霉菌的分离纯化和鉴定ppt
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第四章酶工程酶的提取与分离纯化ppt课件
在生物大分子制备中最常用的几种沉淀方法： ⑴中性盐沉淀（盐析法） ⑵有机溶剂沉淀 ⑶选择性沉淀（热变性和酸碱变性） ⑷等电点沉淀 ⑸有机聚合物沉淀
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
脂类
蛋白质(6% ~ 8%) 蛋白质
脂类(8.5% ~ 13.5%)
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
细菌细胞壁的结构
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
蛋白质溶解度与盐浓度之间的关系：
loSg loS0 g K sI
I：离子强度，I = 1/2∑MZ2；M：离子浓度（mol/L）； Z：离子价数
S：离子强度为I时的蛋白质的溶解度（g/L） S0：离子强度为0时蛋白质的溶解度（g/L） Ks：盐析常数，是与蛋白质和盐种类有关的特性常数。
b. 添加固体硫酸铵
适用于：蛋白质溶液原来体积已经很大，而要 达到的盐浓度又很高时。
实际使用时，可直接查表 （各种饱和度下 需加固体硫酸铵的量）。
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
3. 化学法 应用各种化学试剂与细胞膜作用，
使细胞膜结构改变或破坏。
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
脂类
蛋白质(6% ~ 8%) 蛋白质
脂类(8.5% ~ 13.5%)
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
细菌细胞壁的结构
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
蛋白质溶解度与盐浓度之间的关系：
loSg loS0 g K sI
I：离子强度，I = 1/2∑MZ2；M：离子浓度（mol/L）； Z：离子价数
S：离子强度为I时的蛋白质的溶解度（g/L） S0：离子强度为0时蛋白质的溶解度（g/L） Ks：盐析常数，是与蛋白质和盐种类有关的特性常数。
b. 添加固体硫酸铵
适用于：蛋白质溶液原来体积已经很大，而要 达到的盐浓度又很高时。
实际使用时，可直接查表 （各种饱和度下 需加固体硫酸铵的量）。
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
3. 化学法 应用各种化学试剂与细胞膜作用，
使细胞膜结构改变或破坏。
霉菌的分离纯化和鉴定讲解共45页文档
霉菌的分离纯化和鉴定讲解
11、战争满足了，或曾经满足过人的 好斗的 本能， 但它同 时还满 足了人 对掠夺 ，破坏 以及残 酷的纪 律和专 制力的 欲望。 ——查·埃利奥 特 12、不应把纪律仅仅看成教育的手段 。纪律 是教育 过程的 结果， 首先是 学生集 体表现 在一切 生活领 域—— 生产、 日常生 活、学 校、文 化等领 域中努 力的结 果。— 领 导者本 身在这 方面以 身作则 才能收 到成效 。—— 马卡连 柯 14、劳动者的组织性、纪律性、坚毅 精神以 及同全 世界劳 动者的 团结一 致，是 取得最 后胜利 的保证 。—— 列宁 摘自名言网
15、机会是不守纪律的。——雨果
谢谢
