高效液相色谱仪常用检测器的种类及分析(终审稿)
高效液相色谱仪常用的检测器及其性能
高效液相色谱仪常用的检测器及其性能(1)紫外汲取(UV)检测器 UV检测器是目前HPLC应用最广泛的检测器。
它是依据光汲取原理,以适当的光路和电路,输出一个与试样组分浓度成正比的紫外一可见光汲取信号,其结构与普通光度计相像。
其流通池是组分流过的光学通道,池体积普通为8μl,内径小于lmm,长度10mm 左右。
这种检测器敏捷度高,线性范围宽,对流速和温度变幻不敏感,可用于梯度洗脱分别。
紫外汲取检测要求被检测样品组分有紫外一可见光汲取,而用法的流淌相无汲取,或在被测组分汲取波特长无汲取。
普通挑选在欲分析物有最大汲取的波特长举行检测,以获得最大敏捷度和抗干扰能力。
在没有最大汲取时,可采纳末端汲取。
检测波长的挑选除取决于待测物质的成分和分子结构外,还必需考虑流淌相组成、共存组分干扰等因素。
特殊是各种溶剂都有一定的透过波长下限值,超过这个波长,溶剂的汲取会变得很强,以至于不能很好地测出待测物质的汲取强度。
表1列出了HPLC中一些常用的溶剂透过波长的下限。
(2)光电二极管阵列(IJDA)检测器 PDA检测器又称为二极管阵列检测器(diode array UV detector,DAD),这种检测器以光电二极管阵列作为检测元件,可举行多通道并行检测,在一次色谱测量中,可同时获得时光、波长、吸光度三者的关系,通过计算机处理,在荧光屏上显示出三维图谱,也可作出随意波长的吸光度一时问曲线和随意时光的吸光度一波长曲线。
DAD的光路与紫外检测器不同,光源发出的光聚焦后先通过检测池,通过检测池的透射光由全息光栅色散成多色光,不同波长的色散光按波长挨次聚焦在阵列元件上,每个元件对应一定的纳米数。
当光照耀到光电二极管时,光电二极管产生讯号。
因为色散过程及透射光的检测是全波长范围的,可在眨眼检测流经检测池的全汲取光谱,得到三维色谱一光谱图。
计算机化的数据处理,还可举行色谱峰光谱相像性比较、峰纯度检测及利用谱图库对掣定样品举行检索等,为定性、定量分析提供更丰盛的信息。
高效液相色谱法所用的检测器
高效液相色谱法所用的检测器
高效液相色谱法通常使用以下检测器:
1. 紫外光吸收检测器(UV检测器): 这是最常用的检测器之一。
它利用样品分子在特定波长下吸收的紫外光的数量来检测分离出来的化合物。
2. 荧光检测器:此检测器利用分离出来的化合物的荧光强度来检测分离出来的化合物。
这可以使它有效地检测探测极小浓度的化合物。
3. 电导检测器: 此检测器通过检测样品中离子的电导率来检测分离出来的化合物。
这种检测器通常用于离子交换色谱。
4. 质谱检测器(MS检测器):在某些情况下,需要识别和定量化合物。
在这种情况下,使用质谱检测器非常有用。
它将化合物的分子质量与一个反应谱库进行比较,以进行准确的定量和鉴定。
5. 折射率检测器(RI检测器): 检测样品分子与溶剂的差异折射率。
该检测器对于不具有紫外吸收或荧光的化合物是很有用的。
不同液相检测器的区别
不同液相检测器的区别公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]高效液相色谱仪的常用检测器有哪几种,有什么区别高效液相色谱仪常用检测器种类及分析检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号,常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。
1.紫外可见吸收检测器(ultraviolet_visibledetector,UVD)紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器之一,几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。
其特点是灵敏度较高,线性范围宽,噪声低,适用于梯度洗脱,对强吸收物质检测限可达1ng,检测后不破坏样品,可用于制备,并能与任何检测器串联使用。
紫外可见检测器的工作原理与结构同一般分光光度计相似,实际上就是装有流动地的紫外可见光度计。
(1)紫外吸收检测器紫外吸收检测器常用氘灯作光源,氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长,并安装一个光栅型单色器,其波长选择范围宽(190nm-800nm)。
