显微镜的七种观察方法[专业内容]
显微镜的使用
显微镜的使用显微镜是一种用于观察微小对象的仪器。
常见的显微镜有两个镜片组成的光学系统：物镜和目镜。
物镜用于放大被观察物体的影像，目镜用于观察物镜形成的影像。
同时，显微镜还有焦聚调节装置和样品台等组成部分。
本文将详细介绍显微镜的使用方法，包括低倍镜和高倍镜的使用。
低倍镜的使用：1.将待观察的物体放置在显微镜的样品台上，调节样品台的位置，使得物体位于物镜光轴下方。
2.调整物镜至低倍位，选择合适的物镜（通常为4倍或10倍）。
3.调节焦聚调节装置，将物镜调至适当的焦距，使得样品清晰可见。
4.通过目镜观察物镜下的物体，使用焦聚调节装置调节焦点，使得图像更加清晰。
5.使用贴近电线的惯用方式来观察物体，即左眼通过目镜观察物镜，右眼保持闭眼，将左眼所看到的物体与右眼感受到的空间结合起来，从而获得更立体的视觉效果。
6.移动样品台，使得整个物体都能够被观察到，并观察物体的细节。
高倍镜的使用：1.将待观察物体放置在显微镜的样品台上，调节样品台的位置，使得物体位于物镜光轴下方。
2.调整物镜至高倍位，选择合适的物镜（通常为40倍或100倍）。
3.利用低倍镜的方式，先将物镜调至适当的焦距，使样品清晰可见。
4.同样使用贴近电线的方式来观察物体。
5.调节焦聚调节装置，使图像更加清晰。
使用显微镜时需要注意以下几点：1.在使用显微镜之前，需要清洁物镜和目镜的镜片，以避免脏污对观察结果的影响。
2.在放置待观察物体时，需要保持物体平稳，避免因晃动而影响观察。
3.在使用显微镜时，需要避免直接用手触摸物镜、目镜和样品台等部分，以免留下指纹或其他污染物，在观察过程中会造成影响。
4.在观察时，可以利用显微镜的聚焦装置调整焦点，以获得最清晰的观察结果。
5.在观察过程中，可以适当调整物镜的倍数，以获取所需的放大倍数。
6.观察结束后，要将显微镜存放在干燥、通风的地方，并注意盖好保护罩。
通过低倍镜和高倍镜的使用方法，我们可以观察到更加细微的物体结构和细节，这对于生物学、医学、材料科学等领域的研究非常重要。
显微镜的七种观察方法
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按观察方法分 7-2
2.暗场:照明光通过物镜外
围射于试样，来自试样的干涉及 衍射光进入物镜并最终被观察到。
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暗场
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1 原理 丁道尔(Tyndall)现象，微粒对斜射光反射或衍射，增 大了人眼可见性。 2 特点 观察到极其微小物体，分辨率可达0.02 ~ 0.004 um (明场0.4um)—”超显微“。 3 缺点 只能观察到物体存在、运动和外部形态 不方便调节 标本要求高（灰尘、盖片、载片）
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使用抗衰减剂的效果
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汞灯灯箱构造
灯室，上下、左右旋钮，聚光镜旋钮
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按观察方法分 7-4
4.偏光:有些物质在两个呈
一定夹角的偏光滤片之间可现呈 鲜明的对比，或根据双折射性能 和定向呈现颜色
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偏光
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1 原理
依据波动光学原理观察和精密测定标本细节,或透明物体改变光束的物理参数,以 此判别物质结构的一种显微镜
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4 应用： 微小粒子、细菌形态观察 、细菌记数，透明标本观 察等
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按观察方法分 7-3
3.荧光:利用某些物质在受
到了紫外光或短波长的光激发照 射以后能够发射出比激发光波长 长的荧光的特性的观察方法
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荧光
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什么是荧光 ?
