蛙早期胚胎切片观察要点
蛙的早期发育观察
实验24 蛙的早期发育观察一、实验目的1．了解生殖的基础理论，学习蛙的人工催产和受精技术。
2．通过对蛙早期发育的观察，认识动物个体发育的一般过程，从而加深对动物系统演化的理解。
3．学会自己查阅文献、设计实验、分析处理实验数据及实验结果的报告。
二、实验材料1．性成熟的牛蛙、虎纹蛙等人工养殖的蛙类。
或在繁殖时期，同学自己在野外采集性成熟的蛙类，如泽蛙等。
2．或性成熟的鱼类。
三、实验器具与药品1．实验器具由同学根据实验设计自行准备。
2．药品丙酮、无水酒精、蛙类脑下垂体（PG）、绒毛膜促性腺激素（HCG）、促黄体生成素释放激素类似物（LRH-A）、生理盐水、蒸馏水等。
四、实验操作实验前同学查阅文献资料，做出实验方案设计，完成实验内容。
1．人工催产（1）不同催产剂组合催产效果的比较。
（2）不同条件催产效果的比较。
2．受精卵的获得（1）精子悬浮液的制备杀死或麻醉一只雄性亲蛙，解剖取出精巢，将精巢轻轻地在吸水纸上滚动，除去粘附其上的血液及肠系膜等。
将干净的精巢放入小烧杯或培养皿中，捣碎。
加入10 mL左右的生理盐水，制成精子悬浮。
将乳状悬浮液静置15分钟，激活精子。
（2）采卵抓住待产雌蛙，使其背部对着手心，手指部分圈住蛙体，并刚好在前肢的后面，手指尖搁在蛙的腹部；另一手抓住并伸展蛙的两后肢（图24-1）。
握蛙手指自蛙体前部开始轻微加压，然后向泄殖腔方向逐渐捏握，卵即可由泄殖孔流出。
由于开始时通常会流出泄殖腔液，因此丢弃最初排出的卵粒，擦干泄殖孔周围后，再收集卵于培养皿中。
图24-1 采集蛙卵（自Leland）（3）受精向盛卵培养皿中加入已制备好的精子悬浮液，摇匀，使精子与卵子充分接触。
10-15分钟后倒出精子悬浮液并加入清水，完成受精，得到受精卵。
将受精卵移入盛有清水的培养皿中，并供给充足氧气，观察发育过程。
也可将催产后的雌、雄蛙一起放入水簇箱中，让它们自行抱对产卵。
但此方法需密切注意观察抱对行为，以便及时采得受精卵。
蛙的早期胚胎发育
蛙的早期胚胎发育一、两栖动物的繁殖两栖动物的繁殖类型是多种多样的。
1．体外受精体外发育绝大多数的两栖动物营这种繁殖方式，我们经常见到的黑斑蛙Rananigromaculata）、中华蟾蜍（Bufo gargarizans）等都是以这种方式进行，这些动物一般将卵产于水中，受精卵在水中完成其胚胎发育。
另有一些产于陆上，胚胎发育完成后，孵出蝌蚪进入水中生活，如树蛙科（Rhacophoridae）的种类。
2．体外受精体内发育营这种繁殖方式的两栖动物通常将体外受精的卵置于身体中的某一位置（除雌性生殖道外）完成胚胎发育，这样亲蛙就可以更好地保护这些受精卵。
产于南美的负子蟾（Pipa pipa）在繁殖期间，雌蟾背部皮肤变得很柔软，增厚成海绵状组织，受精后，雄蟾用后肢将受精卵挟置雌蟾背部皮肤的“育囊”中，并在其中完成发育。
产于南美智利的尖吻达蛙（Rhinoderma darwinii）声囊很大，繁殖时会将受精卵吞入声囊中发育至雏蛙后才从声囊中出来。
而澳大利亚胃育溪蟾（Rheobactrachus sibus）雌蟾则将受精卵吞入胃中进行孵化，雌蛙在繁殖期间停止进食，由卵胶膜及后来蝌蚪所分泌的类生长素物质E）阻止了盐酸和胃蛋白酶的产生，使胃由一种消化器官临时转变为一种保护（前列腺素2性的怀孕囊。
3．体内受精体外发育这种繁殖类型在蝾螈科的种类中普遍存在，这些种类没有交配器，但它们90%是行体内受精的，交配时，雄体将精子团或精包排入水中，雌体则用泄殖腔唇纳入其中：另外还有北美山溪中生活的尾蟾（Ascaphus trnei），其雄体从泄殖腔中伸出一种尾状突出物作为交配器，而真蚓科（Caeciliidae）的种类，其雄体以泄殖腔外翻成为一突起作为交配器。
因此，这些种类都是在雌体生殖道内受精后，将受精卵排出体外完成发育的。