它有两个流通池,一个作参比,一个作测量用,光源发出的紫外光照射到流通池上,若两流通池都通过纯的均匀溶剂,则它们在紫外波长下几乎无吸收,光电管上接受到的辐射强度相等,无信号输出。
当组分进入测量池时,吸收一定的紫外光,使两光电管接受到的辐射强度不等,这时有信号输出,输出信号大小与组分浓度有关。
局限:流动相的选择受到一定限制,即具有一定紫外吸收的溶剂不能做流动相,每种溶剂都有截止波长,当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时,溶剂的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收检测器的工作波长不能小于溶剂的截止波长。
(2)光电二极管阵列检测器(photodiodearraydetector,PDAD)也称快速扫描紫外可见分光检测器,是一种新型的光吸收式检测器。
它采用光电二极管阵列作为检测元件,构成多通道并行工作,同时检测由光栅分光,再入射到阵列式接收器上的全部波长的光信号,然后对二极管阵列快速扫描采集数据,得到吸收值(A)是保留时间(tR)和波长(l)函数的三维色谱光谱图。
中药制剂高效液相常见的色谱柱类型及其检测器类型
中药制剂高效液相常见的色谱柱类型及其检测器类型中药制剂高效液相常见的色谱柱类型包括C18、C8、Phenyl、CN、NH2等。
其中C18属于常规的反相色谱柱,适用于大多数化合物的分离;C8柱的分离效果较C18柱略差,但可以用于分离易失活的化合物;Phenyl柱可以增加由于芳香环与反相胶体间的作用而引起的选择性;CN柱比C18柱对亲水性化合物更为灵敏,适合分离极性化合物;NH2柱与CN柱相似,适于极性化合物的分离。
常见的检测器类型包括UV检测器、荧光检测器、电化学检测器和质谱检测器。
UV检测器是常见的检测器类型,根据样品吸收UV光谱特征进行定量或者鉴定;荧光检测器则根据荧光光谱特征进行检测,其对于化合物的灵敏度一般高于UV 检测器;电化学检测器包括阳极和阴极两种类型,可用于检测电化学反应产生的电信号,最常用的电化学检测器是电化学荧光检测器;质谱检测器则可以对化合物的结构进行进一步的确认和鉴定,其灵敏度和选择性都比较高。
仪器分析技术w6202-2高效液相谱仪常用检测器的分类及工作原理和应用
高效液相色谱仪常见检测器分类及工作原理和应用
主讲教师:长春职业技术学院 王磊
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检测器的分类 常用检测器的工作原理及应用
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检测器的分类
高效液相色谱仪常用检测器分类及工作原理和应用
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高效液相色谱仪常用的检测器
主要特点
池体积可制作的很小,检测后不破坏杨品, 可用于制备
灵敏度比紫外检测器高,噪音低,线性范围 宽,适用梯度洗脱及制备色谱;紫外吸收大 的溶剂不能做流动相
易受背景荧光、pH和溶剂的影响,适用于痕 量分析
可检测所有物质,不适合微量分析
蒸发光散射检测器 ELSD 纳克级激光计数检测器NQAQ
任何挥发型低于流动想的样品均能 被检测
高效液相色谱仪常见检测器分类及工作原理和应用
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常见检测器的工作原理及应用
荧光检测器的应用
环境中的污染物
– 多环芳烃(PAH),多酚, 氨基甲酸酯等
食品、饮料 – 食品中的毒素;例如:黄 曲霉毒素
– 染料 – 维生素及衍生氨基酸 生物技术及制药
多环芳烃(PAH)
H3C CH3
CH3
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常见检测器的工作原理及应用
荧光检测原理
原理:发荧光的化合物吸收光使其分子达 到激发态,当其返回到基态时发射光的现象即 荧光。
检测过程:由光源发出的光,经激发光单 色器后,得到所需波长的激发光。经过样品池 被样品吸收,并使其被激发后发射出荧光。再 经选择发射波长的单色器分光后,单一波长的 发射光波被送至检测器进行检测,吸光强度与 激发光强度成正比。