物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变 为高能状态，再回到低能状态时释放出的光，是 非温度辐射光——冷光。即：物质吸收短波光， 发射出的长波光。
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按观察方法分 7-7
显微镜使用知识
显微镜使用知识显微镜使用知识显微镜的认识1、目镜盖：保护目镜，以免将灰尘、油污、尖锐物件进入目镜，操作镜片，影响观察。
2、目镜：观察物体之用。
如有油污、灰尘等，可用镜头纸沾上乙醇，做圆圈状清洗。
千万不能用手去触摸镜片。
3、调焦手轮：用手轮来调整镜筒的上下位置，以便得到清晰的聚集来观察物体。
4、反光镜：有两种光源：a 可用反光镜借助自然光源或灯光的折射，将光束从载物台中心的通光孔中通过，并通过角度的变动来获得自己满意的光强度，使观察物更清晰。
B 装上电池，将灯泡向上，调节光源至满意的效果。
5、载物台：是用来置放所观察物体的。
载物台上的两个金属压片是用来固定载玻片的。
6、镜座：取下底垫就可以更换电池，注意电池的正、负极。
7、转盘：轻轻的用手旋转转盘，听到清晰的“咔嗒”声，则表示定位准确。
转盘上有三个物镜，通过变换物镜的倍数，可以获得不同的放大倍数，以便清晰地观察物体。
建议：先用最小的倍数的物镜来观察，然后逐步放大倍率。
显微镜的附件：1、塑胶瓶：可放置做实验所需的物品。
如海盐、虾卵、染色剂、胶水等。
2、孵卵盒：用来孵化虾卵或当培养皿。
3、标签盒和盖片盒：存放空白标签和盖片。
是为你动手做标本的。
4、标本载片：先学会观察这些标本。
5、空白载片：你可以用身边熟悉的东西做标本观察。
6、吸管：吸取染色剂之用。
7、蝴蝶标本：通过显微镜的放大，可以看到蝴蝶的角须、足、鳞粉等。
8、滤色盘：将滤色盘安装在载物台的下面，转动滤色盘，可变换红、黄、蓝三种不同的颜色来分别观察物体的奇异变色现象。
1、取镜和安装把显微镜放在实验台距边缘7厘米左右处，略偏左。
检查一下物镜和目镜。
2、对光转动转盘，使低倍率物镜对准通光孔。
调整光源，使光线通过通光孔，达到最好的效果。
3、观察把所要观察的载玻片放在载物台上，用压片夹住，标本要正对通光孔的中心。
或自制一个字母装片。
A、从报纸或书刊上剪下一个字母；B、将字母放在干净的空白载片上；C、用吸管吸水后挤上一滴水；D、将透明盖玻片取出，盖在滴水后的纸片上；E、置于压片下，将其移放到载台小孔中央。
显微镜的七种观察方式
显微镜的七种观察方法发布时间：2013-1-7一．明视野观察（Brightfield）明视野镜检是大家比较熟悉的一种镜检方式，广泛应用于病理、检验，用于观察被染色的切片，所有显微镜均能完成此功能。
二．暗视野观察（Darkfield）暗视野实际是暗场照明发。
它的特点和明视野不同，不直接观察到照明的光线，而观察到的是被检物体反射或衍射的光线。
因此，视场成为黑暗的背景，而被检物体则呈现明亮的象。
暗视野的原理是根据光学上的丁道尔现象，微尘在强光直射通过的情况下，人眼不能观察，这是因为强光绕射造成的。
若把光线斜射它，由于光的反射，微粒似乎增大了体积，为人眼可见。
暗视野观察所需要的特殊附件是暗视野聚光镜。
它的特点是不让光束由下至上的通过被检物体，而是将光线改变途径，使其斜射向被检物体，使照明光线不直接进入物镜，利用被检物体表面反射或衍射光形成的明亮图象。
暗视野观察的分辨率远高于明视野观察，最高达0.02—0.004三．相差镜检法（Phasecontrast）在光学显微镜的发展过程中，相差镜检术的发明成功，是近代显微镜技术中的重要成就。
我们知道，人眼只能区分光波的波长（颜色）和振幅（亮度），对于无色通明的生物标本，当光线通过时，波长和振幅变化不大，在明场观察时很难观察到标本.相差显微镜利用被检物体的光程之差进行镜检，也就是有效地利用光的干涉现象，将人眼不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差，即使是无色透明的物质也可成为清晰可见。
这大大便利了活体细胞的观察，因此相差镜检法广泛应用于倒置显微镜。
1相差显微镜的基本原理是，把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。
光线透过标本后发生折射，偏离了原来的光路，同时被延迟了1/4λ（波长），如果再增加或减少1/4λ，则光程差变为1/2λ，两束光合轴后干涉加强，振幅增大或减下，提高反差。
在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处：1.环形光阑（annulardiaphragm）位于光源与聚光器之间，作用是使透过聚光器的光线形成空心光锥，焦聚到标本上。