4．体内受精体内发育这是一种类似于哺乳动物的繁殖方式，即卵在体内受精后，在输卵管内继续发育，直接产出幼体在水中生活。
青蛙形态结构实验报告
一、实验目的通过本次实验，了解青蛙的形态结构特点，掌握青蛙内部器官的分布和功能，为后续生物学学习和研究打下基础。
二、实验材料1. 青蛙尸体2. 解剖器械：解剖剪、解剖镊、解剖针、解剖盘、解剖刀、解剖针、解剖钩等3. 显微镜及配套玻片、载玻片、盖玻片等4. 生理盐水、酒精、甲醛等试剂三、实验步骤1. 青蛙外部形态观察（1）观察青蛙整体形态：青蛙身体呈扁平状，分为头部、躯干部和尾部三部分。
头部较宽，躯干部较长，尾部细长。
（2）观察青蛙皮肤：青蛙皮肤光滑，具有丰富的粘液腺，有利于在水中游泳。
（3）观察青蛙四肢：青蛙具有四肢，后肢发达，适于跳跃。
前肢较短，主要用于抓握和攀爬。
2. 青蛙内部器官观察（1）解剖青蛙：将青蛙尸体放在解剖盘上，用解剖剪剪开腹部皮肤，暴露出内部器官。
（2）观察消化系统：消化系统包括口腔、咽、食道、胃、小肠、大肠和肛门。
口腔内有牙齿，胃呈囊状，小肠较长，大肠较短。
（3）观察呼吸系统：呼吸系统包括鼻腔、咽、喉、气管、支气管和肺。
青蛙的肺较小，但肺泡数量较多，有利于气体交换。
（4）观察循环系统：循环系统包括心脏、血管和血液。
青蛙的心脏为一心房一心室，动脉血和静脉血混合。
（5）观察泌尿系统：泌尿系统包括肾脏、输尿管和膀胱。
肾脏呈红色，具有滤过功能，输尿管将尿液输送到膀胱。
（6）观察生殖系统：生殖系统包括卵巢、输卵管、子宫、睾丸和附睾。
卵巢和睾丸分别产生卵子和精子，通过输卵管和子宫进行受精。
（7）观察神经系统：神经系统包括大脑、脊髓和神经。
大脑分为左右两个半球，脊髓连接大脑和身体各部位。
3. 青蛙内部器官显微镜观察（1）制作切片：将青蛙内部器官切成薄片，用生理盐水浸泡，制成玻片。
（2）显微镜观察：观察切片，观察细胞结构和组织结构。
四、实验结果与分析1. 青蛙具有扁平的身体形态，有利于在水中游泳。
2. 青蛙皮肤光滑，具有丰富的粘液腺，有利于在水中游泳。
3. 青蛙具有四肢，后肢发达，适于跳跃。
生物实验报告观察青蛙
一、实验目的1. 了解青蛙的生物学特征和生态习性。
2. 观察青蛙的外部形态和内部结构。
3. 掌握青蛙的生殖发育过程。
二、实验材料与工具1. 实验材料：青蛙（青蛙种类不限）、解剖工具（解剖剪、解剖镊、解剖针等）、培养皿、解剖盘、显微镜、载玻片、盖玻片、生理盐水等。
2. 实验工具：放大镜、量筒、显微镜、解剖镜、数码相机等。
三、实验方法与步骤1. 观察青蛙的外部形态（1）观察青蛙的整体形态，包括体型、体色、皮肤、四肢等。
（2）观察青蛙的眼睛、鼻子、嘴巴、四肢、尾巴等部位。
（3）记录观察到的特征。
2. 解剖青蛙（1）将青蛙放置在解剖盘上，用解剖剪剪开青蛙的腹部。
（2）用解剖镊取出内脏器官，观察心脏、肝脏、肺、胃、肠、肾脏等器官。
（3）观察青蛙的生殖系统，包括卵巢、睾丸、输卵管、输精管等。
（4）记录解剖过程中的观察结果。
3. 观察青蛙的生殖发育过程（1）观察青蛙的卵细胞、精子、胚胎等发育阶段。
（2）观察青蛙的孵化过程。
（3）记录观察到的生殖发育过程。
4. 制作青蛙的玻片标本（1）将青蛙的器官或组织切片。
（2）将切片放在载玻片上，滴加生理盐水。
（3）盖上盖玻片，用显微镜观察。
（4）记录显微镜下的观察结果。
四、实验结果与分析1. 外部形态观察结果（1）青蛙的整体形态呈椭圆形，四肢细长，皮肤光滑，体色多样。
（2）青蛙的眼睛大而突出，鼻子位于头部前端，嘴巴位于鼻孔下方。
（3）青蛙的四肢发达，适合跳跃和游泳。
2. 解剖观察结果（1）青蛙的心脏为一心房一心室结构，心脏位置位于胸腔。
（2）肝脏位于腹腔，呈绿色。
（3）肺位于胸腔，呈粉红色。
（4）胃位于腹腔，呈粉红色。
（5）肠位于腹腔，呈粉红色。
（6）肾脏位于腹腔，呈粉红色。
（7）生殖系统包括卵巢、睾丸、输卵管、输精管等。
