大学组织胚胎学课件1绪论

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一对互相垂直的圆筒状中心粒构成。
功能:参与细胞分裂,形成纺锤体,使染色体的分离。
中心粒(TEM)(↙) 右下图横SH断OU.CXW
中心粒卫星
8.细胞骨架(cytoskeleton) 组成: 微管、微丝、中间丝。
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A 微管
(2)微丝(microfilament,Mf )
功能:支持作用 (伪足、微绒毛丰富) 细胞收缩、变形运动。
大多数动植物细胞在



20~30μm间;


一般真核细胞的体积大于原核
细胞;
卵细胞大于体细胞。
几种细胞的大小
名称
人卵
口腔上 皮细胞
肝细胞
红细胞
变形虫
海胆卵
伤寒菌
肺炎球菌
μm 120 75
20
7
100 70
2.4x0.5 0.2x0.1
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组织学的教学内容:
上皮组织
细胞
基本 结缔组织
细胞透射电镜图片
M 线粒体 S 滑面内质网 R 粗面内质网
L 溶酶体 P 过氧化物酶
GL 糖原 N 细胞核
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一、细 胞 膜
细胞膜 又称单位膜 呈“两暗夹一明” 的 三层结构。
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细胞膜
二、细胞质
细胞质
细胞器 细胞基质 包涵物
线粒体 内质网 核糖体 高尔基复合体 溶酶体 微体 中心体 细胞骨架
2.形态计量术
运用数学和统计学原理对组织细胞内各种成分的数量、 体积、表面积等的测量 。目前多应用图像分析。
3.流式细胞术
应用流式细胞仪进行细胞定量分析和细胞分类研究。
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三、组织学的学习方法
1.理论联系实际 2.结构与功能关系 3.断面与立体的关系 4.建立动态变化的概念 5.善于总结,掌握规律
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B 微丝
(3)中间丝 (intermediate filament)
细胞连接,附着。
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C 中间丝
包涵物(inclusions)
1.糖原颗粒 包括:糖原颗粒、脂滴、分泌颗粒、色素颗粒等。 LM:PAS染色时呈紫红色。 EM:电子密度高,无膜包裹, 两种类型: β颗粒-不规则,散在于肌细胞; α颗粒-花簇状,多见于肝细胞。