显微镜的使用方法
显微镜的使用方法
显微镜是一种重要的科学工具，用于观察微小物体。
以下是显微镜的使用方法：
1. 准备样本：选择要观察的物体或样本，并将其放置在显微镜玻璃片上。
2. 调节光源：打开显微镜下方的光源，调节光的亮度，确保样本能够被照亮。
3. 调节目镜（物镜）：通过转动显微镜上方的目镜旋钮，将物镜调节到最低放大倍数。
4. 调节聚焦：通过转动显微镜侧面的聚焦轮，将样本和物镜的间距调整到最小。
然后，通过细致地转动聚焦轮，逐渐将样本变得更加清晰。
5. 调节放大倍数：通过转动物镜旋钮，逐渐增加放大倍数，直到达到所需的观察倍率。
6. 调节工作台：通过转动显微镜底部的工作台旋钮，可以在垂直方向上移动样本，以便观察不同的区域。
7. 观察样本：通过看进目镜，您可以看到样本的放大图像。
您可以使用显微镜携带的调节旋钮，调整焦点和放大倍数，以获取清晰的图像。
8. 记录观察结果：您可以使用纸和笔记录您观察到的任何有趣的细节，或者使用相机来拍摄图像以备后用。
9. 清洁显微镜：使用柔软的镜头纸轻轻擦拭显微镜的镜头和其他表面，以确保下一次使用时的清晰观察。
注意事项：
- 在拿取和搬运显微镜时要轻柔，避免碰撞和摔落。
- 在观察之前，确保样本清洁，无尘和无污染。
- 如果需要更高放大倍数的观察，可以更换较高倍数的物镜。
希望以上使用方法对您有所帮助！。
光学显微镜的七种观察方式
上海超益光电科技有限公司
5.7、荧光观察
什么是荧光？
• 物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变为高能状态，再回到低能状态时释放出的光， 是非温度辐射光——冷光。即：物质吸收短波光，发射出的长波光。
• 显微镜荧光利用光源激发——光化荧光
2019/7/17
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五、显微镜的七种观察方式
5.7、荧光观察
共轭面：吸收光线，直射光通过 物镜相板
补偿面：相位推迟，衍射光通过
聚光镜环状光阑
2019/7/17
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五、显微镜的七种观察方式
5.3、相差观察
• 特点：
鉴定活体细胞最实用、最经济的方法
• 缺点：
需要光强高； 切片不能太厚(5~10um)； 盖片、载片需符合标准； 需增加单色滤镜以提高相差效果； 操作较麻烦； 相差荧光物镜的荧光成像效果较明场荧光物镜差。
2019/7/17
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五、显微镜的七种观察方式
5.6、霍夫曼观察
• 原理：斜射光照射到标本产生折射、衍射，光线通 过物镜光密度梯度调节器产生不同阴影，从而使透 明标本表面产生明暗差异，增加观察对比度。
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2019/7/17
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五、显微镜的七种观察方式
5.6、霍夫曼观察
• 优点：
体荧光等
发荧光量的测定对物质定性、定量分析
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2019/7/17
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• 缺点：
只能观察到物体存在、外部轮廓、运动状态等； 物镜使用的局限，不方便调节； 对标本要求较高（灰尘、盖片、载片等）。
• 应用：
微小粒子、细菌形态观察、细菌记数，透明标 本观察等。
显微镜七种观察方式
显微镜七种观察方式
一、透射显微镜：
这种显微镜通过高倍透射光学系统将物体表层的透射光照射到放大镜
片上，使物体被放大，从而观察它的微观结构。
此外，可以通过涂抹不同
厚度的染料、加入使用紫外线源、加入高倍镜片、低倍玻璃、把它放进腔
体或把它和它的二维或三维图像连接在一起等方式来改变显微图像的效果。
二、扫描电镜：
它是一种计算机驱动的扫描技术，由一条直线扫描物体的表面，通过
把物体的表面反射光线映射到一个探测器上，从而获得一系列电学信号，
从而计算物体表面的细微结构和形状，以及由此推断物体的性质和状态。
三、后焦透镜：
它是一种原理类似于荧光显微镜的显微技术，使用荧光发射光束去照
亮物体，然后使用镜头聚焦到检测器，检测器将获得的物体图像转变为电
子信号，以方便计算机进一步处理。
四、激光扫描显微镜：
它是一种高精度的实时显微技术，使用激光照射物体表面，然后使用
