发酵豆粕常见指标检测方法

发酵豆粕常见指标

检测方法

粗蛋白含量检测

(GB/T6432)

一、原理：

凯氏法测定样中的含氮量、即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。

二、仪器设备：

1.高速粉碎机，粉碎时间1分钟。

2.分样筛； 0.45mm、40目

3.分析天平；感量0.0001g

4.消化炉

5.滴定管；酸式50mL

6.锥形瓶；250mL

7.定氮仪；以凯氏原理制造的半自动蛋白测定仪

三、试剂

1.硫酸：含量98%

2.氢氧化钠：40%水溶液（m/V）

3.硼酸：2%水溶液（m/V）

4.混合催化剂：0.4g硫酸铜(5个结晶水)，6g硫酸钾或硫酸钠，磨碎

混匀。

5.混合指示剂：甲基红0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿0.5%乙醇溶液，两

溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。

6.0.1mol/L盐酸标准溶液：8.3 mL盐酸注入1000 mL蒸馏水中。

标定：减量法称取0.8g左右在270-300℃灼烧2h的无水NaCO3，加水50mL 溶解，加10滴混合指示剂，用配好的盐酸滴定成暗红色，煮沸2min，冷却(水中)后再滴至暗红色，同时作空白试验(不加Na2C03)。

计算：

m×1000

C=

(V1-V2)M

式中: C——硫代硫酸钠标准溶液之物质的量浓度（mol/L）

m——无水碳酸钠的质量，g

V1——盐酸溶液的用量，mL

V2——空白试验盐酸溶液的用量，mL

M——无水碳酸钠的摩尔质量数值，单位为克每摩尔（g/mol）〔M(1/2NaCO3)=52.994〕

7.蔗糖

8.硫酸铵：分析纯，干燥

四、分析步骤：（国标推荐法）

1.试样的消煮

2.称取试0.5g（含氮量5～80mg）准确至0.0002g，放入消化管中，

加入6.4g混合催化剂，与试样混合均匀，再加入12mL硫酸，于420℃

消化炉中消化3小时。冷却后，加入蒸馏水20ml ，待用。

3. 氨的蒸馏；

采用半自动定氮仪，将带消化液的消化管插在蒸馏装置上，以25mL 硼酸为吸收液，加入2-3滴混合指示剂，蒸馏装置的冷凝管末端要浸入装有吸收液的锥形瓶内，然后向消化管中加入氢氧化钠溶液，以溶液变黑为宜，即当生成黑色的氢氧化铜时，加碱量已够。若加碱量不足或过量，分解液呈蓝色而不显黑色，若加碱不够，需再增加氢氧化钠用量，直到分解液呈黑色为止。蒸馏，蒸馏时间以吸收液体积达到150mL 以上时为宜，降下锥形瓶，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶内。

4. 滴定：用0.1mol/L 的标准盐酸溶液滴定吸收液，溶液由蓝绿色变淡

紫色为终点。

5. 空白测定：

称取蔗糖0.5g ，代替试样，按以上分析步骤进行测定，消耗0.1mol/L 的标准盐酸溶液的体积不得超过0.2mL ，消耗0.02mol/L 的标准盐酸溶液的体积不得超过0.3mL 。

五、计算：

100m

014.025.6C V -V %HCl 01⨯⨯⨯⨯=）（）粗蛋白（ 式中：V 1——滴定试样时所需标准酸溶液体积，mL

V 0——滴定空白时所需标准酸溶液体积，mL

C HCL ——盐酸标准溶液浓度，mol/L

m——试样质量，g

0.014——每毫克当量氮的克数

6.25——氮换算成蛋白质的平均系数

水分检测

(GB/T6435— )

一、适用范围：

本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和各种单一饲料中水分的测定，但用作饲料的奶制品、动物和植物油脂、矿物质除外。

二、原理：

试样在105℃烘箱内，在大气压下烘干，直至恒重，逸失的重量为水分。

三、试剂和仪器设备：

1．高速粉碎机，粉碎时间1分钟。

2．分析筛孔径0.25mm（60目）。

3．分析天平感量0.0001g

4．电热恒温箱（烘箱）可控制温度在105±2℃

5．称样皿玻璃或铝质,直径40mm以上,高25mm以下

6．干燥器以氯化钙或变色硅胶为干燥剂

四、试样的选取和制备：

选取具有代表性的试样，其原始样量应在1000g以上，用四分法缩减至500g，风干后粉碎至全部经过40目筛，再用四分法缩减至200g，装于密封容器中，防止试样成分的变化或变质。