3. 生殖发育过程观察结果（1）青蛙的卵细胞呈球形，透明。
（2）精子呈椭圆形，有鞭毛。
（3）胚胎发育过程分为卵裂期、囊胚期、原肠期、神经胚期、器官形成期等阶段。
最新-高中生物 高等动物(青蛙)的个体发育蛙的胚胎发育
高等动物（青蛙）的个体发育蛙的胚胎发育概括
（1）卵裂期这时期弱端黄卵进行不均等分裂。
经过几次分裂，形成一团细胞，动、植物极细胞大小悬殊。
（2）囊胚期在继续分裂过程中，细胞数目增多，细胞产生的液态代谢产物集中在中心，细胞向四周飘移，围成一个空心的球体，这时的胚体叫囊胚，囊胚内部出现偏于动物极、充满流体的囊胚腔。
（3）原肠胚期囊胚后期，在赤道线下出现一条月牙形的浅沟，浅沟的背缘叫背唇。
背唇出现以后，动物极细胞分裂卷入囊胚腔。
与此同时，植物极细胞也由背唇下卷入囊胚腔。
先前出现的浅沟两端继续向下延伸，最终形成一个环状裂隙，称为胚孔（原口）。
胚孔外周的细胞继续内卷，而胚孔中心始终堵塞着一团原来植物极的细胞，称为卵黄栓。
那些内卷的细胞在原来囊胚腔处围成一个新的空腔，叫原肠腔。
这时的胚体称为原肠胚。
原肠胚早期的特点是胚体出现了两层细胞，围绕原肠腔的一层，称为内胚层，包围胚体体表的一层称为外胚层。
原肠胚进一步发育，开始三胚层分化：即原肠腔顶壁的细胞分化为中胚层，中胚层包围着全部由内胚层细胞构成的原肠。
（4）神经胚期外胚层形成一片神经板，进而围成一条神经管。
神经营前端膨大发育成脑，其余发育成脊髓。
同时，在神经管下方，中胚层细胞形成一条棒状实心结构，即脊索。
在中胚层不断发育过程中，中胚层又分化出脏壁中胚层和体壁中胚层，它们两者之间的空腔，即为体腔。
蛙的个体发育在形态结构上有变态的特征。
各种动物在胚胎发育过程中都要形成内、中、外三胚层，再由这三胚层发育成动物的各种组织、器官和系统。
动物的细胞和四大组织
实验1 动物的细胞和四大组织一、实验目的1、了解动物细胞的基本结构；2、了解四大类组织的结构与功能；3、了解细胞有丝分裂各期的特点；4、掌握临时装片的制作方法。
二、实验材料人口腔上皮、疏松结缔组织、血液组织（活蛙或蟾蜍）、横纹肌（蝗虫浸制标本）、有丝分裂永久制片、复层扁平上皮、透明软骨、平滑肌及神经组织4种组织的切片。
0.1%及1%的亚甲蓝、0.7%及0.9%的NaCl溶液。
三、操作及观察1、人口腔上皮细胞：2、疏松结缔组织：胶原纤维束，弯曲成波浪状；弹性纤维细而具分枝，不成束，无波浪状弯曲。
3、血液组织：红细胞呈扁椭圆形，单个细胞为黄色，但血液组织为何呈红色？红细胞侧面呈何形状？4、肌肉组织：四、示范1、细胞的有丝分裂观察：2、复层扁平上皮组织的观察：3、软骨组织观察：4、平滑肌的观察：5、神经组织的观察五、注意事项1、做口腔上皮细胞临时装片时，注意必须将从颊部刮下的细胞在载玻片上涂得薄而均匀。
滴加0.9%的氯化钠液不宜过多，恰在盖波片之下为宜。
2、做疏松结缔组织装片时，用解剖针将取下的组织必须在一小滴生理盐水将其展开成薄片。
3、做横纹肌装片时，将取下的一小束肌肉放在载玻片上加一滴水，必须在水中用解剖针顺着肌纤维仔细分离，分得越细越好。
4、在做临时装片时，必须用镊子铗着盖玻片放置。
六、作业1、绘人口腔上皮细胞（2~3个，其中1个详绘）图。
实验2草履虫一、实验目的1、通过草履虫的形态结构与各种细胞器的观察，了解原生动物的主要特征；2、掌握临时装片的制作方法；3、了解草履虫的无性生殖和有性生殖。
二、实验材料草履虫培养液、显微镜、5%的冰醋酸、载玻片、盖玻片、镊子、棉花和吸水纸等。
三、实验操作及观察1、草履虫临时装片的制作：2、观察内容：外形、纤毛、前后端、运动方式、内质与外质、刺丝泡、表膜、口沟、胞口与胞咽、食物泡与伸缩泡、大小核等。
四、示范1、草履虫无性生殖的观察：2、草履虫接合生殖的观察：五、注意事项1、作临时装片时，棉花应使纤维之间的孔隙大小较均匀，棉花的量要少；2、观察纤毛、刺丝泡、和伸缩泡时，光线应暗些。