透镜聚焦到检测器，检测器将获得的物体图像转变为电子信号，以方便计
算机进一步处理。
五、荧光显微镜：
它是一种放大微小物体的显微技术，其基本原理是使用一个荧光检测
器来检测物体上发出的不同波长的荧光。
显微镜实验方法和技术知识点整理
一、实验方法1.显微观察法：如“观察细胞有丝分裂”、“观察叶绿体和细胞质流动”、“用显微镜观察多种多样的细胞”等。
2.观色法：如“生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定”、“观察动物毛色和植物花色的遗传”、“DNA和RNA的分布”等。
3.同位素标记法（元素示踪法）：如“噬菌体浸染细菌的实验”、“恩格尔曼实验”等。
4.补充法：如用饲喂法研究甲状腺激素，用注射法研究动物胰岛素和生长激素，用移植法研究性激素等。
二、实验技术1.光学显微镜的使用：包括显微镜的取送、放置、旋转、对光（反光镜及光圈的使用）、低倍观察、高倍观察、镜头的擦拭；显微镜的放大倍数（是物体的长和宽，不是面积，也不是体积）、焦距问题、物镜离装片的远近、准焦螺旋的使用、显微镜使用时物象移动方向、显微镜使用时异物的.判断（通常通过移动玻片、转动转换器或旋转目镜来判断）。
2.临时装片、切片和涂片的制作：适用于显微镜观察，凡需在显微镜下观察的生物材料，必须先制成临时装片、切片和涂片，如“观察植物细胞的质壁分离和复原”中要制作洋葱表皮细胞的临时装片，在“生物组织中脂肪的鉴定”中要制作花生种子的切片，在“观察动物如人体血液中的细胞”中要制作血液的涂片等等。
3.研磨，过滤：适用于从生物组织中提取物质如酶、色素等，要求学生熟练掌握研磨、过滤的方法，如研磨时要先将生物材料切碎，然后加入摩擦剂（常用二氧化硅）、提取液和其它必要物质，充分研磨之后，往往要进行过滤，以除去渣滓，所用过滤器具则根据需要或根据试题中提供的器材加以选用，如可用滤纸、纱布、脱脂棉、尼龙布等。
4.解离技术：适用于破坏细胞壁，分散植物细胞，制作临时装片。
5.恒温技术：适用于有酶参加的生化反应，一般用水浴或恒温箱，根据题目要求选用。
6.层析技术：适用于溶液中物质的分离。
主要步骤包括制备滤纸条、划滤液细线、层析分离等。
7.植物叶片中淀粉的鉴定：适用于光合作用的有关实验，主要步骤包括饥饿处理、光照、酒精脱色、加碘等。
【初中生物】七年级显微镜的使用知识点讲解
【初中生物】七年级显微镜的使用知识点讲解
聪明出于勤奋，天才在于积累。
我们要振作精神，下苦功学习。
生物网编辑了七年级显微镜的使用知识点讲解，以备借鉴。
一、拿镜子
二、对光
通过目镜，你可以看到明亮的白色视野。
三、观察
1.将待观察的载玻片试样放在台上，用压片钳按压。
试样应直接与光孔中心相对。
2.先转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近
直到载玻片样本（观察物镜，防止物镜接触载玻片样本）。
3.左眼向目镜内看，同时反方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直到看清物像为止。
再略微转动细准焦螺旋，使看到的物像更加清晰。
4.实验结束后，擦拭显微镜外观。
转动转换器，将两个物镜向两侧倾斜，然后慢慢将镜筒降到最低位置。
最后，将显微镜放入镜盒中，并将其放回原位。
1.显微镜的使用
（1）目镜和物镜具有一定的放大率=目镜x物镜
(2)移动玻片时，玻片移动的方向与视野中的物像移动方向相反。
（3）视野中的物体图像和样本中的物体被反转。
如果对象图像为p，则实际对象为d。
(4)旋转粗准焦螺旋可使镜筒向上或向下作较大幅度的移动;旋转细准焦螺旋时，可将物像调节更清晰。
bionet提供的七年级显微镜知识点讲解，希望给大家带来启发！。
显微镜的使用方法和步骤
显微镜的使用方法和步骤显微镜是一种用于放大微小物体并观察其细节的工具。
它在科学研究、医学诊断、教学等领域中扮演着重要的角色。
本文将介绍显微镜的使用方法和步骤，帮助读者正确高效地操作显微镜。
一、常见类型的显微镜在开始学习显微镜的使用方法之前，让我们先了解一下常见类型的显微镜。
常见的显微镜主要有光学显微镜和电子显微镜两种。
1. 光学显微镜：这是最常用的显微镜类型，它使用可见光作为光源，并通过透镜系统放大物体。
光学显微镜适用于观察透明或半透明物质。
2. 电子显微镜：电子显微镜使用电子束而非光线来放大物体。
与光学显微镜相比，电子显微镜的分辨率更高，可以观察更细微的细节。
但它需要复杂的样品处理和操作技术，适用于研究微观结构。
二、使用光学显微镜的步骤下面是使用光学显微镜的一般步骤：1. 准备工作：a. 将显微镜放置在稳定的平面上，确保它平稳牢固。
b. 将电源插头连接到电源插座，打开显微镜的电源开关。