紫外可见吸收检测器
高效液相色谱检测器的种类及特点
一、概述高效液相色谱(HPLC)是一种常用的分析化学技术,广泛应用于化学、生物、医药和食品等领域。
在HPLC技术中,检测器是至关重要的一部分,它负责检测样品中化合物的浓度,并将其转化为可读的信号输出。
本文将对HPLC检测器的种类及特点进行详细介绍。
二、紫外-可见光(UV-Vis)检测器1. 原理:UV-Vis检测器利用化合物中的紫外或可见光吸收特性来检测化合物。
2. 特点:1)广泛适用:UV-Vis检测器适用于大多数有机化合物和许多无机化合物的分析。
2)灵敏度高:对于绝大多数有机化合物,UV-Vis检测器的灵敏度较高。
3)简单易用:UV-Vis检测器的操作相对简单,适合实验室常规分析。
三、荧光检测器1. 原理:荧光检测器利用化合物在受激光照射下产生荧光的特性来检测化合物。
2. 特点:1)高灵敏度:荧光检测器对于有荧光活性的化合物具有极高的灵敏度。
2)特异性强:由于荧光本身具有较高的特异性,荧光检测器可以用于分析中对混杂物的忽略。
3)应用广泛:在生物学、医学和环境领域,荧光检测器得到了广泛的应用。
四、蒸发光散射检测器1. 原理:蒸发光散射检测器通过样品与蒸发后的溶剂之间的差异来检测化合物。
2. 特点:1)通用性强:蒸发光散射检测器对于大多数非吸收性化合物都具有较好的检测能力。
2)无需色谱柱:相比于其他检测器,蒸发光散射检测器可以不需要色谱柱,适用于高分子化合物的检测。
3)灵敏度较低:蒸发光散射检测器的灵敏度通常较低,需要较高浓度的样品才能进行检测。
五、质谱检测器1. 原理:质谱检测器通过将化合物转化为离子,并对离子进行质量分析来检测化合物。
2. 特点:1)高分辨率:质谱检测器具有极高的分辨率,可以准确确定化合物的质荷比。
2)特异性强:质谱检测器对于复杂混合物的成分分析具有很强的特异性。
3)操作复杂:相比于其他检测器,质谱检测器的操作和维护较为复杂,需要专业的操作人员。
六、综述HPLC检测器种类繁多,每种检测器都有其特定的适用场景和优势。
各种液相色谱检测器介绍 液相色谱操作规程
各种液相色谱检测器介绍液相色谱操作规程紫外吸取检测器 ultraviolet absorption detector 紫外吸取检测器 ultraviolet absorption detector 简称紫外检测器(UV),是基于溶质分紫外吸取检测器 ultraviolet absorption detector紫外吸取检测器 ultraviolet absorption detector 简称紫外检测器(UV),是基于溶质分子吸取紫外光的原理设计的检测器。
由于大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外吸取性质,所以该检测器是液相色谱中应用广泛的检测器,几乎全部液相色谱仪都配置了这种检测器。
它不仅有较好的选择性和较高的灵敏度,而且对环境温度、流动相构成变化和流速波动不太敏感,因此既可用于等度洗脱,也可用于梯度洗脱。
其检测灵敏度在mg/L至mg/L范围。
可见光检测器 visible light detector可见光检测器 visible light detector 又称分光光度检测器,是基于溶质分子吸取可见光的原理设计的检测器。
能够直接接受可见光检测的溶质不是很多,而且多数灵敏度也不高,但接受具有高摩尔吸光系数的有机试剂(配位体和螯合剂)作为衍生化试剂进行柱前或柱后衍生操作的衍生化光度检测法是相当有用的,特别是在金属离子搭配物液相色谱中的应用是相当成功的。
低压梯度 low—pressure gradient低压梯度 low—pressure gradient 又称外梯度,是在低压状态下完成流动相强度调整的梯度装置。
只需一个高压泵,与等度洗脱输液系统相比,就是在泵前安装了一个比例阀,混合就在比例阀中完成。
由于比例阀是在泵之前,所以是在常压(低压)下混合之后再增压输送到色谱柱的。
蒸发光散射检测器克服常见的HPLC检测难题虽然阵法光散射检测器(Evaportive light Scattering,ELSD)已经开发生产15年,但是对于很多色谱工来说,它仍是一个新产品。
高效液相色谱仪检测器发展分类及应用