蛙的早期发育观察
实验24 蛙的早期发育观察两栖类的胚胎发育作为脊椎动物早期发育模式的研究已有近100年的历史,在胚胎学、发育生物学及细胞生物学的研究中占有重要的位置，是研究发育生物学、进化生物学、功能基因组学和蛋白质组学等前沿学科的模式动物，因而关于无尾两栖类早期胚胎发育的研究,国内外均早有报导.Pol.ster和Moore(1937)首先发表了蛙的正常发育时间表,将早期的胚胎发育划分为23个时期,开始对这方面的研究工作提供了一定的帮助。
蛙类动物是脊椎动物进化历程中的一个重要类群,由于蛙类动物必须在水中繁育,对水源和水质环境的改变特别敏感,如果失去水源和良好的水质坏境, 它们的生存将会受到严重威胁。
因此以蛙类动物生存质量作为检测水质环境恶化程度的探针,为探讨全球变化对生命系统的影响提供了良好的实验材料。
两栖类在脊椎动物发生中占有重要地位,在系统发生方面是水生和陆栖脊椎动物的联系动物。
观察蛙的胚胎发育,也可以看到胚胎发生中从简单到复杂的过程。
一、实验目的通过对蛙早期发育的观察，认识动物个体发育的一般过程，从而加深对动物系统演化的理解。
二、实验原理绝大多数的两栖动物营体外受精体外发育的繁殖方式，这些动物一般将卵产于水中，受精卵在水中完成其受精发育（如黑斑蛙，中华蛙等）。
也有很少的一些产卵于陆上，胚胎发育完成后，孵出蝌蚪进入水中生活（如树蛙）。
蛙类早期胚胎发育的分期通常以胚胎发育过程中的形态变化为标准。
不同的学者在研究不同蛙类的早期胚胎发育时，划分的时期不尽相同，但大同小异，大多数种类，从受精卵开始至胚胎发育完成可分为24~25个时期。
（各时期的划分及特点见附录）三、材料用具1、实验材料：青蛙的早期胚胎——蛙卵2、实验器材：手术剪、镊子、培养皿、载玻片、解剖镜（或低倍显微镜）：四、实验操作1、用镊子夹取小块蛙卵于培养皿中，用剪刀剪取一个卵放载玻片上，置于显微镜下观察。
2、连续观察一周，记录各时期蛙卵及蝌蚪的形态特点并记录与下表。
实验十青蛙早期胚胎发育的观察
细胞分化
内胚层和外胚层细胞开始分化 ，形成各种组织和器官。
形态变化与生长
胚胎逐渐变大，形态特征逐渐 明显，如四肢的出现和发育。
实验结果与理论预期的比较分析
实验结果与理论预期基本一致，胚胎 发育过程和形态特征的变化符合理论 预期。
实验结果中可能存在一些误差或异常 情况，可能与实验条件、操作等因素 有关，需要进一步分析。
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参考文献
参考文献
01
02
03
[文献1]
介绍了青蛙早期胚胎发育 的过程，包括受精、卵裂、 囊胚形成等阶段，为实验 提供了理论依据。
[文献2]
详细描述了实验所需的材 料和试剂，包括显微镜、 培养皿、胚胎培养液等， 为实验操作提供了指导。
[文献3]
提供了实验步骤和注意事 项，包括如何采集青蛙卵、 如何进行显微观察等，确 保实验的顺利进行。
对实验结果的理解和解释
实验结果说明，青蛙早期胚胎发 育是一个复杂的过程，涉及到多 个基因和蛋白质的相互作用。
通过观察胚胎发育过程，可以深 入了解细胞分化的机制和胚胎发 育的调控机制，为生物医学研究
和临床应用提供有益的参考。
实验结果也提示我们，在实验过 程中需要严格控制实验条件和操 作过程，以避免对胚胎发育造成
实验材料的准备
实验动物
选择健康、成熟的青蛙，确保其处于繁殖期。
实验器材
显微镜、培养皿、玻璃棒、吸管、解剖刀等。
实验试剂
生理盐水、甲醛溶液等。
实验操作过程
卵收集
受精
用玻璃棒轻轻刺激雌蛙的腹部，使其排卵 。将排出的卵收集到培养皿中。
使用吸管将雄蛙排出的精液与卵混合，使 卵受精。
胚胎培养
观察蛙细胞实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解蛙细胞的基本结构和功能。
