禽流感及其防控

火鸡
火鸡 鸡 鸡 火鸡 鸡 火鸡 鸡 火鸡
1963
1966 1976 1979 1979 1983 1983 1985 1991
中国香港
荷兰 比利时 德国 韩国 中国台湾 美国 韩国 日本
H5N1
H7N7 H7N7 H7N7 H5N1 H5N1 H7N2 H5N1 H5N1
鸡
鸡、火鸡 鸡 鸡 鸡 鸭 鸡 鸡、鸭 鸡




（2）AGP、Elisa的检测问题 （3）抗原检测的诊断方法：RT-PCK，荧 光RT-PCR，Elisa，单抗基础上的Elisa， 荧光抗体法等。 （4）病毒分离 纯度检测——外源病毒检测，有限稀释、 毒力测定
（二）疫苗质量跟踪结果



1．H5亚型：2002年前差，2002年后基本符 合要求，一次免疫可达HI抗体24-6。 2．H9亚型：2003年前一直较好，一次免疫 HI可达26-8，2003年底至今，联苗中H9亚 型常出现抗体反应不好的现象。 3．H7亚型在某些疫苗中被混入。
（三）免疫程序研究


1．母源抗体消长规律 ①种鸡与雏鸡母源抗体HI检测相差2-3个滴度 ②母源抗体通常可维持15天，HI保持在23 ③疫苗免疫效果和母源抗体高低无明显相关 2．免疫抗体消长规律 ①良好疫苗一次免疫至少可维持有效抗体达2个月 之久。 ②H5亚型间隔21天进行二免比一次免疫抗体上升 和维持要好的多。

2．H9N2亚型：不同地区、不同时间，大面 积发生不是来自同一毒源。
3．禽流感的发生与候鸟迁徒有关。 4．不同野生禽类宿主分离到的H5N1对鸡的 致病作用（2000年后）

不同宿主AIV特征
文中简写
CK02 PF02 PG02 QA00 DK02 GS01 PS02 TK02 SW/GDSZ/4304 PS/SXXY/4604 RP/SXXY/4704 QA/YNKM//5504 JPS/GDSZ/43-304 WB/SH/31-104
第8、9、12天各死2、2、1 只
小鼠半数致死量 (EID50)MLD50(EID50)
5.0 >6.5 >6.5
QA00
DK02 GS01 PS02
第6组 3/5第5组 1/5
0 第6组 1/5 第6组5/5、第5组5/5、 第4组3/5、第3组1/5、 第2组1/5 第6组 3/5
第6组：10天1只、11天2只， 5.1 第5组：11天1只

②免疫鸡群



鸡群中出现萎顿，鸡冠发绀，趾部角质变 红趋向的鸡只很快死亡，并延续数天，可 见肿头及流泪。 死亡鸡和营养好坏无关
病死鸡肝脏变化为主，呈现偏淡的多色彩、 质脆，腺胃乳头出血常见。检查HI抗体可 见群体抗体水平参考不齐。
wenku.baidu.com

③未免疫鸭：沉郁、明显的神经症状，头 颈扭曲、抽搐、瘫痪，临床症状出现后死 亡急速上升，死亡率30-100%。种鸭初期采 食下降，产蛋下降可达10-90%。 ④免疫鸭：商品鸭发病日期在20日龄以后， 神经症状和死亡明显。种鸡产蛋下降3060%，很少死亡。
2004
2004 2004 2004
澳大利亚 新南威尔士州
中国香港 意大利 意大利
H7N4
H5N1 H5N2 H7N1
鸡
鸡 鸡 鸡
1997
1997 1997 1999
老挝
中国 中国台湾 巴基斯坦
H5N1
H5N1 H5N2 H7N3 H7N2 H5N2 H7N3
鸡
鸡、鸭、鹅 鸡、鸭 鸡
2004
2004 2004 2004

②免疫鸡群 呼吸道症状呈快速传播，在一个隔离群体 内占有一定比例。 产蛋鸡产蛋下降2-15%不等。 剖检变化和未免疫鸡无本质分别，只是变 化稍轻微。 商品肉鸡在25-30天出现呼吸道症状，随后 一直延续至出栏。