高效液相色谱仪检测器发展分类及应用1、高效液相色谱器的发展方向仪主要是高端的用于科研的通用型仪器和应用于常规分析的专用型高效液相色谱仪。
高端科研通用型仪器这部分仪器主要以Agilent、Waters、Dionex、ThermoFishier等国外知名厂家为主,国内的厂商上海通微生产的trisepTM2100PCECsystem【加压毛细管色谱(PCEC)、微径液相色谱(UHPLC)和毛细管电泳(CE)三合一仪器】,在国外有一定的销售量。
常规分析的专用型高效液相色谱仪占有高端市场的国外产品的厂商,近年也针对中国市场现状,以及常规分析专用型高效液相色谱仪市场,生产了适用于常规分析、造价低的专用型高效液相色谱仪.国内的液相色谱厂商在这个市场上的优势是多种型号、价格适当的高效液相色谱仪。
在此类仪器中,备受关注的仪器有;依利特P1201型高效液相色谱仪、福立FL-2200-2型高校液相色谱仪、伍丰LC-100型智能全控高效液相色谱仪、东西LC5510型高效液相色谱仪在仪器外观设计上有重大改进,已经与国外仪器相近。
依利特公司和通微公司都是生产了激光诱导荧光检测器。
优联公司生产的UC-3281型超小型输液泵、UC-2191型超小型UVD可组成UC3231型超小型高效液相色谱仪,在国内首次出现,是很有发展前景的新型仪器。
2 高效液相色谱仪的结构和原理高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论。
在技术上,流动相改为高压输送( 最高输送压力可达4 .9 1 0 7 P a ) ;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱( 每米塔板数可达几万或几十万) ;同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。
高效液相色谱仪主要由色谱泵及控制器、进样器、色谱柱、检测器和数据处理及控制五大部分组成,分离原理是一个物理过程,流动相携带着待分析化合物和其他一些共存物质流过色谱柱,利用不同物质在固定相上的保留时间不同,从而出峰时间不同而达到分离,利用保留时间定性,峰高或者峰面积定量,在将分离后的各个成分依次通过一紫外检测器时就可检测出各化合物的浓度来。
高效液相色谱检测器分类.
2019/8/26
光 紫外-可见检测器
检测器 射和散射等性质进行检测的
高
,示差折光率检测
器,蒸发光散射检
测器,荧光检测器
,化学发光检测器
,手性检测器
按
测
量 原 理
电学及电 化学性质 检测器
根据被测物电化学性质进行检 测
分
安培检测器,电导 检测器,库仑检测 器,介电常数检测 器,极谱检测器
高效液相色谱检测器分类
兽药残留检测
检测器的分类 :
分类标准
按检测 器性质 或应用 范围分
类
按测量 信号性
质分
种类
响应原理
特点
常用类型
总体性能 检测器
响应值取决于流出物(包括样 品和流动相)某些物理性质的
总的变化的检测器
有广泛的适用范围, 基线噪音和漂移较大 ,灵敏度低,不适于 痕量分析,不能用于
梯度洗脱
质浓度瞬间的变化
样品量一定时,检测 器瞬间响应即峰高响 应值和流动相流速无 关,峰面积与流速成 反比,峰面积与流速
乘积为常数
大部分常用的液相 色谱检测器都属于
该类检测器
质量敏感 响应值正比于单位时间内通过 峰面积与流动相流速
性检测器 检测器的物质的质量即正比于 无关,峰响应值与流
质量流速
速成正比
库仑检测器
2019/8/26
示差折光率检测器 介电常数检测器电
导检测器
溶质性能 检测器
响应值取决于流动相中溶质的 物理或化学特性的检测器
检测灵敏度高,受操 作条件和外界环境影 响小,可用于梯度洗 脱,应用范围受限制
紫外-可见检测器 荧光检测器
化学发光检测器安 培检测器
液相色谱仪检测器类型及原理
液相色谱仪检测器类型及原理
液相色谱仪检测器类型及原理如下:
1. 紫外检测器:该检测器适用于吸收波长在200-400nm的物质。
样品溶液通过进样管进入流动相,进入紫外检测器前经过一条石英衬里的检测池。
紫外辐射通过溶液时,被样品分子吸收,吸收的光强度被检测器测量。
2. 荧光检测器:该检测器适用于荧光性物质。
样品溶液通过进样管进入流动相,经过紫外激发后,样品分子发生激发态,脱离激发态时会放出发射波长固定的荧光。
该荧光被荧光检测器检测并转换为电信号。
3. 漂移时间检测器:该检测器适用于分子量小的有机物。
