链球菌鉴定测试板标准操作规程

1 目的

规范链球菌鉴定及药敏分析系统测试板标准操作规程。

2 原理

测试板由生化反应孔组成，在生化反应孔中加入细菌悬液，经35—37℃孵育，生化反应在细菌代谢作用下直接产生颜色变化或经加入辅助试剂后产生颜色变化。

3 试剂盒组成：微生物（链球菌）鉴定及药敏分析系统测试板（温州康泰）

4 质控

链球菌ATCC49619

5 操作步骤

5.1取出试验板条，平衡于室温。在鉴定试条伸出的边沿处标上菌株编号

5.2取无菌蒸馏水3ml，将培养18-24h的目的菌洗脱下来，制成菌悬液，使其浊度相当

于4McFarland标准浊度。

5.3将调制好的菌悬液按每孔100ul，加入试验板条中。除VP孔外，每孔滴加液体石蜡2滴覆盖。（为防止VP孔蒸干，可在未加试剂的三个孔中各加蒸馏水100-200ul）

5.4盖上盖子，放35-37℃孵育18-24小时，取出按标准判读自然发生的结果和加入反应试剂后出现的结果（滴加VP试剂于相应空中观察），并记录在记录单上。

5.5将反应结果输入计算机BIO-KONT STREP软件得到鉴定结果。

6 结果判断

7 注意事项

7.1所有的操作过程应避免杂菌污染。

7.2必须事先做好板外的鉴别试验，即革兰氏染色镜检与β-HEM试验，若未做或做得不准确，板上的鉴别结果将可能出现根本性的错误。

7.3被测菌必须是新鲜纯培养物，严格避免用两种或两种以上的菌落或用陈旧的培养物进行试验。

7.4孵育48小时以后的反应结果不能作为判断的依据。

7.5本测试板各孔底物在无菌条件下冷冻干燥，密封包装，临用时先置室温预温再在无菌环境下打开。

7.6操作过程必须有必要的防护措施以防止操作人员感染，废弃物应作为传染源处理。

7.7本产品仅用于体外诊断，供一次性使用，试剂板包装出现漏破损一律禁用。

参考文献

[1]Patrick R.Murray,Mannal of clinical Microbiology,7th edition.

[2]闻玉梅，现代医学微生物学，第一版，上海医科大学出版社。

[3]《全国临床检验操作规程》

[4]《Clinical and Laboratory Standards Institute》文件