饲料公司乙二胺四乙酸二钠EDTA络合滴定法

饲料公司乙二胺四乙酸二钠（EDTA）络合滴定法

1 原理

将试样中有机物破坏，钙变成溶于水的离子，用三乙醇胺、乙二胺、盐酸羟胺和淀粉溶液消除干扰离子的影响，在碱性溶液中以钙黄绿素为指示剂，用乙二胺四乙酸二钠标准溶液络合滴定钙，可快速测定钙的含量。

2 试剂和溶液

2.1 盐酸羟胺，分析纯；

2.2 三乙醇胺，1+1；

2.3 乙二胺，1+1；

2.4 盐酸水溶液：1+3；

2.5 硝酸溶液：1+1；

2.6 高氯酸，70%～72%；

2.7 氢氧化钾溶液（200 g/L）：称取20 g氢氧化钾溶于100 mL 水中；

2.8 淀粉溶液（10 g/L）：称取1 g可溶性淀粉入200 mL烧杯中，加5 mL水润湿，加95 mL沸水搅拌，煮沸，冷却备用

（现用现配）；

2.9 钙黄绿素—甲基百里香草酚蓝指示剂：0.10 g钙黄绿素、0.10 g甲基麝香草酚蓝、0.03 g百里香酚酞与5 g氯化钾研细混匀，贮存于磨口瓶中备用；

2.10 钙标准溶液（0.001 g/mL）：称取2.4974 g于105℃～110℃干燥为3 h的基准物碳酸钙，溶于40 mL盐酸（2.4）中，加热赶除二氧化碳，冷却，用水移至1000 mL容量瓶中，稀释至刻度；

2.11 乙二胺四乙酸二钠（EDTA）标准滴定溶液。

3 仪器和设备

3.1 实验室用样品粉碎机或研钵；

3.2 分样筛：孔径0.42 mm（40目）；

3.3 分析天平：感量0.0001g；

3.4 高温炉：电加热，可控温度在（550±20）℃；

3.5 坩埚：瓷质；

3.6 容量瓶：100 mL；

3.7 滴定管：酸式，25 mL或50 mL；

3.8 玻璃漏斗：6 cm直径；

3.9 定量滤纸：中速，7 cm～9 cm；

3.10移液管：10，20 mL；

3.11烧杯：200 mL；

3.12凯氏烧瓶：250 mL或500 mL；

4 测定步骤

4.1 试样分解

4.1.1干法（推荐法）

称取试样2～5 g（精确至0.0002 g）于坩埚中，在电炉上小心炭化，再放入高温炉于550℃下灼烧3 h(或测定粗灰分后连续进行)，在坩埚中加入盐酸溶液10 mL和浓硝酸3滴，小心煮沸，将此溶液转入100ml容量瓶，冷却至室温，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。

4.1.2湿法（用于无机物或液体饲料）

称取试样2～5 g于凯氏烧瓶中，精确至0.0002 g，加入硝酸（2.5）10 mL，加热煮沸，至二氧化氮黄烟逸尽，冷却后加入70％～72％高氯酸10 mL，小心煮沸至溶液无色，不

得蒸干，冷却后加蒸馏水50 mL ，且煮沸驱逐二氧化氮，冷却后转入容量瓶，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。

4.2 测定

准确移取试样分解液5 mL ～20 mL （蛋鸡饲料10mL ，肉禽饲料20mL ）。加水50ml ，加淀粉溶液10ml 、三乙醇胺2ml 、乙二胺1ml 、氢氧化钾溶液15ml ，加0.1g 盐酸羟胺（每加一种试剂都须摇匀），加钙黄绿素少许，在黑色背景下立即用EDTA 标准溶液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点。同时做空白实验。

5 测定结果的表示与计算

测定结果按下式计算：

()()100100(%)1

03201

32⨯⨯⨯-⨯=⨯⨯-⨯=V m V V V T V V m V V T X

式中：X ——以质量分数表示的钙含量，%；

T ——EDTA 标准滴定溶液对钙的滴定度，g/mL ；

V 0——试样分解液的总体积，mL ；

V1——分取试样分解液的体积，mL；

V2——分取试样分解液消耗EDTA 标准滴定溶液的体积，ml；

V3——空白消耗EDTA 标准滴定溶液的体积，ml；

m——试样的质量，g。

6 允许差

含钙量在10%以上，允许相对偏差2%；含钙量在5%～10%时，允许相对偏差3%；含钙量1%～5%时，允许相对偏差5%；含钙量1%以下，允许相对偏差10%。

7 注意事项

7.1 三乙醇胺、乙二胺、氢氧化钾能腐蚀皮肤刺激眼睛，使用的时候要避免接触皮肤，如果接触皮肤则应该先用湿抹布擦干净，然后在用大量的水冲洗接触处。

7.2消化时不论是用干法消化还是湿法消化，必须要在通风橱处进行。采用湿法消化时要带上防毒面具。

8 结果准确度的保证和评价

8.1 结果准确度的保证

8.1.1掩蔽剂（如乙二胺、三乙醇胺等）是在一定条件下才能起到它的掩蔽作用，要按固定的操作流程顺序进行操作，三乙醇胺掩蔽Fe3+；乙二胺掩蔽Cu2+、Mn3+、Zn2+。

8.1.2配制备用的淀粉溶液不可超过一周，室温高时淀粉溶液呈混浊或有异味时不可使用，需重新配制。可以在配置时每升淀粉溶液加3g硼酸。

8.1.3定期配置一次钙标液对EDTA标定。

8.1.4钙黄绿素指示剂加入要适量。

8.1.5本实验所有仪器都不能用清洗粉洗刷。

8.2 结果准确度的评价

8.2.1加标回收

8.2.1.1称取2.4974g 已经105℃烘至恒重的基准级碳酸钙，溶于40mLHCl（1+1）加热赶除二氧化碳，冷却，用水定容至1000mL容量瓶，此溶液为0.001g/mL的钙标准溶液，此溶液可以作为标定EDTA的标准溶液也可以作为加标回收的标液使用。

8.2.1.2移取待测的试样分解液相同体积于两个锥形瓶中（移取体积参考4.2 测定中的步骤）其中一个锥形瓶中加入此节

8.2.1.1中配置的钙标准溶液5.00mL 。按照测定钙过程中的步骤，分别用EDTA 标准溶液进行滴定。

8.2.1.3回收率计算

式中: T ——EDTA 标液对钙的滴定度，g/mL

V 2——加入标液后消耗EDTA 标液的体积，mL V 1——未加标液的试样分解液消耗的EDTA 的体积，mL 测定的钙回收率应该在95%～105%之间为优秀

8.2.2参加实验室之间的比对

把有疑问的样品寄往中心化验室。 ()()%100/001.05%12⨯⨯-⨯=mL

g mL V V T Ca