样
品溶液经过进样管进入流动相,在漂移时间管中流动,被高电压加速后通过泄漏孔,被带电终点接收器捕获。
根据分子质量的不同,分子的漂移时间也不同,漂移时间越短,质量越大。
4. 折射率检测器:该检测器适用于非紫外吸收物质,如糖类,蛋白质等。
样品溶液经过进样管进入流动相,经过一条单色光源后,进入折射率检测器。
折射率的变化导致被检测到的偏折角度发生变化,进而被检测器检测和记录。
5. 电化学检测器:该检测器适用于可被氧化还原的物质。
样品通过进样管进入流动相,经过电化学池后,从阳极溶出的电子被电流计测量。
随着溶出的电子数增加,电流也随之增加。
根据电流的变化反映出样品组分的浓度。
不同液相检测器的区别
高效液相色谱仪的常用检测器有哪几种,有什么区别?高效液相色谱仪常用检测器种类及分析检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号,常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。
1.紫外可见吸收检测器(ultraviolet_visibledetector,UVD)紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器之一,几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。
其特点是灵敏度较高,线性范围宽,噪声低,适用于梯度洗脱,对强吸收物质检测限可达1ng,检测后不破坏样品,可用于制备,并能与任何检测器串联使用。
紫外可见检测器的工作原理与结构同一般分光光度计相似,实际上就是装有流动地的紫外可见光度计。
(1)紫外吸收检测器紫外吸收检测器常用氘灯作光源,氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长,并安装一个光栅型单色器,其波长选择范围宽(190nm-800nm)。
它有两个流通池,一个作参比,一个作测量用,光源发出的紫外光照射到流通池上,若两流通池都通过纯的均匀溶剂,则它们在紫外波长下几乎无吸收,光电管上接受到的辐射强度相等,无信号输出。
当组分进入测量池时,吸收一定的紫外光,使两光电管接受到的辐射强度不等,这时有信号输出,输出信号大小与组分浓度有关。
局限:流动相的选择受到一定限制,即具有一定紫外吸收的溶剂不能做流动相,每种溶剂都有截止波长,当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时,溶剂的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收检测器的工作波长不能小于溶剂的截止波长。
(2)光电二极管阵列检测器(photodiodearraydetector,PDAD)也称快速扫描紫外可见分光检测器,是一种新型的光吸收式检测器。
它采用光电二极管阵列作为检测元件,构成多通道并行工作,同时检测由光栅分光,再入射到阵列式接收器上的全部波长的光信号,然后对二极管阵列快速扫描采集数据,得到吸收值(A)是保留时间(tR)和波长(l)函数的三维色谱光谱图。
高效液相色谱仪常用检测器的种类及分析
高效液相色谱仪常用检测器的种类及剖析检测器的作用是将柱流出物中样品构成和含量的变化转变为可供检测的信号,常用检测器有紫外汲取、荧光、示差折光、化学发光等。
1.紫外可见汲取检测器 (ultraviolet -visibledetector,UVD)紫外可见汲取检测器(UVD)是 HPLC中应用最宽泛的检测器之一,几乎所有的液相色谱仪都配有这类检测器。
其特色是敏捷度较高,线性范围宽,噪声低,合用于梯度洗脱,对强汲取物质检测限可达 1ng,检测后不损坏样品,可用于制备,并能与任何检测器串连使用。
紫外可见检测器的工作原理与构造同一般分光光度计相像,实质上就是装有流动地的紫外可见光度计。
(1)紫外汲取检测器紫外汲取检测器常用氘灯作光源,氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长,并安装一个光栅型单色器,其波长选择范围宽(190nm~800nm)。
它有两个流通池,一个作参比,一个作丈量用,光源发出的紫外光照耀到流通池上,若两流通池都经过纯的平均溶剂,则它们在紫外波长下几乎无汲取,光电管上接遇到的辐射强度相等,无信号输出。