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线粒体 (TEM)
6.过氧化物酶体(peroxisome)
又称微体(microbody,Mb), 膜包圆形小体, 多见于:肝细胞、 肾小管上皮细胞。 具有电子致密的核心。
功能: 参与脂肪酸氧化; 分解过氧化氢,解毒。
过氧化物酶体(TEM)
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7.中心体(centrosome)
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常用染色方法:HE染色
苏木精
(Hematoxylin) 碱性染料
伊红
(Eosin) 酸性染料
细胞核中的染色质、 细胞质中的核糖体
细胞质 细胞间质成份
染成蓝色
(嗜碱性)
染成红色
(嗜酸性)
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HE染色
组织结构的嗜色性
嗜碱性:可使细胞核内的染色质
及细胞质内的核糖体等
结构染成蓝紫色。
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断面与立体的关系
立体
断面
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嗜酸性
嗜酸性:可使多数细胞的细胞质
染成粉红色。
中性: 与两种染液亲合力都不强。
嗜碱性
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其它染色方法
A 嗜银性 B 嗜铬性 C 异染性
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普通光学显微镜
(light microscope ,LM )
是观察组织细胞微细结构最常用的工具,
光学部分 起放大作用
分为
光镜的分辨率约为0.2µm 可放大1000倍左右
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(六)原位杂交术
原位杂交(in situ hybridization) 是一种敏感性高、特异性强的, 能在组织细胞原位进行的核 酸分子杂交技术。 常用的标记物有两种: 1、放射性同位素,
如3H、14C、 32P、35S、125I, 2、为非放射性物质,
如地高辛等。
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人和鱼的肝脏
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胚胎学分支
1.叙述胚胎学 2.比较胚胎学 3.生态胚胎学 4.实验胚胎学 5.化学胚胎学 6.分子胚胎学 7.免疫胚胎学
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二、组织学的研究方法和常用技术
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(一)光学显微镜技术 1、常用组织切片标本制备技术 石蜡切片术 ①取材和固定; ②脱水和包埋; ③切片和染色; ④封片。 其他;火棉胶包埋, 冰冻切片, 涂片,铺片,磨片等
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三、细胞核
含有DNA遗传信息 LM:HE染色呈强嗜碱性。 结构:核被膜、染色质、
核仁与核基质
细胞核
核被膜 核仁 核基质 染色质
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核(TEM)
细胞周期
是指细胞从上一次分裂结束开始到下一次分 裂终了所经历的过程,分为分裂间期与分裂期两 个阶段。
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糖元 脂滴 色素 SHOU.CXW
1、核糖体
两种存在形式: 游离核糖体(free ribosome) 合成细胞结构蛋白,供细胞结构 更新,细胞功能旺盛则游离核糖体极多。 附着核糖体(attach ribosome)-位于内质网膜表面,合成分 泌蛋白 。
LM: 核糖体丰富的细胞,细胞质呈嗜碱性。
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冰冻蚀刻照片
冰冻蚀刻 细胞
冷冻断裂 肾小球 右下 线粒体
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分析电镜-X线微区分析图片
分析电镜
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X线微区分析
(四)组织化学和细胞化学技术
糖类显示法- PAS反应:
过碘酸—希夫反应 (periodic acid Schiff reaction,PAS):
PAS阳性 小肠上皮
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神经球
人类染色体端粒DNA的荧光原位杂交照片
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(3) 共焦激光扫描显微镜
共焦激光扫描显微镜 (confocal laser scanning microscope,CLSM)
由激光光源、共焦成像扫描 系统、电子光学系统和微机 图象分析系统四部份构成。 可对样品进行断层扫描重建 三维图像,进行体视学分析; 测定细胞内pH、钙浓度等; 更精确地检测、识别, 组织细胞的微细结构及其变 化。CLSM又称细胞CT。
真核细胞:细胞核具有核被膜和核仁。 原核细胞:核区没有核膜包围,称其为拟核。
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细胞基本结构
细胞膜
线粒体 内质网
核糖体

细胞器
高尔基复合体
溶酶体
微体

细胞质 细胞基质 中心体
细胞骨架
细胞核
包涵物
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糖元 脂滴 色素
1. 细胞核 2. 细胞质
细胞超微结构模式图
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冰冻蚀刻(freeze etching method) 观察细胞断裂表面形态结构
分析电镜 X–射线显微分析术(X–ray microanalysis) 研究细胞、组织内元素种类分布和含量
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透射电镜与照片
TEM
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淋巴细胞
扫描电镜与照片
SEM
SEM 1.纤毛 2.微绒毛
SHOU.CXWSHOU.CXWFra bibliotekCLSM
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(三)电子显微镜技术 (electron microscope, EM)
透射电镜 (transmission electron microscope,TEM) 观察细胞内部结构 分辨率为0.1-0.2nm,可放大几万-几十万倍
扫描电镜(scanning electron microscope,SEM) 观察组织或细胞表面的立体结构
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3.高尔基复合体(Golgi complex,Gol)
LM:银染呈黑褐色网状。 EM: 扁平囊、小泡、大泡
凸面-形成面,有小泡 凹面-成熟面,有大泡 功能:进行蛋白质加工、
浓缩、修饰、糖化。
“蛋白质物流中心”
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高尔基复合体(TEM)
4.溶酶体(1ysosome,Ly)
绪论
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一、组织胚胎学的研究内容
组织胚胎学【组胚】=组织学+胚胎学 组培=组织培养
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1.组织学(histology)的定义:
研究生物体微细结构及其相关功能的科学。 【其中主要是研究显微镜下细胞和细胞外基质的
形态、排列及其相关功能。】
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胚胎学的定义: 研究从精子和卵子结合形成受精卵,到
机械部分
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几种特殊显微镜术
(1)相差显微镜 (phase contrast microscope) 用于观察生活细胞 和末经染色细胞的 形态结构。
神经干细胞培养
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(2) 荧光显微镜 (fluorescence micrscope)
是用以观察 细胞、组织内 荧光物质的分布。
2.内质网(endoplasmic reticulum,ER)
扁平囊状或管泡状膜性结构。“蛋白质的加工厂”。
分为两种: 粗面内质网(rough endoplasmic reticulum,RER) 膜表面有附着核糖体 滑面内质网(smooth endoplasmic reticulum,SER) 膜表面不附着核糖体
初级溶酶体(primary lysosome) 是新生成的溶酶体
次级溶酶体(secondary lysosome)又称吞噬性溶酶体
细胞消化器,“垃圾处理厂”。
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溶酶体 (TEM)
5.线粒体(mitochondrion,Mit)
LM:杆状、圆形或椭圆形, EM: 外膜,内膜。
功能:能量代谢中心, “发电厂”
又称超微结构(ultrastructure)
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2. 胚胎学
胚前发育:精子和卵子的发育与成熟。 胚后发育:幼虫发育到性成熟,到死亡。
胚胎学——是个体发育的动态过程。
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组织学分支
1.研究对象不同:人体,动物,植物 2.研究方法不同:比较组织学,实验组织
学,组织培养,病理组织学,
胚胎的形成,个体的成熟。 这是一个从单细胞到多细胞的分化过程,是
单细胞到多种组织到多器官的发育过程。 因此:
组织胚胎学【组胚】=组织学+胚胎学
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细胞的基本知识
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细胞是:
构成有机体的基本单位,是有机体生长发 育的基础;
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不同的细胞类型:结构,细胞器?
检测组织或细胞中有无多糖存在。 原理:
PA
Schiff
多糖

