胎盘干细胞 ppt
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胎盘亚全能干细胞
表面标志
亚全能干细胞的鉴别标志有所不同 房佰俊等采用Flk1+CD31-CD34-组合细胞表面标志
来鉴别亚全能干细胞 北京汉氏联合用CD184-CD151+/OCT4+组合鉴定
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胎盘亚全能干细胞的制备
将胎盘组织破碎,蛋白酶降解、过筛,分离得到 原代单个核细胞,使用常规的磁式细胞分选法, 以CD184-CD151+/OCT4+为细胞表面组合标志来 分选,从采集的单个核细胞中分选出目的细胞。
目前已知证明的胎盘干细胞包括: 造血干细胞 间充质干细胞 亚全能干细胞 血管干细胞 皮肤干细胞 神经干细胞等
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胎盘造血干细胞
概述
胎盘是一个造血组织,从胚胎形成后3周开始造血。胎 盘组织中存在大量造血干细胞。
公认的人造血干细胞的表面标记有CD34+、CD38-Lin-、 CD45RA-、c-kit+、CD71-以及近年来新发现的CD43。
人胎盘组织具有淋巴细胞亚群低比例和抑制性T细 胞高比例的特性。
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胎盘亚全能干细胞
概述
胎盘亚全能干细胞是来源于新生儿胎盘组织的一 族胚胎后亚全能干细胞(Post-embryoni pluripotent stem cells)。
在发育阶段与胚胎干细胞接近,具备分化形成三 个胚层的组织细胞的能力。
磁式细胞分选法:利用结合磁性微粒的单克隆抗体标记
细胞,在外加磁场的作用下,将样品中与不带磁的细胞分 开,达到分离纯化目的的方法。
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胎盘亚全能干细胞应用前景
胎盘作为理想的亚全能干细胞来源,在抗衰老及 疾病治疗领域显示了其独特的功能,治疗疾病种 类如下:
心脑血管系统疾病
糖尿病
肝肾损伤
脑及脊髓神经损伤
酶消化液灌注法
2、酶消化法
主要应用中性蛋白酶、胰蛋白酶及胶原酶进行组 织块消化
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胎盘造血干细胞的制备
酶消化液灌注法:
1. 对新鲜娩出胎盘立即进行预处理,然后分离出脐 动脉和脐静脉;
2. 用清洗液灌注胎盘绒毛血管,收集灌注后的清洗 液;
3. 用酶消化液灌注胎盘绒毛血管,置37℃温度下消 化5~20min;
与胚胎干细胞的不同之处是不会形成畸胎瘤,这 一特性使亚全能干细胞可以直接用于体内而不必 担心在体内产生畸胎瘤。
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胎盘亚全能干细胞
胚胎发育成熟后逐渐失去部分原始干细胞表型, 但在胚胎发育为成体后仍具有亚全能基因组,其 中组织特异性基因在适当的微环境下可以被激活, 因各自所处的微环境不同而向不同的组织分化, 能够全方位地选择分化为各种组织细胞。
亚全能干细胞作为胚胎干细胞的后代,可与其他 各个成熟阶段的干细胞和祖细胞共存于组织中
ห้องสมุดไป่ตู้
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胎盘亚全能干细胞
优势:
原始性强,分化潜能强,可分化多种类型细胞 数量丰富,可体外扩增,传代扩增30多代后仍具
有干细胞特性 免疫原性低,异体使用不需配型,不会产生免疫
排斥反应
无致瘤性及伦理学问题
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胎盘干细胞
脐带组:谢晓燕
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主要内容 Ø 胎盘构造 Ø 胎盘干细胞概述 Ø 胎盘干细胞的优缺点 Ø 胎盘干细胞的种类:
v 胎盘造血干细胞 v 胎盘亚全能干细胞 v 胎盘间充质干细胞
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胎盘概述
胎盘(placenta)是母体与胎儿间进行物质交换的 器官,是胚胎与母体组织的结合体。
由羊膜(amniotic membrane)、叶状绒毛膜 (chorion frondosum)和底蜕膜构成。
胎盘组织由滋养细胞、间充质干细胞和血管共同 组成,为免疫“豁免”的组织。
胎盘又叫胞衣、衣胞、紫河车、胎衣、胎膜。
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胎盘干细胞
概念 胎盘干细胞是来源于新生儿胎盘组织的一族亚全 能干细胞。
特点 a) 使用不需配型 b) 数量丰富 c) 分化能力强 d) 没有伦理学问题
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胎盘干细胞的种类
脐带血分离的干细胞数量少会限制它使用的有效 性,只能用在一个幼儿或少年患者的移植
胎盘可以提供自体干细胞足够的数量重建成年人 的造血系统。
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胎盘来源的CD34+CD38+ 、CD34+CD38-两个造血干 /祖细胞亚群均具有增殖分化为粒细胞-单核细胞 集落生成单位、红细胞爆裂型集落生成单位、混 合集落生成单位的能力。
造血干细胞
造血祖细胞
脐血
0.06±0.01%
0.31±0.05%
胎盘
0.39±0.21%
1.1±0.79%
胎盘血
0.06±0.04%
0.43±0.16%
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人足月胎盘可以提供大量的CD34 阳性、CD133 阳 性细胞以及其他原始的造血祖先细胞,适合人类 移植。
由胎盘取得的造血干细胞或培养出的群落形成单 元的总数量可以是同一来源脐带血可得造血干细 胞的10 倍。
胎盘造血干细胞表达许多与胎肝和骨髓来源造血干细 胞相同的标记。
CD133是较CD34更为原始的造血干/祖细胞表面标志, 其膜抗原可作为胎盘造血干/祖细胞的分选标志。
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胎盘造血干细胞的制备
1、灌注法
AMD3100灌注法
AMD3100是基质细胞衍生因子(SDF-1)受体CXCR4的拮 抗剂,能有效与CXCR4结合,阻断SDF-1与CXCR4的结合; 能快速动员造血干细胞/祖细胞。
自身免疫性疾病
移植物抗宿主病
与造血干细胞共移植治疗血液病
肺及其它组织器官纤维化
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胎盘间充质干细胞
概述
胎盘间充质干细胞(mesenchymal stem cell, MSC)是一种多能干细胞,在胚胎发育中来源于中 胚层。
胎盘亚全能干细胞
分化能力:
在适宜的体内或体外环境下具有分化为间充质干 细胞、上皮干细胞、神经干细胞、肝干细胞,肌 细胞、成骨细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细 胞的能力。
可以用来修复受损或病变的组织器官,治疗心、 脑血管疾病、神经系统疾病、肝脏疾病、骨组织 病、角膜损伤、烧伤烫伤、肌病等多种疾病。
4. 用收集液灌注胎盘,收集灌注后的液体;
5. 将得到的液体离心,弃上清后重悬细胞;
6. 重悬的细胞悬液经羟乙基淀粉和淋巴细胞分离液 两步法分离,得到临床应用级胎盘造血干细胞。
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胎盘造血干细胞的应用前景
运用流式细胞计数技术检测脐血、胎盘血、胎盘 中造血干细胞(CD34+CD38-细胞)以及造血祖细 胞(CD34+CD38+细胞)的含量