开胆总管前壁，近肝端插入外径1.0mm，长4.0mm 的聚乙烯管约2.0mm（可用硬膜外导管制成），结扎固定后远肝端离断之，分离结扎离断肝固有动脉；游离门静脉，结扎离断其分支幽门静脉、脾静脉，于脾静脉下方离断门静脉，锐性分离肝周韧带，结扎左膈下静脉，绕肝上下腔静脉环切膈肌及其腱膜，保留2.0mm边缘，取下供肝置于4℃林格氏液中保存。

五、血管套管的准备供肝置4℃冰浴中，作血管套管放置。

胆道梗阻大鼠的肝脏病理变化及动态观察

胆道梗阻大鼠的肝脏病理变化及动态观察雷俊;陶强;杨文萍;徐红艳;黄慧;邓庆强;曾华;张守华【摘要】目的：建立SD大鼠胆道梗阻的动物模型，并对该动物模型的肝脏病理变化及肝功能等各项指标进行动态观察。

方法将纯系SD大鼠30只，随机分为实验组和对照组，实验组进行胆总管结扎，然后关腹。

对照组打开腹部后游离胆总管然后关腹。

动态观察胆总管结扎后第1d、3d、7d、14d，21d的肝功能、肝脏组织病理变化。

结果梗阻性黄疸大鼠在14d内随着时间延长，血清胆红素逐渐上升，肝内小胆管增生逐步增加，少量纤维结缔组织增生。

14d后血清胆红素逐渐下降，增生小胆管减少，亦未见纤维结缔组织增生。

结论大鼠梗阻性黄疸在14d内的肝脏病理及肝功能变化与人类相似，但在14d后出现恢复，与人类梗阻性黄疸病变过程不同。

%Objective To establish the animal models of SD rat biliary obstruction,and pathological changes of liver and liver function indicators on the animal model of dynamic observation. Methods The pure line of 35 SD rats,were randomly divided into experimental group and control group,the experimental group underwent common bile duct ligation,then close the abdominal. The control group after open abdomen from the common bile duct and abdominal closure. Dynamic observation of bile duct ligation af-ter first days,3 days,7 days,14 days,21 days of liver function,pathological changes of hepatic tissues. Results In rats with ob-structive jaundice in 14 days with the prolongation of time,serum bilirubin increased gradually,the small intrahepatic bile duct proliferation increased gradually,with little fibrous connective tissue hyperplasia. After 14 days of serum bilirubin decreased grad-ually,small bile duct hyperplasiareduce,also has not seen the hyperplasia of fibrous connective tissue. Conclusion Jaundice Rat Liver and liver function obstruction in 14 days changes similar to humans,but in 14 days after the surgery the rats appeared re-covery,unlike human obstructive jaundice disease process.【期刊名称】《江西医药》【年(卷),期】2015(000)008【总页数】4页(P752-754,848)【关键词】胆道梗阻;肝脏;大鼠【作者】雷俊;陶强;杨文萍;徐红艳;黄慧;邓庆强;曾华;张守华【作者单位】江西省儿童医院普外科，南昌 330006;江西省儿童医院普外科，南昌 330006;江西省儿童医院病理科，南昌 330006;江西省儿童医院病理科，南昌330006;江西省儿童医院病理科，南昌 330006;江西省儿童医院普外科，南昌330006;江西省儿童医院病理科，南昌 330006;江西省儿童医院普外科，南昌330006【正文语种】中文【中图分类】R657.4胆道梗阻性疾病在临床上常见，常见于胆道闭锁和胆汁淤积，是小儿肝胆外科领域常见及难治性疾病。

不同术式大鼠原位肝移植模型的比较

不同术式大鼠原位肝移植模型的比较吴建武;胡明政;杨小华;秦磊;钱海鑫【期刊名称】《肝胆胰外科杂志》【年(卷),期】2007(19)1【摘要】目的比较二种不同术式大鼠原位肝移植模型的优劣,建立一种稳定的大鼠肝移植模型.方法采用二袖套法完成大鼠原位肝移植40例,采用三袖套法施行大鼠原位肝移植20例.结果二袖套法手术成功率为92.5%(37/40),1周存活率为89.2%(33/37).三袖套法手术成功率为85%(17/20),1周存活率为11.8%(2/17).结论大鼠原位肝移植二袖套法较三袖套法远期存活率高,并发症少,是一种稳定可靠的大鼠肝移植模型.【总页数】3页(P18-19,21)【作者】吴建武;胡明政;杨小华;秦磊;钱海鑫【作者单位】苏州大学第一附属医院,普外科,江苏,苏州,215006;苏州大学第一附属医院,普外科,江苏,苏州,215006;苏州大学第一附属医院,普外科,江苏,苏州,215006;苏州大学第一附属医院,普外科,江苏,苏州,215006;苏州大学第一附属医院,普外科,江苏,苏州,215006【正文语种】中文【中图分类】R657.3【相关文献】1.大鼠两种不同供肝对原位肝移植术中和术后影响的比较 [J], 杨卫平;邵堂雷;蔡伟耀;张明钧;陈皓;李宏为2.大鼠原位肝移植模型不同术式改进的研究 [J], 邰升;苏志雷;包少瑜;孙士波;迟强;吴德全;韩德恩3.三种大鼠原位肝移植术式的比较研究 [J], 康俊升;王霞4.大鼠原位肝移植肝上腔静脉吻合方式的比较 [J], 王轩;殷广福;许正昌;杨甲梅;严以群;吴孟超5.150例大鼠原位肝移植手术方法比较 [J], 吴剑英;徐冠南;吕随峰;王孟龙;傅志仁;王元和因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