2. 掌握使用高倍显微镜观察细胞的方法。
3. 学习细胞形态学的基本知识。
二、实验原理蛙细胞作为动物细胞，具有典型的真核细胞结构。
通过高倍显微镜观察蛙细胞，可以了解其细胞核、细胞质、细胞膜等结构，以及细胞分裂和细胞器的功能。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蛙胚胎、生理盐水、盖玻片、载玻片、镊子、滴管、酒精灯、剪刀、解剖刀、显微镜、高倍物镜、低倍物镜、滤光片等。
2. 实验试剂：生理盐水、0.9%NaCl溶液、1%盐酸、1%醋酸、1%酒精、1%甲醛等。
四、实验步骤1. 取蛙胚胎，用剪刀剪开蛙胚胎，取出蛙胚胎细胞。
2. 将蛙胚胎细胞放入生理盐水中，用镊子轻轻搅拌，使细胞悬浮。
3. 取盖玻片，滴一滴生理盐水于盖玻片上，用滴管将蛙胚胎细胞悬浮液滴于生理盐水滴中。
4. 用镊子轻轻将盖玻片盖上，使细胞均匀分布在盖玻片上。
5. 将载玻片放置于显微镜载物台上，调整低倍物镜，观察蛙细胞形态。
6. 调整高倍物镜，观察蛙细胞核、细胞质、细胞膜等结构。
7. 重复步骤5和6，观察细胞分裂和细胞器的功能。
五、实验结果与分析1. 观察到蛙细胞具有典型的真核细胞结构，包括细胞核、细胞质、细胞膜等。
2. 细胞核较大，具有明显的核仁，染色质分布均匀。
3. 细胞质中分布有细胞器，如线粒体、内质网、高尔基体等。
4. 观察到细胞分裂现象，包括有丝分裂和无丝分裂。
5. 通过观察细胞器的功能，了解细胞代谢和能量供应过程。
六、实验讨论1. 蛙细胞具有高度分化的特点，不同细胞具有不同的功能。
2. 细胞分裂是生物体生长发育的基础，有丝分裂和无丝分裂在细胞分裂过程中发挥着重要作用。
3. 细胞器是细胞内的重要功能单位，线粒体、内质网、高尔基体等细胞器在细胞代谢和能量供应过程中具有重要作用。
七、实验总结本次实验通过观察蛙细胞，了解了蛙细胞的基本结构和功能，掌握了使用高倍显微镜观察细胞的方法。
在实验过程中，我们学会了如何操作显微镜，如何观察细胞形态，以及如何分析细胞结构和功能。
蛙的早期胚胎发育Liuliangguo
纵裂
纵裂
分裂快，细 胞体积小， 数量多
横裂
纵裂
横裂
分裂慢，细 胞体积大， 数量少
（二）囊胚期 动物极内部的细胞向表面迁移， 形成一空腔，即囊胚形成。
动物极 囊胚腔
植物极
（三）原肠胚期 1.原肠早期: 动物极细胞分裂快,并向植 物极包裹,同时,原灰新月处的细胞向内 卷入，形成背唇。 2. 原肠中期：内 原肠腔 卷的细胞沿背壁 囊胚腔 内行并向两侧扩 展，形成侧唇。 背唇 原肠腔形成。
个 体 发 育
胚胎发育
胚后发育
一、蛙的早期胚胎发育
动物极：黑褐色，细 胞质、核位于此
蛙卵
植物极：淡黄色，含 卵黄颗粒
精子与卵结合既为受精，精子进入 卵细胞后，在其对面靠近植物极处出现 一个弯月形的灰色区域——灰新月
（一）卵裂期 受精卵的分裂称卵裂，产生的子细 胞叫卵裂球。卵裂方式：不等全裂
受精卵
囊胚腔
原肠腔
原肠胚
囊胚腔
原肠腔
原肠胚
外胚层 原肠腔
中胚层
内胚层
原肠胚
原肠早期
原肠中期
原肠晚期
神经板期
神经沟期
神经管期
[ 实验报告 ]
1. 会蛙囊胚的经切面图, 注明各部分名称 2. 绘蛙原肠胚晚期切面图, 注明各部名称 3. 绘蛙神经管期横切面图, 注明各部名称 注: 有胚层分化的, 用不同的颜色表示
神经板 中胚层 内胚层
2.神经沟期: 神经板两侧向上隆起为神经 褶, 中央凹陷为神经沟。中胚层背部正中 区形成脊索，两侧形成体节，同时沿侧 壁向腹部延伸。
神经沟 神经褶 脊索 体节
3.神经管期: 神经褶向背部中央靠拢、融合， 形成神经管，其脱离外胚层进入胚胎内。中 胚层继续沿侧壁向腹部延伸，最后在腹部愈 合，同时侧腹部的中胚层分裂成体壁中胚层 和脏壁中胚层。由内胚层包围的原肠腔形成 原始的消化道。
实验十 青蛙早期胚胎发育的观察