c. 调节光源强度，通常可以通过旋钮或拉杆来实现，确保获得适当的照明。
2. 样品准备：a. 将待观察的样品放在玻璃载玻片上，并在其上添加一滴显微镜油（适用于高倍镜下的观察）或一滴水（适用于低倍镜下的观察）。
b. 用镊子或显微镜针将样品固定在载玻片上，并确保没有气泡或杂质。
3. 调焦：a. 将载玻片放在显微镜的样品台上，用装有目镜的镜筒将样品台固定到显微镜上。
b. 将目镜调节到最低放大倍数，通过旋转调节钮，将物体移动到视野中心。
c. 观察者应该用双眼进行观察，调整两侧的视野对称，确保清晰度。
4. 放大倍数调节：a. 通过旋转物镜转盘，将放大倍数调至所需的水平。
b. 根据样品的需要，选择适当的放大倍数，从低倍到高倍逐渐调整。
5. 焦距调节：a. 使用调焦轮或焦距控制装置，仔细调整目镜与物镜之间的距离，以避免物体模糊或失焦。
b. 需要注意的是，焦距调节应在观察时小心进行，避免接触到物镜和载玻片。
6. 观察和记录：a. 通过目镜观察样品，并调整焦距和放大倍数以获得清晰的图像。
显微镜的七种观察方法 ppt课件
显微镜的七种观察方法
应用： 矿物质、化学物品鉴别 鉴别纤维、染色体、淀粉粒、细胞中晶体 植物病理检验 鉴别骨骼、牙齿、胆固醇、神经纤维、肿 瘤细胞、横纹肌和毛发等
BAND PASS
落射荧光显微镜各部件特性和 作用
• 分色镜:
T%
反射激发光,荧光透过 ＜A 反射
＞A 透过
A
nm
• 吸收滤色镜:
T%
荧光透过,阻挡杂光
＜B 阻挡
＞B 透过
显微镜的七种观察方A法
B
nm
落射荧光显微镜各部件特性和 作用
分色镜: 反射激发光,荧光透过
T% ＜A 反射
＞A 透过
吸收滤色镜:
依据波动光学原理观察和精密测定标本细节,或透明物体改变光束的物理参数,以 此判别物质结构的一种显微镜
偏振器1
自然光（多 振动面）
偏振器2
偏振光（单 一振动面）
各向同性：单折射体，光性质不因照射方向而改变，普 通气体、液体、非结晶固体等
各向异性：双折射体，光速度、折射率、吸收和振动面、
振幅随照射方向不同，晶体、纤维等
）
显微镜的七种观察方法
显微镜的七种观察方法
显微镜的七种观察方法
按观察方法分七种
明场
DIC 暗场
荧光
偏光
霍夫曼 相差
显微镜的七种观察方法
显微观察方式
显微镜的七种观察方法
按观察方法分 7-1
1.明场:照明光直接通过聚
光镜入射于试样，并透过试样后 进入物镜并最终被观察到。
显微镜的七种观察方法
明场
显微镜的七种观察方法
明场观察方式
常规观察方式 应用领域：
常规镜检、病理、染色标本 优点：
显微镜的七种观察方式
显微镜的七种观察方式一．明视野观察（Bright field BF）明视野镜检是大家比较熟悉的一种镜检方式，广泛应用于病理、检验，用于观察被染色的切片，所有显微镜均能完成此功能。
明视野二．暗视野观察（Dark field DF）暗视野实际是暗场照明发。
它的特点和明视野不同，不直接观察到照明的光线，而观察到的是被检物体反射或衍射的光线。
因此，视场成为黑暗的背景，而被检物体则呈现明亮的象。
暗视野的原理是根据光学上的丁道尔现象，微尘在强光直射通过的情况下，人眼不能观察，这是因为强光绕射造成的。
若把光线斜射它，由于光的反射，微粒似乎增大了体积，为人眼可见。
m..m 暗视野观察所需要的特殊附件是暗视野聚光镜。
它的特点是不让光束由下至上的通过被检物体，而是将光线改变途径，使其斜射向被检物体，使照明光线不直接进入物镜，利用被检物体表面反射或衍射光形成的明亮图象。
暗视野观察的分辨率远高于明视野观察，最高达0.02—0.004暗视野三．相差镜检法（Phase contrast PH）在光学显微镜的发展过程中，相差镜检术的发明成功，是近代显微镜技术中的重要成就。
我们知道，人眼只能区分光波的波长（颜色）和振幅（亮度），对于无色通明的生物标本，当光线通过时，波长和振幅变化不大，在明场观察时很难观察到标本.相差显微镜利用被检物体的光程之差进行镜检，也就是有效地利用光的干涉现象，将人眼不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差，即使是无色透明的物质也可成为清晰可见。
这大大便利了活体细胞的观察，因此相差镜检法广泛应用于倒置显微镜。
相差图片相差显微镜的基本原理是，把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。
光线透过标本后发生折射，偏离了原来的光路，同时被延迟了1/4λ（波长），如果再增加或减少1/4λ，则光程差变为1/2λ，两束光合轴后干涉加强，振幅增大或减下，提高反差。
在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处：1. 环形光阑（annular diaphragm）位于光源与聚光器之间，作用是使透过聚光器的光线形成空心光锥，焦聚到标本上。
