胎盘干细胞ppt课件

人足月胎盘可以提供大量的CD34 阳性、CD133 阳 性细胞以及其他原始的造血祖先细胞，适合人类 移植。 由胎盘取得的造血干细胞或培养出的群落形成单 元的总数量可以是同一来源脐带血可得造血干细 胞的10 倍。 脐带血分离的干细胞数量少会限制它使用的有效 性，只能用在一个幼儿或少年患者的移植 胎盘可以提供自体干细胞足够的数量重建成年人 的造血系统。

胎盘来源的CD34+CD38+ 、CD34+CD38-两个造血干 /祖细胞亚群均具有增殖分化为粒细胞-单核细胞 集落生成单位、红细胞爆裂型集落生成单位、混 合集落生成单位的能力。 人胎盘组织具有淋巴细胞亚群低比例和抑制性T细 胞高比例的特性。

胎盘亚全能干细胞


概述
胎盘亚全能干细胞是来源于新生儿胎盘组织的一 族胚胎后亚全能干细胞（Post-embryoni pluripotent stem cells）。 在发育阶段与胚胎干细胞接近，具备分化形成三 个胚层的组织细胞的能力。 与胚胎干细胞的不同之处是不会形成畸胎瘤，这 一特性使亚全能干细胞可以直接用于体内而不必 担心在体内产生畸胎瘤。


胎盘亚全能干细胞

胚胎发育成熟后逐渐失去部分原始干细胞表型， 但在胚胎发育为成体后仍具有亚全能基因组，其 中组织特异性基因在适当的微环境下可以被激活， 因各自所处的微环境不同而向不同的组织分化， 能够全方位地选择分化为各种组织细胞。

亚全能干细胞作为胚胎干细胞的后代，可与其他 各个成熟阶段的干细胞和祖细胞共存于组织中
胎盘造血干细胞的制备
1、灌注法

AMD3100灌注法
AMD3100是基质细胞衍生因子（SDF-1）受体CXCR4的拮 抗剂，能有效与CXCR4结合，阻断SDF-1与CXCR4的结合； 能快速动员造血干细胞/祖细胞。

酶消化液灌注法
主要应用中性蛋白酶、胰蛋白酶及胶原酶进行组 织块消化
2、酶消化法
胎盘造血干细胞的制备
胎盘组织由滋养细胞、间充质干细胞和血管共同 组成，为免疫“豁免”的组织。 胎盘又叫胞衣、衣胞、紫河车、胎衣、胎膜。


胎盘干细胞

a) b) c) d)
概念 胎盘干细胞是来源于新生儿胎盘组织的一族亚全 能干细胞。 特点 使用不需配型 数量丰富 分化能力强 没有伦理学问题
胎盘干细胞的种类


胎盘亚全能干细胞的制备

将胎盘组织破碎，蛋白酶降解、过筛，分离得到 原代单个核细胞，使用常规的磁式细胞分选法， 以CD184-CD151+/OCT4+为细胞表面组合标志来 分选，从采集的单个核细胞中分选出目的细胞。

磁式细胞分选法：利用结合磁性微粒的单克隆抗体标记
细胞,在外加磁场的作用下，将样品中与不带磁的细胞分 开,达到分离纯化目的的方法。
胎盘亚全能干细胞应用前景

胎盘作为理想的亚全能干细胞来源，在抗衰老及 疾病治疗领域显示了其独特的功能，治疗疾病种 类如下： 心脑血管系统疾病 糖尿病 肝肾损伤 脑及脊髓神经损伤 自身免疫性疾病 移植物抗宿主病 与造血干细胞共移植治疗血液病 肺及其它组织器官纤维化
胎盘间充质干细胞


概述
胎盘间充质干细胞（mesenchymal stem cell， MSC）是一种多能干细胞，在胚胎发育中来源于中 胚层。 胎盘的各个部位，羊膜、绒毛膜、以及底蜕膜均 含有间充质干细胞。


目前已知证明的胎盘干细胞包括： 造血干细胞 间充质干细胞 亚全能干细胞 血管干细胞 皮肤干细胞 神经干细胞等
胎盘造血干细胞


概述



胎盘是一个造血组织，从胚胎形成后3周开始造血。胎 盘组织中存在大量造血干细胞。 公认的人造血干细胞的表面标记有CD34+、CD38-Lin-、 CD45RA-、c-kit+、CD71-以及近年来新发现的CD43。 胎盘造血干细胞表达许多与胎肝和骨髓来源造血干细 胞相同的标记。 CD133是较CD34更为原始的造血干/祖细胞表面标志， 其膜抗原可作为胎盘造血干/祖细胞的分选标志。
胎盘干细胞
主要内容 Ø 胎盘构造
Ø 胎盘干细胞概述 Ø 胎盘干细胞的优缺点 Ø 胎盘干细胞的种类：
v 胎盘造血干细胞 v 胎盘亚全能干细胞 v 胎盘间充质干细胞
胎盘概述

胎盘（placenta）是母体与胎儿间进行物质交换的 器官，是胚胎与母体组织的结合体。

由羊膜（amniotic membrane）、叶状绒毛膜 （chorion frondosum）和底蜕膜构成。
胎盘造血干细胞的应用前景

运用流式细胞计数技术检测脐血、胎盘血、胎盘 中造血干细胞（CD34+CD38-细胞）以及造血祖细 胞（CD34+CD38+细胞）的含量
造血干细胞 造血祖细胞
脐血
胎盘 胎盘血
0.06±0.01%
0.39±0.21% 0.06±0.04%
0.31±0.05%
1.1±0.79% 0.43±0.16%来自胎盘亚全能干细胞

优势：
原始性强，分化潜能强，可分化多种类型细胞 数量丰富，可体外扩增，传代扩增30多代后仍具 有干细胞特性 免疫原性低，异体使用不需配型，不会产生免疫 排斥反应 无致瘤性及伦理学问题


胎盘亚全能干细胞

分化能力：
在适宜的体内或体外环境下具有分化为间充质干 细胞、上皮干细胞、神经干细胞、肝干细胞，肌 细胞、成骨细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细 胞的能力。


可以用来修复受损或病变的组织器官，治疗心、 脑血管疾病、神经系统疾病、肝脏疾病、骨组织 病、角膜损伤、烧伤烫伤、肌病等多种疾病。
胎盘亚全能干细胞


表面标志
亚全能干细胞的鉴别标志有所不同 房佰俊等采用Flk1+CD31-CD34-组合细胞表面标志 来鉴别亚全能干细胞 北京汉氏联合用CD184-CD151+/OCT4+组合鉴定
酶消化液灌注法：
1. 2. 3. 4. 5. 6.
对新鲜娩出胎盘立即进行预处理，然后分离出脐 动脉和脐静脉； 用清洗液灌注胎盘绒毛血管，收集灌注后的清洗 液； 用酶消化液灌注胎盘绒毛血管，置37℃温度下消 化5～20min； 用收集液灌注胎盘，收集灌注后的液体； 将得到的液体离心，弃上清后重悬细胞； 重悬的细胞悬液经羟乙基淀粉和淋巴细胞分离液 两步法分离，得到临床应用级胎盘造血干细胞。