组胚 第一章 绪论

合集下载
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

第一章绪论
组织学与胚胎学相互独立又相互关联
组织学是解剖学快的分支,又称显微解剖学,研究人体细胞、组织、器官的微细结构与相关功能。

胚胎学研究个体发生、生长及其发育机制。

旨在阐明人体胚胎发育的形态、结构、变化特点、规律。

细胞是人体结构的基本单位,机体新陈代谢、生长发育、繁殖分化的形态基础。

组织:由细胞和细胞外基质构成的具有一定形态结构、生理功能的细胞群体。

人体的基本组织:上皮、结缔、肌、神经→四大基本组织有机结合成器官→若干结构相似、功能相近的组织形成系统。

组织学与胚胎学的研究方法
光学显微镜技术(光学显微镜简称光镜1):将组织、器官制成切片,在光学显微镜下观察。

组织切片制作
一、石蜡切片法
①取材、固定:取动物或人体新鲜组织切成小块,用固定剂(常用甲醇)固定使其蛋白质迅速凝固,防止细胞自溶和组织腐败,最大程度保持组织省钱结构。

②脱水、包埋:用酒精脱去组织中的水分,用二甲苯(能溶于石蜡)置换出组织中的酒精,然后将组织块放在融化的石蜡中包埋,冷却后形成有一定硬度的蜡块。

③切片、染色:将蜡块放在切片机上,切成5-10微米的薄片,将组织切片贴于载玻片上,经二甲苯脱蜡后染色2。

最后用树胶密封,加盖玻片密封好。

二、冰冻切片
将组织块置入液氮(-196℃),冷冻后直接切片。

程序简单、快速,常用于免疫组织化学研究以及快速的病理诊断。

三、涂片
将液态的组织标本(如血液和精液)直接涂于载玻片上,以观察游离细胞的形态。

四、铺片
把疏松柔软的组织(如疏松结缔组织)撕成薄膜铺在载玻片上,以观察其中纤维的完整形态。

五、磨片
把坚硬的组织(如骨和牙)磨成薄片,放在显微镜下观察。

电子显微技术(电子显微镜简称电镜3)
一、透射电镜
用于观察组织和细胞内部的结构。

由于电子束穿透能力低,所以必须制备超薄切片(厚度通
1最好的光镜分辨率约0.2微米,放大倍数为1500倍左右。

借助光镜观察到的组织细胞结构,称作光镜结构。

除此之外还有用于观察活细胞的相差显微镜,观察组织细胞内荧光物或荧光标记物的荧光显微镜等。

2染色目的是使组织内不同结构呈现不同颜色而便于观察。

石蜡切片最常用的是苏木精-伊红染色法,简称HE染色法。

苏木精为碱性染料,可将胞核中的染色质与胞质中的核糖体染成紫蓝色;伊红为酸性染料,能把细胞质与细胞外基质染成粉红色。

组织中凡与苏木精亲和力强而被染成蓝紫色的特性称为嗜碱性;与伊红亲和性强而被染成粉红色的特性叫做嗜酸性;对两种染料亲和力都不强的称中性。

特殊染色方法:
硝酸银处理组织或细胞后呈黑色,呈亲银性;若加硝酸银后需要还原剂才能显色的叫嗜银性。

用碱性染料甲苯蓝将肥大细胞内的分泌颗粒染成紫红色,若分泌颗粒呈现出的颜色与染料不同,这种特性用醛复红将弹性纤维染成紫红色。

3以电子发射枪(电子枪)发射的电子束代替可见光,以磁场代替玻璃透镜,将放大的物象投射到荧光屏上进行观察。

分辨率0.1~0.2纳米,放大倍数为几万至几百万倍。

借助电镜观察到的结构称超微结构。

目前常用的是透射电镜(TEM)、扫描电镜(SEM)。

常为50~70nm),超薄切片制作步骤与石蜡切片相似,也经过取材、固定、脱水、包埋、切片、染色,但固定剂(戊二醛和锇酸),包埋剂(环氧树脂),切片机(超薄切片机),染料(重金属盐)等有所不同。

细胞被重金属染色的部位,图像深,称为电子致密,图像亮称为电子透明。

二、扫描电镜
用于观察组织、细胞表面立体结构。

不需要制成超薄切片,标本经固定、脱水、干燥、喷镀金属后即可观察。

由于他景深长,凹凸不平的表面也能清晰成像,故图极富立体感。

组织化学技术:定性或定位地显示组织、和细胞内某种化学物质的存在、分布、状态
一、一般组织化学技术:在组织切片上滴加某种试剂,使其与组织、细胞内待检物质发生化学反应,并形成有色沉淀,以便在显微镜下识别。

如常用过碘酸希夫反应(PAS反应)显示多糖或糖蛋白上的糖链。

后者经与过碘酸与希夫试剂反应,形成紫红色产物,以证明多糖或糖蛋白的存在。

二、免疫组织化学技术:根据抗原抗体间特异性结合的原理,检测组织和细胞中某种多肽及蛋白质等大分子物质的存在与分布。

常用标记物有荧光素、辣根过氧化物酶、胶体金。

用荧光素标记抗体,在荧光显微镜下观察,称为免疫荧光技术。

用已知抗体结合某种标记物形成标记抗体,标记抗体与组织切片孵化的时候,发生特异性结合,在显微镜下能观察到。

三、原位杂交技术带有标记物的已知碱基序列的DNA或RNA片段为核酸探针,与细胞内待检测的核酸片段按碱基配对原则进行特异性原位结合。

在光镜或电镜下观察核酸的存在与定位,该技术有特异性,敏感性较高。

组织培养技术:将离体细胞、组织或器官放置在模拟体内生理环境条件的培养液中,在无菌和适当温度(37℃)等条件下进行体外培养,使之生存和生长。

用以研究组织细胞的代谢、增殖、分化、形态及功能变化,还有各种理化因素(如药物、毒物、射线等)对活细胞的影响。

激光共聚焦技术:激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)利用激光扫描束通过光栅针孔形成点光源,在荧光标记标本道德共聚焦平面上逐点扫描,对样品进行断层扫描和成像,并用计算机进行二维或三维的数据图像分析处理。

可以进行活细胞的动态观察和对样品进行多重荧光标记观察。

组织胚胎的学习方法:
理论、实践结合,联系平面与立体,联系结构与功能,
注重胚胎发育过程中结构变化与时间的联系4
4胚胎在从一个细胞(受精卵)。

相关文档
最新文档