11、越是没有本领的就越加自命不凡。——邓拓 12、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。——爱尔兰 13、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。——老子 14、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。——歌德 15、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。——迈克尔·F·斯特利
11、战争满足了，或曾经满足过人的 好斗的 本能， 但它同 时还满 足了人 对掠夺 ，破坏 以及残 酷的纪 律和专 制力的 欲望。 ——查·埃利奥 特 12、不应把纪律仅仅看成教育的手段 。纪律 是教育 过程的 结果， 首先是 学生集 体表现 在一切 生活领 域—— 生产、 日常生 活、学 校、文 化等领 域中努 力的结 果。— 领 导者本 身在这 方面以 身作则 才能收 到成效 。—— 马卡连 柯 14、劳动者的组织性、纪律性、坚毅 精神以 及同全 世界劳 动者的 团结一 致，是 取得最 后胜利 的保证 。—— 列宁 摘自名言网
15、机会是不守纪律的。——雨果
谢谢
11、越是没有本领的就越加自命不凡。——邓拓 12、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。——爱尔兰 13、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。——老子 14、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。——歌德 15、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。——迈克尔·F·斯特利
2024年度霉菌ppt课件完整版
酸碱度
霉菌对酸碱度的适应范围较广，但最 适pH值通常在5.0-6.0之间。
氧气
霉菌是需氧菌，需要在有氧条件下生 长。
2024/3/24
13
繁殖方式与生命周期
无性繁殖
霉菌通过孢子囊或分生孢 子进行无性繁殖，产生大 量后代。
2024/3/24
有性繁殖
某些霉菌在特定条件下进 行有性繁殖，通过接合或 配子融合形成合子。
分类
根据形态和生态特征，霉菌可分 为多个类群，如毛霉、根霉、曲 霉、青霉等。
4
生物学特性
01
02
03
营养方式
霉菌主要通过分解和吸收 有机物来获取营养，属于 异养生物。
2024/3/24
繁殖方式
霉菌主要通过无性繁殖（ 如孢子繁殖）和有性繁殖 （如接合生殖）进行繁殖 。
生长条件
霉菌生长需要适宜的温度 、湿度和pH值等条件，不 同种类的霉菌对这些条件 的要求有所不同。
2024/3/24
6
02
霉菌形态与结构
2024/3/24
7
菌丝体形态
营养菌丝
伸入培养基内吸收养分的菌丝， 无色或有色，直径比气生菌丝细
。
2024/3/24
气生菌丝
营养菌丝向空中生长的菌丝，又称 二级菌丝。
直立菌丝
气生菌丝发育到一定阶段，成为紧 密排列的直线菌丝，又称三级菌丝 。
8
孢子形态与结构
无性孢子
由菌丝体直接产生的孢子，如节孢子 、厚垣孢子、分生孢子等。
有性孢子
通过两个性细胞或菌丝结合后形成的 孢子，如接合孢子、卵孢子、子囊孢 子、担孢子等。
2024/3/24
9
特殊结构
菌核
霉菌PPT课件
气生菌丝
向空中生长的菌丝，部分可产生孢子。
菌丝组织
由菌丝交织而成的组织，包括疏丝组织和 拟薄壁组织。
孢子形态与结构
无性孢子
由菌丝细胞直接形成，包括节孢子、 厚垣孢子、分生孢子和裂生孢子。
有性孢子
通过两个性细胞或菌丝结合形成，包 括接合孢子、卵孢子、子囊孢子和担 孢子。
特殊结构
菌核
由菌丝紧密交织而成的休眠体，可抵抗不 良环境。
调控因子
如营养物质、pH值、温度、氧气浓度等 环境因素，以及霉菌自身的遗传特性，共 同影响霉菌的代谢过程和产物合成。
氮代谢
通过氨基酸代谢和核苷酸代谢等途径进行 氮源的利用和转化。
硫代谢
