临床标本检验-医学资料
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-大肠杆菌培养：挑取脓血、黏液的粪便接种于MAC 或EMB， 37℃培养18-24h，挑取可疑菌落接种 KIA/MIU，进一步做生化和血清凝集试验
-金黄色葡萄球菌培养：接种于高盐甘露醇琼脂， 37℃培养18-24小时
-副溶血弧菌培养：增菌后接种与弧菌选择性培养基 与SS培养基。
检测方法
分离培养 -小肠耶尔森培养：接种NYE、MAC及SS，22-25℃及 37℃培养，挑取可疑菌落接种KIA/MIU，进一步做生化 鉴定。 -空肠弯曲杆菌：接种弯曲菌培养基，43℃微需氧培养 24-72h -艰难梭菌培养：取黄色伪膜状粪便，接种于CCFA平板， 37℃厌氧培养48h，挑取可疑菌落检测毒素
检测方法和报告
分离培养 -普通培养： -淋球菌培养： -厌氧菌培养： -真菌培养：
检测方法和报告
菌落计数
倾注平皿法： 尿液稀释成1：10、1：100、1：1000， 取此液1ml放入直径9cm灭菌平皿内，同时加入已熔化并 冷至50℃的培养基与尿混合，待凝固后置35 ℃培养。
定量接种环涂抹法：使用 1ul的定量接种环沾满尿液， 在分离培养基分离培养。生长的菌落数乘以 1000，等于 每毫升尿中的菌数。 报告： 革兰阴性菌>105cfu/ml， 革兰阳性菌>104cfu/ml有临床意义 阴性报告为“48h培养无菌生长”
检测方法和报告
普通培养：分别做厌氧和需氧培养 阳性表现：
均匀浑浊，革兰阴性菌 浑浊有绿色，肺炎链球菌 表面有菌膜有绿色荧光，铜绿假单胞菌 下面沉淀，链球菌 溶血，溶血性链球菌 浑浊有胶胨，葡萄球菌 灰白色菌膜，枯草芽孢杆菌 涂片革兰染色镜检，直接药敏、分离培养 报告临床 阴性结果7天报告
粪/肛拭
痰/咽拭
增菌 血平板
SS
MAC/ EMB
巧克力 培养基
SNA
NYE
SA
备注
++ ++
+
可同时做厌氧、需氧培 + 养，做菌计
++
+
+
做菌计、需要时做厌氧
++ ++
弧菌培养选用碱性蛋白
+
胨水和TCBS培养基
直接涂片镜检
++
++
+
+
脓液
分泌物
++
++
Байду номын сангаас
生殖道
标本
++ ++
眼耳口鼻 标本
+
++
体液
++ ++
患者徐某，男，26岁，因烧伤入住 某院烧伤病房等待植皮手术。期间 ，患者烧伤创面有蓝绿色有甜腥气 味的粘稠分泌物渗出，随后患者出 现41℃高热、呼吸急促、血压下降 、昏迷。临床诊断为败血症休克， 立即给予广谱抗生素抗菌治疗与对 症支持治疗，同时采集血标本送检 验科微生物室检验并要求做药敏试 验。请问，该患者可能为哪种细菌 感染？血培养将会出现什么现象？ 该如何进一步鉴定？
患者周某，男，65岁，结肠癌术后化疗三日后出现高 热，常规应用抗生素治疗无效，遂临床采集血标本送 检验科微生物室，要求血培养鉴定病原菌及药敏试验 。微生物室工作人员血标本经18h培养后，出现均匀 混浊，酚红指示剂变色。请问该病人可能是什么细菌 感染？如何进一步鉴定？
患者李某，女，57岁，术后留置导尿3d后出 现发热（38℃以上）、尿痛、排尿困难，查 体有下腹触痛与肾区叩痛，临床初步判断为 肾盂肾炎，病房要求检验科派人协助采集尿 液标本送检。请问如何正确采集标本，并如 何进行检验？
粪便标本
自然排便法：挑取脓血、黏液的粪便2-3g于无 菌的纸盒中，或放置于增菌液中送检
直肠肛拭子法：直接送检或放入运送培养基中 送检
检测方法
直接镜检：针对特殊细菌，如霍乱弧菌、结核、真菌等 -霍乱弧菌：鱼群样排列的革兰阴性菌，动力阳性 -葡萄球菌：金葡菌引起的假膜性肠炎 -结核分枝杆菌： -艰难梭菌：革兰阳性粗大杆菌，无荚膜、有芽孢 -空肠弯曲杆菌：细小、弧形、S形或螺旋形革兰阴性
++
++
++
++ ++
++
++
+
直接涂片镜检、可同时 做厌氧、需氧培养 可直接涂片镜检
直接涂片镜检 +
直接涂片镜检，可同时 做厌氧、需氧培养
血液和骨髓
采血时间与次数：采集血培养都应该在使 用在使用抗生素之前进行；对间歇性寒战， 应该估计寒战或体温高峰时间。
采血部位：肘静脉或肘动脉 骨髓采集： 增菌培养：培养基中加入SPS
检测方法
分离培养
-沙门菌及志贺菌：增菌培养或直接接种于SS和MAC、 CB，37℃18-24h培养，挑取可疑菌落接种KIA/MIU， 进一步做生化和血清凝集试验
