细菌的形态结构观察实验
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3 特殊染色法：
Structure of a Gram-Negative Cell Wall Structure of a Gram-Positive Cell Wall
2.细菌涂片的制作: “有菌观念，无菌操作”
步骤：涂片——干燥——固定
讲台上取一张清洁载玻片
用接种环取1-2环生理盐水 在载玻片上，取2个位置
Spore
flagellum
(特殊染色法,x1000)
实验报告 实验名称
一、材料和方法 关键试剂、重要的方法
二、实验结果 文字、图、表描述
三、结论（讨论）
实验报告
一、细菌革兰染色 方法、结果（绘图）、讨论
二、细菌特殊结构
绘图
？
绘图要求
染色方法、 放大倍数
用接种环刮取细菌在生理盐水中 涂开，1-大肠杆菌，2-金黄色葡 萄球菌（也可混合涂片）
1
2
涂成1cm2 菌膜
How to do
在空气中自然干燥或 在火焰上方烘干（菌 膜面向上，至少 20cm)
.通过火焰，来回3次 进行热固定（菌膜面 向上）
How to do
3.革兰染色（Gram stain）：
与染色性. ❖ 观察细菌的特殊结构（示教镜）——荚膜, 鞭毛, 芽胞
1、细菌的形态结构观察ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ法
显微镜 细菌体积小，半透明，活体很难观察。经常用染色方法
进行观察： 1 单染色法 2 鉴别染色法 革兰染色法（Gram stain):最常用，1884年丹麦
细菌学家革兰发明。其原理——“细胞壁结构学 说”+“等电点学说”。
No.1step---初染:
结晶紫和等量的碳酸氢钠（3-5秒）
No.2step--- 媒染:
碘液（3-5秒）
No.3step---脱色:
丙酮酒精（3-5秒）
No.4step---复染
稀释复红（10-15秒）
倒掉染料，细水流冲 洗，甩干
倒掉染料，细水流冲 洗，甩干
倒掉染料，细水流冲 洗，甩干
倒掉染料，细水流冲 洗，甩干，烘干
医学微生物学实验 （EXPERMENT OF MICROBIOLOGY）
医学微生物学实验室规则
1.每次进入实验室必须穿白大褂，拒绝穿拖鞋者入内。 2.不准携带食品、饮料和餐具入室，拒绝实验室内吃喝。 3.上课前请不要动桌面上的实验器材，老师介绍完后才能开始
实验。实验完成后统一下课。 4.实验过程中发生意外时，应立即报告老师，不要私自处理。 5.实验完成后要求洗手离开。服从班干部安排，做好实验室
Gram Positive Bacteria (Staphylococcus)
Gram Negative Bacteria ( E. coli )
5.细菌特殊结构观察(示教镜)
细菌的荚膜（capsule）
Capsule
（特殊染色法，X1000)
细菌的芽胞（spore） 细 菌的鞭毛(flagellum)
清洁，验收合格后签字离开。 6.实验完成后按要求书写实验报告。
实验一 细菌的形态结构观察
实验目的： ❖ 了解革兰染色的原理. ❖ 掌握并熟练操作细菌涂片的革兰染色. ❖ 熟悉细菌的特殊染色法并观察细菌的特殊结构——
荚膜, 鞭毛, 芽胞 实验内容： ❖ 制备细菌涂片，进行革兰染色并观察细菌的大小、形态、排列
How to do
4.油镜观察
在干燥的细菌涂片上滴加香柏油，转到油镜进 行观察。观察内容：
1 细菌的革兰染色性：
细菌被染成紫蓝色——革兰阳性（G+)菌 细菌被染成红色——革兰阴性（G-)菌
2 单个细菌的形态：球菌（C），杆菌（b） 3 细菌的排列：散在排列；葡萄状排列 记录： G+c，葡萄状排列； G-b，散在排列。
Structure of a Gram-Negative Cell Wall Structure of a Gram-Positive Cell Wall
2.细菌涂片的制作: “有菌观念，无菌操作”
步骤：涂片——干燥——固定
讲台上取一张清洁载玻片
用接种环取1-2环生理盐水 在载玻片上，取2个位置
Spore
flagellum
(特殊染色法,x1000)
实验报告 实验名称
一、材料和方法 关键试剂、重要的方法
二、实验结果 文字、图、表描述
三、结论（讨论）
实验报告
一、细菌革兰染色 方法、结果（绘图）、讨论
二、细菌特殊结构
绘图
？
绘图要求
染色方法、 放大倍数
用接种环刮取细菌在生理盐水中 涂开，1-大肠杆菌，2-金黄色葡 萄球菌（也可混合涂片）
1
2
涂成1cm2 菌膜
How to do
在空气中自然干燥或 在火焰上方烘干（菌 膜面向上，至少 20cm)
.通过火焰，来回3次 进行热固定（菌膜面 向上）
How to do
3.革兰染色（Gram stain）：
与染色性. ❖ 观察细菌的特殊结构（示教镜）——荚膜, 鞭毛, 芽胞
1、细菌的形态结构观察ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ法
显微镜 细菌体积小，半透明，活体很难观察。经常用染色方法
进行观察： 1 单染色法 2 鉴别染色法 革兰染色法（Gram stain):最常用，1884年丹麦
细菌学家革兰发明。其原理——“细胞壁结构学 说”+“等电点学说”。
No.1step---初染:
结晶紫和等量的碳酸氢钠（3-5秒）
No.2step--- 媒染:
碘液（3-5秒）
No.3step---脱色:
丙酮酒精（3-5秒）
No.4step---复染
稀释复红（10-15秒）
倒掉染料，细水流冲 洗，甩干
倒掉染料，细水流冲 洗，甩干
倒掉染料，细水流冲 洗，甩干
倒掉染料，细水流冲 洗，甩干，烘干
医学微生物学实验 （EXPERMENT OF MICROBIOLOGY）
医学微生物学实验室规则
1.每次进入实验室必须穿白大褂，拒绝穿拖鞋者入内。 2.不准携带食品、饮料和餐具入室，拒绝实验室内吃喝。 3.上课前请不要动桌面上的实验器材，老师介绍完后才能开始
实验。实验完成后统一下课。 4.实验过程中发生意外时，应立即报告老师，不要私自处理。 5.实验完成后要求洗手离开。服从班干部安排，做好实验室
Gram Positive Bacteria (Staphylococcus)
Gram Negative Bacteria ( E. coli )
5.细菌特殊结构观察(示教镜)
细菌的荚膜（capsule）
Capsule
（特殊染色法，X1000)
细菌的芽胞（spore） 细 菌的鞭毛(flagellum)
清洁，验收合格后签字离开。 6.实验完成后按要求书写实验报告。
实验一 细菌的形态结构观察
实验目的： ❖ 了解革兰染色的原理. ❖ 掌握并熟练操作细菌涂片的革兰染色. ❖ 熟悉细菌的特殊染色法并观察细菌的特殊结构——
荚膜, 鞭毛, 芽胞 实验内容： ❖ 制备细菌涂片，进行革兰染色并观察细菌的大小、形态、排列
How to do
4.油镜观察
在干燥的细菌涂片上滴加香柏油，转到油镜进 行观察。观察内容：
1 细菌的革兰染色性：
细菌被染成紫蓝色——革兰阳性（G+)菌 细菌被染成红色——革兰阴性（G-)菌
2 单个细菌的形态：球菌（C），杆菌（b） 3 细菌的排列：散在排列；葡萄状排列 记录： G+c，葡萄状排列； G-b，散在排列。