品检中的光学显微镜观察技巧
品检中的光学显微镜观察技巧光学显微镜是一种常用的实验工具，广泛应用于品质检验和研究工作中。
正确使用光学显微镜并掌握观察技巧，对于准确评估产品质量以及进行科学研究具有重要意义。
接下来，我们将介绍一些在品质检验过程中使用光学显微镜的观察技巧。
确保显微镜处于正确的调焦状态。
调焦是观察样品清晰度的关键。
调节齿轮或旋钮，使样品与物镜间的距离达到最佳状态。
初始观察时，可以从较低倍率的物镜开始，逐渐切换到较高倍率的物镜，以便更仔细地观察样品细节。
细心检查样品。
在使用光学显微镜观察样品时，应仔细检查样品的表面是否存在缺陷、异物或其他元素。
如果发现任何异常，应立即记录，并与产品规格进行比对。
例如，如果观察到表面存在划痕或不均匀涂层，可能会影响产品的品质和性能。
注意观察样品的颜色和纹理。
不同材料和表面处理会呈现出不同的颜色和纹理。
通过光学显微镜观察，可以更清楚地识别产品或样品的质量特征，如颜色均匀性、材料结构和纹理。
这些特征在品质检验过程中通常是关键指标。
注意调整光源和对比度。
在光学显微镜中，光源和对比度的调整对于获得清晰的观察图像至关重要。
根据样品类型和需要观察的特定细节，可以调整照明强度、角度和对比度，以增强观察的效果。
正确的光源调整可以提供更好的细节和清晰度。
熟悉与样品相关的评估标准。
对于品质检验和评估工作，了解相关的标准和规定是必要的。
熟悉产品规格和评估指标，可以在观察过程中更准确地判断样品的合格性。
这样可以确保产品的质量符合标准，并提前发现潜在的问题。
妥善保养光学显微镜。
合理的维护和保养将帮助延长显微镜的使用寿命，并确保其正常工作。
在使用结束后，应及时清理显微镜的镜片和物镜，防止灰尘和杂质积累。
避免过度触摸和摇动显微镜，这可能会导致零件磨损或损坏。
综上所述，正确使用光学显微镜和掌握观察技巧对于品质检验非常重要。
通过确保显微镜处于正确的调焦状态、仔细检查样品、注意观察颜色和纹理、调整光源和对比度、熟悉评估标准以及妥善保养显微镜，可以提高观察图像的清晰度和准确度，从而有效评估产品质量并进行持续的科学研究。
使用显微镜的7个步骤
使用显微镜的7个步骤1安放：显微镜应放在体前偏左，镜筒在前镜臂在后的方向安放好。
2对光：用低倍镜、较大光圈(遮光器上调);眼看目镜，同时调节反光镜;使视野变得明亮。
3放片：观测对象必须正对物镜的孔，将玻片缠不好之后再调焦。
4调焦：先用低倍镜寻找物象，先降镜筒后升高镜筒，降低镜筒时要在侧面观察是否压片，升高镜筒时正对着目镜寻找物象。
把物像移到视野中心，换用高倍镜观察只调节细准焦螺旋，使物象变得清晰。
5观测：两眼睁开，用左眼观测，用右眼画图。
注意事项：1.必须熟练掌握并严格执行采用规程。
2.取送显微镜时一定要一手握住镜臂，另一手托住底座。
显微镜不能倾斜，以免目镜从镜筒上端滑出。
取送显微镜时要轻拿轻放。
1.实验时必须把显微镜放到桌面上，镜座应当距桌沿6～7cm左右，关上底光源控制器。
2.转动转换器，使低倍镜头正对载物台上的通光孔。
然后用双眼注视目镜内，调整光源强度，把聚光镜上升，把虹彩光圈调至最大，使光线反射到镜简内，这时视野内呈明亮的状态。
3.将所要观测的装片放到载物台上，并使被观测的部分坐落于通光孔的也已中央。
4.先用低倍镜观察(物镜10×、目镜10×)。
观察之前，先转动粗准焦螺旋，使载物台上升，使物镜逐渐接近切片。
需要注意，不能使物镜触及玻片，以防镜头将玻片压碎。
并转动粗准焦螺旋，使载物台慢慢下降，不久即可看到玻片中材料的放大物像。
5.如果在视野内看见的物像不合乎实验建议(物像偏移视野)，可以慢慢移动左右移动尺。
移动时应特别注意玻片移动的方向与视野中看见的物像移动的方向刚好恰好相反。
如果物像不甚准确，可以调节细准焦螺旋，直到物像准确年才。
6.如果进一步使用高倍物镜观察，应在转换高倍物镜之前，把物像中需要放大观察的部分移至视野中央(将低倍物镜转换成高倍物镜观察时，视野中的物像范围缩小了很多)。
一般具有正常功能的显微镜，低倍物镜和高倍物镜基本齐焦，在用低倍物镜观察清晰时，换高信物镜应该可以见到物像，但物像不一定很清晰，可以转动细准焦螺旋进行调节。
观察细胞的10种显微镜方法
观察细胞的10种显微镜方法自1665年英国物理学家罗伯特·胡克创造了“细胞”一词来描述软木塞的微观视图以来，科学家们一直在开发越来越复杂的显微镜工具，借助这些显微镜,他们能够观察到细胞的更小的细节。
与17世纪和18世纪用于细胞研究的显微镜不同，今天的显微仪器与技术具有较高的放大倍数和非常精细的分辨率,可以以10 nm或更低的分辨率（1 nm=10-9米）来显示细胞的结构细节,甚至可以做到识别细胞上或细胞内的特定分子，并随着时间在活细胞和整个生物体（如小鼠）中追踪分子。