-霍乱弧菌：碱性蛋白胨水37℃增菌6h，挑取菌膜接 种TCBS平板， 37℃培养16-20h，挑选可疑菌落氧化 酶阳性，多价“O”诊断血清凝集试验
尿液的处理
标本采集： 一般培养采用清洁中段尿。采样前，用肥皂
水或清水清洗外阴，排出尿液前段需丢弃，中 段和后段尿液10-20ml盛装于无菌的容器。
肾盂尿采集法 膀胱穿刺尿采集法 结核菌涂片或培养用24小时尿取沉淀。
检测方法和报告
直接镜检 -离心沉淀涂片革兰染色 -淋球菌镜检
假丝酵母镜检 结核分枝杆菌镜检
临床意义
检测引起腹泻、食物中毒的肠道菌致病菌 检测肠道正常菌群，预防菌群失调
患者杨某，女，24岁，2日前到某海滨城市旅 游，并在街边小店食入大量海鲜。回家后出现 腹痛、腹泻、呕吐、低热到医院就诊。临床采 集粪便标本送检验科微生物室。标本性状为糊 状，常规接种SS平板与CB平板，培养18h后发 现SS平板上除乳糖阳性菌落外有扁平、无色透 明、蜡滴状小菌落生长，CB平板上未见乳糖阴 性菌落生长。请问患者可能是何种细菌感染？ 如何进一步鉴定？
临床标本的细菌学检验
基本要求
认真核对： 了解诊断： 联系临床：
正确采集和处理标本
无菌操作：对无菌或有菌标本不同处理 盛放容器：无菌容器 采集时间、部位： 送检时间、方法：及时送检、低温或保温保存 安全防护： 及时检验和报告：
选择合适的培基养和培养方法
血液 骨髓 尿液
检测方法和报告
特殊培养 脑膜炎奈瑟菌培养：37℃加5-10%CO2 伤寒或其它沙门菌：接种葡萄糖胆汁肉汤或胆盐肉汤 草绿色链球菌：胰酶酪蛋白大豆肉汤，同时做需要、 CO2和厌氧培养 L型细菌：高渗液体培养基，“油煎蛋”菌落 厌氧培养： 真菌培养：
临床意义
确诊菌血症和败血症 金黄色葡萄球菌见疖、痈、脓肿引起的败血症 革兰阴性菌见尿路、胆道、胃肠道引起的败血症 草绿色链球菌引起亚急性心内膜炎 铜绿、金葡引起烧伤后败血症
-金黄色葡萄球菌培养：接种于高盐甘露醇琼脂， 37℃培养18-24小时
-副溶血弧菌培养：增菌后接种与弧菌选择性培养基 与SS培养基。
检测方法
分离培养 -小肠耶尔森培养：接种NYE、MAC及SS，22-25℃及 37℃培养，挑取可疑菌落接种KIA/MIU，进一步做生化 鉴定。 -空肠弯曲杆菌：接种弯曲菌培养基，43℃微需氧培养 24-72h -艰难梭菌培养：取黄色伪膜状粪便，接种于CCFA平板， 37℃厌氧培养48h，挑取可疑菌落检测毒素
检测方法和报告
分离培养 -普通培养： -淋球菌培养： -厌氧菌培养： -真菌培养：
检测方法和报告
菌落计数
倾注平皿法： 尿液稀释成1：10、1：100、1：1000， 取此液1ml放入直径9cm灭菌平皿内，同时加入已熔化并 冷至50℃的培养基与尿混合，待凝固后置35 ℃培养。
定量接种环涂抹法：使用 1ul的定量接种环沾满尿液， 在分离培养基分离培养。生长的菌落数乘以 1000，等于 每毫升尿中的菌数。 报告： 革兰阴性菌>105cfu/ml， 革兰阳性菌>104cfu/ml有临床意义 阴性报告为“48h培养无菌生长”
检测方法和报告
普通培养：分别做厌氧和需氧培养 阳性表现：
均匀浑浊，革兰阴性菌 浑浊有绿色，肺炎链球菌 表面有菌膜有绿色荧光，铜绿假单胞菌 下面沉淀，链球菌 溶血，溶血性链球菌 浑浊有胶胨，葡萄球菌 灰白色菌膜，枯草芽孢杆菌 涂片革兰染色镜检，直接药敏、分离培养 报告临床 阴性结果7天报告
粪/肛拭
痰/咽拭
增菌 血平板
SS
MAC/ EMB
巧克力 培养基
SNA
NYE
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备注
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可同时做厌氧、需氧培 + 养，做菌计
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做菌计、需要时做厌氧
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弧菌培养选用碱性蛋白
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胨水和TCBS培养基
直接涂片镜检
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脓液
分泌物
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Байду номын сангаас