通过硫酸盐还原等途径进行硫源的利用和 转化。
磷代谢
通过磷酸化作用进行磷源的利用和转化。
05
霉菌与人类关系
有益作用与应用领域
分子生物学方法
04 采用PCR扩增、基因测序等分子
生物学技术，对霉菌进行快速、
准确的鉴定。
谢谢您的聆听
THANKS
生物学特性
营养方式
霉菌为异养生物，通过分解和吸收有机物 质获取营养。
繁殖方式
霉菌主要通过无性繁殖（如孢子繁殖）和 有性繁殖（如接合生殖）进行繁衍。
生长条件
霉菌生长需要适宜的温度、湿度和pH值 等环境条件。
分布与生态环境
分布范围
霉菌广泛分布于自然界， 包括土壤、水体、空气以 及各种动植物体表和体内
无机盐
如磷酸盐、硫酸盐等，对霉菌的生长和代 谢活动至关重要。
水
霉菌细胞含水量高，水分对其生长和代谢 活动至关重要。
生长条件与过程
湿度
霉菌生长需要较高的湿度，通 常相对湿度在80%以上。
向空中生长的菌丝，部分可产生孢子。
菌丝组织
由菌丝交织而成的组织，包括疏丝组织和 拟薄壁组织。
孢子形态与结构
无性孢子
由菌丝细胞直接形成，包括节孢子、 厚垣孢子、分生孢子和裂生孢子。
有性孢子
通过两个性细胞或菌丝结合形成，包 括接合孢子、卵孢子、子囊孢子和担 孢子。
特殊结构
菌核
由菌丝紧密交织而成的休眠体，可抵抗不 良环境。
调控因子
如营养物质、pH值、温度、氧气浓度等 环境因素，以及霉菌自身的遗传特性，共 同影响霉菌的代谢过程和产物合成。
氮代谢
通过氨基酸代谢和核苷酸代谢等途径进行 氮源的利用和转化。
硫代谢
通过硫酸盐还原等途径进行硫源的利用和 转化。
磷代谢
通过磷酸化作用进行磷源的利用和转化。
05
霉菌与人类关系
有益作用与应用领域
分子生物学方法
04 采用PCR扩增、基因测序等分子
生物学技术，对霉菌进行快速、
准确的鉴定。
谢谢您的聆听
THANKS
生物学特性
营养方式
霉菌为异养生物，通过分解和吸收有机物 质获取营养。
繁殖方式
霉菌主要通过无性繁殖（如孢子繁殖）和 有性繁殖（如接合生殖）进行繁衍。
生长条件
霉菌生长需要适宜的温度、湿度和pH值 等环境条件。
分布与生态环境
分布范围
霉菌广泛分布于自然界， 包括土壤、水体、空气以 及各种动植物体表和体内
无机盐
如磷酸盐、硫酸盐等，对霉菌的生长和代 谢活动至关重要。
水
霉菌细胞含水量高，水分对其生长和代谢 活动至关重要。
生长条件与过程
湿度
霉菌生长需要较高的湿度，通 常相对湿度在80%以上。
酶的提取和分离纯化.pptx
破碎细胞的方法有: 机械法，物理法，化学法和酶法
第9页/共139页
11.2.1 机械破碎法 • 指通过机械运动所产生的剪切力使细胞破碎的方法，常用的有如下几种：
• 1.机械捣碎法
• 利用捣碎机的高速旋转叶片所产生的剪切力将组织细胞破碎。 10000r/min
• 此法在实验室和生产规模均可采用。
• 2.研磨法
• 突然降压法的另一种形式为爆破性减压法是将菌体悬浮在高压 容器中，用氮气或二氧化碳加压到几十至几百大气压，振荡几 分钟，使气体扩散到细胞内，然后突然排出气体，压力骤降， 使细胞破碎。
第16页/共139页
压力差破碎法
• （3）渗透压差法是利用渗透压的变化而使细胞破碎。 • 应用时先将对数生长期的细胞从培养液中分离出来，再悬浮在20%左右的蔗糖
第33页/共139页
球蛋白溶解度-溶液离子强度关系
第34页/共139页
盐析
• 中性盐类使蛋白质发生沉淀的原因： • 1).中和蛋白质分子表面电荷 • 2).与蛋白质颗粒竞争水分子 • 不同蛋白质表面极性基团、带电数目及分布等不
同，因而可以分级沉淀。 • 盐析法应控制pH使接近等纯化酶的等电点。蛋
• 性质
方法
• 分子大小
离心，超离心法、凝胶过滤，
膜分离技术（超滤，反渗透，
微孔过滤，透析，电渗析等）
• 溶解度
法，
盐析法，有机溶剂沉淀法，共沉淀
选择性沉淀法，结晶
• 电荷或基团
离子交换色谱，电泳，等电聚焦，