以下内容重点介绍10种前沿的观察细胞甚至分子的显微镜。
一近场扫描光学显微镜近场扫描光学显微镜（NSOM）通过超越衍射极限来可视化样品中的纳米级特征，在传统光学显微镜中，衍射极限会阻止靠近结构的分辨率。
在NSOM中，为了解析低于衍射极限的特征，光波在非常靠近试样表面的地方发射（因此称为近场）。
尽管仅限于研究细胞表面，但NSOM可以实现约20nm的横向分辨率和2-5nm 范围内的轴向（垂直）分辨率。
因为它能分辨低于衍射极限的特征，所以被认为是一种超分辨率显微镜。
二原子力显微镜原子力显微镜（AFM）允许样品具有非常高的表面分辨率，为研究人员提供有关表面特征的信息。
AFM的工作原理是在样品表面拖动一个锋利的尖端（只有几个原子宽），并测量尖端和样品表面之间的力,所得信号可以转化为表面形貌的描述，表面力扫描可以转换为样品表面的三维图像。
在生物科学中，AFM已被用于研究细胞行为和细胞间相互作用，以及评估某些细胞表面特征。
三激光扫描共聚焦显微镜激光扫描共聚焦显微镜对生物标本进行深度成像，并消除或减少焦平面以外区域的信息，从而产生清晰的图像。
20世纪60年代末和70年代初，第一台激光扫描共聚焦显微镜的发展标志着显微镜的重大进步。
激光技术、探测器和滤光片以及附着在细胞和组织中高度特异性靶标上的荧光化学物质的持续发展使共聚焦显微镜成为生物研究的关键工具。
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T%
荧光透过,阻挡杂光
＜B 阻挡
＞B 透过
高等教育 A
B
nm 25
落射荧光显微镜各部件特性和 作用
分色镜: 反射激发光,荧光透过
T% ＜A 反射
＞A 透过
吸收滤色镜: 荧光透过,阻挡杂光
A
nm
T%
＞B ，＜C 透过
高等教育
AB
C
nm 26
滤色镜的选择
荧光素的特性
荧光素
激发波长 发射波长
DAPI
372
优点：
❖ 检出能力高（放大作用）
❖ 对细胞的刺激小（可以活体染色）
❖ 能进行多重染色
用途：
❖ 物体构造的观察——荧光素
❖ 荧光的有无、色调比较进行物质判别——抗体 荧光等
❖ 发荧光量的测定对物质定性、定量分析
高等教育
17
荧光显微镜的种类
透射式
高等教育
18
荧光显微镜的种类
落射式
高等教育
19
荧光显微镜的主要部件
456
AMCA
350
450
Hoechst 33258
365
465
FITC
490
520
Acridine Orange
490
590
Acridine Yellow
470
550
CY3
552
565
TRITC
541
572高等教育
Propidium Iodide 530
615
滤色镜的特性
激发
分色
吸收
27
FITC+PI
高等教育
45
按观察方法分 7-5
5.相衬（差）:利用光线通
过分别处于聚光镜与物镜的一对互
补的光环后产生干涉（强度叠加或
）
高等教育
1
显微镜的七种观察方法
高等教育
2
按观察方法分七种
明场
DIC 暗场
荧光
偏光
霍夫曼 相差
高等教育
3
显微观察方式
高等教育
4
按观察方法分 7-1
1.明场:照明光直接通过聚
光镜入射于试样，并透过试样后 进入物镜并最终被观察到。
高等教育
5
明场
高等教育
6
明场观察方式
常规观察方式 应用领域：
常规镜检、病理、染色标本 优点：
2 特点 观察到极其微小物体，分辨率可达0.02 ~ 0.004 um (明场0.4um)—”超显微“。 3 缺点 只能观察到物体存在、运动和外部形态
不方便调节
标本要求高（灰尘、盖片、载片）
高等教育
10
4 应用：
微小粒子、细菌形态观察 、细菌记数，透明标本观 察等
高等教育
11
按观察方法分 7-3
带宽对图象的影响
SWB: BP420-480
WB: BP450-480
WIB: BP460-490
NB: BP470-490
高等教育
28
多重染色标本的多色观察
FITC+Texas Red+DAPI
高等教育
29
三色滤色镜的特性曲线
激发
分色
吸收
高等教育
30
双重染色标本的单色和双色观 察
WU
WIB
DUAL BAND
显微镜荧光利用光源激发——光化荧光
高等教育
14
荧光的种类
自发（固有）荧光
二次荧光
高等教育
15
荧光的性质
❖ 吸收光，必需有激发光源 ❖ 荧光波长＞激发波长（损失热能） ❖ 荧光强度极小于激发光的强度 ❖ 有不同程度的衰减 ❖ 荧光强度取决于激发光强度、被检物浓度、
荧光效率
高等教育
16
荧光显微镜的优点和用途
3.荧光:利用某些物质在受
到了紫外光或短波长的光激发照 射以后能够发射出比激发光波长 长的荧光的特性的观察方法
高等教育
12
荧光
高等教育
13
什么是荧光 ?