枣庄学院
• 实验作业 • 绘蛙早期胚胎的囊胚期发育简图， 注明各部分结构名称。
图10-2 文昌鱼囊胚（自曲漱惠等）
• 4．原肠期 • 胚胎继续发育转入原肠期。囊胚较大的一 端植物极发生内陷，并向内部迁移，内陷 继续进行，结果形成具有两层细胞的胚体， 称原肠胚。组成原肠胚的外层细胞称外胚 层，内层细胞称为内胚层。内外两胚层之 间残留的空腔为原来的囊胚腔，由内胚层 细胞包围的腔称原肠腔。内胚层细胞在胚 胎发育过程将形成消化道的上皮组织，故 称原肠。原肠腔与外界相通的小孔叫胚孔 或原口（图10-3）。
• 文昌鱼受精卵的第1、2次卵裂是从动 物极向植物极纵裂的，第3次呈水平分 裂，共形成8个分裂球，进入8细胞期， 因为细胞排列不在同一平面上，观察 时必须及时转动细调焦器才能看清楚。 以后再交替地分裂下去则形成16细胞 期、32细胞期等。
• 3．囊胚期
• 图10-2文昌鱼囊胚（自曲漱惠等）
• 文昌鱼的受精卵经过多次的卵裂后， 分裂的细胞群逐渐向胚胎的表面迁移， 结果发育成由单层上皮细胞构成的中 空的球形胚体，称囊胚期。观察文昌 鱼囊胚期装片，注意单层上皮细胞称 囊胚层，中央的空腔称囊胚腔，腔内 有细胞分泌的囊胚液（图10-2 ）。
• 原口的位置是胚胎的后端，相反一端 是前端，因此，胚胎发育到原肠期就 已经确定了胚胎的对称面。文昌鱼的 胚胎发育继原肠期之后，内胚层继续 分化出脊索和中胚层，外胚层分化出 神经管等，最终完成整个胚胎发育过 程。
•
图10-3 文昌鱼原肠作用过程 1 外胚层；2 中胚层；3 内胚层；4 脊索；5 囊胚腔； 6 胚孔背唇；7 胚孔腹唇；8 原肠腔；9 胚孔 （自曲 漱惠等）
•
图10-1 文昌鱼早期卵裂 A 受精卵；B 2细胞时期；C 4细胞时期；D 8细胞时期； E 16细胞时期；F 32细胞时期 （自曲漱惠等）
实验四、体外受精新
根据需要，对获得 的2-细胞期进行体外 培养，观察发育至囊 胚的能力。
2021/6/21
17
附加内容：蛙胚不同时期切片观察
1.蛙卵单细胞
2021/6/21
有分裂沟
18
无分裂沟
2.二细胞蛙胚
2021/6/21
19
3.蛙胚分裂早期
2021/6/21
20
4.蛙胚囊胚期
2021/6/21 囊胚早期
囊胚晚期
21
5.蛙胚原肠期
202原1/6肠/21早期-明显背唇，腹唇初现
原肠晚期-背腹唇和内卷明显 22
6.蛙胚神经板期
神经板 脊索
2021/6/21
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7.蛙胚神经沟期
2021/6/21
24
8.蛙胚神经管期
2021/6/21
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9.3mm蛙胚
2021/6/21
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五、要求
1.掌握小鼠体外受精的基本步骤 2.观察体外受精过程中小鼠精子、卵子和 卵丘细胞的变化，并绘制精卵结合示意图 3.绘制单细胞和蛙胚2细胞及早期卵裂图， 并简述蛙的原肠特点
1978年7月25日，世界上第一 例试管婴儿 —路易斯∙布朗诞 生。并在2007年成功生下一 个男孩
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三、实验仪器与试剂药品
器械与仪器：二氧化碳培养箱、实体显微镜、加温板、 血球计数板、滤纸、移卵管、微量移液器、35mm培 养皿、实验动物手术器械等。
药品与培养液：PMSG、hCG、PB1、 M16液、 液体 石蜡
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4. 媒精