吸附 色谱，疏水色谱，聚焦色 谱
• 稳定性
选择性变性法（热，酸碱，
表面活性剂）
• 特殊（专一性结合）第30亲页/共和13色9页谱，亲和洗脱，亲和电
第9页/共139页
11.2.1 机械破碎法 • 指通过机械运动所产生的剪切力使细胞破碎的方法，常用的有如下几种：
• 1.机械捣碎法
• 利用捣碎机的高速旋转叶片所产生的剪切力将组织细胞破碎。 10000r/min
• 此法在实验室和生产规模均可采用。
• 2.研磨法
• 突然降压法的另一种形式为爆破性减压法是将菌体悬浮在高压 容器中，用氮气或二氧化碳加压到几十至几百大气压，振荡几 分钟，使气体扩散到细胞内，然后突然排出气体，压力骤降， 使细胞破碎。
第16页/共139页
压力差破碎法
• （3）渗透压差法是利用渗透压的变化而使细胞破碎。 • 应用时先将对数生长期的细胞从培养液中分离出来，再悬浮在20%左右的蔗糖
第33页/共139页
球蛋白溶解度-溶液离子强度关系
第34页/共139页
盐析
• 中性盐类使蛋白质发生沉淀的原因： • 1).中和蛋白质分子表面电荷 • 2).与蛋白质颗粒竞争水分子 • 不同蛋白质表面极性基团、带电数目及分布等不
同，因而可以分级沉淀。 • 盐析法应控制pH使接近等纯化酶的等电点。蛋
• 性质
方法
• 分子大小
离心，超离心法、凝胶过滤，
膜分离技术（超滤，反渗透，
微孔过滤，透析，电渗析等）
• 溶解度
法，
盐析法，有机溶剂沉淀法，共沉淀
选择性沉淀法，结晶
• 电荷或基团
离子交换色谱，电泳，等电聚焦，
吸附 色谱，疏水色谱，聚焦色 谱
• 稳定性
选择性变性法（热，酸碱，
表面活性剂）
• 特殊（专一性结合）第30亲页/共和13色9页谱，亲和洗脱，亲和电
细菌分离与鉴定方法ppt课件
在干净的培养皿中放一张滤纸，滴上二甲基对本二胺的1%水溶 液，仅使滤纸湿润即可，不可过湿。用白金丝接种环（不可用镍 铬丝）取18～24小时的菌苔，涂抹在湿润的滤纸上，在10s内涂 抹菌苔现红色者这为阳性，(四甲基对本二胺呈蓝色)，10～60s 现红色者为延迟反应，60s以上现红色者不计，按阴性处理。
细菌分离与鉴定方法
—嗜水气单胞菌分离鉴定
分离方法
细菌的生长状况观察
氧化酶试验
AHM鉴别培养
吲哚试验
革兰氏染色法
糖发酵试验
脱脂奶平板试验（酪蛋白胨可化编试辑课验件 ）
1
分离方法
用途:
• 在检查含两种或两种以上的待检材料（如肝、脾、肾、 心、肌肉等）中的某种细菌时，须先将待检材料进行 分离培养。常用的分离培养方法是琼脂平皿分区划线 法，是借划线将混杂的细菌在琼脂平皿表面分散开来， 使个别的细菌能固定在某一点，经培养生长繁殖后形 成单个菌落，以达到分离获得纯种细菌的目的。
可编辑课件
2
分离方法
具体操作方法如下：
• 点燃酒精灯，右手执笔式握持接种环（见图1），在酒精灯火焰上烧灼接种环， 待冷，取待测菌液一环。
• 左手抓握琼脂培养基平皿，用手掌将平皿的底固定，用手指将平皿的盖略抬
起一些，进行接种（见图2）。或者，将平皿的盖留在实验台上，尽量直立平
皿靠近酒精灯火焰，右手持接种环在琼脂表面的一端（即1区，约占整个平皿
• （1）取载玻片一张，试净。
• （2）用灭菌的接种环取生理盐水一滴，放于载玻片的中央（如被检材料是液体，可 不加生理盐水）。
• （3）左手斜持菌种管，右手将菌种管棉塞稍加转动，以便拔下。
• （4）右手持接种环，经火焰灭菌后，用右手小指拔开菌种管棉塞，管口通过火焰， 用接种环取少量菌（切不可过多）。
实验三 霉菌、放线菌及土壤中微生物的分离纯化27页PPT
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71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。——韩非
实验三 霉菌、放线菌及土壤中微生物 的分离纯化
