人类染色体作图与人类基因定位方法

Affected females are more common than affected males.
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The trait is present
in each generation
or 人类染色体作图和人类基因定位方 is lost.
法
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Congenital Generalized Hypertrichosis is one medical syndrome that could have contributed to the werewolf myth.
（HGPRT-） 这两种酶相对应的嘧啶和嘌呤核苷酸的代谢影响都不大，
因此，两种细胞都可以在完全培养基中生长.
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法
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HAT培养基：
H为次黄嘌呤，是HGPRT的底物，为DNA合成提供原 料（核苷酸旁路合成原料）
A为氨甲喋呤,是叶酸拮抗剂,可阻断细胞利用正常途径 合成DNA.
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细胞融合 细胞核融合 染色体丢失
继续培养许多代，其 中的一个物种的染色 体逐渐随机丢失，最 后只剩一条或几条。
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杂种细胞的筛选 (HAT选择法)
小鼠细胞株为胸腺嘧啶核苷激酶缺陷型（TK-） 人体细胞株是次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型
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Congenital Generalized Hypertrichosis is an Xlinked dominant trait（先天性多毛症）
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Affected fathers have all affected daughters and no affected sons.
Scientists are interested in this atavistic syndrome as its understanding could shed light on how during our evolution we lost hair from parts of our body.
而母亲X染色体上的基因组成，可以由外祖父的表型获知。
例如：人类色盲（a）和蚕豆病基因（G6PD ）（g）
两对连锁基因时，双重杂合体母亲可能有两种连锁相： 互引相：AG/ag------顺式相 ( cis phase) 互斥相：Ag/aG------反式相 (trans phase)
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five modes of Mendelian inheritance： 1.Autosomal dominant
2.Autosomal recessive
3.X-linked recessive
4.X-linked dominant--rare
5.Y-linked--very rare (hairy ears)
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1. 若X染色体没有重组交换
无论母亲顺式还是反式，儿子的X染色体只有两种。
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2. 若母亲X染色体的两个基因间发生了重组交换
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(二) 体细胞遗传学与细胞学图的制作
体细胞遗传学（somatie cell genetics） – 是以高等生物的体细胞为实验材料，采用细胞离体培 养，细胞融合以及遗传物质在细胞间转移等方法，研 究真核细胞内基因的结构、功能及其表达规律和条件 等的遗传学分支学科。
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E B Wilson于1911年将红绿色盲基因首次定位到X染色体上。 1968年Donahue利用系谱分析将Duffy血型基因定位于1号染
色体上，这也是人类首次将基因定位于常染色体上 。 1号染色体长臂在靠近着丝粒区的地方变长，这一异常是遗
T为在胸苷激酶（TK）的作用下生成胸腺嘧啶核苷酸， 为DNA合成提供原料
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因此在HAT培养基上:
人细胞：①由于A的存在，正常的DNA 合成通路受阻 。 ②同时由于HGPRT的缺乏，无法利用次黄嘌呤通过旁路合 成DNA（ 嘌呤合成障碍）
鼠细胞：由于A的存在正常的DNA合成通道受阻，由于无 TK，无法合成胸腺嘧啶。（嘧啶合成障碍 ） 杂种细胞：有HGPRT旁路合成腺嘌呤,鸟嘌呤；并可以利用 TK合成胸腺嘧啶（嘌呤和嘧啶都可以正常合成）
人类染色体作图和 人类基因定位方法
人类染色体作图和人类基因定位方 法
一、人类基因定位方法
(一) 家系分析与基因定位 (三) DNA介导的基因定位（核酸探针方法）
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（一）家系分析(Pedigree Analysis)与基因定位
通过分析、统计家系中有关性状的连锁情况和重 组率而进行基因定位的方法。
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1➢、经人紫、外鼠处杂理种的细仙胞台病的毒获：得具有附着点，能同时把
两个细胞融合在一起
➢ 两细胞靠近 细胞膜融合，形成异核体 细胞 核融合形成杂种细胞 继续分裂 杂种细胞 系 培养多代 其中一个物种的染色体随机丢 失，最后只剩一条或几条
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传的，将其作为1号染色体上的一个特定的标记，随后发现 这一标记与Duffy血型具有平行性，表明这种染色体的异常 结构同这一基因相连锁，因此将此血型基因定位于1号染色 体上。
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外祖父法：确定X染色体上基因间的相对距离。
根据双重杂合体母亲所生儿子中性状的重组情况，可以 估算重组率。
意义： – 可以绕过减数分裂过程，应用细胞培养方法，研究体 细胞融合、突变、分离以及连锁和交换等等。把基因 定位在染色体上，作成细胞学图。
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1、体细胞杂交定位
体细胞杂交又称体细胞融合，是指将两种 基因型不同的体细胞融合成一个细胞的过程， 这种融合后的细胞又称为杂种细胞，它兼有 两种细胞的染色体。