在实体显微镜下，用金属针或注射针撕破置于M16液 培养滴旁液体石蜡内的输卵管膨大部，牵引其内的卵丘卵 子复合体并导入含有预培养的精子液滴中进行媒精。然后 置于二氧化碳培养箱中进行体外受精。
实验一-爪蟾人工繁殖、受精和胚胎发育
实验二爪蟾人工繁殖、受精和胚胎发育一、实验目的：了解爪蟾的生活和繁殖习性，掌握爪蟾人工繁殖技术；通过对爪蟾从受精卵经卵裂、囊胚、原肠胚到神经胚的系列发育过程的观察，了解其胚胎早期发育过程和形态模式形成的特征。
二、爪蟾的生活和繁殖习性非洲爪蟾（Xenopus laevis）原产非洲南部的一种水生蛙类，又名光滑爪蟾，属于两栖纲（Amphibia）、无尾目（Anura）、负子蟾科（Pipidae）、爪蟾属（Xenopus）。
其头部及身体扁平，没有外耳或舌头，其后脚上3趾有短爪。
雌性成蛙体长9-14cm，在身体尾端的泄殖腔上方有分列左右的两瓣膜。
雄性成蛙体长7-11cm，性成熟的雄蛙前肢有黑色婚垫，便于交配，泄殖腔上方无瓣膜。
图2-1 非洲爪蟾和热带爪蟾成体形态非洲爪蟾产卵量很大，为多次产卵类型的蛙类。
在25℃养殖条件下可以不受季节限制而常年产卵。
其卵子和胚胎体积较大，便于进行实验胚胎学操作，如显微注射、胚胎切割和移植等。
受精后胚胎发育很快，在24℃下受精后2天左右就可以孵化成可以游动的蝌蚪。
非洲爪蟾蝌蚪在早期是透明的，能够看清楚它内部的结构。
因此，非洲爪蟾长期以来被作为实验胚胎学和脊椎动物胚胎形体模式形成的模式动物。
但由于其基因组是在进化上二倍体化了的四倍体，多数基因存在四个拷贝，很难进行遗传突变实验。
因此，近年来非洲爪蟾的近亲——二倍体的热带爪蟾Xenopus tropicalis被引入发育生物学的研究中。
热带爪蟾其外型与非洲爪蟾类似，但体型较小（图2-1）。
几乎所有使用在非洲爪蟾的研究技术都可在热带爪蟾上应用，而且热带爪蟾的基因组测序计划已在2010年基本完成。
因此，热带爪蟾成为了功能基因组学和发育生物学研究的优良的实验动物模型。
三、实验器材和材料爪蟾养殖系统，小型塑料整理箱（直径约58cm）两个，加热棒，加气泵，12cm培养皿若干，9cm培养皿若干，数个胶头滴管，0.5ml (U-40)注射器、绒毛膜促性腺激素（HCG），曝气水10L，琼脂糖，0.1×MMR, 半胱氨酸(L-Cysteine Free Base),性成熟雌、雄性热带爪蟾。
蛙早期胚胎切片观察
预定外胚层 细胞
囊பைடு நூலகம்腔
预定脊索和体 节中胚层细胞 预定的内胚 层细胞，形 成原肠
原肠早期
胚 孔
瓶状细胞
背唇
胚孔
原肠早期
边缘区细胞
内卷的边缘 区细胞 陷入的内 胚层细胞
原肠胚早期
囊胚腔
脊索中胚层 原肠腔 内胚层， 形成原肠
背唇
囊胚腔
中期原肠胚
脊索中胚层在背部集中延 伸形成棒状。
预定脊索中 胚层细胞 内胚层细胞
• 蛙早期胚胎发育： 卵子受精被激活后，引起一系列反应，形成受精卵，随后 开始卵裂，形成囊胚，并进一步发育为原肠胚。之后三胚 层开始分化，各个器官原基形成，最先出现的是神经管的 形成过程，所以此期的胚胎成为神经胚。
实验目的
• 通过观察蛙早期胚胎发育的卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚 切片，理解蛙的卵裂方式、囊胚类型、原肠作用及神经管 的形成等过程。
•原肠胚： 原肠胚是胚胎发育的关键时期，通过原肠作用囊胚细胞重 新组合，并形成内胚层在内、外胚层在外，中胚层在二者之 间的三胚层结构。 蛙原肠作用起始于赤道区下方植物半球瓶状细胞内陷，从 而形成狭缝状的胚孔； 边缘区细胞（预定脊索中胚层细胞）先向植物极运动，到 达胚孔后内卷并沿囊胚腔内表面向动物极延伸； 同时，囊胚表面内胚层细胞在瓶状细胞和内卷细胞的带动 下，也进入胚胎内部，形成原肠；
原肠
神经板期
原肠腔
U型神经沟 脊索
外胚层 中胚层 原肠腔
内胚层卵黄 细胞
神经沟期
背侧铰合点
