Annexin V-FITC 凋亡检测试剂盒说明书
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Annexin ⅴ凋亡检测试剂盒操作步骤
1. 贴壁细胞,先用胰酶消化;
2. 细胞计数后取5×105 ~1×106 个细胞,1000rpm,4℃离心 10
分钟,弃上清;
3. 加入1ml 冷的PBS,轻轻震荡使细胞悬浮;
4. 1000rpm,4℃离心10 分钟,弃上清;
5. 重复步骤3、4 两次;
6. 将细胞重悬于200ul Binding Buffer;
7. 加入10ul Annexin V-FITC 轻轻混匀,避光室温反应15 分钟
或4℃反应30 分钟。
8. 加入300ul Binding Buffer(总反应体积500 ul)以及5ul PI,上机检测;(建议在加入PI 之前将细胞悬液用200 目筛网过滤。)
9. 若用荧光显微镜检测,将细胞混合液离心,取细胞沉淀涂片,再进行观察。