16、自己选择的路、跪着也要把它走 完。 17、一般情况下)不想三年以后的事， 只想现 在的事 。现在 有成就 ，以后 才能更 辉煌。
18、敢于向黑暗宣战的人，心里必须 充满光 明。 19、学习的关键--重复。
20、懦弱的人只会裹足不前，莽撞的 人只能 引为烧 身，只 有真正 勇敢的 人才能 所向披 靡。
71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。——韩非
实验三 霉菌、放线菌及土壤中微生物 的分离纯化
16、自己选择的路、跪着也要把它走 完。 17、一般情况下)不想三年以后的事， 只想现 在的事 。现在 有成就 ，以后 才能更 辉煌。
18、敢于向黑暗宣战的人，心里必须 充满光 明。 19、学习的关键--重复。
20、懦弱的人只会裹足不前，莽撞的 人只能 引为烧 身，只 有真正 勇敢的 人才能 所向披 靡。
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放线菌分离中，选用重铬酸钾做抑制剂能很好的抑 制细菌和真菌，几乎不影响放线菌的生长；
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⑵常用培养基
◆细菌——牛肉膏蛋白胨培养基（肉汤培养基）pH7.2-7.4；
注意事项：
◆放线菌——高氏一号培养基；
①在加入凝固剂之前调 pH值；②加酸碱要缓慢，
多搅拌；③加热杀菌后
◆霉菌——马铃薯葡萄糖培养基（PDA）、查pH氏值酵下母降0膏.3琼-0脂.4培。养基(CYA)、
少非耐热菌的干扰； ——加入非目的菌的抑制剂；
3、目的菌的充分释放
——使目的菌与样品基质分离：加入活化剂或乳化剂；震荡及超 声波处理，DDC技术；酶法或研磨等组织破碎法；
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三、初筛
设计选择性培养基，稀释涂布，挑选目标菌株。
1、培养基设计原则
合适的营养物质及浓度配比，如不同的C/N源；各无机盐比例适 当；合适的渗透压或水分活度；适宜的pH等；
缺 严 注缺 察特 认点格 ：和点和点：厌 取挑：再：操氧 样取由次简作菌 液困于单分相生 约难菌离，对长1；落m；多麻受l形；用烦限成于，；在对热琼已敏脂有感住纯菌中培易间养被，的烫观确死，
3. 平板划线法
应缺用点：：在无缺法乏分专离业得的到厌不氧可设培备养的的情内况生下细 对菌严；格此厌法氧最菌简进便行，分但离可和能观遗察落；部分菌株；
温度 37℃ 28℃ 28℃
培养时间 1-2d 5-7d
5-7-14d
注：根据不同培养基性质等因素，培养条件有所差异，需视情况而定。
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四、复筛
将获得的单菌落接种于复筛培养基，给予一定条件进 行培养，对产物产率、性能等相关标准进行评价，即可挑 出所需要的菌株；
土壤环境：
每年春季或旱雨季之交，一般在3-5月为佳；通常采集1040cm深处的土样；若要分离放线菌和真菌，土样应放到无菌牛皮纸袋 中，一般不放在瓶子或塑料袋中；如果要分离细菌，最好要保湿；
海洋环境及湿地：
0.5μm的滤膜过滤水样，以增加出菌率；Ekmann型采泥器或 重锤式取样器采集；样品装入无菌瓶内，不能密封，在3h内用于实验；
麦芽汁琼脂培养基(MEA)、甘油硝酸盐琼脂培养基(G25N)、
察氏培养基(CA)、孟加拉红培养基、豆汁培养基、其他；
孟蛋白加P察胨拉D氏5A红g培培、培养养葡养基基萄基成糖成成1分分0分g：：、：磷酸二氢钾1g、硫酸镁(MgSO4·7H2O)