中间铰合点
轴旁中胚层
原肠
原肠腔
神经管
脊索 体节 外胚层
原肠腔
神经管管腔 神经管 脊索 外胚层 原肠腔 卵黄细胞
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囊胚腔
中期原肠胚
脊索中胚层在背部集中延 伸形成棒状。
原肠胚
预定脊索中 胚层细胞 内胚层细胞
原肠腔
随着胚孔细胞的内卷，胚唇从背面向侧面和腹面延伸，形成 新月状结构。新月状胚孔进一步延伸，先形成侧唇，再形成 腹唇。
中胚层和内胚层细胞通过侧唇和腹唇继续内卷，最后仅剩一 些含有大量卵黄、体积较大的内胚层细胞暴露在胚孔外面， 称为卵黄栓。
卵裂间隙，后来 扩大形成囊胚腔
2cell蛙胚
卵裂沟
卵裂
动物极（注意色素）
卵裂
•囊胚
蛙囊胚球形，囊胚腔位于动物半球，囊胚壁由多层细胞组 成，动物半球细胞小，植物半球细胞大，内含大量卵黄。通 过卵裂形成囊胚后细胞数目显著增多。
囊胚腔
囊胚早期
囊胚晚期
囊胚腔
细胞数量增多， 囊胚腔扩大
囊胚腔 动植物半球细胞体积差异较大
神经板期
预定表皮外 胚层 神经板 脊索
原肠
原肠腔
神经板期
外胚层细胞 变长加厚
轴旁中胚层 脊索
原肠
原肠腔
神经沟期
U型神经沟 脊索
外胚层 中胚层 原肠腔
内胚层卵黄 细胞
背侧铰合点 中间铰合点
轴旁中胚层 原肠 原肠腔
神经管
脊索 体节 外胚层
原肠腔
神经管管腔 神经管 脊索 外胚层 原肠腔 卵黄细胞
发育生物学实验3
蛙早期胚胎切片观察
• 蛙早期胚胎发育：
卵子受精被激活后，引起一系列反应，形成受精卵，随后 开始卵裂，形成囊胚，并进一步发育为原肠胚。之后三胚 层开始分化，各个器官原基形成，最先出现的是神经管的 形成过程，所以此期的胚胎成为神经胚。
实验目的
• 通过观察蛙早期胚胎发育的卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚 切片，理解蛙的卵裂方式、囊胚类型、原肠作用及神经管 的形成等过程。
•原肠胚： 原肠胚是胚胎发育的关键时期，通过原肠作用囊胚细胞重
新组合，并形成内胚层在内、外胚层在外，中胚层在二者之 间的三胚层结构。
蛙原肠作用起始于赤道区下方植物半球瓶状细胞内陷，从 而形成狭缝状的胚孔；
边缘区细胞（预定脊索中胚层细胞）先向植物极运动，到 达胚孔后内卷并沿囊胚腔内表面向动物极延伸；
实验材料和仪器
•材料： 蛙早期胚胎发育切片： 卵裂（1cell，2cell, 卵裂早期，卵裂晚期） 囊胚（囊胚早期，囊胚晚期） 原肠胚（原肠早期，原肠晚期） 神经胚（神经板期，神经沟期，神经管期）
•仪器： 普通光学显微镜
Байду номын сангаас
实验观察内容
•卵裂
胚胎通过卵裂增加细胞数目。 不同动物的卵子卵黄的数量和分布不同，所以卵裂的方式 也不同。蛙的卵子为中量黄卵，卵黄主要分布在植物极。蛙 的卵裂方式为完全卵裂的辐射型卵裂，但是由于植物极卵黄 多，所以，动物极的细胞卵裂快，细胞小；植物极卵裂慢， 细胞大。
同时，囊胚表面内胚层细胞在瓶状细胞和内卷细胞的带动 下，也进入胚胎内部，形成原肠；
原肠早期
预定外胚层 细胞
囊胚腔
预定脊索和体 节中胚层细胞
预定的内胚 层细胞，形 成原肠
胚 孔
原肠早期
瓶状细胞 背唇
胚孔
边缘区细胞
内卷的边缘 区细胞
陷入的内 胚层细胞
原肠胚早期
囊胚腔
脊索中胚层
原肠腔 内胚层， 形成原肠
囊胚腔顶壁预定外胚层细胞形状的改变和细胞重排，合并成 单层细胞，向植物极下包。最终，卵黄栓也被包入胚胎内部。
背唇 卵黄栓 囊胚腔 腹唇
晚期原肠胚
外胚层重 排并下包
•神经胚 原肠作用形成内中外三个胚层后，贯穿身体前后的脊索诱
导其背部的外胚层细胞变长增厚形成神经板； 神经板进一步弯曲形成神经沟； 神经沟闭合形成神经管。
表皮外胚层 神经管
脊索 轴旁中胚层 原肠
实验报告
• 绘图表示蛙胚早期各发育阶段胚胎