当组分进入丈量池时,汲取必定的紫外光,使两光电管接遇到的辐射强度不等,这时有信号输出,输出信号大小与组分浓度相关。
限制:流动相的选择遇到必定限制,即拥有必定紫外汲取的溶剂不可以做流动相,每种溶剂都有截止波长,当小于该截止波长的紫外光经过溶剂时,溶剂的透光率降至 10%以下,所以,紫外汲取检测器的工作波长不可以小于溶剂的截止波长。
(2)光电二极管阵列检测器 (photodiodearraydetector ,PDAD)也称快速扫描紫外可见分光检测器,是一种新式的光汲取式检测器。
它采纳光电二极管阵列作为检测元件,构成多通道并行工作,同时检测由光栅分光,再入射到阵列式接收器上的所有波长的光信号,而后对二极管阵列快速扫描收集数据,获取汲取值(A)是保存时间 (tR)和波长 (l)函数的三维色谱光谱图。
由此可实时察看与每一组分的色谱图相应的光谱数据,进而快速决定拥有最正确选择性和敏捷度的波长。
高效液相色谱检测器演示文稿
第1页,共41页。
高效液相色谱检测器
第2页,共41页。
检测器 是高效液相色谱仪的
核心部件,他负责把从色谱柱 分离出来的各组分快速、准确 的检测出来,实现定性、定量 分析。
第3页,共41页。
检测器的分类
❖ 1、 紫外可见吸收检测器(UV) ❖ 2 、光电二极管阵列检测器 ( PDA) ❖ 3 、荧光检测器( FD) ❖ 4 、示差折光检测器( RID) ❖ 5 、电化学检测器( ED) ❖ 6 、化学发光检测器( CD) ❖ 7 、蒸发光散射检测器(ELSD)
第23页,共41页。
结构图
示差折光检测器原理图
第24页,共41页。
➢3、局限:不如紫外检测器敏度、对温 度敏感、不能用于梯度洗脱测器宽。
第25页,共41页。
电化学检测器
(electrochemical detector, ED)
包括电导、安培、库仑、极谱和介电常数
检测器检测器等。 ➢1 、电导检测器:
✓特点:高灵敏度、高选择性、结构简单、 操作成本低、线性范围宽(可达106) 、死 体积小、选择性检测器。 是离子色谱中必 备的检测器。
第26页,共41页。
✓原理及结构:基于离子性物质的溶液具有导电性,利
用离子在电场中迁移导电进行检测,其电导率与离子的性 质和浓度相关。 当向电导池的两个电极施加电压时,溶 液中的阴离子向阳极移动,阳离子向阴极移动。在电解质 溶液中的离子数目和离子的移动速率决定溶液的电阻大小 ,离子的迁移率或单位电场中离子的速率取决于离子的电 荷及其大小、介质类型、溶液温度和离子浓度。离子的迁 移速率取决于施加电压的大小。所施加的电压既可以是直 流电压,也可以是正弦波或方波电压。当施加的有效电位 确定后,即可测量出电路中的电流值,即能测出电导值。
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高效液相色谱仪常用检测器的种类及分析
文稿归稿存档编号:[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-
高效液相色谱仪常用检测器的种类及分析
检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号,常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。
1.紫外可见吸收检测器(ultraviolet-visibledetector,UVD)
紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器之一,几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。
其特点是灵敏度较高,线性范围宽,噪声低,适用于梯度洗脱,对强吸收物质检测限可达1ng,检测后不破坏样品,可用于制备,并能与任何检测器串联使用。
紫外可见检测器的工作原理与结构同一般分光光度计相似,实际上就是装有流动地的紫外可见光度计。
(1)紫外吸收检测器
紫外吸收检测器常用氘灯作光源,氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长,并安装一个光栅型单色器,其波长选择范围宽(190nm~800nm)。