大鼠肝移植图谱

供体手术
1.游离肝周韧带，显露结扎左膈下静脉
剪开胃结肠韧带无血管区，游离肝脏尾状叶
游离尾状叶
游离右腰静脉全身肝素化
分离结扎右肾动脉
结扎切断右肾静脉
肝下腔静脉游离完毕
分离结扎右肾上腺血管
供体胆道置入硬膜外导管
经腹腔动脉全身灌注冰乳酸林格式液
供肝灌注良好，变为土黄生色
游离供体门静脉完毕（结扎幽门静脉、脾静脉）
紧贴膈环下方剪断供体肝上腔静脉
不好意思，少发了1张，分离切断供体门静脉幽门支
供体修整，肝下腔静脉及门静脉袖套
肝上腔静脉修整完毕，两角缝吊牵引线
游离受体肝下腔静脉
结扎切断受体胆总管(已结扎）及分离肝固有动脉
分离门静脉左右支（图为左支）
经门静脉驱除受体肝脏余血（变为土黄色）
供体植入，缝合肝上腔静脉前壁
肝上腔静脉吻合完毕前排除气泡
门静脉袖套吻合完毕后固定
门静脉袖套吻合开放供肝迅速再灌注
肝下腔静脉袖套吻合完毕
修整受体胆总管(供肝胆道支撑管内已有胆汁产生）
两袖套及胆道插管完毕
关腹时大鼠清醒抬头
术毕大鼠自行翻身,毛发蓬松，直立。

大鼠部分肝移植(PLT)的肝叶切除方法及体会

大鼠部分肝移植(PLT)的肝叶切除方法及体会宋康;贺轶锋;周俭;黄晓武;孙健;王晓颖;王征;潘奇;樊嘉【摘要】Objective To establish the models of 30% and 60% partial liver transplantation (PLT) in rats by different methods of hepatolobectomy. Methods The 60% PLT group was resected left lobe and caudate lobe in vivo (n = 50) or in vitro (n= 50) , retained middle lobe, right lobe and right anterior lobe. The 30% PLT group in = 50) was resected left lobe, caudate lobe, right lobe and right anterior lobe in vivo , retained middle lobe only. Results The proportion of the partial donor liver in each group was similar to the clinical PLT. It had higher survival rate in each group after liver transplantation. Conclusions The models of 30% and 60% PLT in rats can better simulate the process of clinical PLT by different methods of hepatolobectomy in vivo or in vitro. It provides a good platform for in-depth fundamental research on liver transplantation.%目的通过不同的肝叶切除方法,建立30％和60％比例的大鼠部分肝移植(partial liver transplantation,PLT)模型.方法 60％ PLT组,在体切除(n=50)或者离体切除(n=50)肝左外叶、尾叶,保留中叶、右叶、右前叶；30％ PLT组(n=50),在体切除肝左外叶、尾叶、右叶、右前叶,仅保留中叶.结果各实验组获取的部分供肝比例与临床部分肝移植相似,移植后存活率较高.结论通过在体切除或者离体切除不同的肝叶组合,建立30％和60％比例大鼠PLT模型,能较好地模拟临床部分肝移植过程,为深入进行肝移植的基础研究提供了良好平台.【期刊名称】《复旦学报（医学版）》【年(卷),期】2012(039)006【总页数】4页(P645-648)【关键词】动物模型;肝移植;肝叶切除;大鼠【作者】宋康;贺轶锋;周俭;黄晓武;孙健;王晓颖;王征;潘奇;樊嘉【作者单位】复旦大学附属中山医院肝癌研究所肝外科上海200032;复旦大学附属中山医院肝癌研究所肝外科上海200032;复旦大学附属中山医院肝癌研究所肝外科上海200032;复旦大学附属中山医院肝癌研究所肝外科上海200032;复旦大学附属中山医院肝癌研究所肝外科上海200032;复旦大学附属中山医院肝癌研究所肝外科上海200032;复旦大学附属中山医院肝癌研究所肝外科上海200032;复旦大学附属中山医院肝癌研究所肝外科上海200032;复旦大学附属中山医院肝癌研究所肝外科上海200032【正文语种】中文【中图分类】R657.3由于器官缺乏的现状，目前临床部分肝移植（partial liver transplantation，PLT）如活体和劈离式肝移植日益受到重视，已成为一项重要的肝移植技术并被广泛应用［1］。