（3）可借助HI血清学快速协助诊断 未免疫鸡群出现HI抗体阳性样本和免疫鸡 群出现有HI抗体滴度≥212的一定量样本就 可确诊。

3．公共卫生问题


①长时间的存在为禽流感向人的传播埋下 了隐患。 ②对哺乳动物和人的侵害的认识——病毒 变异有向哺乳动物传播的倾向；目前仍是 “误行感染”人、禽、种间保护依然存在。 ③注意从事和养禽工作有关工作人员的健 康和安全。
④应该开展禽流感变异和哺乳动物易感性 之间的研究





（四）未来AIV的流行动态




观点：AIV会长期存在 高致病性AIV会呈点爆发状态，H9亚型在蛋鸡产蛋下降 和肉鸡的多种疾病继发感染上会形成长期影响。 依据： ①AIV疫苗不得不应用，但疫苗注射不能阻止病毒隐性 感染及排毒。 ②很难大面积扎实的做好全国甚至东南亚地区的疫苗防 疫工作，一定时间内（几年）总会有敏感宿主形成点爆 发。 ③H9亚型感染传播能力太强，现有禽舍类型是防控不 住的。
禽流感及其防控
一、有关流感发生的基本观点


1．野生候鸟（主要是水禽）是人、禽、其 他哺乳动物流感病毒的保毒宿主。 2．野生水禽带带而不发病，和人、禽形成 自然隔离状态；禽流感病毒随其生活环境 而散播。 3．流感病毒除A、B、C型对不同物种感染 力不同，不同物种对同型流感病毒也存在 种间隔离（细胞受体不同）。
HP HP HP HP HP HP HP HP HP HP HP HP HP HP
四、禽流感的防控

（一）诊断 1．指示性诊断指标： （1）目的：制定可供建立初步诊断的指示 性诊断指标，以便快速反应，及时采取防 控、扑灭措施，免于因时间延误而形成的 禽流感传播危害。


2003
2003 2003 2003 2003 2003 2004 2004 2004
澳大利亚 维多利亚
澳大利亚 昆士兰洲 墨西哥 巴基斯坦
H7N3
H7N3 H5N2 H7N3
鸡
鸡 鸡 鸡
1992
1994 1994 1994
越南
泰国 印度尼西亚 柬埔寨
H5N1
H5N1 H5N1 H7N7
鸡
鸡 鸡 鸡
（五）对禽流感的防控的认识




1．政策：扑杀；扑杀结合生物安全；扑杀，疫苗 注射结合生物安全。 2．防疫问题：①政策上的预防为主。 ②饲养方式使得防疫2H1开展困难。 ③疫苗的质量，单苗和联苗。 ④新疫苗的研制。 a. 抗原变异和新疫苗的研制。 b. 各种基因工程苗的研究 载体：禽痘、腺病毒、马立克 核酸疫苗：基因工程苗：（反向基因操作）有害 基因的改造与敲除，人禽疫苗的整合。
中国香港
智利
H5N1
H7N3
鸡
鸡
2001
2001
美国
加拿大
鸡
鸡
2004
2004


2．感染宿主多样化：20科，88种 3．H5N1高致病性禽流感特点 （1）水禽发病，其最早发现始于水禽 （2）传播方式的不同

①H5N1传播可能方式 ? 野生水禽 → 鹅 鸡
鸭

②一般传播方式 家养水禽 家养水禽（不发病） 野生水禽—— ↓ 鸡
（2）技术路线
实验室感染试验的临床观察 选择经鉴定过的标准毒 SPF鸡 大群发病禽的临床观察
经实验室诊断确诊 （血清学、病毒分离鉴定） 有不同抗体的鸡、鸭 免疫禽群 未免疫禽群 得出共有的指示性诊断指标

免疫群体
未免疫群体
2．指标

（1）H5亚型的指示性诊断指标 ①未免疫禽群：
突发、急剧的倍数增长的死亡；萎顿，鸡 冠发绀的鸡只出现后很快死亡；早期病死 鸡以全身性出血性变化为主

1．高致病性禽流感发生频率加快，次数增 多，范围扩大。
国家或地区 英格兰
亚型 H5N2
禽种 鸡
年代 1959
国家或地区 中国香港
亚型 H5N1
禽种 鸡
年代 2002
英国 英格兰
加拿大 安大略 澳大利亚 维多利亚 德国 英格兰 美国 宾夕法尼亚 爱尔兰 澳大利亚 维多利亚 英格兰
H7N3
H5N9 H7N7 H7N7 H7N7 H5N2 H5N8 H7N7 H5N1