氧化
试剂
紫红色沉淀
PAS反应阳性部位即表示多糖和蛋白多糖的存在 SHOU.CXW
组织细胞化学染色图片
酶细胞化学 神经元ACP酶阳性
脂类显示法 苏丹Ⅲ
脂类显示法 苏丹Ⅲ
锇酸 髓鞘染色
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核酸显示法
(五)免疫细胞化学技术
免疫组织化学术 (immunohistochemistry)
细胞培养-神经干细胞培养
组织工程基本方法示意图 A获取组织 B分离、培养种子细胞
C制备三维支架 D将种子细胞种植于支架 E将细胞-支架复合物植入组织缺损处
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(九)组织细胞定量术
1.显微分光光度术
应用显微分光光度计(microspectrophotometer)对组织和 细胞内化学成分进行定量分析。
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非放射性原位杂交 海马GAP-43 mRNA
(七)放射自显影术
放射自显影术(autoradiograph) 旨在追踪某些物质在体内、组织 或细胞中的分布与代谢径路。
同位素注入 取材 制标本 涂核乳胶 暗室曝光
显影、定影 染色 LM观察
放射自显影 甲状腺125I
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(八)组织培养和组织工程
是将免疫学原理与组织化学技术 相结合建立的新技术, 根据抗原与抗体特异性 结合的特点,检测组织 细胞内某种多肽、蛋白质 等大分子物质的存在与分布。
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鱼胃上皮中的内分泌细胞
免疫细胞化学原理
利用抗原(antigen, Ag),抗体(antibody)特异 结合的原理,用已知抗体检测未知抗原的一种方法。
细胞间质 组织 肌肉组织
(细胞外基质)
神经组织
各个器官、系统
细胞生 物学
组织学 总论
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组织学 各论
组织学结构观察的层次:
组织学 结构
光镜结构-用光学显微镜观察的结构 (LM)(light microscope ,LM 简称光镜)
微观结构microstructure
电镜结构-电子显微镜下观察的结构 (EM)(electron microscope, EM简称电镜)
2.脂滴 LM:脂肪被溶解呈空
泡状
EM: 中等或低电子密度 A 脂滴和β糖原颗粒 SHOU.CXW
α糖原颗粒
3.分泌颗粒(secretory granule)
常见于各种腺细胞、内含酶、激素 等生物活性物质。分泌颗粒有膜包裹 形态、大小因细胞种类不同各异。
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4.色素颗粒
电子密度不等
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