微生物无菌技术及仪器备使用以及维护要求

三.加水 第一次使用时加入约8L 的纯水，观察控制面
板上的缺水位灯和低水位灯相继灭，继续加水 至高水位灯（HIGH绿灯）亮，每次使用时需要 补充适量是纯水使高水位灯亮。如加水过多的 发现内胆中有存水时，应开启下排气阀放去内 胆中的多余水量。 四.堆放
将包扎灭菌的物品放入灭菌筐内，各包之间 留有空隙。
微生物实验操作基本技术
▪ 制作棉塞和包扎常用的实验器材（视频） 培养皿、移液管、锥形瓶、试管
塞棉塞和包扎
1）棉塞的制作：现场演示 用途：①避免杂菌侵入 ②保证良好的通气性能。
2）旧报纸包扎：演示 用途：①防止灭菌时水蒸气打湿棉塞 ② 减缓培养基水分的 蒸发。
常用仪器设备使用原理及操作
▪ 灭菌锅 ▪ 摇床（水浴、气浴） ▪ 培养箱 ▪ 无菌工作台
微生物无菌技术及仪器备 使用以及维护要求
微生物包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生动物等在内
的一大类生物群体，个体微小，与人类生活密切相关。广泛涉及健康、 医药、工农业、环保等诸多领域。
发酵工程 基因工程 细胞工程
酶工程
微生物学 实验技术
实验项目
▪ 微生物无菌技术及仪器设备使用和维护 ▪ 混合菌种的分离 ▪ 菌种保存及细菌形态观察 ▪ 酵母菌的形态观察及微生物直接计数 ▪ 霉菌的形态观察 ▪ 葡萄酒的酿制
实验要求
▪ 1．课前认真预习，明确本次实验的目的、要求、内容、方 法及步骤
▪ 2．提前5-10min进入实验室，检查实验所需物品是否齐全， 做好实验准备工作。
▪ 3．实验时严肃认真，根据实验指导要求进行操作，仔细观 察和记录，并进行独立思考，按时完成实验内容和实验报告。
▪ 4．保持实验室安静，实验时不得随意走动和谈笑。室内严 禁吸烟、不允许在实验室内接听手机
▪ 5．保持实验室清洁整齐，书包、衣帽等应放在指定位置， 不能置于实验台上；一切实验用具用完后擦洗干净，放回 原处。
▪ 6．爱护实验室一切仪器设备，珍惜药品及一切消耗用品， 节约水、电。
▪ 7．实验完毕后，值日生值日。值日工作范围包括：关闭水、 电、门、窗；查看水池，实验台，桌椅，地面是否干净整 齐；最后在值日生记录本上登记值日情况，再交于老师签 字后方可离开。（各班负责人分配值日生，并将名单交给 老师处一份备案。）
灭菌锅
▪ 适用于医疗卫生事业，科研，农业等单位，对医疗器械，敷料，玻 璃器皿，溶液培养基等进行消毒灭菌。
▪ 供微生物学实验、细胞生物学实验、发酵学实验、分子生物实验等 学科使用。
原理及使用方法
▪ 原理
高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密 闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套 间的水沸腾而产生蒸汽,待水蒸汽急剧地将锅内 的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀， 继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了 灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于 100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到 灭菌的目的。
▪ 使用方法： 一.开盖
向左转动手轮数圈，直至转动到顶，使锅盖充分提 起，拉起左立柱上的保险销，向右推开横梁移开锅 盖。
二.通电 接通电源，将控制面板上的电源开关按至ON处，此
时力上亮欠升，的压至蒸缺蜂约发水锅位0鸣.0内灯器3M属和响p断低，a时水水显蜂状位示鸣态灯本器，均机自缺亮锅动水。内关位低无闭（水压）位L力，A（（C控KL当黄制O锅W灯面红内）板灯压亮）， 显示电源已正常输入本机。
6.平时应将设备保持清洁和干燥，方可延长使用年限， 橡胶密封圈使用日久会老化，应定期更换。
摇床（气浴、水浴）
▪ 振荡器（摇床）是生物、医药、卫生等行业用于微生物细胞组织生 长的理想培养装置。
▪ 供微生物实验、发酵学实验以及植物细胞培养。 ▪ 目的：为了增加空气与发酵液的接触面积，同时可以是发酵液保持
迟到、早退、缺一次实验以上者或考试不及格者均不能得优秀，缺两次实验的不能得 良好，缺该课程1/3以上者或不参加实验考试者，均没有实验成绩。
实验报告的格式：
（1）实验名称 （2）实验目的 （3）实验原理 （4）实验步骤 （5）实验结果
实验目的
1.掌握包扎常用器材； 2.掌握和运用微生物实验中常用的仪 器和设备
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五.密封把横梁推向左立柱内，横梁必须全部推入 立柱槽内，手动保险销自动下落锁住横梁。并 将手轮向左旋转，使锅盖向下压紧锅体，加力 使之充分密合，致使密封开关处于联通状态。 当连锁灯亮时，显示容器密封到位。
六.温度、时间的设定
设定温度 1.按动一下确认键，绿色数显在闪烁表示可以进
行设定状态。 2.按动增加键△或是减少键▽，将温度上调或下
考核办法
实验习惯10％：
迟到1次扣1分，早退扣1分，不穿实验服者扣1分，不写预习实验报告扣5分， 值日生必须最后走，早走者扣1分。
实验报告20％：
自己归纳总结，格式规范。按时交报告，迟交报告者要扣分。
实验操作30%：
实验思路清晰，各项操作都能认真练习并熟练掌握，各组员之间协调合理，配 合得当。
实验考试成绩30％：笔试（实验结束1至2周后考试） 预习报告 10％：
九.启盖
向左转动手轮数圈，直至转动到顶，使锅盖充分提起，拉起左 立柱上的保险销，向右推开横梁移开锅盖。
注意事项
1.堆放灭菌物品时，严禁堵塞安全阀和放气阀的 出气孔，必须留出空位保证其空气畅通，否则 安全阀和放气阀因出气堵塞不能工作，造成事 故。
2.灭菌液体时，应将液体灌装在硬制的耐热玻璃 瓶中，以不超过3/4体积为好，瓶口选用棉花纱 塞，切勿使用未打孔的橡胶或软木塞。
调，设定所需温度后再按一下确认键。
▪ 设定时间 1.按一下确认键将温度显示切换成时间显示状态，绿色数显在
闪烁表示可以进行设定状态，前两位为小时，后两位为分钟。 2. 按动增加键△或是减少键▽，将温度上调或下调，设定所需
温度后再按一下确认键。 七.灭菌 八.干燥
需要迅速干燥的物品需要打开安全阀或将排汽排水阀向左旋转 至“开”位置。
3.灭菌液体结束时，不准立即释放蒸汽，必须待 压力表指针回零位方可放余汽。
4.对不同类型、不同灭菌物要求的物品，如敷料和液 体等，切勿放在一起灭菌，以免造成损失。
5.灭菌终了时，若压力表指针已回复零位，而盖不易 开启时，则可将放气阀摘子置于放气方汽。使外界 空气进入灭菌器内，真空消除后，盖即可开启。