物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变为 高能状态，再回到低能状态时释放出的光，是非 温度辐射光——冷光。即：物质吸收短波光，发 射出的长波光。
高等教育
41
偏光
高等教育
42
1 原理
依据波动光学原理观察和精密测定标本细节,或透明物体改变光束的物理参数,以 此判别物质结构的一种显微镜
偏振器1
自然光（多 振动面）
偏振器2
偏振光（单 一振动面）
各向同性：单折射体，光性质不因照射方向而改变，普 通气体、液体、非结晶固体等
各向异性：双折射体，光速度、折射率、吸收和振动面、
视野亮度高、均匀， 应用范围广， 操作简单，价格低， 物镜适用于荧光观察 缺点： 透明标本对比度低， 标本没有立体感
高等教育
7
按观察方法分 7-2
2.暗场:照明光通过物镜外
围射于试样，来自试样的干涉及 衍射光进入物镜并最终被观察到。
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8
暗场
高等教育
9
1 原理 丁道尔(Tyndall)现象，微粒对斜射光反射或衍射，增 大了人眼可见性。
DAPI+FITC
WIBA
WIG
高等教育
WIB
FITC+PI
31
单色滤色镜的特性曲线
高等教育
32
双色滤色镜的特性曲线
高等教育
33
现行显微镜特点和各种滤色镜
高等教育
34
分色镜
自由组合 激 发块
吸收滤色镜
高等教育
35
激发滤色镜
油
镜
应
使
用
荧
光
油
高等教育
36
的运用
光栏全开启
物镜光栏
减少杂散光干扰
高峰值更宽，更稳定
高等教育
23
荧光显微镜激发透镜组
• 激发透镜组
吸收 滤色镜
（激发块）:
激发 滤色镜
发射光
入射光
• 激发滤色镜:
激发波长选择
分光 滤色镜
T%
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BAND PASS
nm 24
落射荧光显微镜各部件特性和 作用
• 分色镜:
T%
反射激发光,荧光透过 ＜A 反射
＞A 透过
A
nm
• 吸收滤色镜:
振幅随照射方向不同，晶体：
矿物质、化学物品鉴别 鉴别纤维、染色体、淀粉粒、细胞中晶体 植物病理检验 鉴别骨骼、牙齿、胆固醇、神经纤维、肿 瘤细胞、横纹肌和毛发等
高等教育
44
❖ 偏光显微镜主要用于检测矿石,地质大学会用 到,特别是可以用来鉴定珠宝,另外可以检测生 物内骨骼,这个我还没有遇见实例,还可以检测 生物化学结晶,化学院用来观察结晶液像,其他 在纺织物品化学成分上检测上,物理芯片上等, 凡是观察双折射晶体会使用偏光显微镜 。
透射式
❖ 汞灯光源 ❖ 激发滤色镜 ❖ 吸收滤色镜 ❖ 暗场聚光镜
高等教育
落射式
❖ 汞灯光源 ❖ 激发滤色镜 ❖ 分色镜 ❖ 吸收滤色镜
20
落射荧光显微镜的构造
吸收滤色镜 激发滤色镜
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21
落射荧光显微镜的构造
高等教育
22
荧光显微镜光源
• 汞灯光源:
提供激发光(U、V、B、G)
• 氙灯光源：
光栏适当关小
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37
荧光的衰减
有衰减的标本
防衰减的方法
❖ 使用抗衰减剂 ❖ 选择衰减小的荧光素 ❖ 降低激发光强度 ❖ 降低标本中氧的浓度
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38
使用抗衰减剂的效果
高等教育
39
汞灯灯箱构造
灯室，上下、左右旋钮，聚光镜旋钮
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40
按观察方法分 7-4
4.偏光:有些物质在两个呈
一定夹角的偏光滤片之间可现呈 鲜明的对比，或根据双折射性能 和定向呈现颜色