它有两个流通池,一个作参比,一个作测量用,光源发出的紫外光照射到流通池上,若两流通池都通过纯的均匀溶剂,则它们在紫外波长下几乎无吸收,光电管上接受到的辐射强度相等,无信号输出。
当组分进入测量池时,吸收一定的紫外光,使两光电管接受到的辐射强度不等,这时有信号输出,输出信号大小与组分浓度有关。
局限:流动相的选择受到一定限制,即具有一定紫外吸收的溶剂不能做流动相,每种溶剂都有截止波长,当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时,溶剂的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收检测器的工作波长不能小于溶剂的截止波长。
(2)光电二极管阵列检测器(photodiodearraydetector,PDAD)
也称快速扫描紫外可见分光检测器,是一种新型的光吸收式检测器。
它采用光电二极管阵列作为检测元件,构成多通道并行工作,同时检测由光栅分光,再入射到阵列式接收器上的全部波长的光信号,然后对二极管阵列快速扫描采集数据,得到吸收值(A)是保留时间(tR)和波长(l)函数的三维色谱光谱图。
由此可及时观察与每一组分的色谱图相应的光谱数据,从而迅速决定具有最佳选择性和灵敏度的波长。
单光束二极管阵列检测器,光源发出的光先通过检测池,透射光由全息光栅色散成多色光,射到阵列元件上,使所有波长的光在接收器上同时被检测。
阵列式接收器上的光信号学的方法快速扫描提取出来,每幅图象仅需要10ms,远远超过色谱流出峰的速度,因此可随峰扫描。
2.荧光检测器(fluorescencedetector,FD) 荧光检测器是一种高灵敏度、有选择性的检测器,可检测能产生荧光的化合物。
某些不发荧光的物质可通过化学衍生化生成荧光衍生物,再进行荧光检测。
其最小检测浓度可达0.1ng/ml,适用于痕量分析;一般情况下荧光检测器的灵敏度比紫外检测器约高2个数量级,但其线性范围不如紫外检测器宽。
近年
来,采用激光作为荧光检测器的光源而产生的激光诱导荧光检测器极大地增强了荧光检测的信噪比,因而具有很高的灵敏度,在痕量和超痕量分析中得到广泛应用。
3.示差折光检测器(differentialrefractiveIndexdetector,RID)
示差折光检测器是一种浓度型通用检测器,对所有溶质都有响应,某些不能用选择性检测器检测的组分,如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等,可用示差检测器检测。
示差检测器是基于连续测定样品流路和参比流路之间折射率的变化来测定样品含量的。
光从一种介质进入另一种介质时,由于两种物质的折射率不同就会产生折射。
只要样品组分与流动相的折光指数不同,就可被检测,二者相差愈大,灵敏度愈高,在一定浓度范围内检测器的输出与溶质浓度成正比。
4.电化学检测器(elec)chemicaldetector,ED)
电化学检测器主要有安培、极谱、库仑、电位、电导等检测器,属选择性检测器,可检测具有电活性的化合物。
目前它已在各种无机和有机阴阳离子、生物组织和体液的代谢物、食品添加剂、环境污染物、生化制品、农药及医药等的测定中获得了广泛的应用。
其中,电导检测器在离子色谱中应用最多。
电化学检测器的优点是:
①灵敏度高,最小检测量~般为ng级,有目可达pg级;
②选择性好,可测定大量非电活性物质中极痕量的电活性物质;
③线性范围宽,一般为4~5个数量级;
④设备简单,成本较低;
⑤易于自动操作。
5.化学发光检测器(c。
iluminescencedetector,CD) 化学发光检测器是近年来发展起来的一种快速、灵敏的新型检测器,因其设备简单、价廉、线性范围宽等优点。
其原理是基于某些物质在常温下进行化学反应,生成处于激发态势反应中间体或反应产物,当它们从激发态返回基态时,就发射出光子。
由于物质激发态的能量是来自化学反应,故叫作化学发光。
当分离组分从色谱柱中洗脱出来后,立即与适当的化学发光试剂混合,引起化学反应,导致发光物质产生辐射,其光强度与该物质的浓度成正比。
这种检测器不需要光源,也不需要复杂的光学系统,只要有恒流泵,将化学发光试剂以一定的流速泵入混合器中,使之与柱流出物迅速而又均匀地混合产生化学发光,通过光电倍增管将光信号变成电信号,就可进行检测。
这种检测器的最小检出量可达10-12g。