0霉上.5述素g马 自 硝 氯 水、各0.铃然酸化11琼成0g薯P钠钾0脂分0H230m约加20g.50l0、6g入gg.、、磷0、蒸硫1酸馏葡/3酸氢水0萄亚0二中糖0铁钾孟溶2001加解.gg0拉、、1后g红琼硫，、溶脂酸再蔗液镁加1糖51(孟3-M0200加g0gmgS、拉、lO、琼红4自·蒸7脂溶来H馏2液2水0O水g。)1、100另00.蒸500用g0m馏m、少l、l、量乙氯 醇溶解氯霉素，加入培养基中，分装后，121℃灭菌20min
4. 稀释摇管法
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱPage 9
⑵用液体培养基获得纯培养 稀释法：
方法：接种物在液体培养基中进行顺序稀释，以得到高度稀 释的效果，使一支试管中分配不到一个微生物； 特点：工作量大，是否获得纯培养依靠统计学的推测； 应用：用于不能或不易在固体上生长的菌落；
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3、培养条件
类型
项目
细菌
放线菌
霉菌和酵母菌
霉菌的分离、纯化与鉴定
怎样鉴定微生物呢？
微生物鉴定主要是要回答两个问题：
一、它是不是某一种菌？
——针对性； ——规范的检测鉴定方法； ——如：致病菌检测；
二、它到底是什么菌？
——常规鉴定； ——大致的工作步骤； ——如：筛菌，潜在用途；
Page 2
分离资源微生物的基本原则
一、微生物可谓无处不在，获得什么样的微生物， 取决于分离的目的：
⑴具体如下：
开发意图贯穿分离过程，使培养基“只”满足目的菌的要求，
而非目的菌不长；eg.寻找低温碱性脂肪酶产生菌
大剂量加入同类化合物；eg.酒精酵母
特殊成分；eg.维真生菌素抑、制氨剂基：酸放、线无菌机酮盐、等制霉菌素等；
抑制剂：
细菌抑制剂：青霉素、链霉素； 萘啶酸可抑制革兰氏阴性细菌；
特定类群微生物的分离（定向分离）； 获取新资源（分离未知菌）； 分离“混合菌”（完成某种功能的一组菌）；
二、分离的基本原则是：
获得目的菌； 排除非目的菌；
Page 3
总思路流程
1、目的菌的富集培养；
采样
1、微生物资源的分布； 2、样品的采集：2h、4℃；
2、减少非目的菌；
预处理
极端环境：
尽量存放在与采样环境相当的条件下至菌种分离；
植物和动物：
确保样品的完整性，迅速对植物切口进行消毒，并用石蜡封 住以防外来菌种入侵，用无菌装置带回；如动物粪便的采集应在动物 排便后马上收集其中间部分，避免外源污染，置于无菌袋内；
Page 5
二、样品的预处理
1、目的菌的富集培养
根据目的菌的生理特性，加入其所需要的营养物质及微量成分进 行诱导增殖，增菌；设计特定的有利于待分离菌株生长的环境。
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2、分离方法介绍
获得微生物纯培养的几种常用方法
(一)固体培养基分离方法 特点：操作简单，是常规方法；
缺点：易因涂布不均使某些部位菌落
1. 涂布平板法 2. 稀释倒平板法
不方能法分：开用，接不菌易环于沾计取数待；分离菌或菌液在 特特注分点点：离：：取平菌是样板落稀液上分释约划离倒0线均.1平分-匀0板.离，2法m；计的l；数变相通对形准式确；；
3、目的菌的充分释放；
1、培养基设计原则；
初筛 2、分离方法介绍；
1、获得纯培养； 2、选择目的菌株；
复筛
3、培养条件； 1、霉菌简介；
形态学观察 2、菌落形态；
1、真菌的系统发育谱；
2、微生物快速鉴定技术； 生理生化实验
3、霉菌制片观察；
18SrRNA
分子生物学方法
Page 4
一、微生物资源的分布及样本的采集
——为了分离铁硫杆菌，可将样品加硫磺后培养； ——为了分离分解纤维素或角蛋白等的酶产生菌，可以将样品与
高浓度的纤维素或角蛋白（适当加入其他成分）在适当温度 下保湿培养一段时间，再进行分离；
2、减少非目的菌
——若目的菌耐干燥，则可通过干燥减少非目的菌； ——若要分离高温菌，可在特定高温下震荡培养若干时间，以减