3．实验室诊断




（1）HI试验的应用及问题 ①疫苗正常反应：多次免疫HI抗体≤211 H9亚型一次免疫可达28 H5亚型一次免疫多为24-6 ②H9亚型HI检测时≥212有诊断意义 H5亚型在免疫鸡群发病怀疑时间隔21天， 两次抗体检测上升≥22有参考价值



③HI诊断中的问题 a. 诊断试剂不纯 b. 不同来源抗原对同一血清可能检测结果 不同 c. 关于鸭HI检测要用鸭红血球的认识 ④可用各种具有血凝特性禽病原的单因子 血清通过交叉HI进行病毒初步鉴定
宿主
鸡 孔雀 鸽 鹌鹑 鸭 鹅 山鸡 火鸡 黑天鹅 野鸡 野鸽 鹌鹑 日本雉 野鸟粪便
亚型
H5N1 H5N1 H5N1 H5N1 H5N1 H5N1 H5N6 H5N1 H5N1 H5N1 H5N1 H5N1 H5N1 H5N1
鸡胚传 代次
5 4 4 4 4 4 4 5 3 3 3 3 3 3
鸡胚半数 感染量
7.50 8.25 9.25 6.50 6.75 8.00 7.75 7.75 7.00 6.33 8.00 7.50 8.00 8.25
静脉接种 指数IVPI
2.99 2.99 2.90 2.85 2.72 1.64 2.69 2.73 3.00 3.00 3.00 3.00 3.00 3.00
对鸡致 病性

（3）感染宿主多样化：鹅、鸭、鸡、猫、 虎、猪、人、（鼠、犬等）。H5N1毒株的 变异对哺乳动物尤其是小鼠的致病性逐渐 加强。
各毒株感染后小鼠死亡情况及MLD50
毒株 死亡组别、数量 Isolates Ga. No. of Dd
CK02 PF02 PG020 第6组5/5 0
死亡时间 Dead Time



3．HI抗体为指标的免疫保护研究 ①H9亚型和H5亚型在HI抗体≥26时有100%保护。 ②有效母源抗体接近消失时，即第16-20日龄，即 使HI抗体已在24以下，仍有一定保护，可不发病 死亡。 4．免疫程序 7-10日龄一免，28-30日龄二免，开产前三免。 5．在抗体监测指导下进行免疫效果的检查和免疫 程序的修正。


（2）H9亚型的指示性诊断指标 ①未免疫鸡群 不明原因的呼吸道症状并具明显传染性， 产蛋鸡的产蛋下降幅度10-80%不等，7-10天 出现缓解。 剖检见喉头及上1/3气管潮红，出血，有粘 液，胸腔入口支气管分叉处粘膜潮红充血， 卵泡表面呈红、紫色，输卵管及中部多见 粘稠透明或乳白色粘液。

4．防控认识 ①建立在改善饲养方式基础上的地毯式的 防疫。 ②至少全东亚地区联合行动，全部采用疫 苗防护为主的防护方法。 ③加强申报和监测。 ④赔偿的必要性。 ⑤出口困难和转向熟食。 ⑥活禽市场的管理。 ⑦准备与禽流感的长期共存。

5．养禽场的对策
在抗体监测基础上选好苗，做好防疫工作， 加强生物安全防护。
>6.5 第8天1只 第6和5组于第9、10、11天 各死1、3、1；第4组第11天 死2只，12天1只，第14天， 2、3组各1只 第9天3只 5.9 3.18
TK02
5.7
三、最近关于禽流感发生的寻源研究认识


1．H5N1型： （1）分子流行病学研究96广东鹅源毒株是 HA的源头。97香港鸡毒株是NA的源头。 （2）H5N1亚型的起因和水源污染有关，或 许这是家养水禽发病导致种间突破的根本 原因。（个人观点）



4．同一型中不同亚型（HA）之间没有交叉 保护性，高致病性禽流感多属于H5、H7亚 型。 5．猪是人、禽流感病毒的混合器，因为猪 具备人、禽流感病毒的细胞受体，容易形成 基因重组。 6．家鸭可带毒而不致病（或许家养水禽） 7．一旦发病经常存在开始致病力尚弱的毒 株，渐变为高致病性毒株。
二、近期发生的高致病性禽流感及 其特点