生殖道
标本
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眼耳口鼻 标本
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体液
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患者徐某，男，26岁，因烧伤入住 某院烧伤病房等待植皮手术。期间 ，患者烧伤创面有蓝绿色有甜腥气 味的粘稠分泌物渗出，随后患者出 现41℃高热、呼吸急促、血压下降 、昏迷。临床诊断为败血症休克， 立即给予广谱抗生素抗菌治疗与对 症支持治疗，同时采集血标本送检 验科微生物室检验并要求做药敏试 验。请问，该患者可能为哪种细菌 感染？血培养将会出现什么现象？ 该如何进一步鉴定？
患者周某，男，65岁，结肠癌术后化疗三日后出现高 热，常规应用抗生素治疗无效，遂临床采集血标本送 检验科微生物室，要求血培养鉴定病原菌及药敏试验 。微生物室工作人员血标本经18h培养后，出现均匀 混浊，酚红指示剂变色。请问该病人可能是什么细菌 感染？如何进一步鉴定？
患者李某，女，57岁，术后留置导尿3d后出 现发热（38℃以上）、尿痛、排尿困难，查 体有下腹触痛与肾区叩痛，临床初步判断为 肾盂肾炎，病房要求检验科派人协助采集尿 液标本送检。请问如何正确采集标本，并如 何进行检验？
粪便标本
自然排便法：挑取脓血、黏液的粪便2-3g于无 菌的纸盒中，或放置于增菌液中送检
直肠肛拭子法：直接送检或放入运送培养基中 送检
检测方法
直接镜检：针对特殊细菌，如霍乱弧菌、结核、真菌等 -霍乱弧菌：鱼群样排列的革兰阴性菌，动力阳性 -葡萄球菌：金葡菌引起的假膜性肠炎 -结核分枝杆菌： -艰难梭菌：革兰阳性粗大杆菌，无荚膜、有芽孢 -空肠弯曲杆菌：细小、弧形、S形或螺旋形革兰阴性
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直接涂片镜检、可同时 做厌氧、需氧培养 可直接涂片镜检
直接涂片镜检 +
直接涂片镜检，可同时 做厌氧、需氧培养
血液和骨髓
采血时间与次数：采集血培养都应该在使 用在使用抗生素之前进行；对间歇性寒战， 应该估计寒战或体温高峰时间。
采血部位：肘静脉或肘动脉 骨髓采集： 增菌培养：培养基中加入SPS
检测方法
分离培养
-沙门菌及志贺菌：增菌培养或直接接种于SS和MAC、 CB，37℃18-24h培养，挑取可疑菌落接种KIA/MIU， 进一步做生化和血清凝集试验
-霍乱弧菌：碱性蛋白胨水37℃增菌6h，挑取菌膜接 种TCBS平板， 37℃培养16-20h，挑选可疑菌落氧化 酶阳性，多价“O”诊断血清凝集试验
尿液的处理
标本采集： 一般培养采用清洁中段尿。采样前，用肥皂
水或清水清洗外阴，排出尿液前段需丢弃，中 段和后段尿液10-20ml盛装于无菌的容器。
肾盂尿采集法 膀胱穿刺尿采集法 结核菌涂片或培养用24小时尿取沉淀。
检测方法和报告
直接镜检 -离心沉淀涂片革兰染色 -淋球菌镜检
假丝酵母镜检 结核分枝杆菌镜检
临床意义
检测引起腹泻、食物中毒的肠道菌致病菌 检测肠道正常菌群，预防菌群失调
患者杨某，女，24岁，2日前到某海滨城市旅 游，并在街边小店食入大量海鲜。回家后出现 腹痛、腹泻、呕吐、低热到医院就诊。临床采 集粪便标本送检验科微生物室。标本性状为糊 状，常规接种SS平板与CB平板，培养18h后发 现SS平板上除乳糖阳性菌落外有扁平、无色透 明、蜡滴状小菌落生长，CB平板上未见乳糖阴 性菌落生长。请问患者可能是何种细菌感染？ 如何进一步鉴定？
临床标本的细菌学检验
基本要求
认真核对： 了解诊断： 联系临床：
正确采集和处理标本
无菌操作：对无菌或有菌标本不同处理 盛放容器：无菌容器 采集时间、部位： 送检时间、方法：及时送检、低温或保温保存 安全防护： 及时检验和报告：
选择合适的培基养和培养方法
血液 骨髓 尿液
检测方法和报告
特殊培养 脑膜炎奈瑟菌培养：37℃加5-10%CO2 伤寒或其它沙门菌：接种葡萄糖胆汁肉汤或胆盐肉汤 草绿色链球菌：胰酶酪蛋白大豆肉汤，同时做需要、 CO2和厌氧培养 L型细菌：高渗液体培养基，“油煎蛋”菌落 厌氧培养： 真菌培养：
临床意义
确诊菌血症和败血症 金黄色葡萄球菌见疖、痈、脓肿引起的败血症 革兰阴性菌见尿路、胆道、胃肠道引起的败血症 草绿色链球菌引起亚急性心内膜炎 铜绿、金葡引起烧伤后败血症